淫羊藿总黄酮对体外培养骨细胞功能的影响

目的 :观察淫羊藿总黄酮 (HEF)对体外培养成骨细胞以及破骨细胞功能的影响。方法 :分别用酶消化法和体外机械分离法获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的HEF ,观察成骨细胞的增殖功能、分化功能和矿化功能。以抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞数目、形态 ,Image ProPlus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的数目和面积。结果 :增殖率测定HEF浓度为 10 - 4mol·L- 1时与对照组比较差异有非常显著意义 (P <0 .0 1) ;碱性磷酸酶活性浓度≥ 10 - 8mol·L- 1,差异有显著意义 ;矿化结节面积/孔HEF 10 - 10mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比均增加(P <0 .0 1)。骨片培养 3d ,吸收陷窝计数的结果显示 ,各浓度对破骨细胞吸收功能均有抑制作用 ,仅10 - 4mol·L- 1组有统计学意义 (P <0 .0 5 )。陷窝面积 10 - 10 mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比 ,均无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 :HEF可以通过影响成骨细胞增殖、分化、矿化促进骨形成 ;而在体外减少破骨细胞数目 ,减弱破骨细胞吸收功能。     

骨碎补总黄酮联合淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究骨碎补总黄酮(TFRD)联合淫羊藿苷(ICA)对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:应用组织块法体外培养hPDLCs,以MTT法测定TFRD、ICA单独以及联合作用对hPDLCs增殖的影响;用酶动力学方法测定TFRD、ICA单独以及联合作用对hPDLCs、ALP活性的影响。结果:TFRD、ICA、TFRD+ICA均可促进hPDLCs增殖和ALP活性增加,其中TFRD+ICA作用效果优于TFRD与ICA。结论:TFRD与ICA联合应用,具有协同作用。     

淫羊藿苷对人外周血内皮祖细胞增殖功能的影响

目的淫羊藿苷对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,用添加VEGF、FGF的M199培养液培养7d后,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。用不同浓度药物干预培养EPCs,分别作用不同时间(24、48、72h)后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,四唑蓝比色试验(MTT法)测定EPCs的吸光度值。用西药西辛伐他汀作为对照组。结果与对照组比较,淫羊藿苷高、中、低浓度组均改善了EPCs增殖功能(P<0.05),且呈一定的量效、时效关系,在中浓度最为显著(P<0.05)能明显促进增殖能力;在同一浓度组中,随时间延长淫羊藿苷对EPCs的促进作用逐渐增强,于72h达到高峰,且中药中剂量组对EPCs的促进作用优于西药组辛伐他汀组。结论淫羊藿苷能促进EPCs增殖,从而刺激缺血组织血管新生和再生,可能是其防治心脑血管及周围血管疾病的机制之一。     

生长期巫山淫羊藿叶中总黄酮及淫羊藿苷含量变化

巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying系小檗科淫羊藿属植物.中国药典规定淫羊藿地上部分采收期为夏、秋间茎叶茂盛时.不同的采收时期直接影响着药材的品质、产量及资源的合理保护与开发利用.为此,笔者采用紫外分光光度法和反相高效液相色谱法测定了不同采收时期巫山淫羊藿叶中总黄酮和淫羊藿苷的含量.     

淫羊藿总黄酮的分离纯化工艺研究

目的优选淫羊藿总黄酮的最佳分离、纯化工艺。方法以淫羊藿总黄酮含量、淫羊藿苷含量和出膏率为考察指标,采用AB-8大孔吸附树脂吸附、乙酸乙酯萃取和酸碱沉淀3种方法对分离纯化工艺进行比较。结果 3种分离纯化方法中以AB-8大孔吸附树脂吸附法最理想,提取物中淫羊藿总黄酮的相对百分含量为80.35%,淫羊藿苷的相对百分含量为46.24%,出膏率为5.23%（n=3）。结论优选的最佳分离、纯化工艺稳定可靠、简便易行,适合于工业化生产。     

淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。结果浓度为100、50μmol.L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目,当其浓度为100、50、10μmol.L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少。结论淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力。     

淫羊藿总黄酮对睾切小鼠免疫功能的影响

淫羊藿总黄酮使睾丸切除所致雄激素缺乏模型小鼠异常增高的免疫功能恢复到一定水平，并可以明显增加青春期前睾切模型小鼠萎缩的包皮腺、精睾腺重量，但对其血浆ｃＡＭＰ水平无显著影响．     

淫羊藿总黄酮药理作用的研究现状

近10年淫羊藿总黄酮研究表明，其作用广泛，如对心血管系统，中枢神经系统，血液系统，免疫系统，抗炎，抗骨质疏松，抗衰老，抗肿瘤等均有作用，本就此研究现状作一概述。     

淫羊藿总黄酮抗大鼠实验性骨质疏松作用研究

目的：研究淫羊藿总黄酮对维甲酸所致大骨质疏松的防治作用作用并探讨其主要作用机理。方法：用70mg.kg^-1.d^-1维甲酸连续灌胃14d,诱发大鼠骨质疏松模型,用高、中、低3种剂量的淫羊藿总黄酮进行治疗,观测大鼠器官指数,骨计量学指标及骨组织形态计量学的变化。结果：淫羊藿总黄酮各剂量组前列腺和睾丸指数均明显增大并恢复到正常对照组水平,脾脏和肾上腺的代偿性肥大消失,股骨的干重,灰重,骨钙,骨磷和骨密度等均明显高于模型组,胫骨近端的骨小梁面积百分比,骨小梁厚度,骨小梁间隙以及胫骨中段的皮质骨面积百分比等亦较模型组有显著升高,第一腰椎中骨小梁指数的变化与胫骨松质骨近似。结论：淫羊藿总黄酮可通过保护性腺,抑制骨吸收和促进骨形成等途径,使机体骨代谢处于骨形成大于骨吸收的正平衡状态,抑制骨量丢失,防止骨疏松的发生。     

淫羊藿黄酮磷脂复合物大鼠体内药动学

目的 :研究淫羊藿黄酮及其磷脂复合物 (EFL)中淫羊藿苷在SD大鼠体内药动学。方法 :以HPLC测定法测定大鼠血中淫羊藿苷的含量 ,以同组大鼠 (8只 ,♂♀各半 )交叉灌服淫羊藿黄酮及其磷脂复合物 ,药 时曲线数据经 3P87药动学计算程序处理。结果 :分别以淫羊藿黄酮及其磷脂复合物给SD大鼠灌胃 (剂量为淫羊藿苷 10 0mg·kg-l) ,淫羊藿苷的药 时过程符合一级动力学模型 ,淫羊藿黄酮中淫羊藿苷的AUC、Cmax、Tmax分别为 (6 2 .5± 4.7)mg·h·L-1,(5 .3± 1.6 )mg·L-1,(2 .9±0 .9)h ,而EFL中的为 (15 6 .1± 2 7.2 )mg·h·L-1,(17.5± 3.5 )mg·L-1,(2 .1± 0 .6 )h ,统计结果表明AUC、Cmax之间差异有显著性。结论 :磷脂可提高淫羊藿黄酮中淫羊藿苷在大鼠体内的吸收     

淫羊藿总黄酮对大鼠实验性骨质疏松生化学指标的影响

目的　探讨淫羊藿总黄酮防治大鼠实验性骨质疏松症过程中骨代谢生化指标的变化及其意义。方法　采用维甲酸灌胃造成大鼠实验性骨质疏松症模型 ,检测灌服高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化 ,并与模型组、正常对照组和阳性对照组进行比较。结果　 3个剂量组的血清E2 、T和BGP水平均高于模型组 ,尿Ca/Cr、DPD和血清PTH水平均低于模型组 ,股骨Ca、P和骨密度与正常对照组接近 ,与模型组差异有显著性。结论　淫羊藿总黄酮对维甲酸造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用 ,骨代谢生化指标变化情况与骨密度的变化相一致 ,说明骨代谢生化指标对骨质疏松症的诊断和治疗具有重要意义     

金线莲及其混伪品中总黄酮含量的比较研究

目的 比较金线莲及其混伪品中总黄酮的含量。方法 以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定金线莲及其混伪品中总黄酮的含量。结果 12批金线莲总黄酮含量在3.89~15.17 mg/g之间,其中广东清远的野生金线莲总黄酮含量最高,为15.17 mg/g;13种混伪品的总黄酮含量在3.66~21.96 mg/g之间,其中野生斑叶兰总黄酮含量最高,为21.96 mg/g。结论 金线莲及其混伪品中总黄酮含量存在明显差异。     

淫羊藿总黄酮对LPC诱导内皮细胞损伤的保护作用

目的观察淫羊藿总黄酮对溶血性磷脂酰胆碱（LPC）诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将血管内皮细胞分为正常对照组,LPC损伤对照组,LPC损伤加淫羊藿总黄酮低、中、高浓度（50、100、200nag·L^-1）组,检测细胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量和细胞内活性氧（ROS）水平。结果淫羊藿总黄酮剂量依赖性地降低LPC诱导的内皮细胞上清液中MDA、LDH含量增加并抑制细胞内ROS活性,且剂量依赖性地增加细胞上清液中NO含量。结论淫羊藿总黄酮对LPC诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞内ROS活性有关。     

大孔吸附树脂对淫羊藿总黄酮的吸附性能研究

目的研究不同大孔树脂对淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷的吸附及解吸附性能,为分离淫羊藿总黄酮提供树脂选择的依据.方法选择11种常用大孔吸附树脂,以淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷为指标,考察不同大孔树脂对两成分的比吸附量和解吸率.同时考察了11种大孔树脂的静态吸附动力学行为.结果对淫羊藿总黄酮比吸附量超过100 mg·g-1的树脂有HPD-300、HPD-400、HPD-500、HPD-600、S-8、AB-8;解吸率超过95%的有D101、HPD-600、AB-8、HPD-400、HPD-500、D201;HPD-600、HPD-500和AB-8为淫羊藿总黄酮快速吸附树脂.结论不同树脂对淫羊藿总黄酮的吸附量、解吸率和速度有很大差异,综合各项试验结果,HPD-600、HPD-500、AB-8为分离淫羊藿总黄酮的最佳吸附树脂.     

几种生药的提取部位对成骨样细胞的增殖作用

考察了石斛、骨碎补、地骨皮、槲寄生的不同提取部位对成骨样细胞UMR10 6的增殖作用。将 4种生药的水提液、乙醇提取液及其经树脂柱洗脱后的不同提取部位与UMR10 6成骨样细胞共同体外培养 ,用MTT法检测各部位对细胞的增殖作用。结果表明 :除石斛的活性部位在 6 0 %、90 %的醇层外 ,骨碎补、地骨皮、槲寄生的活性部位集中在水层、30 %的醇层。     

淫羊藿总黄酮及其含药血清对成骨细胞增殖及功能表达的影响

目的研究淫羊藿总黄酮及其含药血清对体外培养大鼠成骨细胞(ROB)增殖和功能表达的影响。方法将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.2、2、20、100、200 mg.L-15种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2%、4%、8%、16%等4种体积浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究其对细胞增殖和功能表达的影响。细胞增殖采用MTT法进行分析,细胞功能表达是于培养d 5、10、15、20分别检测碱性磷酸酶活性(比色法)、骨钙素分泌量(放射免疫法)、钙盐沉积量(比色法)和矿化结节(组织化学法)等。结果TFE5种质量浓度均对ROB细胞增殖和分化无影响,2%和4%SRAT则表现出强烈的刺激细胞增殖活性并提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、矿化结节数和钙盐沉积量。结论淫羊藿治疗骨质疏松的直接物质基础可能并非TFE,而与其经口给予后吸收入血的TFE代谢产物及其诱生物有关。血清中的TFE代谢产物可促进细胞的功能表达增殖。     

紫外分光光度法和高效液相色谱法测定淫羊藿总黄酮含量的比较研究

目的:比较紫外分光光度法和高效液相色谱法测定淫羊藿总黄酮含量的差异,探讨淫羊藿总黄酮含量测定方法的可靠性。方法:紫外分光光度法以淫羊藿苷为指标性成分,在270 nm 波长处进行测定。高效液相色谱法以 ZORBAX SB-C_(18)柱(250mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长为270 nm。经紫外光谱识别的黄酮类成分(部分经 ESI-MS 确认),除朝藿定 C、淫羊藿苷、鼠李糖基淫羊藿次苷-Ⅱ和宝藿苷Ⅰ以自身对照外,其他黄酮类成分均以淫羊藿苷为参比进行定量,淫羊藿总黄酮含量等于朝藿定 C、淫羊藿苷、鼠李糖基淫羊藿次苷-Ⅱ、宝藿苷Ⅰ和其他黄酮成分含量之和。结果:紫外分光光度法,淫羊藿苷在2.45～24.50μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9996),测得淫羊藿总黄酮含量以淫羊藿苷计为56.6%。高效液相色谱法中,与淫羊藿苷紫外光谱相似的33个色谱峰,MS 归属了其中10个主要成分均为黄酮类成分。朝藿定 C、淫羊藿苷、鼠李糖基淫羊藿次苷-Ⅱ和宝藿苷Ⅰ分别在0.093～1.852μg(r=0.9998)、0.107～2.136μg(r=0.9997)、0.094～1.876μg(r=0.9998)、0.098～1.956μg(r=0.9998)线性关系良好,淫羊藿总黄酮含量为35.6%。结论:紫外分光光度法和高效液相色谱法测定的淫羊藿总黄酮含量差异显著,紫外分光光度法的准确性有待进一步考证。     

阿仑膦酸钠对人成骨样细胞增殖和分化的影响

目的研究阿仑膦酸钠对人成骨样细胞增殖和分化的影响.方法进行OS-732人成骨样细胞生长曲线的绘制、MTT测定、形态学观察、碱性磷酸酶(ALP)测定、ALP染色等.结果①d3时,与对照组相比,10-6md@L-1浓度组的细胞数目增加22.6%;而10-5mol@L-1浓度组的细胞数目明显低于对照组.d 6时10-6,10-7,10-8mol@L-1三种浓度组细胞数日比对照组分别增加24.7%,24.7%和31.0%.10-5mol@L-1浓度组的细胞数目仍明显低于对照组.MTT测定得到了类似的结果.②加药后d4,10-6,10-7,10-8mol@L-1三种浓度组的细胞与空白对照组相比细胞数目多、形态大而规则,染色质深而致密,核质比小.③ALP染色结果显示,10-6,10-7mol@L-1浓度组细胞ALP颗粒染色明显深于对照组,并且ALP颗粒在胞质中分布均匀.ALP的定量测定结果表明,10-6,10-8mol@L-1浓度组细胞ALP水平明显高于对照组.结论阿仑膦酸钠对体外培养的OS-732人成骨样细胞具有促增殖和分化作用,并且这种作用具有最适合的浓度.