被动血凝试验与酶联免疫吸附试验和蛋白印迹法检测1型人类免疫缺陷症病毒抗体的比较

目前用于诊断1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染的血清学检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白印迹法(WB)和放射免疫沉淀测定(RIPA).这些检测方法大多具有敏感性高之优点,但也存在费用昂贵、测定费时、并需要一定的设备等缺点.本文所述的被动血凝试验(PHA)可以克服以上缺点.     

利用HIV合成肽试验避免蛋白印迹法中的可疑结果

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染常用血清学方法进行诊断。经ELISA筛检出的阳性结果须用蛋白印迹法(WB)确证。由于WB结果的判读常会遇到困难,因此作者提出以合成肽试验(SPA)替代WB来证实ELISA阳性结果。 8073份高危人群的样本,经几种病毒裂解物或重组HIV-1加HIV-2ELISA试验检测,有1209份阳性。再用HIV-1WB及应用     

HIV的病毒学测定在临床试验中的应用

本文回顾了在艾滋病临床试验组(ACTG)指导下50多家美国病毒学实验室在使1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)的病毒学检测方法规范化方面的共同努力,包括对这些测定的概述、试验的标本和要求以及在诸如诊断和药效检验方面的应用。     

检测各亚型HIV感染的快速诊断试验的可靠性研究

本文作者比较了在一些发展中国家已经广泛使用的人类免疫缺陷病毒 ( HIV)诊断试验和第三代酶免疫法 ( EIA)诊断试验 (被视为金标准 )之间的差异。考核的诊断试验包括1项 ELISA、6项快速筛查试验和 1项确证试验。所有试验同时检测以下血清样品 ,( 1 )代表 HIV各基因型的 79份人血清样品 ,其中有 HIV- 1 A、B、C、D、F、H、O亚型的样品59份 ,HIV- 2阳性血清样品 1 2份 ,HIV- 1和HIV- 2双重阳性样品 2份 ,基因分型和蛋白印迹法结果提示不确定但后来证实是阳转血清的样品 6份。检测结果表明除 1项试验存在漏检外 ,其他试验都可以…     

美国FDA批准HIV-2抗体试验

美国食品与药物管理局(FDA)首次批准检测2型人类免疫缺陷症病毒(HIV-2)抗体的试剂盒.该试剂盒是由美国遗传系统公司研制,可辅助诊断潜在的HIV-2感染.由于目前发现的HIV-2感染病例数较少,故FDA还未要求将该试剂盒用于血库.另外,由于HIV-1与HIV-2相似,约50～90%带HIV-2抗体的样本在已获准的HIV-1试验中呈阳性反应,大多数(近60%)HIV-1抗体阳性的样本在HIV-     

使用人单克隆抗体的竞争性ELISA检测抗1型人类免疫缺陷症病毒抗体

诊断工型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染,通常是根据抗病毒抗体的出现。使用最广泛的方法是ELISA。第一代检测IgG抗体的ELISA是间接法,该法假阳性反应率较高。竞争性测定法的建立可减少假性反应的发生率,此外还可检测IgG和IgM抗体,因此有可能比间接ELISA检出更为早期的抗体应答。本文作者采用人单克隆抗体(McAb)及由大肠杆菌产生的跨膜糖蛋白gp41片段,成功地建立了一种新的检测HIV-1抗体的竞争性ELISA。人McAb直接针对gp41高度保守区的一个表位,业已证明几乎所有HIV-1     

在人类免疫缺陷症病毒感染危险性低的健康成人中蛋白印迹试验可疑结果的出现率

不少研究发现,在未感染1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)者的样品中出现蛋白印迹试验(WB)可疑结果。本文作者用酶免疫试验(EIA)、WB、HIV-1培养法、HTLV-Ⅲ抗原中和试验等对168名18～55岁健康志愿者进行检测。结果如下:用EIA和WB检测,所有志愿者的HIV-1抗体均未出现阳性,其中1人经EIA检测p24抗原阳性,但该结果未被HTLV-Ⅲ     

用加热震摇细胞共同培养法快速检测临床标本中HIV-1病毒

虽然常规通过血清抗体的测定来发现HIV-1携带者,但在HIV感染早期,母亲感染的新生儿血清抗体阳转之前等时期必需靠检测病人标本中的HIV-1病毒进行诊断。HIV-1病毒的分离检测步骤包括将病人的外周血淋巴细胞(PBL)与用PHA刺激的未感染者PBL体外混合共同培养,一般需3～4周,比较费时。作者曾用此常规方法对69例血清     

对36种检测HIV抗体的商品试验的比较评价

作者总结了1988～1990年间对测定1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)和/或HIV-2抗体的试验进行评价的结果。共用了537份血清,其中65%是非洲人血清,26%为欧洲人血清,9%是南美洲人血清。HIV-1阳性率是39.1%,HIV-2是15.7%,36种试剂盒中有20种是ELISA,11种简单试验,4种辅助性试验和1种鉴别试验。这些试验均按说明     

白藜芦醇衍生物体外抗HIV-1活性的初步研究

目的:检测白藜芦醇衍生物IFB-1和IFB-9的体外抗HIV-1活性,并对其进行抗HIV-1作用机制的初步研究。方法:采用MTT比色法检测白藜芦醇衍生物IFB-1和IFB-9的细胞毒性;细胞病变法检测化合物对HIV-1急性感染的抑制活性;采用HIV-1 p24抗原ELISA方法检测临床分离株HIV-1KM018在PBMC中复制的抑制实验;采用细胞病变法检测HIV-1感染和未感染细胞之间的融合;采用HIV-1重组逆转录酶活性抑制实验,HIV-1重组蛋白酶活性抑制实验以及直接杀病毒实验来研究化合物体外抗HIV-1机制。结果:白藜芦醇衍生物IFB-1和IFB-9对HIV-1IIIB诱导的合胞体形成抑制的选择指数分别为16.16和230.27;IFB-1和IFB-9均能抑制p24抗原的产生,EC50s分别为14.51和0.23μg.mL-1,也能抑制HIV-1KM018在PBMC中的复制。IFB-1和IFB-9对感染细胞与未感染细胞融合有较好的抑制,但对病毒逆转录酶和蛋白酶体外活性没有抑制作用,也不能直接杀死HIV-1病毒。结论:白藜芦醇衍生物IFB-1和IFB-9具有抗HIV-1活性,其作用机制可能为抑制病毒进入细胞。     

一种检测抗-HIV-1和抗-HIV-2的微量ELISA系统

除1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)外,HIV-2也是引起艾滋病的病因。故抗-HIV的筛检试验对HIV-1和HIV-2两种抗体均应充分敏感。本文介绍一种夹心型的免疫试验,采用HIV-1病毒裂解物和HIV-2包膜(env)合成肽联合作固相抗原。HIV-2 env合成肽经液相和固相技术结合制得,通过硅胶层析纯度达95%以上,与牛血清白蛋白     

浓缩HIV-1感染性颗粒的改进方法[英]

目前，大家正致力于提高Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)检测系统的敏感性，浓缩HIV感染者样本中的病毒是一种方法。聚乙二醇(PEG)沉淀是广泛用于各类病毒的有效方法，作者重新评估了用PEG浓缩HIV-1的方法并优化了低滴度HIV的浓缩方法。     

浓缩HIV-1感染性颗粒的改进方法

目前,大家正致力于提高1型人类免疫缺陷病毒( HIV- 1 )检测系统的敏感性,浓缩HIV感染者样本中的病毒是一种方法。聚乙二醇( PEG)沉淀是广泛用于各类病毒的有效方法,作者重新评估了用PEG浓缩HIV- 1的方法并优化了低滴度HIV的浓缩方法。　　作者用HIV- 1 ( LAV- 1 BRU株)感染Molt- 4细胞系,收获HIV- 1。取分子量为1 0 0 0、1 50 0、2 0 0 0、4 0 0 0、6 0 0 0及2 0 0 0 0的PEG加0 .9% Na Cl溶液分别配制浓度为2 %～30 % ( w/v)的PEG溶液。将50 0 μlHIV- 1病毒悬液与等体积PEG溶液混合,在4℃培育1、3、1 6、1 8及2 4小时,并…     

对HIV-1/2双阳性血清样本的判断

世界卫生组织(WHO)对艾滋病的检测策略中包括测定1和2型人类免疫缺陷症病毒抗体的联合HIV-1/2试验(ELISA和简单/快速试验)。由于抗体的交叉反应性,这种联     

应用细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒药物

目的探讨采用已建立的细胞模型初筛抗人免疫缺陷病毒(HIV)药物的可靠性。方法以齐多夫定为阳性对照,使用HIV-1急性感染系统(MT-4/HIV-1ⅢB)、HIV-1耐药性毒株系统(MT-4/3TC耐药株)、HIV-1慢性感染系统(H9/HIV-1ⅢB)和HIV-1临床分离株感染系统(PBMC/HIV-1GX02),分别测定药物的细胞毒性和抗HIV-1活性,计算药物的半数细胞毒性浓度(TC50)、半抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI)。同时对4种药物DPC961、牛膝多糖、艾乃吉1号和痰热清注射液进行了抗HIV活性检测。结果测定了齐多夫定在4种细胞-病毒系统的TC50,IC50和TI与文献报道相近。DPC961在4种细胞/病毒培养系统的TI分别为979,5348,3912和2745;牛膝多糖分别为323,223,2777和173;艾乃吉1号仅在MT-4/HIV-1ⅢB模型上T1为2.6。结论使用本细胞模型通过检测药物的TC50,IC50及TI进行药物初筛是可靠的。药物DPC961、牛膝多糖和艾乃吉Ⅰ号具有不同程度的体外抗HIV-1活性,痰热清注射液未检测到抗HIV-1活性。     

HIV-1和2Ab Doublecheck~(TM)在临床的应用

获得性免疫缺陷综合征 (AIDS,艾滋病 )是一种后天性免疫下降的继发性疾病 ,由人类免疫缺陷病毒 HIV - 1和 2所引起的。 HIV- 1感染是全球性分布 ,而 HIV- 2感染主要是在西非洲 ,两者的生物学特性相似。自 1983年人类免疫缺陷病毒首次分离成功以来 ,抗 HIV抗体检测对控制HIV感染的传播、预防引起了重要的作用。目前 HIV抗体的血清学检测方法一般分为两步进行 ,即一般试验和确证试验。笔者作为援喀麦隆医疗队成员 ,1998年 1月 - 12月在姆巴尔马尤医院 ,应用 HIV- 1和 2 Ab Doublecheck TM方法 ,对年龄在 11岁～ 62岁疑为艾滋病的 …     

酶联免疫测定试验检测1型人类免疫缺陷症病毒包膜糖蛋白120

检测细胞培养液和体液中的病毒蛋白有助于诊断病毒感染,并了解人类、动物模型和细胞培养中病毒感染的发生机理。人类免疫缺陷症病毒(HIV)的逆转录酶和p24gag蛋白的检测在一些实验室中已进入常规使用。然而,HIV-1包膜糖蛋白,gp160-sp120-gp41复合物是引起感染的关键的病毒成份。在感染与未感染细胞之间,gp120与CD4结合是感染乃至融合的关键。本文作者报告采用重组可溶性CD4(rsCD4)作固相捕获系统的ELISA法,检测细胞培养液或体液中的HIVgp120,其检出的微量     

用CpG ODN使有Th2型免疫背景的小鼠对缺失gp120的HIV-1灭活病毒产生Th1型免疫应答

作者用血吸虫感染预先存在 Th2型免疫背景的小鼠 ,证实共同使用含有胞苷酸鸟苷 ( Cp G)免疫刺激序列的寡脱氧核苷酸( ODN)和缺失 gp1 2 0的 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )灭活病毒颗粒 ( HIV- 1免疫原 ) ,能诱生强的 Th1型抗 - HIV- 1免疫应答 ,并克服 Th2型应答的倾向。　　试验分两组 ,第一组 :所有小鼠感染曼氏血吸虫尾蚴后 5周 ,经皮内注射 IFA或含0 .1、1或 1 0 μg HIV- 1抗原的 IFA(不加或加2 5μg或 50 μg ODN1 82 6 ) ,每组 5只小鼠。 2周后 ,用相同方法加强免疫一次 ;再过 2周 ,杀死小鼠 ,检测寄生虫感染、细胞因…     

Roche推出cobas HIV-1和cobas HCV检测试剂盒

近日,罗氏(Roche)宣布在所有承认CE标识的市场推出应用于cobas 6800/8800系统的cobas HIV-1和cobas HCV检测试剂盒。这些试剂盒将为临床医师提供可依赖的高性能用于管理人类免疫缺陷病毒(HIV-1)或丙型肝炎病毒(HCV)感染者的临床治疗。这些试剂盒的上市,将扩展cobas 6800/8800系统菜单。     

对天然产物抑制HIV-1逆转录酶的评价

对HIV-1逆转录酶的抑制是目前被认为是预防爱滋病有益的新进展。天然产物已广泛用作HIV-1逆转录酶(HIV-1RT)的抑制剂。作者开发的在病毒粒子中检测HIV-1的方法,可作为天然产物对HIV-1RT的抑制作用的筛选方法,作者筛选了156种纯天然产物。鸟成髓细咆血症病毒逆转录酶的抑制剂苯并菲啶生物碱氯化崖椒宁(fagarnoninechloride)和氯化两面针碱(nitidine chloride)对HIV-1RT具有显著活性,因此以这两个化合物作为筛选时的阳性对照。作者发现非洲汉防己碱(columbamine)和另一些原小檗碱异奎宁碱(如o-methyl psychotrine sulfate和iri-doid fulvo plumierin)具有抑制作用。而一些吲哚类等其它类型的生物碱却无活性。作者筛