用反相高压液相色谱法分离测定庆大霉素硫酸盐

庆大霉素是一个很有价值广泛使用的氨基糖苷类抗生素,它主要由C组份组成。对C组份采用各种色谱法进行分离分析已有大量报道,近来大多数研究者采用了HPLC法,其中Anhalt等人用OPA试剂柱后衍生庆大霉素进行离子对的HPLC,Maitra等人将柱后衍生步骤改成柱前衍生,避免柱后反应螺管的特性对荧光强度的影响。Freeman等人对OPA试剂进行了改进,以巯基醋酸代替琉基乙醇,增强衍生能力。Weigand等人改变溶剂系统比较柱前柱后衍生方法并与微生物法进行了对照,将庆大霉素中C_1、C_(1a)、C_2、C_(2a)完全进行了分离测定。     

高效液相色谱柱前衍生技术在低浓度药物分析中的应用

围绕衍生化试剂2, 4-二硝基氟苯、酰氯、醛类、异硫氰酸苯酯和对溴苯甲酰甲基溴等, 总结柱前衍生处理方法、高效液相色谱(HPLC)的分析和方法的检测限, 阐明柱前衍生法在低浓度药物分析中的应用及其意义.     

氨基葡萄糖3种含量测定方法的比较

目的比较了USP法、HPLC衍生化法和紫外分光光度法测定氨基葡萄糖含量的准确性和可靠性。方法①USP法参照USP28,采用C8色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）,以乙腈-0.05%磷酸溶液（调pH 3.0）（40∶60）为流动相,检测波长195 nm,柱温：30 ℃;②HPLC衍生化法采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.05%磷酸溶液（调pH 3.0）为流动相进行梯度洗脱,检测波长265 nm,柱温：30 ℃,氨基葡萄糖与芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺（FMOC-Osu）溶液反应的衍生物在上述条件下检测;③紫外分光光度法采用在碳酸钠溶液环境下铁氰化钾与氨基葡萄糖反应后在420 nm处测定吸收值。结果3种方法的线性均较好, HPLC衍生化法和UV法测定原料药的精密度和回收率均比USP方法好。USP法测定氨基葡萄糖硫酸盐及其制剂的含量偏低。结论USP方法测定结果不理想,HPLC衍生化法和UV法均适合氨基葡萄糖原料的测定,而HPLC衍生化法更适合制剂的含量测定。     

高效液相色谱间接光度检测法及其应用现状

高效液相色谱间接光度检测(HPLC-IPD)法是在流动相中添加具有检测响应的探针试剂(检测剂、背景试剂)来完成响应低或无响应化合物分离检测的一种有效方法。与HPLC柱前、柱后衍生化技术相比，此法具有操作简便，灵敏度高和线性关系好等特点。     

高效液相色谱法测定氨碘肽滴眼液中5种氨基酸的含量

目的采用HPLC法测定氨碘肽滴眼液中丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)的含量。方法采用Ocean-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:乙腈-水(4∶1),流动相B:0.1 mol·L-1乙酸钠-乙腈(97:3);流速为1.0 mL·min-1;柱温:25℃;检测波长:254 nm;用异硫氰酸苯酯(PITC)作为柱前衍生化试剂,采用柱前衍生HPLC法进行分析。结果各种氨基酸能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰;平均回收率在98%¹02%,RSD均<3%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于氨碘肽滴眼液中氨基酸含量的检测。     

反相快速HPLC测定核糖霉素方法的研究

本文选用３，５－二硝基苯甲酰氯作衍生化试剂，柱前衍生，采用二极管阵列紫外检测器检测，研究并建立了核糖霉素及杂质新霉胺的反相快速ＨＰＬＣ测定方法。采用高效细颗粒短柱进行分离，整个分析时间少于５ｍｉｎ，实现了高效快速测定。     

部分氨基糖苷类抗生素含量的快速测定法

氨基糖苷类抗生素的质控及分析测定,主要集中于各组分的快速准确分离测定的研究,除经典的微生物测定含量的方法外,还有TLC法,HPLC法,用HPLC法进行测定时,多以氨基糖苷类衍生化反应制成紫外吸收衍生物或荧光衍生物后,才便于检测,其衍生化试剂有邻苯二醛巯基化合物,荧光胺,2.4-二硝基氟苯,2,4,6-三硝基苯磺酸试剂等.     

柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分布洛芬对映异构体

目的：建立一种柱前手性衍生化-反相高效液相色谱紫外法检测布洛芬的异构体。方法：以N′N-羰基二咪唑（CDI）作为活化剂活化布洛芬的羧基基团,再以（R）-（+）-1-（1-萘基）乙胺（R-NEA）作为手性衍生化试剂进行反应。选用Kromasil C18色谱柱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,以乙腈-0.05%磷酸（68∶32）为流动相,检测波长225 nm。结果：布洛芬的非对映异构体色谱峰的保留时间分别为25.6 min和27.9 min。结论：本方法操作简单,条件温和,衍生化产物稳定,且衍生化试剂价格便宜,更准确地实现了对布洛芬对映异构体的分离检测。     

薄层色谱法定量分析纯品和胶囊中的阿奇霉素

根据美国药典 (USP) ,检测阿奇霉素 (AZT)的方法有HPLC ,但由于AZT及其杂质、降解产物的紫外吸收太低 ,通常用电化学法或柱前 /柱后衍生化来辅助HPLC ,并且只适用于纯品和血药浓度的测定。Khedr等人建立了一种新的定量分析方法———薄层色谱法 ,可选择性、准确地评价原料药和产品剂型中AZT及其杂质、降解产物。用二氯甲烷或水溶解样品 ,硅胶G6 0F2 54 作为固定相。尝试了多种展开系统 ,最后决定使用正己烷 -乙酸乙酯 -二乙基胺 (75 :2 5 :10 ,v/v/v/ )系统。为了检测斑点 ,用改良的Dragendoff试剂显印 ,即先喷新制Dragendoff试剂…     

用1-氟-2,4-二硝基苯进行氨基糖甙类的快速柱前衍生化及其在药物分析中的运用

本文介绍了一种简单而快速的柱前衍生化技术,从而对丁胺卡那霉素(Amikacin,Am)和妥布霉素(Tobramycin,Tb)采用HPLC法进行测定,所用的衍生化试剂为1-氟-2,4-二硝基苯(FDNB).作者认为,氨基糖甙类的FDNB衍生物稳定,在常用波长范围内,克分子吸收系数大,无论在正相还是在反相系统中都具有极好的层析性质.本文对衍生化反应条件和实验方法进行了优化选择,以克服该法的某些     

氨基葡萄糖3种含量测定方法的比较

摘要：目的 比较了USP法、HPLC衍生化法和紫外分光光度法测定氨基葡萄糖含量的准确性和可靠性。     

柱前衍生化HPLC法测小儿金丹片中朱砂的含量

目的：建立柱前衍生化HPLC法测定小儿金丹片中朱砂的含量。方法：以二乙基二硫代氨基甲酸钠（NaDDC）为衍生化试剂,样品经消解、衍生化和有机溶剂提取后测定。采用HPLC法,使用C18柱,流动相为甲醇-水（含0．02mmol·L^-1的NaDDC）（87：13）;检测波长272nm;流速1．0ml·min^-1,柱温35℃。结果：Hg^2＋在0．10～0．63μg范围内线性关系良好,r=0．9992,平均加样回收率98．4％（RSD为0．40％,n=9）。结论：本法结果准确,便于操作,可作为小儿金丹片的质量控制方法之一。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量

目的用二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化RP HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量。方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生 ,ODS(KromasilC18,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱分离 ,以乙腈 0 0 5mol·L-1乙酸钠水溶液为流动相 ,梯度洗脱 ,3 60nm检测 ,在 3 0min内 ,测定氨肽素的氨基酸组成与含量。结果线性范围 (总氨基酸 1 4种 )为 0 1 5～ 0 75 g·L-1;回收率为 94 8%～ 1 0 3 5 % ;RSD为0 2 6%～ 1 47% (n =5 )。结论DNFB柱前衍生化RP HPLC法可有效控制产品质量     

柱前衍生化RP-HPLC分离巴氯芬的对映异构体

目的建立巴氯芬对映异构体的拆分方法。方法采用柱前衍生化RP-HPLC法,以2,3,4,6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯为柱前手性衍生化试剂,考察衍生化时间、试剂用量、流动相组成及其pH等因素对手性分离的影响。结果采用ZORBAX-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,在流动相为甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(40:60,pH6.0)、紫外检测波长为254 nm、流速为1.5 m.lmin-1、柱温35℃的色谱条件下,巴氯芬对映体衍生物获得了基线分离,分离度为1.93,并确认了R( )-衍生物的色谱峰。结论所建方法简便、快速,为巴氯芬的光学异构体的测定提供了参考。     

朱砂中汞的二乙基二硫代氨基甲酸盐柱前衍生化HPLC测定

建立了柱前衍生化HPLC法测定朱砂中的汞含量。以二乙基二硫代氨基甲酸钠(NaDDC)为衍生化试剂,样品经消解、衍生化和有机溶剂提取后测定。采用C18色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.022mmol/LNaDDC)(90∶10),检测波长为272nm。结果Hg2 在8.4～42.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,检测限为4.2ng,平均回收率为99.9%,RSD为2.2%。     

鹿肉酶水解液中游离氨基酸的高效液相色谱分析

目的应用高效液相色谱法对鹿肉酶水解液中游离氨基酸进行检测。方法以AQC为衍生化试剂,采用柱前衍生化技术、紫外检测考察了氨基酸衍生和液相分离过程中的各种影响因素,检测鹿肉酶水解液中各种游离氨基酸含量。结果鹿肉酶水解液中蛋白质含量为83.2 8% ,总游离氨基酸含量为4 8.79mg/g。结论柱前衍生高效液相色谱法可用于检测鹿肉酶水解液中游离氨基酸含量,此法可为鹿肉的综合利用提供依据     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

高效液相色谱光学检测的新方法及其应用

高效液相色谱检测器用于连续监测色谱柱流出液。样品组分在流出液中的浓度变化,由检测器转换成电信号,在记录器上描绘出色谱图。根据色谱图,可以对样品组分进行定性定量。在高效液相色谱(HPLC)的各种检测器中,以光学检测器的应用最为广泛,其中各种类型的紫外吸收检测器的应用约占67%,萤光检测器的应用约占14%。最近几年,HPLC 的光学检测法有很大进展,新颖的光学检测方法时有报道;高灵敏度、低噪音、高选择性的光学     

利用Pirkle型手性固定相柱拆分对映体药物:用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂拆分胺类、醇类药物

本文首次介绍了利用异氰酸-α萘酯(NI)作衍生化试剂,在Pirkle型DNBPG柱上对五种含胺基、醇基的药物对映体进行了拆分。其中拆分美西律(mexiletine)、氯胺酮(ketamine)、本芴醇(benflumelol)和苯丙醇(phenylpropanol)药物尚未见报道。结果表明,用异氰酸-α萘酯作衍生化试剂的方法,具体简便易行、分离度好、几乎没有衍生化带来的杂质、不需分离出未反应的异氰酸-α萘酯便可直接进行拆分实验等优点。可以预计,NI将可能成为一种很有发展前途的新衍生化试剂,而且为Pirkle型DNBPG柱开发了新的领域。     

骨化三醇注射液中甘氨酸含量测定方法研究

目的:建立HPLC法测定骨化三醇注射液中甘氨酸的含量.方法:采用柱前衍生高效液相色谱法测定,通过实验筛选出柱前衍生化的最佳反应条件.结果:衍生反应的最佳条件为pH 8.04,温度20～30℃,反应时间为1.5 min,试剂用量1 ml.含量测定的方法学验证结果显示该方法专属性好,线性关系、重复性、回收率较好.结论:采用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法能准确测定骨化三醇注射液中甘氨酸含量.