烧伤后某些急性期蛋白反应物的变化及其临床意义

测定了烧伤病人伤后血清中4种急性期蛋白反应物的变化并分析了与败血症及死亡的关系。其中C-反应蛋白，α1-抗胰蛋白酶伤后升高，其变化趋势有助于预测和诊断烧伤败血症的发生．α2-巨球蛋白的降低与败血症的发生也有关系。若α2-巨球蛋白持续下降和α1-酸性糖蛋白明显升高有助于判断烧伤病人的预后。因此观察急性期蛋白反应物的变化是监测病人病情变化的有益指标。     

烧伤早期大鼠主要脏器内皮素受体mRNA的表达与定位

烧伤早期大鼠主要脏器内皮素受体ｍＲＮＡ的表达与定位６３００３８重庆第三军医大学西南医院王旭高建川吴雄飞杨宗城黎鳌关键词灼伤；内皮素；原位杂交中国图书资料分类号Ｒ６４４内皮素（ＥＴ）是目前所知体内作用最强的缩血管因子，是血管内皮细胞参与血管舒缩功能调节...     

烧伤大鼠肺泡巨噬细胞CD14蛋白表达对细胞因子的影响

目的：探讨严重烧伤对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)CD14膜蛋白(mCD14)表达变化及其对AM分泌细胞因子的影响。方法：20％Ⅲ度烧伤大鼠检测早期外周血LPS浓度。AM以烧伤血清及LPS刺激，再分别以抗CD14抗体作用，免疫组化检测mCDl4蛋白表达变化；ELISA检测培养液中川TNFα和IL—6浓度。结果：烧伤血清和LPS刺激后．mCD14蛋白表达从1h起就开始增加，2h达峰值，尔后逐渐减弱，上述改变在12h内持续，细胞因子分泌相应增加；抗CD14抗体阻断CD14作用后，mCD14的蛋白表达显著降低，细胞因子分泌亦相应减少。结论：严重烧伤后随LPS增加，激活内毒素信号传导通路，使AM分泌细胞因子增加，此作用可以被抗CDl4抗体所阻断，提示严重烧伤后可以通过调节CD14的作用而减少细胞因子的合成和分泌。     

烧伤后大鼠骨骼肌组织泛素及泛素化蛋白表达的变化研究

为研究烧伤大鼠骼肌组织泛素（ubiquitin)及泛素化蛋白表达的变化规律，探讨烧伤后骨骼肌蛋白降解的分子机制，采用大鼠30％Ⅲ度烫伤模型，分为伤后2、6、12和24h组，每组设正常对照组，于伤后不同时间点分别测定大鼠骨骼肌孵育液中伸趾长肌蛋白降解率以及伸趾长肌组织中泛素及泛素化蛋白的表达变化。结果发现，大鼠烧伤后伸趾长肌蛋白降解率增强，尤其是肌纤维蛋白降解增强明显（P＜0．01），伤后12h增加185％，24h增加153％；伸趾长肌泛素及泛素化蛋白的表达在烧伤后各时相点均显著增加（P＜0.01)，尤以12h和24h为明显，表达增加的泛素化蛋白主要为高分子量蛋白。提示烧伤后大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢与泛素及泛素化蛋白的高表达关系密切。     

正常人前列腺组织PSP mRNA的表达

用ＲＴ－ＰＣＲ和ｃＤＮＡ序列测定法分析５名正常中国人前列腺组织中前列腺分泌蛋白（ＰＳＰ）ｍＲＮＡ的表达。结果表明,在这５名正常前列腺组织中均同是存在ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｃＤＮＡ,且基因序列与文献报道的从前列腺癌和增生前列腺组织中获得的完全一致。这可能对ＰＳＰ进一步的基础研究和应用有一定的意义     

严重烧伤对大鼠肠三叶因子表达的影响

目的　探讨严重烧伤对大鼠肠三叶因子（ITF）及其mRNA表达的影响及意义。　方法　48只健康成年Wistar大鼠,制成30%TBSAⅢ度烧伤模型并随机分成正常对照组及伤后1,2,3,5,7d共6组,每组8只。采用原位杂交、免疫组化等手段观察伤后ITF及ITFmRNA表达的变化,并使用高效液相色谱仪对肠黏膜ITF含量进行定量检测。　结果　正常对照组大鼠小肠中ITF及ITFmRNA均有一定表达,它们主要分布于肠绒毛杯状细胞中。烧伤后肠黏膜组织结构受损,ITFmRNA表达明显减少,肠杯状细胞合成和分泌ITF的能力大幅下降（P<0.01）,特别是ITF二聚体的含量远远低于伤前［(369.33±65.56)ng/g］,伤后7d［(15.83±4.40)ng/g］仅为伤前的4%。　结论　严重烧伤后肠黏膜组织结构受损是ITF合成下降的主要原因,而ITF特别是ITF二聚体含量的大幅下降又可加重肠黏膜损伤,延缓肠黏膜修复。     

大鼠脊髓组织CNTFRα mRNA的表达及其坐骨神经损伤后表达的变化

目的：通过对大鼠脊髓组织中睫状神经营养因子受体α（ＣＮＴＦＲα）的分布与细胞定位及其在坐骨神经损伤后表达变化的研究，来探讨ＣＮＴＦ在脊髓组织中的可能作用。方法：利用原位杂交和点杂交的方法，对ＣＮＴＦＲα在大鼠脊髓组织中的分布与坐骨神经损伤后的表达变化进行研究。结果：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ几乎存在于所有脊髓神经元与胶质细胞中；坐骨神经损伤后１ｄ表达增加，以后降到较低水平，到１４ｄ再次升高，但第２峰较第１峰为低。结论：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ在大鼠脊髓组织中的广泛分布，表明ＣＮＴＦ对脊髓组织各类神经元与胶质细胞均有神经营养作用。坐骨神经损伤后１ｄ，ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ表达的增加，可能与损伤应激相关；１４ｄ的再次升高是否由于再生过程中，雪旺细胞大量增殖，ＣＮＴＦ大量表达所诱导，还有待进一步的研究；ＣＮＴＦＲα表达的改变，可能是损伤神经元在损伤与再生修复过程中，神经元本身代谢适应性改变的一部分     

运动疲劳对大鼠纹状体神经元GLUT_3 mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨运动疲劳后大鼠纹状体神经元GLUT_3 mRNA和蛋白表达的适应性变化。方法:Wi-star大鼠40只,任选10只为正常对照组,其余采用多级递增负荷跑台运动建立运动疲劳模型,留其成功的20只为疲劳组;测试两组大鼠血糖、血乳酸、尿素氮及血清胰岛素含量,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定纹状体神经元GLUT_3 mRNA的表达,运用免疫组化法观测该部神经元GLUT_3的蛋白表达情况。结果:力竭后即刻,实验组大鼠血糖、血清胰岛素含量均显著低于对照组大鼠(P<0.05),而血乳酸及尿素氮水平显著高于对照组大鼠(P<0.05),纹状体神经元GLUT_3 mRNA及蛋白的表达均较对照组大鼠显著上调(P<0.05)。结论:运动疲劳后大鼠能量基本耗竭,迫使机体以非胰岛素依赖方式上调纹状体神经元GLUT_3 mRNA和蛋白表达水平来应激,以此延搁由能量衰竭所引起的级联反应,从而形成一种适应性保护反应来减缓运动性疲劳的发生。     

抑制差减杂交筛选大鼠烧伤后差异表达基因

目前 ,抑制差减杂交 (ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＳＳＨ)因其简单易行和假阳性率低成为研究基因表达变化的重要实验方法[1] 。我们尝试用ＳＳＨ分析烧伤大鼠外周血淋巴细胞及单核细胞基因表达的变化 ,为全面了解严重烧伤后早期该类细胞的功能改变打下基础。1　材料与方法1 1　主要仪器和材料　雄性ＳＤ大鼠由第二军医大学动物中心提供。ＰＣＲ仪为ＰＥ2 40 0型 ,凝胶图像分析仪为ＧＤＳ80 0 0型。Ｔｒｉｚｏｌ总ＲＮＡ提取试剂盒及ＰＣＲ产物纯化试剂盒购自上海华舜生物技术公司 ;Ｐｏｌｙ…     

不同深度的Ⅱ度烧伤创面中单核巨噬细胞生长因子的mRNA表达

目的了解不同深度的Ⅱ度烧伤创面内源性生长因子的表达调控特点，以及这些特点与创面愈合过程的关系。方法分别观察大鼠浅Ⅱ度和深Ⅱ度烫伤模型创面渗液单核巨噬细胞生长因子ｍＲＮＡ表达的变化，并比较分析了两者间的差异。这些生长因子有ＴＧＦα、ＴＧＦβ和ＰＤＧＦ。结果对照组、浅Ⅱ度和深Ⅱ度组实验动物的创面单核巨噬细胞ｍＲＮＡ表达明显不同。未烫伤的对照组（单纯植海绵收集创面渗液）伤后１天均达峰值以后呈持续下降；浅Ⅱ度组伤后１周呈更高而持续的表达，伤后２周时回落接近对照组；深Ⅱ度组伤后早期呈低水平表达，于伤后１周时呈较高水平表达，其中ＴＧＦβ迟至伤后２周呈较高水平表达。结论提示创面单核巨噬细胞生长因子表达的启动，达到高峰和回落与损伤类型和创面愈合的状况密切有关，深Ⅱ度创面早期单核巨噬细胞生长因子的低水平表达与这类创面愈合时间较长的关系值得深入探讨。     

烧伤早期大鼠血浆,皮肤创面及脏器内皮素—1的动态变化

采用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３５％Ⅲ度烧伤模型，于伤前、伤后共８个时点，分别检测血浆、皮肤创面及心、肺、肝、肾肠５种脏器的内皮素－１含量。实验发现，血浆ＥＴ－１含量伤后１ｈ高，８ｈ达到峰值，并持续升主同直至伤后２４ｈ。     

超氧化物歧化酶和过氧化氢酶对大鼠急性肺损伤的预防作用

大鼠尾静脉注射油酸造成急性肺损伤模型，观察到肺组织丙二醛、脂酰过氧化物和花生四烯酸代谢产物、ＴＸＢ２、６－Ｋ－ＰＧＦ１α显著升高（Ｐ〈０．０１），肺组织内大量ＰＭＮ扣押，血管内皮、基底膜受损及肺泡水肿等。超氧化物歧化酶和过氧化氢酶可显著减轻上述病变，证实氧自由基清除剂通过抑制氧自由基反应和改善ＰＧＩ２／ＴＸＡ２平衡而对急性肺损伤有预防保护作用。     

烧伤脓毒症早期心肌内泛素mRNA的表达变化及意义

目的　观察烧伤脓毒症大鼠心肌内泛素mRNA表达的变化及意义。方法　采用大鼠 30 %Ⅲ度烫伤复合腹腔注射内毒素(6mg/kg)动物模型 ,分为伤后 2h和 6h组 ,同时设对照组 ,通过核糖核酸印迹法检测大鼠心肌内泛素mRNA表达的变化。结果　伤后 2h和 6h大鼠心肌内泛素mRNA 2 4kb条带和 1 2kb条带的表达均较对照组均显著升高 ,其中 2 4kb条带的升高更明显 (P<0 0 1)。提示烧伤脓毒症早期心肌内重要的蛋白降解途径———泛素系统活性呈持续增强现象 ,预示蛋白降解代谢可能显著增加。结论　该发现对进一步从代谢角度研究烧伤脓毒症时心肌结构的变化及其对心功能的影响有重要意义。     

雷米芬太尼对肺损伤大鼠粘附因子表达影响的实验研究

为探讨雷米芬太尼对失血后肺损伤粘附因子表达的影响 ,以健康SD大鼠为实验对象 ,复制改良Wigger休克模型 ,随机分为对照组、复苏组、复苏 药物使用组 ,观察休克前、休克、复苏 2h、复苏 4h 4个时点 ,每组每个时间点的动物数为 6只。采用免疫组化和RT PCR方法测定ICAM 1、P Selectin的肺内表达。结果发现 ,电镜下可见药物使用组肺损伤程度轻于其他两组 ;从复苏 2h开始 ,肺内I CAM 1和P Selectin蛋白质的表达药物使用组的阳性率要显著低于对照组和复苏组 (P<0 0 5 )。ICAM 1和P SelectinmRNA光密度比具有时间顺序性 :休克时P Selectin的表达与休克前比较有显著性差异 ,早于ICAM 1的表达。组间差别与免疫组化结果相同。提示雷米芬太尼可能通过下调肺组织中粘附因子的表达 ,从而缓解失血性休克及复苏后再灌注性肺损伤     

抑制生物蝶呤合成对大鼠烫伤后金葡菌感染所致肺损伤的影响

为探讨生物蝶呤 (BH4 )在金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌 )脓毒症所致急性肺损伤中的作用及BH4 合成抑制剂的防护效应 ,将 5 6只动物随机分为正常对照组、烫伤对照组、烫伤后金葡菌感染组和 2 ,4 二胺 6 羟基嘧啶 (DAHP)拮抗组。分别检测肺组织三磷酸鸟苷环水解酶I(GTP CHI)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)基因表达 ,以及BH4 和一氧化氮 (NO)等介质的含量。结果显示 ,早期给予生物蝶呤合成限速酶抑制剂 (DAHP不仅可显著抑制组织GTP CHI基因表达和BH4 的产生 ,iNOS基因表达和NO生成亦明显受抑 (P <0 .0 5 )。同时 ,注射DAHP可在一定程度上减少肺组织肿瘤坏死因子 α的产生 (P <0 .0 5 ) ,肺组织髓过氧化物酶活性也有所下降。本结果表明 ,严重烫伤后金葡菌感染所致BH4 大量产生可能是介导急性肺损伤的重要原因之一 ,感染早期及时抑制BH4 的合成可能有助于金葡菌脓毒症的防治     

烟雾吸入性肺损伤肺泡表面活性物质结合蛋白A表达异常机制的研究

为探讨烟雾吸入性肺损伤肺泡表面活性物质结合蛋白A（SPA）表达异常机制。本实验采用烟雾吸入性肺损伤大鼠模型，研究吸入伤后肺氧化应激及SPAmRNA表达情况。提取SPA转录因子（TTF1），采用EMSA实验，研究氧化应激对TTF1与SPA 基因调控区DNA结合活性的影响。结果发现，烟雾吸入伤后肺组织过氧化氢（H2O2）含量显著增加，SPAmRNA表达下降；EMSA实验显示，H2O2剂量依赖地抑制TTF1与SPA 基因调控区DNA结合活性。研究表明，氧化应激对TTF1活性抑制可能是烟雾吸入性肺损伤SPA表达下降的原因。     

烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响

加深入阐明严重烧伤早期全身血管通透性增加继而引直民早期损害的发生机制，本实验应用培养于微孔滤膜上的小牛瞌 及皮细胞单层所构成的选择性通透屏障模型，观察了３０％Ⅲ度烧伤大鼠血清对其影响，结果发现，烧伤早期烧伤血清刺激后ＥＣ单层对Ｈａｎｋｓ液或白蛋白液滤过流量、滤过系数均明显增加。     

环氧合酶-2在大鼠酒精性肝损伤中的作用

为探讨环氧合酶-2(COX—2)在大鼠酒精性肝损伤中的作用，将大鼠随机分为3组。正常组：予以玉米油 葡萄糖液灌胃；模型组：玉米油 酒精灌胃；处理组：玉米油 酒精 塞莱昔布(celecoxib，为COX—2选择性抑制剂)灌胃。3周后处死大鼠，然后进行大鼠肝组织切片HE染色、脂肪染色及COX—2免疫组化染色；血清AST、ALT水平、血浆及肝组织匀浆谷胱甘肽—S转移酶(GST)活性测定。结果发现，模型组脂肪染色明显加重，AST升高，肝GST活性降低，COX—2表达增加；而处理组比模型组脂肪染色减轻，AST下降，GST活性上升，肝组织中COX—2表达明显减少。提示使用选择性COX—2抑制剂能减轻大鼠酒精性肝损伤，证实COX—2参与了大鼠酒精性肝损伤过程。     

慢性肾衰大鼠IL－2基因表达的改变及淫羊藿的调节作用

采用ＭＴＴ掺入法及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术探讨了慢性肾衰大鼠脾细胞ＩＬ－２水平及其ｍＲＮＡ的表达，以及中药淫羊藿对其影响。结果显示，慢性肾衰大鼠ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达量及脾细胞培养上清中ＩＬ－２的水平均低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），经中药淫羊羹调节后ＩＬ－２水平及ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达可恢复至正常水平。     

冠状动脉内放射对PDGF-B和iNOS基因表达以及NO的影响

为探讨冠状动脉内放射抑制再狭窄的机制,对２３头小型猪冠誊劝脉行球囊过度扩张术,其中１２例头在术后即刻通过＾１９２Ｉｒ血管内放射治疗系统局部给予２０Ｇｙ的放射剂量,其余１１头作为对照缄。用反转录－聚合麦链反庆（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量检测血管组织血小板源生长因子（ＰＤＧＦ－Ｂ）和诱导型一氧化氮合酶（Ｉｎｏｓ）ＡＤＬＤＧＥ ＤＰ ,ＵＡ ＩＭＪ ＰＧ ＴＬＤ ＴＰ ＸＥＸＫＧ ＲＮＵＤＷＸ ＲＮＯＯ（屡