基质金属蛋白酶-2促进肝纤维化作用免疫组织化学研究

目的了解基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在肝纤维化形成中的作用及与肝硬化患者肝功能损害程度的关系。方法采用免疫组织化学方法(SP法)观查7例正常肝组织和23例肝炎后肝硬化患者肝组织中MMP-2表达的情况。结果在肝硬化患者肝细胞胞浆中、肝窦内皮细胞胞浆中均有MMP-2表达,随着Child-Pugh(肝功能分级)增高,MMP-2在肝细胞中的表达逐渐增强。A、B级患者肝组织与对照组,A、B级与C级间MMP-2表达比较均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 MMP-2参与了肝硬化的形成,在肝硬化患者肝细胞胞桨中表达与肝功能分级相关,提示MMP-2在肝硬化发病机理中有重要作用。     

肝硬化患者血清基质金属蛋白酶-2检测的临床意义

目的 了解基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在肝纤维化形成中的作用及与肝硬化患者肝功能损害程度的关系.方法 采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测了52例肝炎后肝硬化患者和28例慢性肝炎患者(对照组)血清MMP-2浓度.结果 肝硬化组MMP-2显著高于对照组(P＜0.01、);但是肝硬化患者血清中MMP-2浓度随Child-Pugh分级增高显著下降,A、B、C级之间差异均有统计学意义(P均＜0.01),MMP-2水平A＞B＞C.同时发现纤维化指标透明质酸(HA)浓度亦高于对照组(P＜0.01),随Child-Pugh分级增高显著上升,A、B、C级之间差异均有统计学意义,HA水平呈C＞B＞A.结论 肝硬化患者血清MMP-2水平和HA明显升高,且血清中MMP-2水平和HA与肝功能分级明显相关,表明MMP-2与肝纤维化程度有关.HA是与肝病严重程度相关的一个参数.     

肝硬化患者血清胆固醇、总胆汁酸及前白蛋白检测意义

目的 探讨肝硬化患者血清胆固醇(CHO)、总胆汁酸(TBA)及前白蛋白(PA)含量变化及临床意义.方法 对65例肝硬化患者按Child-Pugh分级分为A级、B级、C级,分别测定其血清CHO、TBA及PA的浓度,并与正常对照组(51例)比较.结果 肝硬化患者TBA水平显著高于对照组(P<0.01),且肝硬化患者的血清TBA水平随肝功能Child-Pugh分级的升高而递增(P<0.01);而肝硬化患者的血清CHO及PA水平显著低于对照组,并在Child-Pugh分级中C级显著低于B级和A级.结论 检测血清TBA能灵敏地反映肝硬化严重程度,联合检测CHO及PA则更有助于病情的判断.     

肝硬化患者Child-Pugh分级与凝血4项、D-二聚体的关系

目的 探讨肝硬化患者肝功能Child-Pugh分级与凝血4项、D-二聚体(D-D)的关系.方法 195例肝硬化患者根据Child-Pugh分级标准分为A组(A级,n=49)、B组(B级,n=84)及C组(C级,n=62),收集3组患者首次住院的临床资料(年龄、性别、体质量指数、肝性脑病、腹部B超、饮酒史及吸烟史等)和实验室检查数据[凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-D、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、白蛋白(ALB)及总胆红素(TBIL)],采用线性回归模型(分未调整模型、微调整模型及完全调整模型)评估肝硬化患者凝血4项、D-D与Child-Pugh分级之间的相关性,采用分层线性回归模型分析肝硬化患者Child-Pugh分级与D-D亚组的关系.结果 3组肝硬化患者年龄、TBIL、肝性脑病及腹水等方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05);未调整模型、微调整模型及完全调整模型结果显示,B组、C组肝硬化患者PT、APTT及TT水平分别较A组升高(P<0.05),FIB分别较A组降低(P<0.05),但D-D无差异(P>0.05);在年龄、性别、吸烟及饮酒等混杂因素情况下,肝硬化患者Child-Pugh分级与D-D各亚组的关系比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 肝硬化患者Child-Pugh分级与凝血4项存在密切关系,但与D-D无相关性.     

乙肝肝硬化患者甲状腺激素水平与病情严重程度的相关性

目的评估乙肝肝硬化患者的甲状腺激素水平及其与肝硬化严重程度的相关性,进一步探讨甲状腺激素在评估肝硬化严重程度中的意义。方法收集2018年1月至2019年1月郑州大学第一附属医院收治的180例乙型肝炎肝硬化患者和同一时期年龄性别匹配的180例健康体检者的临床资料,比较肝硬化与正常对照组、不同肝功能分级之间游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)、游离甲状腺素(FT_4)、促甲状腺激素(TSH)的差异,评估甲状腺激素水平与肝硬化严重程度的相关性。结果乙肝肝硬化组FT_3水平低于对照组,FT_4水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同Child-Pugh分级肝硬化患者FT_3水平低于对照组,Child-Pugh B、C级患者FT_4水平高于对照组及Child-Pugh A级患者,对照组和Child-Pugh A、B级患者TSH水平高于Child-Pugh C级患者,差异有统计学意义(P<0.05)。乙肝肝硬化患者Child-Pugh评分与FT_3、TSH呈负相关,与FT_4呈正相关(P<0.05);MELD评分与FT_3、TSH呈负相关,与FT_4呈正相关(P<0.05)。结论测定乙肝肝硬化患者的甲状腺激素水平有助于评估患者肝硬化的严重程度,FT_3可以作为评估乙肝肝硬化患者病情严重程度和预后的指标。     

肝硬化患者同型半胱氨酸测定的临床意义

目的 探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)测定结果在肝硬化Child-Pugh分级中的临床意义.方法 对62例肝硬化患者按Child-Pugh分级分为ABC三组其中A级24例,B级16例,C级22例,采用全自动生化仪和全自动电化学发光仪对Hcy、部分肝功能生化指标和肿瘤标志物进行结果分析.结果:Child-Pugh分级中B、C级Hcy和部分肝功能生化及肿瘤标志物指标较A级有明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),B与C级差异无统计学意义(P>0.05).结论:血清Hcy可作为反映肝硬化患者肝损伤程度的生化指标,为临床的疗效观察和疾病预后有一定的指导意义.     

肝硬化68例血氧变化及其临床意义

目的:探讨肝硬化患者血氧变化及其临床意义。方法:收集诊断明确的肝硬化患者68例,其中Child-Pugh A级11例,B级13例,C级44例。检测其动脉血气分析并比较各级患者的PaO2和PaCO2。结果:Child-Pugh A、B、C级肝硬化患者的低PaO2血症和低PaCO2血症发生率依次增高,三组低PaO2血症的发生率分别为27.2%、38.4%、86.4%。肝硬化患者不同门静脉内径、有或无蜘蛛痣、食道静脉曲张有无、不同肝功能分级(A级加B级及C级)的PaO2和SaO2值比较,均有显著统计学意义。结论:肝硬化患者低氧血症的发生率高,其严重程度与门静脉内径、有无蜘蛛痣、食管静脉曲张和Child-pugh分级有关。     

肝硬化患者外周血中血管内皮生长因子的变化及其临床意义

目的:探讨肝硬化患者外周血中血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其临床意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定80例肝硬化患者(肝硬化组)和20例我院门诊健康体检者(对照组)血清中血管内皮生长因子的含量.结果:Child-Pugh A级、B级肝硬化患者血清VEGF的含量明显高于Child-Pugh C级患者和对照组(P<0.01);而Child-Pugh A级、B级肝硬化患者血清VEGF的含量无显著性差异(P>0.05).结论:血清VEGF含量与肝功能受损程度有关,可能在肝硬化的进程中起着一定的保护作用,这种保护作用可能是通过其改善肝组织的缺血缺氧来实现的.     

CT动脉增强分数评估肝硬化患者肝功能水平

目的：探讨CT动脉增强分数(arterial enhancement fraction,AEF)评估肝硬化患者肝功能损伤程度的可行性及临床价值。方法：前瞻性招募符合纳入及排除标准的52例肝硬化患者(Child-Pugh A,B,C级肝硬化患者组分别为13,20及19例)和17例无肝脏疾病者作为对照。受试者均行肝3期增强CT扫描,利用CT Kinetics软件进行后处理获得AEF彩图及其定量参数肝AEF(hepatic AEF,HAEF)、肝与脾AEF比值(H/S)。比较不同Child-Pugh级别间HAEF,H/S的差异,并计算受试者工作特征曲线下面积(area under the receiver operating characteristic curve,AUROC),对肝硬化患者的HAEF,H/S与终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分进行Spearman相关性分析。结果：HAEF,H/S的观察者间一致性高,组内相关系数(intraclass correlation coefficient,ICC)分别为0.918(95% CI：0.871~0.949),0.946(95% CI：0.915~0.966)。对照组与Child-Pugh A,B,C级肝硬化患者组间的HAEF,H/S差异有统计学意义 (均P<0.001);肝硬化患者HAEF,H/S随Child-Pugh分级增加呈升高趋势,且除Child-Pugh A级组与B级组H/S外差异均有统计学意义(均P<0.001)。在所有肝硬化患者中,HAEF,H/S用于诊断Child-Pugh A级的AUROC分别为0.933,0.821;用于诊断Child-Pugh C级的AUROC分别为0.925,0.915。肝硬化患者HAEF,H/S与MELD评分呈显著正相关(HAEF：r=0.752,P<0.001;H/S：r=0.676,P<0.001)。结论：CT AEF相关参数HAEF,H/S与肝硬化严重程度及预后密切相关,能简单、有效地评估肝功能损伤状况。     

肝硬化患者前白蛋白、纤维蛋白原及肝纤维化指标与Child-Pugh分级的关系

目的:探讨肝硬化患者血清前白蛋白(PA)、血浆纤维蛋白原(FIB)及肝纤维化指标与Child-Pugh分级的关系. 方法:肝硬化患者52例,按Child-Pugh 分级,A级23例,B级16例,C级13例.正常对照组30例,男性18例,女性12例.均检测PA,FIB和肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(IV-C)、层粘连蛋白(LN).结果:肝硬化患者PA,FIB含量均比对照组显著下降(P＜0.01),肝纤维化指标HA,IV-C,PC-Ⅲ,LN含量均比对照组显著升高(P＜0.01).随着肝硬化Child-Pugh分级的递增,PA,FIB水平呈进行性下降,在C 级处于最低水平,而肝纤维化指标水平均呈进行性升高, 在C 级均处于最高水平.PA与HA在肝硬化Child-Pugh A级、B级、C级组间两两比较差异有显著性(P＜0.01).结论:联合检测PA,FIB及肝纤维化指标HA,IV-C,PC-Ⅲ,LN可以较好反映肝硬化患者肝细胞受损的严重程度,对于观察病情、估计预后有一定的参考价值.     

肝硬化患者中白细胞介素17A水平及临床意义

目的:研究肝硬化患者中白细胞介素(Interleukin,IL)-17A的表达情况与其定位,并研究外周血和组织中IL-17A的含量与肝硬化发展的关系?方法:收集肝硬化患者外周血和肝组织,通过血清酶联免疫吸附法和免疫组织化学法,观察IL-17A在肝硬化患者血清?肝脏组织中的表达量,在肝硬化组织中的定位及其与肝硬化程度之间的关系?结果:肝硬化患者血清中的IL-17A水平明显高于正常对照者;肝硬化组织中,IL-17A主要表达在肝星状细胞?浸润的中性粒细胞和淋巴细胞,以及胆管上皮细胞中,新鲜肝组织中IL-17A的含量与Child-Pugh分级之间存在正相关关系?结论:IL-17A在肝硬化过程中起着重要的作用,且可一定程度反映肝硬化的进展?     

固肠胶囊对慢性溃疡性结肠炎大鼠炎症介质及结肠黏膜的影响

[目的]观察固肠胶囊对慢性溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)水平及结肠病理组织的影响,探讨其可能作用机制。[方法]Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、固肠胶囊高、中、低剂量组,采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液及葡聚糖硫酸钠(DSS)联合应用复制大鼠慢性UC模型,于造模缓解复发期灌胃给药10 d,观察各组大鼠疾病活动指数(DAI),结肠黏膜损伤指数(CMDI)及病理组织学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α、IL-10水平。[结果]与空白对照组比较,模型组DAI、CMDI评分及血清TNF-α水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,固肠胶囊能明显升高血清IL-10水平(P<0.05),降低DAI、CMDI评分(P<0.01)及血清TNF-α水平(P<0.05),促进溃疡修复。[结论]固肠胶囊可通过抑制血清TNF-α表达、促进血清IL-10表达,抑制炎症进展,减轻结肠组织因过度免疫介导作用而导致的肠黏膜损伤而治疗慢性UC。     

软肝化坚颗粒对肝纤维化模型C57小鼠肝脏MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的观察软肝化坚颗粒对肝纤维化模型C57小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响。方法 40只C57小鼠被随机分为四组,即正常对照组、模型对照组、软肝化坚颗粒低剂量组和高剂量组,每组10只。采用四氯化碳腹腔注射制造小鼠肝纤维化模型,通过免疫组织化学染色方法检测肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达,同时进行阳性表达评分及肝组织纤维化评分（S）。结果造模6周结束后各实验组肝组织MMP-2和TIMP-2表达及纤维化评分与正常对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,而MMP-2/TIMP-2比值软肝化坚高、低剂量组与正常对照组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;软肝化坚高、低剂量组肝组织MMP-2和TIMP-2表达和纤维化评分明显低于模型对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;且MMP-2和TIMP-2比值也较模型对照组趋于平衡,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论软肝化坚颗粒可通过调节C57小鼠肝组织MMP-2和TIMP-2的表达,降低ECM过度沉积,具有抗肝纤维化功效。     

实验性肝纤维化过程中基质分解素-1酶原的表达变化

目的：研究实验性肝纤维化过程中基质分解素-1(MMP-3)酶原蛋白表达的动态变化。方法：建立四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化模型，采用半定量Western免疫印迹方法，对肝纤维化不同阶段肝内MMP-3的酶原蛋白的表达水平进行了检测。结果：在正常大鼠肝组织中有MMP-3的酶原表达。在肝纤维化发生发展过程中MMP-3酶原蛋白表达水平逐渐增强，至肝纤维化中期到达最高峰，到肝纤维化晚期及肝硬化阶段其表达较中期下降，但仍高于正常对照水平。结论：MMP-3在肝纤维化的发生、发展直至肝硬化形成过程中可能发挥着重要作用。     

基质金属蛋白酶-2、-9在大鼠肝纤维化中的表达及意义

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )、基质金属蛋白酶 9(MMP 9)与肝纤维化的关系。方法　用皮下注射四氯化碳的方法建立大鼠化学性肝纤维化模型 ,并在第 4周、8周、12周末处死大鼠 ,采用免疫组织化学方法分别检测肝组织中MMP 2、MMP 9的表达。结果　MMP 2主要位于血管内皮细胞、肝窦内皮细胞及肝窦细胞的胞浆 ,MMP 9主要位于静脉周围的肝窦细胞的胞浆。肝纤维化组MMP 2、MMP 9免疫组化阳性表达面积明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,并随造模时间延长而进行性增加。结论　MMP 2和MMP 9参与了肝纤维化的进展。     

三种血清因子水平在晚期血吸虫病肝纤维化诊治中的意义

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）在晚期血吸虫病（晚血）患者肝纤维化诊断中的作用及意义。方法采用ELISA法检测45例晚血、30例健康人血清TGF-β1、MMP-1、TIMP-1水平;采用常规HE染色结合Masson三色、苦味酸天狼猩红特殊染色法,对晚血患者的肝活检组织进行肝纤维化程度分期。结果与对照组比较,晚血组血清TGF-β1、TIMP-1水平及TIMP-1/MMP-1值明显增高（P均〈0.01）,而且血清TGF-β1含量和TIMP-1/MMP-1值与肝纤维化程度呈正相关（P均〈0.05）,但血清MMP-1含量与肝纤维化程度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 TGF-β1、MMP-1、TIMP-1与晚血肝纤维化的发生、发展密切相关,三者联合检测可作为晚血肝纤维化的诊断和疗效评估指标。     

转基因骨髓源性肝干细胞移植对肝纤维化大鼠细胞外基质积聚的影响

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏细胞外基质(ECM)积聚的影响.方法 体外将携带人uPA基因的腺病毒(AduPA)转染BDLSC.采用皮下注射CCl4方法 建立大鼠肝纤维化模型.将纯系Fisher大鼠随机分为正常组、模型组、BDLSC组(尾静脉注入2×104BDLSC)和BDLSC-uPA组(尾静脉注入2×106AduPA转染的BDLSC),各9只.观察各组大鼠肝功能和血清ECM水平的变化;采用半定量逆转录(RT)-PCR方法 检测大鼠肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL Ⅰ、COLⅢ)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、3、9及金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1、2 mRNA的表达.结果 BDLSC-uPA组大鼠肝功能明显改善;血清ECM水平和羟脯氨酸含量明显低于模型组和BDLSC组;肝组织COL Ⅰ mRNA(38.9±2.7)、COLⅢ mRNA(8.5±1.6)表达均明显低于模型组和BDLSC组(均P<0.05),MMP-2mRNA(157.5±32.6)、MMP-3 mRNA(105.5±14.6)、MMP-9 mRNA(187.5±22.8)表达均高于模型组和BDLSC组(均P<0.05),而TIMP-1、2 mRNA的表达则差异无统计学意义(P>0.05).结论 uPA基因修饰BDLSC移植可能通过上调MMP的表达,促进ECM的降解,从而改善纤维化大鼠的肝功能,抑制大鼠肝纤维化.     

干脏B超形态学变化、MMP-2及TIMP-2水平与肝纤维化分期的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者肝脏B超形态学改变、血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子水平（TIMP-2）与其肝纤维化程度的关系。方法选择我院收治的76例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,对所有观察对象进行B超引导下肝活检及肝组织纤维化分期,B超检查测定门静脉主干、脾静脉宽度及脾脏厚度;使用ELISA检测法检测慢性乙型肝炎患者血清MMP-2和TIMP-2含量,另外选取15例健康成人作为对照,分析MMP-2、TIMP-2与患者肝纤维化程度之间的关系。结果慢性乙型肝炎患者的脾脏厚度、门静脉主干及脾静脉宽度随患者肝纤维化分级的增加而增大：血清MMP-2、TIMP-2水平随肝纤维化程度加重而升高,r值分别为0．805、0．771,P〈0．05。结论肝脏B超形态学改变及血清MMP-2、TIMP-2水平变化对慢性乙型肝炎患者早期肝纤维化的诊断具有重要意义。     

丹芍化纤胶囊对基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的：探讨丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化的作用及对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组，除正常组外，其余采用四氯化碳(CCl4)、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周，然后两治疗组分别予以低剂量(0．5g／kg)、高剂量(1g／kg)丹芍化纤胶囊灌胃8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT)，光镜下观察肝组织纤维化程度，检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量，同时免疫组织化学SABC法检测肝组织MMP-1的表达。结果：治疗组与肝纤维化模型组及自然恢复组比较，肝脏指数、血清HA及ALT显著下降，肝纤维化程度显著减轻，尿Hyp排出明显增加，肝脏MMP-1表达显著增加。以上结果均以高剂量组较低剂量组改善明显。结论：丹芍化纤胶囊增加大鼠肝组织中MMP-1的表达，可能是其抗纤维化作用的机制之一。     

肝炎平对家兔血吸虫肝纤维化MMP-2、 TIMP-1表达的影响

目的　研究肝炎平抗家兔血吸虫肝纤维化的作用, 探讨其抗肝纤维化的可能机制。方法　实验分为3 组:正常对照组(N组)、血吸虫感染 吡喹酮组(A组) 及血吸虫感染 吡喹酮 肝炎平治疗组(B组)。采用苏木精伊红染色及Masson染色, 观察肝组织病理学改变; 采用免疫组织化学SP 法检测各组肝组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子- 1 (TIMP- 1) 的表达水平。结果　B组肝组织胶原纤维含量低于A组(P<0 05); B组MMP 2、TIMP -1的表达水平均低于A组(P<0 .01, P<0 .05)。结论　在抗血吸虫治疗后使用肝炎平,能通过减少肝组织MMP- 2、TIMP- 1的表达而发挥抗血吸虫肝纤维化的作用。