模拟载人飞船内微重力和噪声环境下大鼠耳蜗毛细胞的形态学变化

目的：观察模拟载人飞船中微重力和噪声环境下大鼠耳蜗毛细胞的形态学特点,探讨耳蜗三回（底回、中回和顶回）毛细胞的不同变化。方法： 选取32只雄性健康SD大鼠,随机分为空白组、失重组、噪声组和失重+噪声组4组,每组8只。失重组以持续尾吊法模拟微重力,噪声组以持续2周的（72±2） dB SPL的稳态噪声及之后的3次高达160 dB SPL的脉冲噪声模拟飞船内复合噪声环境,失重+噪声组同时给予模拟微重力和噪声环境,空白组不做任何处理,常规饲养2周。暴露后检测听性脑干反应（auditory brainstem response, ABR）阈值,处死大鼠即刻取耳蜗基底膜行免疫荧光及扫描电子显微镜（scanning electron microscope, SEM）观察。 结果： 给予模拟环境暴露后,各组大鼠ABR阈值升高,各实验组大鼠暴露前后ABR阈值差异均有统计学意义（P<0.05）。免疫荧光结果显示：失重组底回以内毛细胞缺失为主,中回可见毛细胞肿胀,顶回毛细胞杂乱不清。噪声组底回以外毛细胞缺失为主,多见于最外层毛细胞,中回毛细胞肿胀,顶回杂乱并有毛细胞的缺失。失重+噪声组底回核缺失较明显,主要存在最外层毛细胞,内毛细胞也存在较多缺失。中回和顶回缺失发生在最内层外毛细胞。电子显微镜观察发现失重组底回纤毛大片倒伏,偶有缺失,顶回和中回毛细胞纤毛无明显异常。噪声组底回纤毛大片倒伏伴缺失,顶回和中回均有缺失,其中顶回最为严重。失重+噪声组底回纤毛大片融合伴缺失,中回纤毛融合、倒伏并缺失,顶回内外毛细胞纤毛大量缺失。4组的损伤程度：失重+噪声组>噪声组>失重组>空白组;三回毛细胞损伤程度：底回>中回>顶回。 结论： 模拟载人飞船内微重力和噪声环境中暴露2周可致大鼠耳蜗形态学结构发生显著变化,尤以失重+噪声组变化最明显,三回毛细胞中以底回最重,顶回最轻。     

豚鼠冲击波负压暴露后耳蜗毛细胞扫描电镜和透射电镜观察

目的 探讨冲击波负压(BUP)暴露后豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化特点.方法 将豚鼠暴露于不同强度的实验性BUP 1次,8h～7d后应用扫描电镜和透射电镜技术观察耳蜗基底膜毛细胞的超微结构变化.结果 负压峰值为-22.4 ～-63.3kPa的BUP暴露后,豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构变化发生了不同程度的病理性改变,主要表现为第2、3排外毛细胞散在性缺失,甚至节段性外毛细胞缺失、纤毛融合甚至巨纤毛形成及胞浆溢出,纤毛内微丝解聚、线粒体肿胀、溶酶体数量增多和胞浆内空泡形成.结论 不同强度的BUP暴露可导致豚鼠耳蜗毛细胞的超微结构病变,且BUP强度越高,病变越重.     

丁咯地尔对噪声性听力损伤影响的实验观察

目的观察丁咯地尔对豚鼠噪声性听力损伤的影响。方法将13只豚鼠随机分为丁咯地尔组(5只),噪声损伤组(5只),正常对照组(3只)。采用105 dB SPL(sound presure level,声压级)白噪声刺激,连续5 d(5 h/d)制造噪声性耳聋动物模型,其中丁咯地尔组在每天噪声刺激前30 min给予丁咯地尔(200 mg/kg)灌胃。豚鼠在给噪前后进行听性脑干诱发电位(ABR)和畸变产物耳声发射(DPOAE)检测,给噪后采用形态学方法观察耳蜗外毛细胞受损情况。结果噪声损伤组及丁咯地尔组豚鼠噪声刺激前后ABR阈值分别为(17.50±3.80)dB SPL、(16.00±3.94)dB SPL和(67.08±6.20)dB SPL(、49.00±4.59)dB SPL,两组豚鼠经噪声刺激后阈值的升高与正常组相比,差异有统计学意义(均P<0.01);DPOAE幅值的下降也具有统计学意义(均P<0.05)。而丁咯地尔组豚鼠ABR阈值的升高和DPOAE幅值的下降与噪声损伤组相比,差异也具有统计学意义(均P<0.05)。耳蜗基底膜铺片观察到凋亡、坏死和缺失的受损外毛细胞,计算其受损率发现,丁咯地尔组豚鼠外毛细胞受损率明显低于噪声损伤组(P<0.01)。结论预防性使用丁咯地尔可以减轻噪声对豚鼠耳蜗的损害,对噪声引起的听力损伤可能有一定的保护作用。     

强化铁营养防治爆震性聋的初步研究

目的：探讨应用强化铁营养防治爆震性聋的可能性。方法：30只体重200g左右的健康Wistar大鼠被随机分为A、B两组，每组15只，A组喂标准饲料，B组喂强化铁饲料。将A、B两组同时暴露于172dBSPL强脉冲噪声下，共30次，分别测定爆震前后大鼠的听性脑干反应（ABR）阈值，扫描电镜观察耳蜗超微结构变化。结果：爆震后3h、3d、11d和21d，B组大鼠ABR阈值显著小于A组。扫描电镜观察到爆震后3h，A组大鼠外毛细胞静纤毛排裂扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失，B组大鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散；3d后A组大鼠外毛细胞静纤毛病变无明显恢复，B组大鼠外毛细胞静纤毛病变已不明显；11d后A组病变减轻，B组病变基本恢复；21d后A组病变明显减轻，但有部分病变未完全恢复，B组病变均完全恢复。结论 强化铁营养对爆震性听力损伤有明显的防治作用。     

脉冲噪声暴露后大鼠耳蜗外毛细胞死亡的启动方式

目的:观察强脉冲噪声暴露后大鼠耳蜗毛细胞死亡的启动方式。方法:将大鼠暴露于平均压力峰值级为154 dB SPL的脉冲噪声100发,分别于噪声暴露后10 m in,3 h,6 h解剖取耳蜗,应用细胞核DNA染料碘化丙锭(prop id ium lod ide,PI)标记耳蜗基底膜细胞,荧光显微镜下观察毛细胞核形态学变化。结果:强脉冲噪声暴露后10 m in可见到核固缩的外毛细胞,3 h出现少量核肿胀和核缺失外毛细胞,6 h可见到外毛细胞核大片段缺失。结论:毛细胞凋亡发生于脉冲噪声暴露后即刻,坏死出现于凋亡之后。细胞凋亡过程迅速,噪声暴露后6 h耳蜗基底膜外毛细胞核的缺失主要源于凋亡细胞。     

噪声对豚鼠耳蜗外淋巴液中氨基酸浓度的影响

目的:观察噪声暴露于对耳蜗外淋巴液中氨基酸浓度的影响.方法:安静组和噪声组豚鼠分别暴露于安静环境(40 dB SPL)和白噪声(115 dB SPL) 2 h,抽取两组动物耳蜗外淋巴液,高效液相色谱(HPLC)荧光分光检测分析氨基酸浓度.结果:安静组动物耳蜗外淋巴液中含有14种氨基酸,与正常哺乳动物脑脊液氨基酸组成和含量十分接近.耳蜗外淋巴液中谷氨酸含量安静组为(6.6±0.2) μmol/L,而噪声组为(10.3±1.1) μmol/L, 后者比前者高55％,P<0.01.结论:噪声暴露可使耳蜗外淋巴中谷氨酸浓度明显提高, 推测这种提高可能和噪声导致毛细胞过度释放谷氨酸和谷氨酸转运体不能正常运转有关.     

强化铁营养对抗稳定噪声致聋作用的实验研究

目的：探讨应用强化铁营养对抗稳态噪声致聋作用的可能性。方法：４０只健康幼龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠按随机化原则分为两组，每组２０只：Ａ组喂标准饲料；Ｂ组喂强铁化饲料。将Ａ、Ｂ两组大鼠同时暴露于１１０ｄＢＳＰＬ２０～１００００Ｈｚ稳态白噪声，持续４０ｍｉｎ。根据暴露前后听性脑干反应（ＡＢＲ）阈差值判定听力阈移，扫描电镜及光镜下观察耳蜗显微结构和听毛细胞表面超微结构变化。结果：暴露后２ｈ，３ｄ和１１ｄ的Ｂ组听力阈移值显著小于Ａ组；暴露后２１ｄ，虽然两组听力阈移均数值的差异无显著意义，但Ａ组ＡＢＲ阈值均数仍显著大于该组大鼠噪声暴露前平均听阈。扫描电镜下观察，暴露后２ｈ的Ａ组大鼠外毛细胞静纤毛出现严重扭曲、倒伏、排列紊乱等病理变化，３ｄ后，上述病变明显减轻，２１ｄ后，部分听毛细胞静纤毛排列紊乱仍未能完全恢复。在Ｂ组大鼠，外毛细胞静纤毛暴露２ｈ后有轻度扭曲及排列紊乱，３ｄ后这些病变基本恢复，２１ｄ后外毛细胞静纤毛形态完全恢复正常。结论：强化铁营养具有对抗稳态噪声听损伤作用，其机制可能与其对含铁酶类活性的增强作用有关。     

天鼓冲剂对噪声性听损伤防治作用的实验研究

目的:观察补肾活血中药天鼓冲剂对豚鼠噪声性听损伤的防治作用.方法:将豚鼠随机分为正常组、模型组、预防组和治疗组,后三组豚鼠暴露在4KHz、110dB SPL的稳态白噪声中6h×6d,预防组和治疗组分别于噪声暴露前7d和噪声暴露结束后给予天鼓冲剂灌胃,模型组与预防组同期灌胃相同剂量的生理盐水,正常组不予给药.以听觉脑干诱发电位(ABR)观察各组动物反应阈、波潜伏期及波间期的变化,耳蜗基底膜铺片毛细胞计数比较各组动物毛细胞损伤率,扫描电镜观察各组动物耳蜗形态学的变化.结果:与模型组和治疗组比较,预防组豚鼠的ABR阈值、毛细胞损伤率均明显降低(P＜0.05),波潜伏期显著缩短(P＜0.01),电镜下毛细胞受损程度较轻;与模型组比较,治疗组豚鼠的ABR阈值明显降低(P＜0.05),波潜伏期显著缩短(P＜0.01),但毛细胞损伤率无明显差异(P＞0.05),电镜下两组毛细胞损伤程度均较重.结论:天鼓冲剂对噪声性听力损伤具有显著的预防作用,在改善听功能方面具有一定的治疗作用,预防效果明显优于治疗效果.     

不同的条件声暴露对豚鼠耳蜗结构保护作用的实验研究

目的 观察条件声暴露对耳蜗结构损伤是否具有保护作用.方法 将听力正常的31只杂色雄性豚鼠(250～400g)按噪声暴露的时程不同随机分为四组,即条件声暴露1天组(n=8),条件声暴露7天组(n=8),条件声暴露14天组(n=7)及未经条件声暴露的对照组(n=8).条件声为中心频率为1 kHz、强度为95 dBSPL的倍频程噪声,每天暴露8小时.条件声暴露结束5天后再将豚鼠暴露于相同频谱强度为115 dBSPL的强噪声中连续暴露48小时.强噪声暴露后第14天将动物处死,进行耳蜗铺片,观察各组动物耳蜗1 kHz感音部位第3回柯替器受损情况,并进行外毛细胞记数.结果耳蜗铺片观察发现,1 kHz噪声损伤的主要部位为耳蜗第3回中下部,距圆窗约14 mm～18 mm处.外毛细胞(outer hair cell OHC)受损明显,三排OHC的受损程度以第三排最重,第二排次之,第一排最轻.内毛细胞(inner hair cell IHC)很少受损.四组动物中,以7天组外毛细胞丢失率为最少,为21.7%,明显低于对照组的32.2%(P＜0.01).其次为1天组,为29.5%,与对照组相比无明显差异(P＞0.05).而经过14 天条件声暴露的动物,其OHC平均丢失率为34.4%,反而略高于对照组.结论适当的条件声暴露对噪声引起的耳蜗结构损伤有一定的保护作用.     

天麻素对噪声性耳聋听觉脑干诱发电位及耳蜗毛细胞的影响

目的 观察天麻素对豚鼠噪声性耳聋听觉脑干诱发电位(ABR)及耳蜗外毛细胞的影响,同时探讨预防及治疗的作用机制.方法 雄性纯白豚鼠共50只,随机分5组:正常组、预防实验组及预防对照组,治疗实验组及治疗对照组.将除正常组以外4组动物置于隔音室,暴露于105dB SPL稳态白噪声,噪声持续时间4h/d并且连续7天.预防实验组暴露噪声前3天开始腹腔注射天麻素100mg/kg,连续每日注射至噪声结束当天,预防对照组同条件下使用注射用水;治疗实验组于噪声结束后次日给予天麻素100mg/kg腹腔注射,每日注射连续10天,治疗对照组同条件下予注射用水.记录ABR听阈值变化;采用耳蜗基膜铺片技术观察耳蜗毛细胞形态学改变同时计算外毛细胞损伤率;观察外毛细胞琥珀酸脱氢酶蓝染沉淀的活性改变.结果 预防实验组ABR听阈值和耳蜗外毛细胞缺失率均低于预防对照组(P＜0.05);预防实验组耳蜗外毛细胞琥珀酸脱氢酶蓝染细胞明显优于预防对照组.治疗实验组与治疗对照组各项观察指标均无统计学差异.结论 进一步证实了天麻提取液天麻素对噪声性耳聋的预防作用,但其治疗作用在本实验不明显.天麻素能保护细胞膜稳定并增加耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶活性,从而增加细胞能量供应改善耳蜗微循环.     

热休克蛋白70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响

目的探讨热休克蛋白(heat shock protein,HSP)70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响。方法将经白噪声预刺激(100 dB SPL,45 min)诱导耳蜗产生HSP70的豚鼠与无预刺激的正常豚鼠同时暴露于强噪声(125 dB SPL,90 min)中,观察强噪声刺激后不同时间的听性脑干反应(ABR)阈值。结果100 dB SPL的白噪声能诱导耳蜗HSP70的表达。强刺激后12 h,两组间ABR阈值无显著差异(P>0.05);强刺激后60 和108 h,预刺激组的ABR阈值均低于无预刺激组(P<0.01)。在预刺激组内,108 h ABR阈值低于60 h ABR阈值(P<0.05),而在无预刺激组内,108和60 h ABR阈值无显著差异(P>0.05)。结论经预刺激诱导耳蜗产生的HSP70对豚鼠耳蜗听功能具有保护作用。     

热休克蛋白70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of evoked heat shock protein 70 (HSP70) expression on the hearing function of the cochlea in guinea pigs. METHODS: Guinea pigs were divided into pre-exposure group (pre-treated with white noise exposure at 100 dB SPL for 45 min) and none pre-exposure group. Auditory brainstem response (ABR) thresholds were recorded at 12, 60 and 108 h after the animals in both groups were exposed to loud white noise (125 dB SPL, 90 min). RESULTS: HSP70 expression was evoked by pre-treatment with white noise (100 dB SPL, 45 min). There was no significant difference of ABR thresholds between the 2 groups (P>0.05) at 12 h after exposure to loud noise, while ABR thresholds became lower in pre-exposure group than in none pre-exposure group (P<0.01) at both 60 and 108 h. In the pre-exposure group, ABR thresholds at 108 h were significantly lower than that measured at 60 h (P<0.05), but which was not the case in none pre-exposure group. CONCLUSION: HSP70 expression induced by pre-exposure to noise protects the hearing function of the cochlea in guinea pigs.     

Prophylactic effect of Ca2+- deficient artificial perilymph perfusion on noise-induced hearing loss

Theioncompositionofcochlearendolymphissimilartointracellularfluid PreviousstudiesshowedthatCa2 + inendolymphplaysanimportantroleinhearing 1　NoiseexposureinducesincreasedCa2 + concentrationalongwithlinearABRthresholdshifts 2 　TheincreaseinCa2 +concentrationmaybecausedbydifferentmechanismssuchasdamagetothestriavascularis (SV) ,calciuminthetectorialmembrane (TM)orstereociliaofhaircellspossiblybeingreleasedintothelymphasfreeCa2 + afterloudnoise exposureandCa2 + diffusingfromperilymphintoint…     

次声暴露对豚鼠听神经动作电位的影响

目的：系统观察在125 dB SPL（sound pressure level, SPL）次声暴露下豚鼠听神经动作电位［action potential N₁, AP（N₁）］的潜伏期及听阈的变化。方法：采用面神经管长期置入电极引导记录的方法记录AP（N₁）,并将次声暴露后豚鼠的听阈及潜伏期与听力正常豚鼠进行对比观察。 结果：125 dB SPL次声暴露可引起听阈不同程度的升高,一般在6～9 d内听阈可完全恢复;潜伏期的恢复要早于听阈的恢复。 结论：SPL为125 dB的次声可造成耳蜗功能的暂时性阈移。     

强噪声对听觉中潜伏期电反应的即时增大效应

本实验将豚鼠暴露于不同强度的强噪声中30min后,立即(5min)测MLR的P_0波幅。结果在95dB(SPL)强噪声暴露后,1kHz短纯音引起的波幅明显增大(P<0.05)。在115dB强噪声暴露后,1kHz短纯音引起的幅度立即增大更加显著(P<0.01);用更强的125dB强噪声暴露后,短声及短纯音引起的波幅均有减小趋势,但只4kHz差异显著(P相似文献   

强噪声引起听觉脑干慢波电位的即时性增大效应

目的：观察强噪声对听觉脑干慢波电位波幅的即时性增大效应。方法：将３６只豚鼠分３组，分别暴露在９５、１１５、１２５ｄＢＳＰＬ不同声强的噪声中，３０ｍｉｎ后，立即检测听觉脑干慢波电位（ＳＷ－ＢＡＥＰ）正相波的波幅。结果：在９５ｄＢＳＰＬ组，可见１ｋＨｚ短纯音诱发的ＳＷ－ＢＡＥＰ波幅明显增大（Ｐ＜０．０５），在１１５ｄＢＳＰＬ组，增大更加明显（Ｐ＜０．０１）；在１２５ｄＢＳＰＬ组，短声及１、４ｋＨｚ短纯音诱发的ＳＷ－ＢＡＥＰ波幅均有减小趋势，但只４ｋＨｚ差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论：表明只有在适当强度的噪声暴露后，才能引起ＳＷ－ＢＡＥＰ正相波的波幅即时性增大，并具有频率特性；即时性增大效应的出现，常预示出现暂时性阈移（ＴＴＳ），因而可用于永久性阈移（ＰＴＳ）的早期预测。     

电针对噪声所致豚鼠听皮层中潜伏期诱发电位阈移的影响

目的：观察电针对噪声暴露所致豚鼠听皮层中潜伏期诱发电位（MLR）阈移影响。方法：实验动物分为对照组、电针耳区穴组和电针前肢穴组,对照组只给噪声,后两组旋与噪声的同时分别电针耳区们和前肢穴,噪声暴露前及停止后不同时间记录MLR的阈值,结果：105dBSPL噪声暴露10min可致豚鼠MLR的暂时性阈移,电针耳区穴组和电针前肢穴组噪声暴露后不同时间的MLR阈移明显小于对照组（P＜0．01或P＜0．05）,MLR阈移恢复时间比对照缩短,结论：电针耳区穴和前肢穴均能关轻噪声暴露所致的听力损伤,并促进听力的恢复。     

Noise-induced nitrotyrosine increase and outer hair cell death in the guinea pig cochleaWeiju Hana, *, Xiaorui Shib, and Alfred Nuttallb,c

中文 目的：观察噪声损伤引起的豚鼠耳蜗内硝基酪氨酸变化,探讨耳蜗外毛细胞的死亡机制。方法：豚鼠随机分为噪声暴露组、SIN1耳蜗灌流组和对照组（每组各10只）,噪声暴露组动物暴露于120dBSPL的宽带噪声环境中每天4小时,连续2天;耳蜗灌流组向动物耳蜗内灌流的5 mg/ml外源性氮自由基供体SIN1 30分钟。豚鼠耳蜗分离解剖后,用碘化丙啶（PI）染色细胞核,以便观察噪声损伤前后细胞核形态变化,利用免疫荧光组织化学方法检测耳蜗外毛细胞及耳蜗外侧壁内硝基酪氨酸的分布及噪声损伤后的变化;按表面制备法行耳蜗铺片,激光共聚焦显微镜下观察耳蜗外毛细胞及耳蜗外侧壁的荧光信号变化。结果:(1) 噪声暴露及耳蜗外淋巴灌流SIN1后均发生耳蜗外毛细胞凋亡和坏死。（2）在正常情况下,耳蜗外毛细胞内有少量硝基酪氨酸分布,在暴露于上述噪声后,耳蜗外毛细胞内的硝基酪氨酸显著增加;（3）发生凋亡的耳蜗外毛细胞的细胞核及其周围硝基酪氨酸显著增加;（4）在正常情况下,耳蜗外侧壁有少量硝基酪氨酸分布,噪声暴露后,耳蜗外侧壁血管纹内的硝基酪氨酸显著增加。结论：本研究结果显示噪声刺激导致的耳蜗内硝基酪氨酸增加与耳蜗外毛细胞死亡有关,提示氮自由基参与了噪声性听力障碍的耳蜗病理损伤。