PCR分型检测胃黏膜组织中幽门螺旋杆菌的应用研究

目的探讨分子探针PCR法与病理甲苯胺蓝特殊染色法两种方法检测胃黏膜切片组织上幽门螺杆菌(Hp)阴、阳性感染以及感染强度结果,评估检测是否存在差异;比较两种方法检测结果与活动性胃炎的相关性。方法选取2017年8月~2017年10月在泉州市儿童医院因消化道不适就诊接受胃镜检查的患者胃黏膜石蜡切片标本100例,分别采用上述两种方法进行Hp检测。结果检出阳性符合率达96.7%,阴性符合率达87.5%,总体符合率达93%,检测结果无统计学意义差别,但是鉴定Hp感染程度时存在差别,荧光探针PCR法鉴定Hp感染程度高于特染法。另外荧光探针PCR法在检测Hp阴、阳性的同时,能够同时对Hp菌株进行亚型鉴定,本次100例样本试验中检测出2例Ⅱ型菌株。结论荧光探针PCR法检测操作简便、不依赖人经验判断,且与病理切片染色(特染法)相比较,检测结果无显著差异,同时能够进行菌株分型,适合在病理科开展。     

定量聚合酶链反应检测胃粘膜幽门螺杆菌

采用美国ＢｉｏｔｒｏｎｉｃｅＴｅｃｈｃｏｒｐＡＧ９６００荧光定量聚合酶链反应系统，检测８０例胃粘膜病变活检标本幽门螺杆菌ＤＮＡ含量，并与细菌培养，病理学检查，尿素酶定性对照。结果：几种检测幽门螺杆菌方法中，以定量聚合酶链反应检出阳性率最高为７６．２％；定性为～时，定量拷贝数也较高，两者有相关性     

炭疽杆菌双重实时荧光PCR检测方法的建立

目的 建立同时检测炭疽杆菌capA基因、PA基因的双重实时定量荧光PCR方法,用于应对突发传染病疫情和流行病学调查、突发公共卫生事件应急处置的早期检测及防范生物恐怖威胁.方法 设计和合成分别针对炭疽杆菌capA基因、PA基因的引物对和荧光双标记探针,构建质粒标准品,通过优化探针、引物浓度、反应体系试剂组分等参数,建立可同时检测capA基因、PA基因的双重实时荧光PCR方法,测试方法的灵敏度和特异性,并在实战检测中应用.结果 双重实时荧光定量PCR的炭疽杆菌capA基因、PA基因检测的灵敏度分别可达到每反应5和50拷贝,并具有良好的特异性,在实战应用中亦经过考验.结论 双重实时荧光定量PCR技术具有可以同时筛查、经济、快速、特异性强等优点,在炭疽杆菌检测方面有良好应用价值.     

荧光定量PCR检测HCV核酸提取法临床价值分析

目的使用RQ-PCR比较氯仿-异丙醇法和核酸分离柱法提取HCVRNA的临床价值。方法分别用两种核酸提取法提取相同患者的HCVRNA后,采用RQ-PCR技术检测HCVRNA含量,对两种方法的提取效率和重复性进行对比。结果两种方法均能较好地提取RNA,且提取效率相近（P〉0.05）,但是核酸分离柱法在重复性上更加优于氯仿-异丙醇法。结论两种方法均可被临床采纳,但是核酸分离柱法重复性更高,且毒性低,值得推广。     

荧光定量PCR法在检测246例小儿巨细胞病毒感染中的应用

目的：探讨FQ-PCR在诊断小儿巨细胞病毒感染的临床应用价值。方法：分别应用血清抗体检测和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）的方法对患者进行血液和尿液病毒的检测,并对确诊的患者进行母乳CMV病毒的检测。结果：在怀疑为活动性CMV感染的169例患儿中,PCR法的阳性检出率为75.1%,血清IgM法为52.1%,两种方法的阳性符合率为86.4%;18例尿液CMV-DNA阳性的患者查出母亲乳汁中CMV-DNA,含量为1.7×10～4.5×103copies/mL。结论：FQ-PCR可以准确检测患儿体液及血液中的CMV含量,提示体内复制情况,对于临床的诊断和治疗有一定的指导意义。     

实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析

目的分析实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测在人巨细胞病毒(HCMV)感染中的应用价值。方法选取363例疑似HCMV感染患儿及50例健康儿童,均采集血样进行实时荧光定量PCR检测。分析荧光定量PCR检测结果 ,并比较不同性别、不同年龄HCMV感染的阳性检出情况。结果实时荧光定量PCR检测显示, HCMV感染患儿中32例为阳性,阳性率为8.82%;健康儿童中1例为阳性,阳性率为2%。阳性患儿的HCMV载量在5.0×102~1.0×104 copies/ml。HCMV感染患儿阳性率高于健康儿童,差异具有统计学意义(P<0.05)。188例男性CMV感染患儿的阳性率为9.04%(17/188), 175例女性CMV感染患儿的阳性率为8.57%(15/175),不同性别HCMV感染患儿阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。152例年龄<1岁CMV感染患儿的阳性率最高,为14.5%;其次为1~3岁患儿,阳性率为6.9%;109例>3岁患儿的阳性率最低,为2.8%;不同年龄段CMV感染患儿的阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 <1岁儿童由于机体的免疫力和抵抗力较弱,容易出现HCMV感染的情况,因此需要借助实时荧光定量PCR技术进行筛查,从而尽早诊断和治疗,能够避免严重并发症的出现。     

贵州地区981例人巨细胞病毒荧光定量PCR检测结果分析

目的 分析某院送检的血液和尿液标本中人巨细胞病毒(hCMV)-DNA的实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)结果,为临床合理诊断hCMV感染提供依据.方法 回顾性分析该院981例尿液和血液样本的hCMV-DNA的FQ-PCR检测结果,并运用SPSS16.0软件对结果进行对比分析.结果 981例样本阳性率为17.02％...     

荧光定量-聚合酶链反应法检测丙型肝炎病毒RNA

随着定量荧光定量 聚合酶链反应法 (ＰＣＲ)的出现 ,人们将定量ＰＣＲ用于丙型肝炎的诊断和疗效观察。为了解ＥＬＩＳＡ法检测抗 ＨＣＶ与病毒ＲＮＡ的定量关系 ,我们用荧光定量 聚合酶链反应 (ＦＱ ＰＣＲ)检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ ,并与ＥＬＩＳＡ法检测抗 ＨＣＶ进行比较。1　材料与方法1 1　材料　抗 ＨＣＶＥＩＡ试剂 ,北京万泰公司 ;丙氨酸氨基转氨酶 (ＡＬＴ)试剂 ,上海生物研究所 ;ＨＣＶ ＰＣＲ试剂盒 ,中山医科大学达安基因诊断中心提供 ;ＰＥ5 70 0荧光ＰＣＲ仪 ,美国ＰＥ公司。ＴＥＣＡＮ自动化加样系统 ,瑞士ＴＥＣＡＮ公司 ;…     

乙肝五项指标与荧光定量PCR HBV DNA检测相关性分析

本文采用荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）测定了1006例血清中HBV DNA,并与酶联免疫吸附测定（ELISA）的结果做了比较。现报告如下：     

Targeting Helicobacter pylori in gastric carcinogenesis

Gastric infection by Helicobacter pylori is an important risk factor for the development of gastric cancer. Recent research has identified both bacterial and host factors related to increased gastric cancer risk, including virulence-associated genes located in the cytotoxin-associated gene pathogenicity island and the vacuolating toxin A exotoxin, as well as polymorphisms in key cytokines and cytokine receptors that mediate the host’s gastric inflammatory response. Early randomized trials indicate that eradicating H. pylori with antibiotics may prevent gastric cancer, although the effects so far have been modest, and are probably confined to individuals who had not developed preneoplastic lesions at the time of eradication. Targeting H. pylori to prevent gastric cancer may be best achieved through vaccination, better understanding of the molecular pathogenesis of H. pylori-associated carcinogenesis and additional chemopreventive strategies.     

Diagnostic methods for Helicobacter pylori detection and eradication

Helicobacter pylori is the principal cause of peptic ulcer disease and an important risk factor for the development of gastric cancer. The efficacy of 1 week triple therapies, which often have eradication rates of>90%, is undermined by poor patient compliance and bacterial antimicrobial resistance. The development of new anti-H. pylori therapies presents enormous challenges to clinical pharmacologists, not only in the identification of novel targets, but also in ensuring adequate drug delivery to the unique gastric mucus niche of H. pylori. Animal models of H. pylori infection have been developed but their clinical validity has yet to be established. Vaccination, to prevent or treat infection, has been demonstrated in animal models, but human studies have not been so encouraging.     

胃癌患者幽门螺杆菌L型感染的临床研究

目的探讨胃癌与幽门螺杆菌L型（Hp—L）感染的关系。方法取186例胃癌患者胃窦和胃体粘膜组织常规切片后经革兰氏染色和免疫组化染色镜检Hp—L型细菌。结果Hp—L型检出率为56-45％（105／186），革兰染色和免疫组化染色法检出率分别为60．22％（112／186）和58．60％（109／186），差异无显著性（x^2=0．1，P〉0．05），男女患者阳性率依次为69．16％（74／107）和39.24％（31，79），前者明显高于后者（x^2=16．55，P〈0．01）。30岁以下、30岁～、40岁～、50岁～患者Hp—L型阳性率分别为33.33％（4／12）、41．38％（12／29）、52．73％（29，55）、66．67％（60，90），差异显著（x^2=9．39，P〈0．05）。Hp—L型阳性率在肠型胃癌患者中为75．42％（89／118），明显高于弥漫型患者为23．53％（x^2=47．26，P〈0．01）；胃窦部胃癌患者（64．71％）高于贲门部患者（41．79％）。结论胃癌患者Hp—L型感染率较高，且男性高于女性。Hp—L型检出率随年龄增长而增高，且主要作用于胃窦部，是引起肠型胃癌的重要致病因子之一。     

幽门螺杆菌粪便抗原用于幽门螺杆菌感染检验观察

目的分析幽门螺杆菌粪便抗原（HpSA）对幽门螺杆菌感染的诊断价值。方法收集304例患者粪便标本,运用ELISA法定性检测HpSA,同时对照用快速尿素酶试验、Gram染色镜检联合检测的胃黏膜标本。结果HpSA的敏感度为96．7％（240／249）,特异度为90．1％（44／49）,阳性预测值为96．4％（240／249）,阴性预测值为80．0％（44／55）,准确率为93．4％（284／304）。结论粪便HpSA检测具有操作简便、省时等特点,是较理想的非侵人性的Hp诊断方法。     

胶体金技术诊断幽门螺杆菌感染分析

目的:探讨胶体会技术对幽门螺杆菌(HP)分型诊断的价值.方法:应用胶体金技术检测86例消化性溃疡患者和22例无症状健康志愿者血清中的HP空泡毒索(VacA)、细胞毒素(CagA)和尿素酶(Ureg8)等HP抗体.结果:慢性胃炎组、消化性溃疡组、胃癌组的HP型阳性率与对照组比较差异有统计学意义.慢性胃炎组HPⅡ型阳性率与对照组比较差异无统计学意义,随着病变恶性严重程度的增加,CagA,vacA的表达呈上升趋势,尤其是VacA的表达.结论:胶体金技术可应用于对HP感染分型诊断,为临床治疗及判断预后提供一定依据.     

不同方法治疗幽门螺杆菌相关性胃溃疡的效果分析

目的 探讨三联疗法治疗幽门螺杆菌（Hp）相关性胃溃疡的临床效果.方法 选取2012年1月～2013年1月在本院门诊就诊的Hp感染相关性胃溃疡患者125例为研究对象,随机将其分为观察组63例和对照组62例,观察组应用三联疗法治疗,对照组应用奥美拉唑治疗,两组患者疗程均为4周,观察两组患者的临床治疗效果及症状改善情况.结果 观察组临床总有效率为92.06％,对照组临床总有效率为75.80％,两组差异有统计学意义（P＜0.05）.观察组腹胀、嗳气、上腹疼痛、反酸缓解时间显著少于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 应用三联疗法治疗Hp感染相关性胃溃疡的临床效果显著,能在较短时间内缓解患者的临床症状,安全有效,值得临床应用.     

老年人胃黄色瘤与幽门螺杆菌感染的相关性分析

目的 了解老年慢性胃炎患者黄色瘤与幽门螺杆菌(Hp)感染之间的相关关系.方法 对2010年1月至2011年12月在该院接受胃镜检查的60岁以上的慢性胃炎患者499例根据病理结果分为黄色瘤组186例和非黄色瘤组313例,分别观察两组患者胃黏膜Hp感染、中性粒细胞浸润、腺体萎缩、淋巴滤泡等病理表现.结果 黄色瘤组与非黄色瘤组比较,Hp感染率(52.7％、37.3％)、中性粒细胞浸润率(35.5％、24.0％)、腺体萎缩率(36.6％、3.5％)均明显升高(x210.677、7.641、95.606,P＜0.01);两组淋巴滤泡检出率(21.0％、20.8％)比较,差异无统计学意义(x2=0.003,P=0.957).Hp 感染者中性粒细胞浸润(45.8％)、淋巴滤泡检出率(42.6％)均高于Hp阴性者(14.8％、4.2％),差异均有统计学意义(P=0.000).结论 胃黄色瘤与Hp感染、中性粒细胞浸润、腺体萎缩相关,淋巴滤泡形成与Hp感染密切相关,应加强对老年慢性胃炎患者Hp的根治.     

阿司匹林与幽门螺杆菌对胃酸分泌的影响

目的:探讨阿司匹林与幽门螺杆菌对胃酸分泌的影响。方法:用醋酸诱导大鼠胃溃疡,然后分为A组(生理盐水+生理盐水)、B组(幽门螺杆菌+生理盐水)、C组(阿司匹林+生理盐水)、D组(幽门螺杆菌+阿司匹林)。观察了环氧化酶-1、环氧化酶-2和胃泌素在胃黏膜中的表达,测定了胃黏膜前列腺素E2的含量和胃液的pH。结果:阿司匹林通过抑制环氧化酶的活性进而减少前列腺素E2生成来增加胃酸分泌,阿司匹林也通过增加胃泌素来增加胃酸分泌。幽门螺杆菌通过增加胃泌素来增加胃酸分泌。结论:阿司匹林与幽门螺杆菌对胃酸分泌有协同作用。     

幽门螺旋杆菌根除对幽门螺旋杆菌相关性胃病患者血清COX-2影响

目的 探讨幽门螺旋杆菌(Hp)根除对幽门螺旋杆菌相关性胃病患者血清COX-2影响.方法 将2014年7月至2016年1月本医院收治的310例Hp相关性胃病患者按照病理学诊断结果分为胃溃疡组117例、十二指肠溃疡组96例和慢性萎缩性胃炎组97例,另选择同期在医院体检的健康人群60例作为对照组,所有感染Hp患者均行标准四联疗法,记录胃病患者Hp根除率;分别抽取各组受试对象肘静脉血,采用酶联免疫吸附试验检测四组血清环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)水平.结果 310例胃病患者Hp根除273例,总根除成功率88.1％ (273/310);胃溃疡组、十二指肠溃疡组Hp根除成功率比较差异无统计学意义(x 2=2.375,P＞0.05),胃溃疡组、十二指肠溃疡组Hp根除成功率显著高于慢性萎缩性胃炎组(x2=3.996、9.162,P＜0.05).胃溃疡组、十二指肠溃疡组、慢性萎缩性胃炎组血清COX-2显著高于对照组(P＜0.05);胃溃疡组、十二指肠溃疡组血清COX-2又显著高于慢性萎缩性胃炎组(P＜0.05),胃溃疡组、十二指肠溃疡组两组间COX-2水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).Hp根除成功的胃溃疡组、十二指肠溃疡组、慢性萎缩性胃炎组患者治疗后血清COX-2显著降低,与治疗前比较差异具有统计学意义(P＜0.05);Hp根除失败的胃溃疡组、十二指肠溃疡组、慢性萎缩性胃炎组患者治疗前后血清COX-2比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 Hp相关性胃病患者在成功根除Hp后,血清COX-2会显著降低,血清COX-2可以作为Hp根除疗效评价指标之一.     

Clarithromycin for Helicobacter pylori infection

Helicobacter pylori, a Gram-negative organism that survives in the deep mucus layer and attaches to the gastric surface cells, is estimated to be present in up to one-half of the US population. Chronic H. pylori infection causes chronic gastritis, peptic ulcer diseases and even gastric cancer. Cure of the infection leads to healing of gastric inflammation, prevention of development of peptic ulcer, as well as accelerated healing of peptic ulcers, and prevention of ulcer recurrence. Treatment of H. pylori has undergone substantial evolution over the past decade. Despite the in vitro susceptibility, results from single or even dual drug therapy is typically unsatisfactory and the best therapy is yet to be defined. The best current therapies for H. pylori infection consist of a proton pump inhibitor (PPI) or ranitidine bismuth citrate and two antibiotics (triple therapies), or bismuth, tetracycline, metronidazole and a PPI (quadruple therapy). Clarithromycin is one of the most useful antimicrobials against H. pylori. It is an acid-stable macrolide with a broad spectrum of antibacterial activity, well absorbed with a wide tissue distribution and with mild side effects. Clarithromycin has a low minimum inhibitory concentration (MIC₅₀) for H. pylori and its effect is potentiated by acid inhibition. When combined with a PPI or ranitidine bismuth citrate and amoxicillin or metronidazole, eradication rates of more than 95% can be achieved with susceptible organisms. However, the prevalence of primary and acquired clarithromycin resistance, which is due to mutations within a conserved loop of 23S rRNA of H. pylori, is increasing. In practice, the presence of clarithromycin resistance usually implies reduced success when clarithromycin-containing regimes are used. There is a need for improved therapies for H. pylori where antibiotic resistance is less of a problem.