槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用

目的:探索槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响.方法:槲皮素体外孵育人乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法检测MCF-7细胞增殖,FCM法测定细胞周期,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡.结果:槲皮素明显抑制MCF-7细胞增殖,高浓度时(≥50μM)促进细胞凋亡,低浓度时(≤20μM)阻滞MCF-7细胞于S期.结论:槲皮素具有抗人乳腺癌MCF-7细胞的生物学活性.     

墨西哥仙人掌多糖对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的研究

目的：观察墨西哥仙人掌多糖对人乳腺癌MFC-7细胞生长的抑制作用。方法：体外培养人乳腺癌MFC-7细胞,利用四甲基偶氮唑蓝染色法（MTT法）及倒置显微镜观察仙人掌多糖对人乳腺癌MFC-7细胞生长的抑制作用。结果：不同浓度的墨西哥仙人掌多糖均能够促进人乳腺癌MFC-7细凋亡或死亡,最大浓度的墨西哥仙人掌多糖的肿瘤细胞生长抑制率为78．7％。结论：墨西哥仙人掌多糖能够抑制人乳腺癌MFC-7细胞的生长。     

干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用

目的:研究干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用.方法:MTT法检测干扰素-γ(IFN-γ)、干扰素-α2b(IFN-α2b)单独及联合应用,作用不同时间对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用.结果:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用均对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用:单独用药时,作用48h的抑制作用较为明显(P<0.05);联合用药时,作用72h效果显著(P<0.05).结论:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用对MCF-7乳腺癌细胞增殖均有不同程度的抑制作用,二者联合应用药效作用时间延长、作用效果更佳.     

PPARγ在ER+乳腺癌中的表达及对MCF-7细胞生物学行为的影响*

目的：探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxidase proliferator activated receptor γ, PPARγ)在雌激素受体(estrogen receptor, ER)+乳腺癌中的表达和意义及对MCF-7细胞生物学行为的影响。方法：采用免疫组织化学法检测77例ER+乳腺癌组织中PPARγ蛋白的表达情况,结合临床病理特征进行分析;运用阳离子脂质体转染法,分别将myc标记的野生型(PPARγWT)及功能区缺失的突变型PPARγ表达质粒(PPARγMUT)转染ER+乳腺癌MCF-7细胞;Western Blot法观察转染后细胞中Wnt通路相关蛋白的表达;运用流式细胞术和CCK-8法检测转染PPARγWT及PPARγMUT对MCF-7细胞周期、增殖活力的影响。结果：PPARγ蛋白的高表达与ER+乳腺癌的腋窝淋巴结转移、组织学分级、TNM分期、Ki-67有关(P<0.05)。外源性转染PPARγWT与转染PPARγMUT比较,能降低MCF-7中的β连环蛋白(β-Catenin)、T细胞受体4(T cell factor-4, Tcf-4)及Wnt通路靶基因c-myc、cyclin D1蛋白量,明显地抑制MCF-7细胞生长和细胞周期进程。结论：PPARγ与ER+乳腺癌发生发展有关,可抑制人乳腺癌细胞的增殖。     

对-壬基酚对MCF-7人类乳腺癌细胞雌激素受体表达的影响

目的　观察对 -壬基酚 (p- NP)对 MCF- 7人类乳腺癌细胞株雌激素受体 (ER)及 ERαm RNA表达的影响 ,探讨其雌激素样活性。方法　以 RPMI 16 4 0培养液 (含 10 %小牛血清 )对 MCF- 7细胞进行半开放式贴壁培养 ,试验前以 DMEM(不含酚红 )培养液洗涤细胞 ,以含 3% C/D胎牛血清的 DMEM(不含酚红 )培养液继续培养 3d。试验设溶剂对照、阳性对照和 p- NP 5个浓度组 ,采用免疫组织化学法和定量 RT- PCR法分别对 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达情况进行分析。结果　 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 4 h下调 ER蛋白表达 ;1× 10 - 6 mol/L～ 1× 10 - 5m ol/L p- NP作用于 MCF- 7细胞 2 h和 2 4 h下调 ERαm RNA表达。p- NP各浓度组均表现出 ER蛋白和 ERαm RNA表达随 p- NP作用于 MCF- 7细胞时间的延长而进一步下降的趋势。结论　 p- NP可模拟雌激素下调 MCF- 7细胞 ER蛋白和 ERαm RNA表达 ,具有雌激素样活性     

西妥昔单抗联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的实验研究

目的:观察表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体西妥昔单抗(Cetuximab)联合紫杉醇(Paclitaxel,PTX)对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法:实验分为对照组、Cetuximab组、PTX组、联合用药组。用MTT法检测Cetuximab、PTX及Cetuximab与PTX不同联合给药方案对MCF-7细胞的生长抑制率,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率和周期分布,免疫荧光法及RT-PCR法检测PTX组和对照组细胞的EGFR蛋白及mRNA的表达。结果:MTT法检测发现PTX对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖性;Cetuximab与PTX不同的联合给药方案对MCF-7细胞的抑制强度不同,先予PTX再予Cetuximab可见明显的协同作用。与对照组相比,其余3组的细胞凋亡率均有所增加,但联合用药组较单药组更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,PTX组细胞的EGFR蛋白、mRNA的表达均减少(P<0.05)。结论:人乳腺癌MCF-7细胞对PTX敏感;PTX对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖性;Cetuximab和PTX联用可明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长,促进其凋亡,二者联用具有协同作用。     

西妥昔单抗联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用的实验研究

目的：观察表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体西妥昔单抗（Cetuximab）联合紫杉醇（Paclitaxel,PTX）对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法：实验分为对照组、Cetuximab组、PTX组、联合用药组。用MTT法检测Cetuximab、PTX及Cetuximab与PTX不同联合给药方案对MCF-7细胞的生长抑制率,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率和周期分布,免疫荧光法及RT-PCR法检测PTX组和对照组细胞的EGFR蛋白及mRNA的表达。结果：MTT法检测发现PTX对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖性;Cetuximab与PTX不同的联合给药方案对MCF-7细胞的抑制强度不同,先予PTX再予Cetuximab可见明显的协同作用。与对照组相比,其余3组的细胞凋亡率均有所增加,但联合用药组较单药组更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,PTX组细胞的EGFR蛋白、mRNA的表达均减少（P<0.05）。结论：人乳腺癌MCF-7细胞对PTX敏感;PTX对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖性;Cetuximab和PTX联用可明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长,促进其凋亡,二者联用具有协同作用。     

黄芩提取物抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的研究

目的：探讨黄芩提取物对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。方法：通过对经不同浓度黄芩提取物处理过乳腺癌MCF-7细胞染色,使用流式细胞仪进行细胞周期分析。结果：各组单因素方差分析结果显示,黄芩提取物作用于乳腺癌MCF-7细胞48h后10ug/ml和20ug/ml组细胞凋亡率均明显增加,与对照组比较均有差异(P<0.05);细胞周期检测结果显示,10ug/ml和20ug/ml组细胞G0/G1期明显增加,与对照组比较均有差异(P<0.05)。结论: 黄芩提取物可以诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡发生,从而在乳腺癌细胞中产生抗肿瘤的作用。     

核受体激动剂对人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF-7细胞芳香化酶的调节作用

目的：探讨各种核受体包括过氧化酶体增生物激活受体γ(PPARγ)和α(PPARα)、维甲酸受体(RAR)、维甲类X受体(RXR)、维生素D受体(VDR)、甲状腺素受体(TR)和糖皮质激素受体(GR)的激动剂对人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性的调节作用。方法：测定人卵巢颗粒细胞和MCF—7细胞在上述各种核受体激动剂处理前后芳香化酶活性的变化和细胞色素P450芳香化酶(P450arom)mRNA的表达水平。结果：(1)PPARγ和RXR激动剂均能显著抑制人卵巢颗粒细胞芳香化酶活性，两者结合使用抑制作用更进一步增强，并且伴有P450arom mRNA水平下降；(2)RAR和RXR激动剂合用能显著刺激乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性，并使P450arom mRNA表达水平升高。结论：人卵巢颗粒细胞和乳腺癌MCF—7细胞芳香化酶活性受不同的核受体激动剂调节。     

阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用

目的：探讨阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的影响。方法：用Western blotting方法检测阿霉素处理MCF-7细胞后不同时间该细胞表达的KIF4A蛋白;用不同浓度的阿霉素处理MCF-7细胞96h后,检测KIF4A蛋白,并进行衰老相关半乳糖苷酶染色。结果：与未用阿霉素处理的MCF-7细胞相比,阿霉素处理的MCF-7细胞表达KIF4A蛋白降低;衰老相关半乳糖苷酶染色率由5%提高到42%,染色阳性的细胞形态亦呈衰老样变。结论：阿霉素处理MCF-7细胞可使KIF4A蛋白表达水平降低,KIF4A蛋白表达降低与阿霉素引起MCF-7细胞衰老的关系有待进一步研究。     

橘荔散结丸对子宫肌瘤雌、孕激素受体水平的影响

目的观察橘荔散结丸对子宫肌瘤患者子宫肌层及瘤体组织雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的影响。方法选用免疫组化的方法,检测15例仅服用橘荔散结丸3个月以上又手术治疗的患者子宫肌瘤及子宫肌层ER、PR水平,选择15例未曾服用相关中西药物而手术治疗的子宫肌瘤患者做对照。结果2组肌瘤组织EP、PR的水平均高于子宫肌层组织(P<0.05),而对照组EP、PR显著高于治疗组(P<0.05)。结论降低子宫肌瘤患者子宫肌层及其瘤体组织中的EP、PR水平可能是橘荔散结丸治疗子宫肌瘤的主要机理之一。      

化疗药物体外干预乳腺癌MCF-7细胞株的耐药基因表达

目的 体外评价蒽环类及紫杉类化疗药物与乳腺癌耐药相关基因MDR1(多药耐药基因)和BCRP(乳腺癌相关耐药基因)表达的关系.方法 利用RT-PCR技术和荧光定量PCR技术检测体外化疗药物干预后乳腺癌细胞株MCF-7的耐药相关基因表达情况.结果 蒽环类药物与MDR1基因表达量间有密切关系,随蒽环类药物浓度的增加和作用时间的延长,MDR1基因表达量也随之增加.而蒽环类药物与BCRP基因间及紫杉类药物与MDR1、BCRP间都无明显的量效关系.结论 蒽环类药物是MDR1基因编码的p-gp蛋白的特异性底物之一.临床可能通过检测MDR1的表达量较准确的预测蒽环类药物的疗效,并为个体化的选择敏感性药物提供一定的实验依据.     

麝香保心丸对人结肠癌细胞LoVo释放碱性成纤维细胞生长因子和细胞周期的影响

目的探讨麝香保心丸对培养的人结肠癌细胞LoVo分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和细胞周期的影响。方法分别用含药血清和药液培养细胞,用酶联免疫吸附法检测上清液中bFGF含量,流式细胞仪测细胞周期。结果除G2／G1小牛血清组高于其他组以外,各组之间其余指标无显著差异。结论麝香保心丸对人结肠癌细胞LoVo分泌bFGF和细胞周期无影响。     

疏肝化痰祛瘀方对乳腺癌细胞增殖能力调节的机制研究

目的 观察疏肝化痰祛瘀方含药血清对人乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的调节。方法 应用疏肝化痰祛瘀方中药汤剂给予大鼠灌胃,取大鼠腹主动脉血制备含药血清。将人乳腺癌细胞MCF-7在体外进行传代培养,分3组进行干预其生长,分别为空白组、对照组(加入表阿霉素)、实验组(加入疏肝化痰祛瘀方含药血清)。3组分别培养24、48及72h,检测细胞增殖及凋亡情况,对比各组不同作用时间细胞增殖抑制率及凋亡率。结果 疏肝化痰祛瘀方对MCF-7细胞体外增殖具有一定的抑制作用,随着作用时间的延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05),与表阿霉素组作用相似;疏肝化痰祛瘀方可诱导MCF-7细胞凋亡,与作用时间呈正相关(P<0.05)。结论 疏肝化痰祛瘀方含药血清具有抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖与诱导其凋亡的作用,与作用时间呈正相关,提示该方剂发挥临床治疗乳腺癌的疗效机制所在。     

电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞周期的影响

目的探讨电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及周期的影响。方法将等量人肿瘤细胞接种于培养板中,随机分为对照组和治疗组,治疗组按电量不同又分4组,对照组不通电。电化学治疗后培养6h和24h后用流式细胞仪分别检测各组细胞周期变化及凋亡率。结果电化学治疗后6h和24h MCF-7细胞凋亡率治疗组比对照组增加明显（P〈0.05）;治疗各电量组随电量的增加处于G0/G1期的细胞比例先逐渐增高,但至20C时反降低;而S期细胞比例有随电量增加下降至20C时升高的趋势。结论电化学疗法可抑制体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞株的生长,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡及影响其细胞周期有关。     

青蒿素对乳腺癌多药耐药MCF-7/ADR细胞的逆转作用

目的探讨青蒿素在乳腺癌多药耐药中的应用。方法采用MTT法观察青蒿素联合阿霉素(ADR)对乳腺癌耐药株MCF-7/ADR细胞生长增殖的影响;应用流式细胞技术测定青蒿素联合ADR对MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响。结果 10、20、40μmol/L青蒿素实验组的细胞耐药逆转倍数分别为1.53、1.90和3.62倍。青蒿素联合ADR可抑制MCF-7/ADR细胞膜P-gp蛋白的表达,0、10、20、40μmol/L青蒿素作用后的细胞表面P-gp表达阳性率分别为(33.41±4.63)%、(23.07±5.48)%、(21.82±3.87)%和(16.62±1.27)%,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05);各组细胞内总P-gp的表达水平分别为(37.19±5.16)%(、35.30±4.77)%(、37.45±5.19)%和(34.98±3.50)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论青蒿素与ADR同共作用于MCF-7/ADR细胞,使细胞对ADR的敏感性增高,青蒿素具有部分逆转MCF-7/ADR细胞耐药的作用,其逆转作用机制可能是通过影响细胞质和细胞膜之间的P-gp交换,降低细胞膜上P-gp表达水平,提高药物在细胞内的聚集,增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用。     

三羟异黄酮对MCF-7/ADM细胞阿霉素耐药性的逆转作用

目的:探讨三羟异黄酮(GEN)单用及联合阿霉素(ADM)对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性的影响。方法:分别将不同浓度GEN(8、15、30、60μg/mL)和阿霉素单独及联合与人乳腺癌MCF-7/ADM细胞体外共培养48、72 h,MTT法检测细胞抑制率(IR),计算耐药倍数和逆转倍数。结果:MCF-7/ADM细胞相对敏感株MCF-7/S的耐药倍数48 h为117.15倍、72 h为54.42倍。当GEN单独作用后可抑制MCF-7/ADM细胞生长,抑制作用与时间、浓度呈正相关。25μg/mL GEN联合阿霉素对MCF-7/ADM细胞生长抑制率明显高于单用阿霉素(P<0.01),其逆转倍数为7.53倍。结论:GEN可抑制人乳腺癌MCF-7/ADM细胞生长,联合阿霉素对肿瘤细胞生长抑制具有协同作用,GEN能够逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性。     

Effects and potential mechanisms of Danzhi Xiaoyao Pill (丹栀逍遥丸) on proliferation of MCF-7 human breast cancer cells in vitro

Objective： To investigate the effects of 50% ethyl alcohol （EtOH） extracts from Danzhi Xiaoyao Pill （丹栀逍遥丸, DXP） on the proliferation of MCF-7 human breast cancer cells and potential mechanisms. Methods： ATP-Lite assay was performed to test the proliferation of the MCF-7 breast cancer cell line; and antioxidant activity was measured by the oxygen radical absorbance capacity （ORAC）. The effects of DXP on nitric oxide （NO） production were tested by lipopolysaccharide （LPS）- stimulated RAW 264.7 murine macrophages using the Griess reaction. Results： The 50% EtOH DXP extracts displayed a cytotoxic response on MCF-7 cells at 0.10, 0.25 and 0.50 mg/mL dosedependently with the proliferation inhibited by more than 85%. The ORAC value of the DXP was 820μ moL Trolox equivalent/g, about 40% of the vitamin C value. DXP extracts had significant inhibitory effect on NO production at the concentration from 0.0625 mg/mL to 0.5 mg/mL （P〈0.05, P〈0.01）. Conclusion： The extracts of DXP could significantly inhibit the proliferation of MCF-7 cells, with the effect possibly related to its antioxidant activity and the inhibition of NO production.     

利用细胞杂交技术检测强骨胶囊对雌激素受体的影响

目的:探讨强骨胶囊对雌激素受体(ER)活性的影响。方法:将含有ERs配体结合域(LBD)的质粒pCMV-BD和pFR-Luci报告基因及内标质粒pFRTlaczeo共转染到Hela细胞中,检测强骨胶囊与雌激素受体的关系;MTT法检测强骨胶囊对细胞活力的影响。结果:低剂量(12.5ng/ml)的强骨胶囊对两种ER均无明显效果,但是高剂量(125ng/ml和1.25μg/ml)可以显著地激活ERs,并可以显著提高细胞活性。结论:强骨胶囊治疗骨质疏松的疗效可能与激活ERs的作用有关。     

健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29细胞株增殖作用的影响

目的:观察健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29细胞株增殖作用的影响,并探讨其关键成分及可能的作用机制。方法:将培养的HT-29细胞随机分为:空白对照组,健脾清肠散结方及其拆方健脾益气方、清肠散结方高、低剂量组,共7组。24 h后换无血清培养液,分别加入不同浓度药物(0、2、20、200μg/ml),用噻唑盐比色法(MTT)分析测定各组在不同浓度及不同作用时间点对HT-29细胞生长抑制率。结果:在浓度为2～200μg/ml时,健脾清肠散结方及其拆方对肠癌HT-29的增殖均有一定的抑制作用,呈现浓度依赖和时间依赖性;其中拆方健脾益气方对肠癌HT-29抑制增殖效果与全方一致。结论:健脾清肠散结方对人大肠癌细胞株HT-29细胞增殖有一定的抑制作用,其关键成分可能是健脾益气药。