激光共焦显微镜下Fuchs角膜内皮营养不良患者的角膜观察

目的:探讨运用激光共焦显微镜观察Fuchs角膜内皮营养不良患者角膜各层形态。方法:收集2014年12月-2015年8月在我院就诊的Fuchs角膜内皮营养不良患者8例16眼,全部患者行激光共焦显微镜检查,对比双眼上皮、基质及内皮细胞形态图像。结果:8例16眼角膜内皮均可见滴状赘疣;10眼内皮细胞结构不清,7例14眼存在双眼内皮损害程度不一;8眼角膜前部基质层细胞肿胀;6眼角膜观察到上皮基底细胞肿胀。结论:激光共焦显微镜能够清楚观察到Fuchs角膜内皮营养不良患者角膜各层细胞变化,尤其是内皮层细胞改变。特别适用于角膜水肿患者。     

Fleck角膜营养不良的临床和活体共焦显微镜特征分析

目的:探讨Fleck角膜营养不良的临床特征和共焦显微镜下角膜各层组织的形态学改变.方法:对来自2个不同家系的9例(18只眼)Fleck角膜营养不良患者进行裂隙灯显微镜、角膜知觉及共焦显微镜检查,应用NAVIS软件测量和分析角膜各层细胞、神经纤维及角膜内沉积物的大小、密度和累及厚度.结果:Fleck角膜营养不良患者经裂隙灯显微镜检查发现,角膜基质全层呈散在、灰白色斑点状或花冠状混浊,累及角膜中央和周边部,混浊间的角膜透明.共焦显微镜图像表现为角膜基质层内油炸圈样或肾形异常沉积物,平均大小为70.6μm×110.3μm,密度为(1.6±0.4)个/幅图像,累及基质层厚度为(438.4±22.0)μm.异常沉积物内充满直径约2-18μm的点状高反光物质.9例患者有1例双眼角膜知觉减退,共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维的分支和密度减少,前弹力层处发现异常高反光的沉积物.其余病例角膜知觉和神经纤维的形态和密度均正常.结论:Fleck角膜营养不良有其特征性临床表现,结合活体共焦显微镜角膜内沉积物的形态学特点,有助于对疾病的临床诊断和病情评估.Fleck角膜营养不良患者的角膜知觉减退可能与角膜基质层内的异常沉积物累及到前弹力层有关.     

早期圆锥角膜共焦显微镜形态学研究

目的 了解早期圆锥角膜共焦显微镜的影像特征，评价共焦显微镜（confocal microscopv）对早期圆锥角膜（keratoconus）的临床检查意义和诊断价值。方法 对Orbscan角膜地形图检查诊断为早期圆锥角膜的患者18例（19只眼）进行共焦显微镜检查，同时对正常人14例（28只眼）进行共焦显微镜检查，比较两组之间共焦显微镜形态学特征、角膜基质、内皮细胞的密度以及角膜厚度的差异。结果 共焦显微镜下，早期圆锥角膜患者18例（19只眼），有8例（9只眼）的角膜组织结构出现变化，表现为后基质层出现微小皱折，上皮层、前基质层及内皮层未发现异常改变。与正常组比较，早期圆锥角膜的角膜中央厚度轻度变薄（P=0．000），角膜基质、内皮细胞密度与正常组比较无显著性差异。结论 共焦显微镜可活体检查早期圆锥角膜组织结构和细胞的病理改变，为早期圆锥角膜的诊断及研究提供一个新的手段．     

Francois综合征患者中央云雾状角膜营养不良的活体共焦显微镜检查

目的:报道Francois综合征患者中,中央云雾状角膜营养不良的角膜共焦显微镜活体检查结果。方法:两例无亲缘关系的Francois综合征患者,1例为78岁男性,另1例为75岁女性,均有中央云雾状角膜营养不良,对其行常规裂隙灯生物显微镜和共焦显微镜检查。结果:两例患者的裂隙灯生物显微镜检查表现为双侧角膜多边形混浊,其间被透明角膜区域分隔。角膜混浊在中央区最明显,累及后弹力层前的基质层深部。用共焦显微镜观察,两例患者的角膜表面和上皮层基底部,基质层中部和内皮细胞层正常。但是,两例患者的前基质层都可以看到小的高折光性颗粒和沉积物。另外…     

角膜内皮层培养及后板层移植的实验研究

目的探讨体外构建角膜内皮层并进行移植的可能性.方法体外培养的兔角膜内皮细胞种植于羊膜基底膜上,形成单层角膜内皮层,并进行形态学、组织学及超微结构的观察.将构建的角膜内皮层对切除后板层的兔角膜进行移植,同时以无培养内皮细胞的羊膜移植作为对照,术后观察角膜透明度及厚度,对内皮层进行形态学和组织学观察.结果角膜内皮细胞在羊膜上生长呈单层,细胞为多角形,排列紧密,其形态及结构与正常兔角膜内皮组织相似.培养内皮层移植后,角膜维持相对透明及薄度;而对照眼角膜严重水肿、混浊,厚度明显大于实验眼角膜(P<0.01).培养内皮移植后具正常内皮层的结构和功能.结论羊膜是培养角膜内皮细胞移植的良好载体,培养角膜内皮移植有望治疗角膜内皮失偿疾病.     

角膜内皮层培养及后板层移植的实验研究

目的探讨体外构建角膜内皮层并进行移植的可能性。方法体外培养的兔角膜内皮细胞种植于羊膜基底膜上,形成单层角膜内皮层,并进行形态学、组织学及超微结构的观察。将构建的角膜内皮层对切除后板层的兔角膜进行移植,同时以无培养内皮细胞的羊膜移植作为对照,术后观察角膜透明度及厚度,对内皮层进行形态学和组织学观察。结果角膜内皮细胞在羊膜上生长呈单层,细胞为多角形,排列紧密,其形态及结构与正常兔角膜内皮组织相似。培养内皮层移植后,角膜维持相对透明及薄度;而对照眼角膜严重水肿、混浊,厚度明显大于实验眼角膜(P<0.01)。培养内皮移植后具正常内皮层的结构和功能。结论羊膜是培养角膜内皮细胞移植的良好载体,培养角膜内皮移植有望治疗角膜内皮失偿疾病。     

准分子激光原位角膜磨镶术后早期共焦显微镜研究

【目的】研究激光原位角膜磨镶术(LASIK)矫正屈光不正术后角膜出现的变化。【方法】对屈光不正30例(60只眼)患者在激光原位角膜磨镶术术前行共焦显微镜检查,与术后角膜共焦显微镜检查结果相比较。【结果】术后多数术眼出现前弹力层及浅基质层皱折,层间出现反光较强的颗粒,术后早期基质细胞激活,激活范围与角膜瓣厚度负相关犤(136.2±18.1)μm犦,角膜瓣的实际测量值低于角膜瓣预期值(160μm),手术前后最浅层和最深层角膜基质细胞及内皮细胞密度无差异。【结论】使用共焦显微镜检查发现LASIK术后层间出现微小皱褶和碎屑,角膜瓣实际厚度低于预期值,角膜基质细胞被激活,角膜瓣越薄反应范围越广。     

共焦显微镜在角膜营养不良中的应用

共焦显微镜作为一种新型的、无创伤的光学显微镜,已应用于角膜营养不良的研究。由于具有无创伤性、高放大倍数、高分辨率等优点,其能在三维空间观察活体角膜各层结构、各种细胞成分及角膜沉淀的形态学变化,对角膜营养不良的诊治具有临床意义。本文主要介绍了共焦显微镜的原理、正常角膜和各种角膜营养不良的共焦显微镜图像特点。     

翼状胬肉的激光共焦显微镜观察

目的 翼状胬肉是常见的眼表面疾病,活体显微结构的观察有助于治疗与随访. 方法 用海德堡角膜激光共焦显微镜观察了20例原发性翼状胬肉(翼状胬肉组)以及20例正常志愿者(对照组)的结膜和角膜缘.比较了2组角膜各部分细胞数及中央厚度,并对翼状胬肉的血管、树突状细胞数与对照组的的角膜缘进行了比较. 结果 角膜激光共焦显微镜扫描的图像能清晰地观察翼状胬肉患者眼表面的超微结构,包括翼状胬肉周围角膜浅层神经的形态、上皮及其与角膜交界的边缘,翼状胬肉的基质及其血管和浸润的炎性细胞.与正常眼表面相比较,翼状胬肉生长的眼表面,其角膜基底部上皮细胞、前基质细胞、后基质细胞、内皮细胞数量以及中央角膜厚度无显著改变,翼状胬肉基质中的血管密度显著高于正常角膜缘(P＜0.05).翼状胬肉组织浅层及其边缘可见较多的树突状细胞,数量显著高于正常角膜缘(P＜0.05). 结论 角膜激光共焦显微镜可对翼状胬肉进行精确活体观察.     

单纯疱疹病毒性角膜炎对角膜表层上皮细胞的影响

目的:通过活体共聚焦显微镜观察单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)患者角膜表层上皮细胞变化及其与角膜神经知觉关系的相关性。方法:诊断单眼HSK的非急性期复查患者50例(100只眼),和50例未患过HSK健康体检者(100只眼)。行角膜知觉、活体共聚焦显微镜检查并对共焦显微镜图像进行分析、记录。结果:HSK患者患眼角膜表层上皮细胞数为1287.78±102.54cells/mm~2,其密度显著低于对侧眼角膜表层上皮细胞数的2425.18±202.13cells/mm~2和健康对照者角膜表层上皮细胞数2435.23±224.3cells/mm~2(P<0.05)。HSK患者患眼角膜表层上皮细胞面积为606.62±198.23mm~2,较对侧眼角膜表层上皮细胞面积415.36±58.13mm~2和健康对照者角膜表层上皮细胞面积409.21±63.20mm~2,显著增大,差异有统计学意义(P<0.05)。HSK患者患眼角膜知觉正常8例(8只眼),角膜知觉轻度异常34例(34只眼),角膜知觉重度异常8例(8只眼),角膜知觉度与HSK患者的角膜表层上皮细胞密度呈负相关(r=-0.90,P<0.05),与HSK患者的角膜表层上皮细胞面积呈正相关(r=0.81,P<0.05)。结论:HSK导致角膜表层上皮细胞密度降低,通过细胞体积增大来代偿,这些改变与角膜神经功能改变密切相关。     

经后路白内障摘除预防角膜内皮失代偿的疗效观察

目的观察经后路白内障摘除对预防角膜内皮失代偿的效果。方法对13例伴有严重角膜内皮异常但保持屈光透明的白内障患者行经后路白内障摘除术,并对术后矫正视力、主要并发症及角膜内皮密度进行评估,术后随诊8～28个月。结果 13例患者手术顺利,除1例患者因Fuch’s角膜内皮营养不良继发大泡性角膜病变于术后5个月矫正视力下降外,余患者术后矫正视力均有不同程度提高。术前、术后角膜内皮细胞平均密度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论经后路白内障摘除可最大程度减少医源性角膜内皮损伤,是伴有严重角膜内皮病变白内障患者安全、有效的手术方式。     

冷冻角膜在角膜穿孔术中的应用

目的：观察无活性内皮细胞的冷冻保存角膜和使用Optisol中期保存液的新鲜角膜应用于直径小于3mm角膜组织缺损的周边角膜穿孔伤病人,行急诊治疗性角膜移植术后效果的比较。方法：回顾性分析2008年3月至2012年6月,因各种原因导致的周边角膜穿孔,在本院急诊行治疗性角膜移植术的患者10例（10眼）,角膜穿孔范围均小于3mm,其中使用冷冻保存角膜6例（6眼）,使用新鲜角膜4例（4眼）。术后均随访6个月以上。结果：所有患者均获得临床治愈,眼球完整性得以保持,术后前房形成良好,其中冷冻保存角膜组5眼及新鲜角膜组3眼术后随访6个月角膜保持透明,冷冻角膜及新鲜角膜组各有1眼发生术后混浊,新生血管长入。结论：无活性内皮细胞的冷冻保存角膜和新鲜角膜均可用于角膜穿孔伤患者的急诊治疗性角膜移植术,术后效果相近,可不行二次光学角膜移植手术,保持角膜的透明。冷冻保存角膜满足了急诊手术的需要,也缓解了新鲜角膜紧缺的现状。     

不适合准分子手术薄角膜患者的角膜生理参数分析

目的观察由于角膜偏薄不适合准分子手术近视患者的屈光度、角膜中央厚度（CCT）与角膜曲率、眼压的相互关系。方法测量我中心行准分子术前检查角膜偏薄（CCT〈500μm）患者138例（276眼）。按屈光度分为两组,观察不同屈光度角膜中心厚度、角膜曲率、眼压间的相互关系。结果低、中度近视组：角膜中央厚度平均462±14μm,角膜曲率平均43．93±0．09D,眼压值平均11．1±1．6mmHg。高度近视组：角膜中央厚度为平均469±17μm,角膜曲率平均44．21±1．19D,眼压平均12．4±2．4mmHg。两组间比较角膜中央厚度及眼压差异具有显著性意义（P〈0．05）,而角膜曲率差异无显著性意义（P〉0．05）。角膜中央厚度与眼压呈正相关（P〈0．01）,角膜中央厚度、眼压与角膜曲率无关（P〉0．05）。结论不适合准分子手术薄角膜的近视患者角膜中央厚度、眼压随近视度数增加而增大,角膜曲率不随屈光度变化。角膜越厚,测出的眼压值越高。     

配戴角膜塑形镜对角膜上皮下神经纤维的影响

目的 利用激光共焦显微镜观察配戴角膜塑形镜1年半的患者角膜组织变化。方法 选取2019年1月至2019年12月于宁波市眼科医院配戴角膜塑形镜的患者102例（186眼）,观察配戴前及配戴1个月、3个月、6个月、12个月、18个月后,患者角膜上皮及上皮下神经纤维密度、分支数量、弯曲度、内皮等方面的数据变化。结果 随着角膜塑形镜配戴时间的增加,角膜上皮层厚度有所变薄,但角膜上皮细胞并无明显改变。配戴角膜塑形镜前后,患者角膜上皮细胞、角膜中周边及中央角膜神经纤维主干密度、角膜神经纤维分支密度、角膜神经纤维密度、角膜内皮细胞数量比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。角膜神经纤维弯曲度随着角膜塑形镜配戴时间的增加而增加。配戴前后角膜内皮细胞数量比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 配戴角膜塑形镜有着较好的安全性,可应用于控制青少年近视进展。     

Effects of HepⅡ domain peptides Ⅴ of fibronectin on corneal permeability, endothelial cells, intraocular pressure and morphology of trabecular meshwork in rats

Background Trabecular meshwork (TM) cell volume may be an important determinant of aqueous humor outflow in the eye. This study aimed to evaluate the role of HepⅡ domain peptides Ⅴ on corneal permeability, corneal endothelial cells, intraocular pressure (IOP) and morphology of trabecular meshwork in rats.Methods The IOP of rat eyes was measured before and 3, 5, 7 and 8 hours after topical delivery of HepⅡ domain peptides Ⅴ through intracameral injections. The peptide's concentration in aqueous humor was assessed by high performance liquid chromatography (HPLC). The shape and density of endothelial cells were observed by laser confocal microscopy 8 hours, 3 and 14 days after intracameral injections of HepⅡ domain peptides Ⅴ. The morphological changes in TM of rat eyes were assessed by transmission electron microscopy (TEM).Results Intracameral injection of HepⅡ domain peptides Ⅴ significantly (P ＜0.001) decreased IOP by (5.71 ±2.10) mmHg in rats at 5 hours after injection. There were no obvious changes of the shape and the density of corneal endothelial cells. In addition, morphological changes in the TM of rats were observed including the expansion of intercellular spaces in the juxtacanalicular meshwork, removal of extracellular material, cellular relaxation, and cytoskeleton reorganization.Conclusions HepⅡ domain peptides Ⅴ could not penetrate cornea and was safe to corneal endothelial cells. HepⅡ domain peptides Ⅴ could significantly decrease IOP in rat probably by disorganizing actin cytoskeleton and cell-junction in the TM.     

共聚焦显微镜下干眼症患者角膜形态变化的诊断价值初探

目的 应用共聚焦显微镜观察干眼症患者的角膜形态改变.方法 运用日本Nidek公司共聚焦显微镜(Confoscan 4.0)对正常人群和干眼症患者各50例(100只眼)的中央区角膜上皮细胞的密度和异型性、上皮下神经纤维形态、朗格汉斯细胞的浸润和内皮细胞密度进行观察,并对结果进行统计学分析.结果 共聚焦显微镜观察下,干眼症患者和正常人群的角膜中央区表层鳞状上皮细胞、翼状上皮细胞、上皮基底层细胞的细胞密度比较差异有统计学意义(P<0.05).干眼症患者的中央区角膜上皮细胞异型性增多(t=14.3,P<0.01),少量细胞呈激活状态,上皮下神经纤维明显增粗,走行紊乱,伴朗格汉斯细胞浸润,内皮细胞计数和形态差异无统计学意义.结论 共聚焦显微镜可以从细胞层面实时、无创观测干眼症患者的角膜形态的改变,根据角膜上皮细胞细胞密度和异型性、上皮下神经纤维形态、朗格汉斯浸润等病理变化直观识别和诊断干眼症.     

Treatment of rabbit corneal with skin epidermal stem cells

OBJECTIVE: To construct artificial rabbit corneas with autologous skin epidermal stem cells and allogenic stromal cells in vitro and promote healing of corneal wounds. METHODS: Skin epidermal stem cells were isolated from autologous skin samples. Keratocytes were isolated from newborn cornea biopsies. The cells were combined with acellular porcine corneal stroma scaffold to construct artificial corneas. Then the constructed artificial corneas were used to repair severe vision loss caused by complete loss of corneal epithelial stem cells. RESULTS: Cultured skin epidermal stem cells and keratocytes were in good growth conditions. Cultured artificial corneas consisted of multiplayer epithelial cells growing on stroma equivalent consisting of stromal matrix with incorporated keratocytes. The in vitro constructed artificial corneas were histologically similar to normal rabbit corneas. Three months after transplantation, the cornea wounds were healed and the rabbit cornea became transparent. CONCLUSION: The artificial corneas were constructed successfully in vitro and can be used to repair severe vision loss caused by complete loss of corneal epithelial stem cells.     

硅油对兔眼角膜内皮结构的影响

目的：制备前房内硅油注入和硅油注入取出的动物模型,以探讨实验动物眼中硅油对角膜内皮的影响,同时观察、分析硅油取出后角膜的病理变化。方法：将40只健康成年白兔随机分成3组：前房硅油注入组（SIG）、前房硅油注入取出组(SIOG)、空白对照组(CG)。将SIG及和SIOG制成动物模型后进行裂隙灯、角膜厚度、角膜内皮细胞密度、角膜组织学及透射电镜检查,分析硅油在前房内允许停留的最长时间及前房硅油注入取出后角膜发生的病理变化。结果：角膜内皮细胞密度检查结果中,SIG和SIOG 8～16周时角膜内皮细胞密度比相应时限CG下降明显（P<0.01）;组织学及透射电镜下可见12周角膜内皮细胞核固缩,损伤区出现多层角膜内皮细胞。SIOG组在裂隙灯下角膜呈水肿状,SIOG组角膜厚度与SIG组比较明显增加（P<0.01）,组织学及透射电镜结果显示角膜基质的纤维束排列疏.松、紊乱,角膜基质厚度明显增加。CG组角膜内皮细胞无显著改变。结论：兔眼前房内硅油停留8周可引起角膜内皮细胞发生不可逆的损伤,时间越长,损伤越严重。