人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法将30只裸鼠随机分为两组,实验组15只,对照组15只。培养人卵巢癌细胞系SKOV3细胞,并将浓度调制2×10~7个·mL~(-1),取0.2 mL注射于实验组裸鼠右侧肩胛背部皮下,接种后每日观察两组裸鼠精神、活动、摄食、排便、体质量等情况,是否有肿瘤生长和肿瘤生长速度等。每3 d使用游标卡尺测量肿瘤最长径和最短径,计算肿瘤体积。于接种后第42天将荷瘤裸鼠处死,剥出肿瘤,测量瘤体长径和短径,称取瘤体质量,取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤病理变化。结果细胞注射法可成功建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,瘤体出现时间为3～7 d,成瘤率为93.33%。实验组裸鼠的体质量、精神、活动等情况与对照组无明显差异。共有2例瘤体表面出现破溃。观察结束后,处死裸鼠后完整剥除瘤体,测得肿瘤平均体积为(416.21±134.67)mm~3,肿瘤平均质量为(0.88±0.19)g。剖开瘤体,发现4例可见瘤体中间有坏死液化,取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现符合人卵巢癌的特点。结论初步建立了人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,为卵巢癌的进一步研究奠定了基础。     

两种人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较研究

目的 比较两种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型.方法 将1例人卵巢癌组织移植裸鼠,建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上,传代第十五代实体瘤细胞和人卵巢癌SKOV3细胞分别皮下移植裸鼠.观察两种人卵巢癌裸鼠肿瘤生长速度、存活时间、组织病理学检查、染色体.结果 实体瘤细胞皮下移植瘤生长速度高于SKOV3细胞皮下移植瘤(P＜0.05).实体瘤细胞皮下移植瘤裸鼠可存活30～58 d;SKOV3细胞皮下移植瘤裸鼠存活96～158 d.病理检查:肉眼观察实体瘤瘤细胞皮下移植瘤:瘤为实体,血性少量腹水,有肝、脾转移;SKOV3细胞皮下移植瘤呈囊形,肿瘤长大后可出现破溃,坏死、脱落,未见腹水及肝、脾转移.组织病理显微镜观察均呈乳头状生长,癌细胞生长活跃,细胞核大小不规则,核分裂多见与人癌组织一致.实体瘤细胞皮下移植瘤染色体多为亚二倍体和多倍体;SKOV3细胞皮下移植瘤多为三倍体或四倍体.结论 实体瘤细胞与SKOV3细胞皮下移植瘤有区别,实体瘤模型与人卵巢癌更为一致,并向肝、脾转移.     

人卵巢癌3AO裸鼠移植瘤模型的研究

目的 建立符合人上皮性卵巢癌的临床特征,又便于实验观察和分析的人卵巢癌裸鼠(athymic mice)腹腔移植瘤及皮下移植瘤异种移植模型;比较两种模型的成瘤情况并观察其生物学特性.方法 将一定数量的体外培养的人上皮性卵巢癌细胞株3AO分别接种于裸鼠的右后肢皮下和腹腔内,制备人卵巢癌裸鼠皮下及腹腔异种移植瘤模型;并待肿瘤生长至一定程度,切取移植瘤组织,进行病理组织学检查、电镜观察和流式细胞分析.结果 人上皮性卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤及皮下移植瘤模型建立的成功率均较高;两者在肿瘤细胞接种数量、肿瘤形成时间、肿瘤形态等方面不同.皮下移植瘤成瘤率93.3%,腹腔移植瘤成瘤率为86.7%.结论 人卵巢癌裸鼠异种移植模型的建立成功率高,并能直接再现肿瘤,可很好地反映肿瘤的生物学行为,便于观察和分析实验结果,为上皮性卵巢癌的实验研究提供了较客观的模型.     

卵巢癌裸鼠移植瘤模型对比和可视化研究进展

以裸鼠为载体建立卵巢癌模型至今已有三十余年的发展,随着裸鼠实验技术的日臻完善,裸鼠模型已广泛应用于卵巢癌各种基础和临床研究。裸鼠移植瘤模型因其移植人瘤成功后保存原肿瘤特性,与原瘤组织对抗癌药物具有同样的敏感性,在探索肿瘤发生发展规律、开发新的治疗方法和药物等方面得到充分应用。     

KIAA1456抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长

目的：探讨KIAA1456对人卵巢癌细胞株HO-8910PM裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将15只裸鼠随机分成3组：空白组（PM组）,阴性对照组[PM（NC）组],实验组[PM（KIAA1456）组]。利用人卵巢癌细胞株HO8910PM及本课题组前期通过慢病毒介导建立的阴性对照组细胞株HO8910PM（NC）和过表达KIAA1456的细胞株HO8910PM（KIAA1456）分别在空白组、阴性对照组、实验组建立裸鼠皮下移植瘤,待成瘤成功后,分别用PBS缓冲液和携带针对随机无关序列（NC）的慢病毒液Lentivirus-NC（作为阴性对照,LV-NC）,携带KIAA1456病毒液Lentivirus-KIAA1456（LV-KIAA1456）每隔4 d进行一次瘤内定点注射治疗至28 d处死裸鼠,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率;采用实时荧光定量PCR和Western blot检测移植瘤组织中KI－AA1456的表达情况;免疫组化检测移植瘤中ki-67和PCNA的表达情况。结果：HO8910PM（KIAA1456）移植瘤组KIAA1456表达量明显高于阴性对照组和空白对照组（P=0.000）;28 d后处死裸鼠,HO8910PM（KIAA1456）组皮下移植瘤的体积明显小于阴性对照组和空白对照组（P=0.000）,抑瘤效果明显;移植瘤组织中KIAA1456的表达上调,ki-67和PCNA表达明显下调。HO8910PM（KIAA1456）组移植瘤组织中ki-67和PCNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组,差异具有统计学意义（P=0.000）。结论：过表达KIAA1456基因对人上皮性卵巢癌细胞HO8910PM裸鼠皮下成瘤的生长具有抑制作用,有望成为卵巢癌基因治疗的新靶点。     

丙戊酸对人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨丙戊酸（valproic acid,VPA）对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法：建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组6只： (1) 治疗组：包括①VPA组;② 顺铂（diamminedichloroplatinum,DDP）组;③VPA+ DDP组;(2) 对照组。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,采用流式细胞术（flowcytometry,FCM）检测肿瘤细胞凋亡率、细胞周期时相、裸鼠肝、脑组织细胞的凋亡率和肿瘤细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的蛋白含量。结果：治疗组皮下移植瘤抑瘤率分别为40.7%、45.3%、58.0%,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组的凋亡率分别为（27.05±1.63）％、（35.93±3.89）％、（42.59±2.55）％,高于对照组（16.73±2.82）％;肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,S期细胞显著减少;各组肝脏和脑组织细胞凋亡率均较低,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组中VEGF蛋白含量明显低于对照组。结论：VPA对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,其作用的实现可能与其诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成有关。VPA与顺铂联合应用其抑瘤作用增强,而对肝细胞和脑细胞毒性较低。     

Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25 siRNA对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,建立裸鼠移植瘤模型,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率、移植瘤组织病理学观察.结果 成功建立裸小鼠移植瘤模型,观察30-45d后,发现转染了Rab25 siRNA细胞体内成瘤能力显著下降,与正常对照组及转染空载体组相比,抑瘤率为50.78%、50.64%.结论 阻断细胞内Rab25的表达,可诱导细胞凋亡,缓慢癌细胞生长速度.基于Rab25基因的RNAi技术靶向诱导癌细胞凋亡可望作为卵巢癌治疗的重要辅助手段.     

人内皮抑素基因治疗卵巢癌裸鼠移植瘤的研究

目的探索人内皮抑素基因治疗人肿瘤的可行性：方法将人卵巢癌(SKOV3)瘤组织或其细胞移植于裸鼠皮下，建立成裸鼠移植瘤模型；用高保真PCR从含有人内皮抑素基因的重组质粒中扩增出与人生长激素信号肽序列融合的人内皮抑素编码区，将此基因克隆入pGEM-T载体中，经序列测定证明其序列的正确性；将此基因克隆入真核表达载体pcDNA3。经免疫荧光试验证明能在CPS-1细胞中表达。结果用重组质粒注射已形成移植瘤的裸鼠，能显著抑制移植瘤的生长；将基因注射与肿瘤移植同时进行，基因注射不仅能部分抑制移植瘤的形成，而且能抑制移植瘤的生长。结论本研究构建的分泌型表达人内皮抑素的重组质粒可以用于肿瘤的基因治疗研究。     

2种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的生物学特性比较研究

目的:建立人卵巢癌裸鼠腹腔及皮下移植瘤模型,比较2种模型的生物学特性.方法:采用细胞悬液注射法将人上皮性卵巢癌细胞A2780/DDP注射于裸鼠皮下或腹腔,建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,观察模型动物肿瘤的生长规律及组织学特性,流式细胞术分析细胞周期分布,免疫组化检测促黄体激素释放激素受体(Luteinzing-hormon...     

ESTABLISHMENT AND BEHAVIOR OF A TRANSPLANTED HUMAN PRIMARY GASTRIC CANCER IN NUDE MICE

A human primary gastric cancer tissue (adenocarcinoma Ⅱ—Ⅲ) was transplanted into nude mice (SWISS/DF, nu/nu). It has been transfered for 8 generations at 56 sites in 28 nude mice with transplanting rate of 100%. The transplanted tumor is designated as transplanted human primary gastric cancer-1 in nude mice (THPGC-1). The growth rate of THPGC-1 is rather rapid and the size of transplanted tumor reaches 1cm~2 in 4—5 weeks after transfer. The morphology and histochemistry of the original tumor were retained well in the initial and serial transplanted tumors. THPGC-1 could secrete carcinoembryonic antigen (CEA). After intravenous or intraperitoneal injection of ~(131)Ⅰ-antiCEA monoclonal antibody into the THPGC-1 bearing nude mice, the radiolabeled antibody was concentrated and localized in the tumor as shown by γ-camera analysis. Similar pattern of lactate dehydrogenase isoenzyme was observed both in primary gastric cancer tissue and THPGC-1 tissue. Chromosomal examination revealed that THPGC-1 was human aneuploid ones. Southern blot analysis showed that the pattern of repetitive DNA bands and the structure of 28S rDNA, c-H-ras and c-myc genes in THPGC-1 were identical to the original primary gastric cancer DNA. The results suggest that THPGC-1 be a reliable model for the research of the molecular biology of cancer cells and experimantal gastric cancer diagnosis and treatment.     

腹腔冲洗化疗对人卵巢上皮癌细胞株裸鼠腹腔荷瘤疗效的形态学观察

研究持续腹腔冲洗化疗对裸小鼠人卵巢上皮癌腹腔荷瘤模型的疗效及其副作用。方法用卵巢浆液性囊腺癌细胞株Skov3和裸小鼠建立腹腔荷瘤模型,分对照组、常规CDDP腹腔化疗组(常规组)和CDDP腹腔持续冲洗化疗组(冲洗组)进行观察。于移瘤后3w开始治疗,间隔4d,共2个疗程。结果冲洗组动物的体重在治疗后虽有所下降,但远未达到毒性反应的程度,与常规组相比,无显著差异。冲洗组腹腔瘤的体积明显小于常规组,抑瘤率和细胞凋亡率明显增高,差异十分显著。病理组织学和超微病理学检查也显示,腹腔冲洗化疗效果优于常规化疗,对肾脏也没有大的病理损伤。结论对裸小鼠腹腔荷瘤,持续腹腔冲洗化疗较常规腹腔化疗疗效显著,无明显的毒副作用。     

CD59-siRNA对人卵巢癌细胞裸鼠移植瘤的作用

目的探讨针对CD59的siRNA(CD59-siRNA)对人卵巢癌裸鼠移植瘤CD59的沉默效应及其抑瘤作用。方法采用脂质体转染法将CD59干扰质粒(T组)和空质粒(V组)转染A2780细胞,获得稳定表达细胞株,将T组、V组A2780细胞和未转染(C组)的A2780细胞分别接种于裸鼠皮下建立肿瘤模型,通过绘制肿瘤生长曲线、RT-PCR和免疫组织化学法研究其抑瘤效应和对CD59基因及蛋白的沉默效应。结果与V组和C组比较,T组肿瘤体积和质量明显减小(F=301.88、5.39,q=4.01~30.41,P<0.05),CD59基因及蛋白表达减少(F=817.77、247.71,q=26.59~52.25,P<0.05)。结论特异性沉默CD59基因的siRNA表达载体可以明显抑制CD59的表达及卵巢癌在体内的生长。     

裸鼠体内人类肿瘤杀伤细胞对自体恶性肿瘤杀伤作用的研究

本文利用卵巢癌手术标本建立体外细胞系及裸鼠移植瘤(OEC)。将来自同一病人的脾淋巴细胞体外经重组人类白细胞介素2活化为LAK细胞。裸鼠体内进行的Winn氏中和试验结果表明,L-AK细胞能有效地抑制自体恶性肿瘤在裸鼠体内的成瘤现象。     

应用荷人卵巢癌腹水瘤模型研究免疫脂质体的导向治疗

用卵巢癌单抗脂质体阿霉素交联物对16只荷人卵巢癌裸鼠腹水瘤模型进行导向治疗。腹水瘤模型更接近实际,符合临床。结果表明,导向治疗组的疗效明显高于对照组、阿霉素组及正常IgG脂质体组。     

As2O3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及机制

目的 探讨不同剂量的三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制.方法 将4×106个SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3高、中、低剂量组及生理盐水组(空白对照)、卡铂(CBP)组(阳性对照),连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠,计算移植瘤的瘤质量、抑瘤率及caspase-3基因表达水平的变化,并检测用药后裸鼠的肝、肾功能及血常规.结果 As2O3对移植瘤生长的抑制作用具有剂量依赖性,各剂量As2O3组及CBP组瘤质量与生理盐水组比较均有统计学意义(F=17.931,P<0.05);As2O3作用后caspase-3基因的表达较空白对照组升高,差异有统计学意义(F=31.821,q=2.89～3.84,P<0.05).同时,As2O3各组与CBP组相比,未表现出明显的肝、肾及血液学毒性.结论 As2O3对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达及诱导细胞凋亡有关.     

卵巢癌化疗耐药机制的研究进展

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,死亡率居妇科之首。化疗是目前治疗卵巢癌的重要手段之一。化疗耐药是影响卵巢癌病人生存率的主要原因。卵巢癌化疗耐药是多基因多因素共同参与的结果。近年来卵巢癌化疗耐药相关基因成为监测预后的指标。本文从细胞内药物积聚减少、药物外排增加、药物失活增强;药物作用的靶点异常;细胞凋亡调控的异常;对DNA损伤的耐受性增加或损伤后的修复功能增强;细胞微环境的改变这几方面对化疗耐药的研究进展作一综述。     

~(131)Ⅰ标记抗卵巢上皮癌单克隆抗体进行人卵巢癌裸鼠移植瘤放射免疫显像

用~(131)Ⅰ标记自行制备的抗卵巢上皮癌单克隆抗体COC166-9及COC183-B_2,并对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行放射免疫显像,还观察裸鼠体内的生物学分布,注射标记单克隆抗体后48～72小时放射免疫显像呈阳性图象。其生物学分布:T/B为1.09,T/NT为4.38;而对照组T/B为0.16,T/NT为1.1。说明这种单抗对卵巢上皮癌有亲和性。     

卵巢癌化疗耐药机制的研究进展

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,死亡率居妇科之首。化疗是目前治疗卵巢癌的重要手段之一。化 疗耐药是影响卵巢癌病人生存率的主要原因。卵巢癌化疗耐药是多基因多因素共同参与的结果。近年来卵巢 癌化疗耐药相关基因成为监测预后的指标。本文从细胞内药物积聚减少、药物外排增加、药物失活增强;药物作 用的靶点异常;细胞凋亡调控的异常;对DNA 损伤的耐受性增加或损伤后的修复功能增强;细胞微环境的改变 这几方面对化疗耐药的研究进展作一综述。     

人胚和鼠类气管裸鼠皮下移植

本实验在13只裸小鼠皮下移植BABC小鼠和Wistar大鼠气管及人胚气管、支气管,共26段。观察1～8周,移植气管的总存活率为77%。以气管裸鼠皮下移植为模型的实验,在10天以后加刺激因子比较适宜。