组织芯片及其在肿瘤病理学研究中的应用

组织芯片是一类新型生物芯片，它可以快速、高效地对大量组织样本进行分析，在肿瘤病理学研究中已得到有效的应用。本就组织芯片的制备及其应用进行了综合讨论。     

应用组织芯片研究PBK/TOPK在人体正常及肿瘤组织中的表达

目的观察PBK/TOPK在人体正常组织和常见恶性肿瘤组织的分布和表达,探讨作为肿瘤标志物的可能性。方法应用免疫组织化学EnV ision法,在含有人体19种正常组织的组织芯片和含有19种恶性肿瘤组织的组织芯片上进行PBK/TOPK染色,检测PBK/TOPK蛋白的表达。结果在19种正常组织中,只有头皮的汗腺、睾丸的精原细胞、肝脏的胆管上皮、食管黏膜下腺体、胰腺外分泌部的导管上皮、前列腺的基底细胞和肾脏的远曲小管8种组织有不同数量细胞明确阳性表达。在19种恶性肿瘤组织中,乳腺癌、子宫颈癌、甲状腺癌等多种肿瘤组织中存在PBK/TOPK的大量、强阳性表达。结论PBK/TOPK在少数正常组织特定细胞中的明确表达及其在多种恶性肿瘤细胞的强阳性表达,为其成为研究肿瘤起源与发生的标志物提供了依据。     

组织芯片技术在原位杂交中的应用

组织芯片 (ｔｉｓｓｕｅｃｈｉｐ)是近年来新兴的一项生物芯片技术。本研究应用这一技术和原位杂交技术 (ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａ ｔｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ,ＩＳＨ)检测 2 30例人体多种常见肿瘤中端粒酶ｈＴＥＲｍＲＮＡ和ｈＴＥＲＴｍＲＮＡ的表达。1　材料与方法1.1　标本来源　 2 30例标本均取自 1999年西安交通大学第二医院病理科外检人体标本 ,其中恶性肿瘤 2 0 7例 ,良性肿瘤 13例 ,正常对照组织 10例。1.2　组织芯片制备　按照本研究室建立的制备方法制备 4× 6规格的组织芯片 (容量为 2 3份组织样本 /张 )。其制备方法…     

组织芯片技术在实验教学中的研究与应用

组织芯片(tissue chip)作为一项新兴的革命性技术,已逐步应用于形态学的观察研究和免疫组织化学、原位杂交等技术。组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片,按实验设计的需求整齐地排列在一张载玻片上,而制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、高效、快速、低耗、易于标准化等优点,我们使用此项技术制作成系统的微缩病理学图谱,初步应用于本利生、研究生的实验教学中,取得了较为满意的效果。     

便携式组织点样仪在肿瘤病理诊断中应用

组织芯片（tissuechip）又称组织微阵列（tissue micmafray TMA）,是近年来新兴的一种标准化和高通量的组织学样本检测的生物芯片技术。由于组织阵列仪价格昂贵,我们尝试自己手工制作组织芯片,取得了一些经验,并完成“便携式组织点样仪和磁性平台组织点样仪”2项发明。现将其在肿瘤组织学研究中的应用介绍如下。     

应用组织芯片技术研究A103和inhibin α在肾上腺皮质肿瘤中的诊断价值

目的 研究肾上腺皮质肿瘤的免疫组织化学和临床病理特点及A103与inhibin α在其中的诊断价值并探讨组织芯片技术的可行性。方法 制备肾上腺皮质腺瘤(ACA)、肾上腺皮质癌(ACC)及嗜铬细胞瘤组织芯片各1个。肾上腺皮脂腺瘤芯片(79例),其中正常肾上腺皮质3例,胎儿肾上腺皮质2例,肾上腺皮质结节状增生2例,ACA72例;肾上腺皮质癌芯片(56例),其中ACC39例,肾上腺转移肿瘤17例(恶性黑色素瘤4例,转移癌13例);嗜铬细胞瘤芯片(44例)中含肾上腺髓质3例,嗜铬细胞瘤41例;20例正常成人肾上腺的常规石蜡组织作对照。用免疫组织化学EnVision法检测A103、inhibin α、calretinin、Ki-67等的表达情况。结果 A103阳性表达情况分别为正常肾上腺皮质100％(23／23),胎儿肾上腺皮质2／2,皮质增生2／2,ACA90．9％(60／66),ACC94．6％(3,5／37),肾上腺髓质及嗜铬细胞瘤阴性,转移肿瘤中除恶性黑色素瘤3／3阳性外其余均为阴性;inhibin α在正常肾上腺皮质、胎儿肾上腺皮质及皮质增生中100％表达,阳性部位主要在网状带与束状带内层,ACA阳性率75．8％(50／66),ACC75．7％(28／37),肾上腺髓质、嗜铬细胞瘤及转移肿瘤均为阴性。结论 组织芯片技术为快速原位检测提供了强有力的手段。应用组织芯片技术大规模高效检测组织样本是可行的。A103及inhibin α的联合应用对于明确肾上腺皮质肿瘤的诊断与鉴别诊断有较高价值。     

应用组织芯片研究clusterin在恶性淋巴瘤中的表达

目的探讨clusterin表达在淋巴瘤诊断分型中的意义。方法应用组织芯片和免疫组化技术检测clusterin在8例反应性增生淋巴结、175例非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)及18例霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma,HL)组织中的表达情况。结果clusterin在193例淋巴瘤中有25例呈阳性表达,其中,18例间变性大细胞淋巴瘤(anaplasia large celllymphoma,ALCL)中有13例呈阳性表达(72·2%),83例弥漫性大B细胞性淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中有12例呈阳性表达(14·5%);clusterin在HL、其他类型NHL和反应性增生淋巴结中均未见表达。结论clusterin可能成为ALCL诊断的新指标,对ALCL的诊断和鉴别诊断具有一定的意义。     

组织芯片技术及其在病理学研究中的初步应用

组织芯片又称组织微阵列 (ｔｉｓｓｕｅｍｉｃｒｏａｒｒａｙ)是将数十个、数百个乃至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体上(通常是载玻片 )而成的微缩组织切片。组织芯片的特点有 :(1)体积小、信息含量高、可根据不同的需要进行组合和设计 ;(2 )不仅适用于形态学观察 ,还能用于免疫组织化学染色、原位杂交和各种原位组织、细胞学的观察和研究 ;(3)高效、快速、低消耗、自身内对照和可比性强。在医学科学研究中可单独或与基因芯片配套用于基因及其产物表达水平的分析和基因功能的研究 ,有广阔的应用前景。我们尝试了组织芯片的制作 ,并在…     

应用组织芯片研究基质金属蛋白酶-13在 乳腺癌中的表达及其临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13, MMP-13）在乳腺癌发生、发展过程中的临床意义。方法：应用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测MMP-13在97例乳腺癌和39例乳腺纤维腺瘤中的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果：乳腺癌中MMP-13的表达（65.98%）显著高于乳腺纤维腺瘤（23.08%）,其表达与腋窝淋巴结转移、临床分期有关,而与患者年龄、肿瘤大小无关。结论：MMP-13与乳腺癌的发生、发展有着密切关系,可作为评估乳腺癌转移和预后的重要生物学指标。     

组织芯片技术在肿瘤分子标志物研究中的应用

肿瘤分子标志物在肿瘤诊断、侵袭、转移、疗效判断和预后预测等方面具有重要作用,而肿瘤标志物的筛选需检测其在成百上千例肿瘤的不同发展阶段、不同分化程度和其相应正常组织中的表达,分析其表达水平与肿瘤临床病理特征的关系。组织芯片技术为筛选肿瘤分子标志物提供了新的高通量工具,显著加速了基因组学和蛋白组学技术在肿瘤临床中的应用。     

组织芯片与基因芯片在肿瘤研究中的联合应用

组织芯片是指固定在载玻片上的组织微点阵,可同时进行分析大量同一实验指标(DNA、RNA及蛋白质)的研究;基因芯片是指固相载体上的高密度DNA微点阵,可检测异常组织与正常组织差异表达基因。组织芯片与基因芯片配合使用在寻找肿瘤基因中有很好的互补作用。利用基因芯片检测出差异表达的侯选肿瘤基因,然后,利用组织芯片迅速筛选鉴定肿瘤基因。从而大大简化和加快从基础研究到临床应用的进程。     

组织芯片在免疫组化染色阳性对照中的应用

目的应用组织芯片制作一种高效方便的免疫组化阳性对照片。方法选择60例不同病变不同抗体染色的免疫组化阳性片和相应的组织蜡块,使用组织芯片制备仪制成组织芯片蜡块,经过连续切片,共获得150张组织芯片,每张组织芯片包含77个组织芯点位,每个组织点的直径为0·6mm,芯片中组织所占面积为0·8cm×0·5cm。每张芯片至少包含了50种常见的抗原。然后将常规工作中测试片裱贴在同一张芯片组织的旁边,同时进行免疫组化染色。结果常见的数10种抗体染色,总能在芯片中出现至少1个阳性点位,其余点位则成为了阴性对照。旁边的测试组织是否阳性有了明确的对照。结论与传统的阳性对照片相比,组织芯片阳性对照片具有更高的效率,参考值更多,更科学,并且简便易行。     

组织芯片联合基因芯片在肿瘤研究中的应用

组织芯片是指固定在载玻片上的组织微点阵 ,可同时进行分析大量同一实验指标 (DNA、RNA及蛋白质 )的研究 ;基因芯片是指固相载体上的高密度DNA微点阵 ,可检测异常组织与正常组织差异表达基因。组织芯片与基因芯片配合使用在寻找肿瘤基因中有很好的互补作用。利用基因芯片检测出差异表达的候选肿瘤基因 ,然后 ,利用组织芯片迅速筛选鉴定肿瘤基因。从而大大简化和加快从基础研究到临床应用的进程。     

应用组织芯片研究Pim-3、p-STAT3在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨Pim-3、p-STAT3蛋白在胰腺导管腺癌组织中的表达情况及生物学行为意义.方法 应用组织芯片和免疫组化的方法,检测88例人胰腺导管腺癌组织和11例非癌组织中Pim-3、p-STAT3蛋白的表达,并分析其与临床病理特征及患者预后的关系.结果 在88例胰腺癌组织中Pim-3、p-STAT3的阳性表达率分别为76.1%和75.0%,在非癌胰腺组织内均为阴性表达.Pim-3在肿瘤细胞的胞质内表达,p-STAT3在肿瘤细胞的胞核与胞质内表达,两者的表达与胰腺癌的临床分期、淋巴结转移相关(P<0.01),与患者年龄、性别、肿瘤大小、位置和病理学分级无关(P>0.05),且其之间成正相关(r=0.416,P<0.01).Kaplan-Meier生存分析结果显示,胰腺癌组织中Pim-3、p-STAT3表达阳性的患者生存时间缩短.Cox多因素相关分析表明Pim-3和p-STAT3阳性表达是影响患者生存期的独立预后因素(分别P=0.003和P=0.015).结论胰腺癌中Pim-3、p-STAT3的阳性表达与肿瘤临床分期和淋巴结转移密切相关,且两者均可作为胰腺癌患者预后不良的判断因子.     

组织芯片技术在检测正常组织和肿瘤组织抗原表达中的应用

组织芯片 (ｔｉｓｓｕｅｃｈｉｐ) [1] 技术具有高产出 (ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ) ,实验误差小和省时、省力、节约经费的优点 ,并能应用于科研、教学、生物试剂测试、质量监控及标准化等领域[2 ,3 ] 。我们采用了组织芯片这项技术并选用了 5种常用抗体 (ＡＥ1/ 3、波形蛋白、ＣＤ45、结蛋白和Ｓ 10 0蛋白 )对 5 4例正常组织及 6 0例肿瘤标本进行了抗原表达的检测 ,以了解该技术在这方面的使用价值。一、材料和方法5 4例正常组织和 6 0例肿瘤标本选自内蒙古中蒙医院病理科和内蒙古乌兰察布盟医院病理科外检标本 (1988～ 2 0 0 0年 )。…     

荧光原位杂交及其在肿瘤生物学中的应用

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）是一种应用荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示ＤＮＡ序列位置的方法。ＦＩＳＨ具有快速、安全、经济、灵敏度高、特异性强等优点，在中期及间期细胞均可检测ＤＮＡ序列及其变化，广泛应用于细胞遗传学、产前诊断、肿瘤生物学、核组成、基因定位、基因扩增等领域。细胞内染色质含量的不平衡是引起肿瘤的根本原因，细胞遗传学上表现为染色体数目或结构异常，分子水平上表现为ＤＮＡ片段的扩增     

应用组织芯片技术研究甾体类受体共激活因子3基因在卵巢癌的扩增与表达

目的 应用组织芯片技术研究甾体类受体共激活因子3(SRC-3)基因在卵巢癌组织中的扩增与蛋白表达及其临床意义.方法 选取1995-2005年间在中山大学附属肿瘤医院和附属第一医院妇科接受手术治疗的卵巢癌患者150例,回顾分析患者临床病理资料.使用两点法制作含有150例卵巢癌的组织芯片.同时选取30例正常卵巢组织作为实验对照组.运用荧光原位杂交、免疫组化方法,对组织芯片中的组织库进行SRC-3基因的扩增与蛋白表达检测,结合肿瘤的临床病理学资料,分析它们之间的关联.结果 在150例卵巢癌组织芯片中,有128例肿瘤成功进行了免疫组化检测,其中46例(35.9%)出现SRC-3蛋白的过度表达,而且与肿瘤的Silverberg氏分级和FIGO分期均有显著的关联(P<0.05),其中45.1%的Silverberg氏G2/3级和46.0%的FIGOⅢ/Ⅳ期卵巢癌出现SRC-3蛋白的过度表达,其阳性率明显高于G1级(13.5%)和FIGO Ⅰ/Ⅱ期(14.6%)的肿瘤.在FISH检测中,9.1%的卵巢癌出现SRC-3基凶扩增,且全部出现SRC-3蛋白的过度表达;而在SRC-3基因无扩增的卵巢癌中,仍有28.6%的肿瘤检测到SRC-3蛋白的过度表达.结论 组织芯片技术是基因扩增与蛋白表达分析的高效准确可靠手段.SRC-3蛋白的过度表达可以作为预示该卵巢癌恶性程度的分子标记之一;在SRC-3的蛋白表达调控中,可能存在着SRC-3基因扩增以外的其它调节机制.     

组织芯片技术及其在胃癌研究中的应用

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率居各种恶性肿瘤前列,但是其分子机制仍知之甚少。组织芯片是一种新型的生物芯片，组织芯片技术自问世以来在肿瘤分子病理研究中得到了广泛应用。在胃癌研究中，它为胃癌相关基因的研究提供了一种全新的方法，为寻找胃癌相关基因、进一步筛选和研究胃癌基因芯片的差异表达基因、寻找和检测与胃癌发生、发展及预后相关的生物分子标记，进而阐明其发病分子机制和进行有效预防提供了捷径。     

组织芯片微量抗体的免疫组化染色

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarrav)技术，是由Kononen等于1998年首先建立并报道，一般是将数十至上百个甚至更多小的组织整齐有序地排列在一张载玻片上而制成缩微组织芯片，即组织切片。组织芯片蜡块可连续切片100～200张，这样用同一套组织芯片即可对上百种生物分子标记(如抗体、DNA和RNA)进行分析、检测，     

荧光原位杂交在软组织肿瘤石蜡包埋组织中的应用

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）作为一种染色体或基因评价的有力工具,可将基因缺失、扩增、异位等异常与组织形态学结合起来,提高病理诊断的准确性,尤其对一些具有遗传学异常而组织形态不典型的软组织肿瘤的诊断。我们采用FISH的方法检测韧带样型纤维瘤病中8号染色体的数目异常,探讨软组织肿瘤石蜡包埋组织FISH检测的可行性、方法优化及其应用。