转基因大豆毛状根hbFGF的检测

目的通过检测转基因大豆毛状根的hbFGF,为利用毛状根生产药物实现工业化提供实验基础。方法采用PCR、RT-PCR、SDS-PAGE电泳、Westem blot印迹、质谱检测等方法,利用植物基因组DNA提取试剂盒,兔抗人bFGF单克隆抗体进行对转基因大豆毛状根hbFGF检测。结果用PCR检测转基因大豆毛状根,并在60条Hyg抗性大豆毛状根中鉴定出19条大豆毛状根整合了hbFGF,阳性率为32%。半定量RT-PCR检测总RNA,表明RNA完整性好,降解较少。SDS-PAGE大致确定重组蛋白的分子量和浓度,分子量约18KDa,hbFGF含量可达110mg/L。兔抗人bFGF单克隆抗体检测表明,hbFGF在转基因大豆毛状根中稳定表达。结论表明转基因大豆毛状根能够稳定表达hbFGF基因,在工业生产中具有广阔的前景。     

rhbFGF基因及其蛋白促兔缺血心肌血管新生的对比研究

目的 探讨通过心肌内注射重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)基因及其蛋白促兔缺血心肌血管新生的“基因血管搭桥”的效果。方法 无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支(LAD)，建立急性心肌梗死动物模型。将成功构建的真核表达质粒pcDNA3-bFGF、rhbFGF蛋白、生理盐水，直接四点注射人兔缺血心肌内。实验兔饲养6周、12周以后，通过病理切片光镜观察、图像分析对比研究三组间血管新生情况。结果 1)成功构建pcDNA3-bFGF真核表达质粒并制备rhbFGF蛋白；(2)pcDNA3-bFCF真核表达质粒在心肌中成功表达为rhbFGF蛋白；(3)血管新生的观察：通过对心肌内注射基因及其蛋白进行对比研究，发现心肌内注射蛋白和基因均有促兔缺血心肌血管新生的作用，而基因的促血管新生作用更强。结论 rhbFGF蛋白及基因心肌内注射均有促兔缺血心肌血管新生的作用，而基因的促血管新生效果显著。“基因治疗促血管新生”法是另一种有效的冠心病治疗方法，rhbFGF基因有重要的推广应用价值。     

双抗体夹心ELISA检测碱性成纤维细胞生长因子

碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）分布于几乎所有来源于中胚层和神经外胚层的组织中, 等电点9.6, 是相对分子质量（Mr）为18 000的单亚基多肽.bFGF在促进血管生成、创伤愈合、骨骼修复、神经营养与修复、眼晶体再生以及胚胎的发育与分化方面均显示出生物学活性[1, 2], 其生产和应用过程中需要高灵敏度的定量检测方法.1992年本室用鼠抗bFGF多克隆抗体（pAb）在国内首次建立了bFGF间接ELISA检测方法[3], 已经应用于bFGF生产过程中的质控和定量检测以及科学研究等工作.在此基础上, 用本室制备的bFGF单克隆抗体（mAb）与抗bFGF酶标pAb, 建立了bFGF双抗体夹心ELISA方法, 并对其重复性、精密度和适合性做了分析, 为bFGF的定量检测提供了有效的手段.……     

bFGF、FGF受体I在HEp-2喉癌和MGE803胃癌细胞株中表达的检测

目的　通过对碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF) ,成纤维细胞生长因子受体 1(fibroblastgrowthfactorreceptor 1,FGFR 1)的检测 ,揭示两者在体内外的表达以及与肿瘤形成的关系。　方法　采用免疫组织化学的检测方法 ,检测了体外培养的HEP 2喉癌细胞和MGE80 3胃癌细胞以及由两者在裸鼠皮下形成的实体瘤组织中bFGF和FGFR 1的表达情况。　结果　在体外培养的这两种肿瘤细胞中bFGF的阳性染色存在于整个细胞。FGFR 1的染色主要存在于细胞核。在两种肿瘤细胞形成的实体瘤组织中bFGF和FGFR 1阳性染色细胞主要是围绕于坏死区的肿瘤细胞。　结论　此两种肿瘤细胞在体内外均能表达bFGF和FGFR 1。bFGF与其高亲和力受体FGFR 1结合后进入细胞核 ,并在细胞核内发挥其生物功能 ,参与了肿瘤组织的形成和发展。     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

本文报告以人脐带内皮细胞原代培养技术,CAM及多聚物载体技术检测bFGF生物活性,结果表明bFGF是机体血管新生的强烈刺激剂。bFGF对血管、神经、结缔组织、骨与软骨细胞具有多向作用,深入研究其生物效应,对于促血管新生,动脉硬化及肿瘤防治,中枢神经创伤后修复,肢体再生,晶体再生,促创伤愈合,以及人工血管的开发应用等均具有重要的实际意义。     

bFGF、FGF受体—Ⅰ在HEp—2喉癌和MGE803胃癌细胞株中表达的检测

目的 通过对碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast gowth factor,bFGF)，成纤维细胞生长因子受体－1（fibroblast growth factor receptor-1,FGFR-1)的检测，揭示两者在体内外的表达以及与肿瘤形成的关系。方法 采用免疫组织化学的方法，检测了体外培养的HEP－2喉癌细胞和MGE803胃癌细胞以及由两者在裸鼠皮下形成的实体瘤 bFGF和FGFR－1的表达情况。结果 在体外培养的这两种肿瘤细胞中 bFGF的阳性染色存在于整个细胞。FGFR－1的染色主要存在于细胞核。在两种肿瘤细胞形成的实体瘤组织中bFGF和FGFR-1.bFGF与其高亲和力受体FGFR－1结合后进入细胞核，并在细胞核内发挥其生物功能，参与了肿瘤组织的形成和发展。     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理，及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

含重组碱性成纤维细胞生长因子培养基中3T3成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能性（英文）

目的：重组碱性成纤维细胞生长因子对培养条件下３Ｔ３成纤维细胞在血纤维蛋白凝块上生长的可能研究。方法：采用Ｇｉｅｍｓａ染色和ＭＴＴ检测法,经过电镜扫描,分段对比观察,研究３Ｔ３细胞在血纤维蛋白凝块上的生长情况。结果：ｒｈｂＦＧＦ促进细胞生长产维持细胞存活的最佳浓度是１００ｎｇ／ｍｌ,在含有１００ｎｇ／ｍｌ的低血清培养基中细胞可在血纤维蛋白凝块生长。经４８ｈ培养以后仍有大量的细胞存活。结论：３Ｔ３成纤     

hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定

目的:将人表皮生长因子(hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的C端连接,构建出既可与肝素结合,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白,并在大肠杆菌中高效表达。方法:将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF5端的231bp的片段连接,克隆到表达载体pJN,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL21(DE3)表达菌株,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果:融合蛋白表达产量为30%,融合蛋白不仅能与肝素结合,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为5.2。结论:本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。     

碱性成纤维细胞生长因子在膀胱移行细胞癌中的表达

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在膀胱移行细胞癌 (BTCC)中的表达及其意义。方法　SP法 ,对 5 5例BTCC及 10例正常膀胱组织中bFGF进行检测。结果　在正常移行细胞呈阴性表达 ,在BTCC中呈不同程度的阳性表达 ,且过表达率在不同病理分级、临床分期组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,复发组的阳性表达率明显高于初发组 (P <0 .0 5 )。结论　bFGF在BTCC侵润转移过程中起重要作用 ,BFGF表达可成为判断肿瘤预后的一项指标     

Long-Term Culture of Human Bone Marrow Stromal Cells in the Presence of Basic Fibroblast Growth Factor

Abstract

Basic fibroblast growth factor (bFGF) is a potent mitogen for human bone marrow stromal cells. Normally, large numbers of human bone marrow stromal cells are difficult to obtain. However, nanogram/ml concentrations of bFGF stimulate the growth of passaged bone marrow stromal cells both in media formulated for optimal growth of stromal cells and in a simple mixture of RPMI-1640 and 10% fetal calf serum facilitating the successive expansion of stromal cells through multiple passages. bFGF also greatly accelerates the formation of a primary stromal cell layer following inoculation of newly harvested bone marrow cells into dishes. In the presence of bFGF, the stromal cells attain high densities, lose their contact inhibition and grow in multilayered sheets. Heparin greatly potentiates the stimulatory effect of low concentrations of bFGF. The effects of bFGF are fully reversible: cells cultured in the presence of this factor for multiple passages revert to normal growth rates following trypsinization and subculture. A short (4 h) exposure of the cells to bFGF elicits profound growth stimulation. This supports the hypothesis that this factor binds to glycosaminogly-cans in the cell matrix which act as a storage reservoir for this cytokine.     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的乳兔软骨细胞中p53 mRNA表达的影响

目的 探讨在乳兔关节软骨细胞体外培养过程中,成纤维细胞生长因子（bFGF）对p53mRNA表达水平的影响及意义。方法 原代体外培养乳兔关节软骨细胞并传代,实验组加入10ng／ml的bFGF,光镜下观测各代细胞形态学变化,RT—PCR检测各代细胞中p53基因在mRNA水平上的表达。结果光镜观察体外培养的软骨细胞,对照组第4代培养细胞始出现凋亡细胞,bFGF组第7代出现少量凋亡细胞;RT—PCR检测bFGF组p53的目的基因指数（p53吸光光度值,β—actin吸光光度值）明显低于对照组（P〈0．05）。结论 在体外培养的兔关节软骨细胞中bFGF下调p53基因mRNA水平表达。     

外用重组人碱性成纤维细胞生长因子联合康复新液治疗 糜烂型扁平苔藓的临床应用

目的 探讨外用重组人碱性成纤维细胞生长因子与康复新液联合应用对于糜烂型扁平苔藓的疗效。方法 选取我院收治的90例糜烂型扁平苔藓患者作为研究对象,随机分为实验组和对照组,各45例。实验组采用重组人碱性成纤维细胞生长因子与康复新液联合治疗,对照组采用康复新液含漱。观察治疗前后患者客观指标体征和主观症状评分情况,比较两组临床疗效。结果 治疗4周后实验组客观指标记分为（0.81±0.35）分、主观症状评分为（0.31±0.27）分,低于对照组的（1.38±0.41）分、（0.76±0.39）分,差异有统计学意义（P＜0.05）;实验组治疗总有效率为82.22%,高于对照组的64.44%,差异有统计学意义（P=0.035）。结论 外用重组人碱性成纤维细胞生长因子联合康复新液联合治疗糜烂型扁平苔藓,治疗效果显著,可有效改善患者临床症状。     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞生长与c-fos表达的影响

以重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rb- b FGF)刺激体外培养的大鼠成骨细胞 ,发现 :经过 1～ 2 d的刺激 ,成骨细胞产生很长的突起 ,细胞数量和活力较对照均有显著升高 ;经 rb- b FGF 1h的刺激后 ,c- fos基因的表达即明显高于对照 ,刺激 1～ 2 d后 c- fos基因的表达也明显高于对照。这表明 b FGF可促进大鼠成骨细胞增殖 ,提高c- fos基因的表达量。 c- fos表达量的提高 ,可能是各种刺激在促进细胞增殖的信号转化过程中的重要一步     

Basic Fibroblast Growth Factor: Serum Levels in the Female

This study investigated serum levels of basic fibroblast growth factor (b FGF), a potent angiogenic factor, during distinct periods of the female life and compared them with corresponding levels in age-matched males. Healthy females (n = 59) and males (n = 53) were included in the study, divided into six groups: fetuses (cord blood), neonates, children, adults (females in proliferative and secretory phase), pregnant and “elderly” men and women. Serum b FGF levels were measured by an enzyme immunoassay. No statistically significant difference was found between both genders. Blood levels in fetuses and neonates were significantly increased as compared to adults (p = 0.01, p = 0.02, respectively). Restricting the analysis to females, all age groups, but fetuses (p = 0.05), demonstrated no difference when compared to proliferative phase adults. In conclusion, b FGF serum levels do not differ between males and females and are elevated in fetal and neonatal life, when growth and development are enhanced.     

外用重组人碱性成纤维细胞生长因子 在牙周炎中的应用效果

目的 探究外用重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh FGF）在牙周炎治疗中的应用效果。方法 选取2018年1月~2019年1月在我院就诊的牙周炎患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用基础疗法进行治疗,观察组在基础疗法的基础上给予外用重组人碱性成纤维细胞生长因子进行治疗。比较两组治疗后不同时间点的龈沟出血指数（SBI）、牙周探诊深度（PD）、临床附着丧失（CAL）、炎症因子和治疗有效率。结果 两组治疗3周、6周的SBI、PD和CAL与治疗前比较均有所改善,治疗6周的改善程度高于治疗3周,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组治疗3周、6周的SBI、PD和CAL均优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。两组治疗3周、6周的IL-1β、IL-8和IL-17与治疗前比较均降低,治疗6周的IL-1β、IL-8和IL-17均低于治疗3周,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组治疗3周、6周的IL-1β、IL-8和IL-17均低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。观察组治疗总有效率高于对照组（90.00% vs 62.00%）,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 rh FGF治疗牙周炎患者,能够改善龈沟出血指数,减少牙周探诊深度、临床附着丧失,减低炎性因子,提高牙周组织的愈合速度。     

碱性成纤维细胞生长因子对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响

促进内皮细胞在聚氨酯材料上粘附是实现人工心和人工血管内皮细胞化的关键一环。用荧光法观察了碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响。结果表明，ＦＮ实验组和Ⅳ型胶原实验组的细胞粘附率分别７１％和６８－５％，而对照组分别是６２－５％和５５－２５％，Ｐ均＜０－０５，表明ｂＦＧＦ能够促进内皮细胞在聚氨酯材料上的粘附。提示ｂＦＧＦ作为一种辅助因素加入培养基中将有助于实现人工心、血管聚氨酯材料的内皮细胞化。     

在大肠杆菌中高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）能促进大多数来源于中胚叶及神经外胚叶细胞的增殖，它对神经再生、创伤愈合、蝾螈断肢及晶体再生等具有促进作用。利用基因工程手段将牛ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ插入到ｐＢＶ２２１高效表达质粒载体中，并使之在大肠杆菌中表达。经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－肝素亲和层析获得重组ｂＦＧＦ纯品。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示两条带，其中１８ ０００系２１ ０００降解所致，加入蛋白酶抑制剂可抑制其降解，并经免