快速老化小鼠SAMP8研究进展

快速老化小鼠SAMP8(senescence-accelerated mouseprone/8)是一个从普通的遗传群AKR/J系小鼠中通过表型选择培育出的快速老化小鼠,表现为早期增龄性学习记忆缺陷,同时伴有Aβ淀粉样蛋白沉积,是目前公认的有效的研究阿尔采末病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。同属SAMR1表现为抗快速老化,具有正常的老化特性,常用作正常对照。目前SAMP8已被广泛应用于研究快速学习记忆缺陷的发病机制,以及评价抗衰老及改善学习记忆功能的药物等。     

快速老化小鼠SAMP10的老化特征及其研究进展

快速老化小鼠(senescence-accelerated mouse,SAM)是日本京都大学Takeda教授从AKR/J系小白鼠中通过表型选择培育出的快速老化模型。根据老化速度和病状特征,SAM鼠可以分为快速衰老的P系和抗快速老化的R系。快速老化小鼠SAMP10作为P系的一种,主要特征表现为与衰老相关的学习记忆障碍,具有β-淀粉样蛋白沉积、脑萎缩、神经DNA损伤、星形胶质细胞及小胶质细胞增生等病理变化,在行为学、神经递质以及分子水平方面均表现出一定的衰老变化,是目前较理想的研究阿尔采末病(AD)的动物模型。同龄对照组SAMR1具有正常的衰老特征,常用于SAMP10的正常对照。目前SAMP10是比较理想的用于研究学习记忆障碍的发病机制、评价抗衰老药物以及抗抑郁药的动物模型。     

何首乌饮对快速老化小鼠卵巢功能的影响

目的观察何首乌饮对快速老化小鼠卵巢功能的影响。方法 SAMP8小鼠分为模型组、阳性药维生素VE组、何首乌饮低、中、高剂量组,每组12只,另设SAMP1小鼠作为对照组。何首乌饮组灌胃给予10、20、40 g/kg何首乌饮,连续8周。化学发光免疫法测定血清中雌二醇(E2)、黄体生长激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平;酶联免疫吸附法测定血清中抑制素B(INHB)、激活素A(ACTA)、卵泡抑素(FS)水平;计算卵巢指数;荧光定量PCR法测定卵巢组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果与模型组比较,何首乌饮组可不同程度的升高血清中E2水平,降低LH、FSH水平;升高卵巢指数;升高INHB、FS水平,降低ACTA水平;升高IGF-1、VEGF表达。结论何首乌饮可延缓快速老化小鼠卵巢的衰老。     

快速老化小鼠脑内能量代谢及学习记忆能力的研究

目的观察快速老化小鼠(SAM)这一较理想的阿尔茨海默病模型,其脑内能量代谢及学习记忆能力随增龄的动态变化情况,研究脑内能量代谢与学习记忆能力的关系。方法选择2,6和12月龄雄性快速老化小鼠(SAMP8)为研究对象,同月龄的抗快速老化小鼠(SAMR1)作为对照。应用新物体识别、Morris水迷宫、穿梭箱等实验研究快速老化小鼠学习记忆能力的变化;应用小动物氟脱氧葡萄糖正电子断层扫描(FDG-PET)技术检测小鼠脑内葡萄糖摄取水平;应用高效液相色谱法检测小鼠海马内ATP,ADP和AMP等能量物质的增龄性变化;应用Western蛋白印迹法检测糖酵解及三羧酸循环葡萄糖代谢关键酶己糖激酶(HK)和丙酮酸脱氢酶(PDH)及葡萄糖转运蛋白的表达情况;应用分光光度法检测HK和PDH的活性。结果在新物体识别实验中,2,6和12月龄SAMP8的1和24 h优先指数显著低于同月龄SAMR1(P<0.05)。在Morris水迷宫实验中,学习期6月龄和12月龄SAMP8的逃避潜伏期显著高于同月龄SAMR1(P<0.05);测试期6月龄和12月龄SAMP8穿环次数显著少于同月龄SAMR1(P<0.05)。在穿梭箱实验中,6月龄和12月龄SAMP8的学习期成功回避次数显著低于同月龄SAMR1(P<0.05),SAMP8的测试期成功回避次数显著低于同月龄SAMR1(P<0.05),表明SAMP8的物体识别记忆能力、空间学习记忆能力及主动回避反应能力呈增龄性衰退。FDG-PET结果显示,2,6和12月龄SAMP8全脑、海马、皮层葡萄糖摄取低于同月龄SAMR1,且SAMP8葡萄糖摄取随着增龄而减少。与同月龄SAMR1比较,6月龄和12月龄SAMP8海马的ATP,ADP和AMP含量均显著降低(P<0.05)。2,6和12月龄SAMP8小鼠海马中HK和PDH的蛋白表达和活性均随着增龄而逐渐降低,其中12月龄SAMP8海马的HK和PDH活性显著低于同月龄SAMR1(P<0.01)。结论 SAMP8学习记忆能力随增龄进行性衰退,SAMP8脑内能量代谢随增龄逐渐降低,其学习记忆能力的衰退可能与其脑内能量代谢的异常相关。     

何首乌饮对快速老化小鼠性激素及其受体的影响

目的观察何首乌饮对快速老化小鼠性激素及其受体的影响。方法SAMP8小鼠分为模型组、阳性药维生素VE组、何首鸟饮低、中、高剂量组,每组12只,另设SAMP1小鼠作为对照组j灌胃给药8周。化学发光免疫法测定血清中雌二醇（E2）、黄体生长激素（LH）、卵泡刺激素（FSH）水平;计算卵巢指数;荧光定量PCR法和Western-blot法测定雌激素受体仅（ERa）、LH受体（LHR）、FSH受体（FSHR）mRNA和蛋白表达。结果与模型组比,何首鸟饮组可不同程度的升高血清中E2水平,降低LH、FSH水平;升高卵巢指数;升高卵巢组织ERa、LHR、FSHR表达。结论何首乌饮可通过调节性激素及其受体表达而延缓快速老化小鼠卵巢的衰老。     

黄连解毒汤对快速老化小鼠皮层基因表达的影响

目的研究黄连解毒汤（HL）对快速老化小鼠亚系SAMP8皮层差异表达基因的影响，揭示HL对认知功能障碍的改善作用的分子机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达eDNA芯片，比较了以石杉碱甲或HL处理的SAMP8皮层基因表达谱，以及HL的药物反应基因，同时采用实时荧光定量PCR技术对芯片结果进行了验证。结果HL对SAMP8皮层基因表达具有明显的调节作用。差异表达基因有信号转导基因Dusp12，Rps6ka1，Rab26，Tat2，Phb，Syde1，Def8，Ihpk1，Pik3e2a，蛋白质代谢相关基因Tte3，Amfr，Prr6，核酸代谢基因Fhit，Itm2e，Cstf2t，能量代谢基因Stub1，Uqer，Nsf，免疫反应相关基因Clqb，转录调节基因D1ertd161e，细胞生长相关基因Ngm，Dip3b，Acrbp，递质转运相关基因skl7a7，神经系统发育相关基因Trim3，神经胶质细胞分化相关基因Tspan2，电子传递相关基因mt-Col，以及15个功能未知基因。结论HL可能是通过调节信号转导、突触传递、蛋白质和能量代谢、细胞增殖分化等途径发挥认知功能改善作用的；研究中发现的HL的药物反应基因可能是改善学习记忆的潜在靶标。     

六味地黄汤对快速老化小鼠海马差异表达基因的影响

目的研究六味地黄汤(LW)对快速老化小鼠(senescenceacceleratedmouse,SAM)海马差异表达基因的影响,揭示LW增强认知功能的分子作用机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达cDNA芯片,比较SAMP8和SAMR1、SAMP8阴性对照和SAMR1阳性对照、石衫碱甲处理的SAMP8和SAMP8阴性对照以及LW处理的SAMP8和SAMP8阴性对照8个基因表达谱,并对LW的药物效应基因进行比较。结果给予SAMP8LW后,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因的表达出现显著差异,这些基因涉及蛋白酪氨酸磷酸酶家族、苏氨酸/丝氨酸蛋白激酶家族、泛素连接酶和线粒体功能等,LW对SAMP8海马的基因表达具有明显的调控作用。结论提示LW作用于认知功能也许是通过维持正常的细胞增殖和分化、保护正常的突触传递、调节Ca2+信号转导、改善线粒体的功能等途径实现的,基因DUSP12、NSF、STUB1、CAMKⅡα、AMFR、UQCRFS1和11个新基因可能是LW改善学习记忆功能的潜在作用靶标。     

实用皮肤光老化动物模型的建立

目的探讨建立实用的皮肤光老化动物模型的方法与步骤,为临床光老化皮肤病的研究提供试验基础。方法 20只SD大鼠,随机分两组,对照组10只、造模组10只。用标记笔标出预照射范围,去除该范围内毛发,造模组用紫外线光疗仪进行照射,每天一次,每次15min,共8周时间。造模完成后分别切取两组大鼠背部皮肤,经固定、脱水、石蜡包埋后切片、常规染色,显微镜下观察并采图。结果肉眼观察造模组大鼠背部皮肤增厚,粗糙,并出现明显的粗大沟纹。组织病理HE染色后镜下可见,造模组大鼠较正常对照组表皮增厚、厚薄不均,真皮胶原变性、断裂、减少、排列紊乱,甚至凝集呈块状,炎症细胞浸润。结论利用紫外线光疗仪局部照射来建立皮肤光老化动物模型是一种简便易行、经济实用的方法。     

当归抗小鼠衰老的研究

本文用光镜、电镜和组织化学方法研究当归抗小鼠肾衰老的作用。实验结果表明,当归可以改变老年小鼠肾的结构和功能,提示有一定的抗衰老作用。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体的保护作用

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体功能的影响。方法：将8月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、盐酸多奈哌齐1mg/kg组、吡啦西坦200mg/kg组、ICA75mg/kg组和150mg/kg组,每组6只;8只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1作为正常对照组。给药30d后,提取小鼠脑线粒体,测定线粒体呼吸功能、肿胀度、膜电位、活性氧（ROS）和ATP含量。结果：与SAMR1正常对照组相比,SAMP8小鼠脑线粒体呼吸功能显著降低,表现为线粒体Ⅲ态呼吸明显降低,Ⅳ态呼吸改变不明显,呼吸控制指数和磷氧比值降低（P〈0.05）;线粒体膜肿胀度增高,膜电位降低,线粒体内ROS含量增高,而ATP含量明显降低（P〈0.05）。与SAMP8模型组相比,ICA75mg/kg和150mg/kg均可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和呼吸功能（P〈0.05,P〈0.01）。结论：ICA可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和功能。     

制备衰老动物模型的一种可控臭氧装置

制备衰老动物模型的一种可控臭氧装置周惠嘉（上海市化工职业病防治研究所，上海２０００３０）中国图书分类号Ｒ９７７．９机体的衰老是一个不可抗拒的生命过程。长期以来，人们对此进行了广泛的研究，以探索其机制并设法来延缓此过程。然而，自然衰老是缓慢而漫长的，不...     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能影响的研究

目的:研究淫羊藿苷(Icaritin,ICA)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能的影响。方法:按体重随机挑选10只8月龄抗快速老化小鼠SAMR1和50只同月龄快速老化小鼠SAMP8,并将SAMP8随机分为5组(模型组、多奈哌齐组和ICA50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg组),灌胃给药1个月,在给药前后分别用Morris水迷宫、SMG-2迷宫和跳台方法检测SAMR1和SAMP8的学习记忆功能能力。结果:与给药前相比,给药后的快速老化小鼠SAMP8定位航行和空间搜索能力以及被动反应能力得到提高。结论:ICA可以改善SAMP8的学习记忆能力。     

建立小鼠增生性瘢痕动物模型的研究

目的:应用小鼠建立自身产生的、与人类类似的增生性瘢痕动物模型。方法:在小鼠耳耳腹面形成边长约3mm的方形全层皮肤缺损创面,愈合后,用计数细胞层数的方法对增生块进行病理学观察,比较瘢痕增生程度。结果:小鼠耳腹面可产生类似于人类的增生性瘢痕。外观明显产生增生80%。结论:这一动物模型可能成为研究人类瘢痕的动物模型。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响

目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP10脑组织单胺类及氨基酸类神经递质的影响。方法:本实验采取8月龄快速老化小鼠SAMP10为实验对象,随机分为模型SAMP10组、阳性药多奈哌齐组(1mg/kg)、ICA 3个剂量(50、100、200mg/kg)组,每组12只,以12只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1为正常对照。灌胃给药30d,一天一次,高效液相-电化学法检测快速老化小鼠SAMP10大脑皮层的去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织单胺类神经递质的影响,通过检测谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GA-BA)、牛磺酸(Tau)、甘氨酸(Gly)的含量来探讨ICA对SAMP10脑组织氨基酸类神经递质的影响。结果:ICA可显著降低SAMP10大脑皮层内Glu、Gln、GABA含量(P<0.01),升高NE、DA、DOPAC、5-HT、HVA、Asp以及Tau的含量(P<0.01或P<0.05),但对SAMP10大脑皮层内Gly的含量并没有显著影响(P>0.05)。结论:ICA可能通过升高脑内单胺类神经递质的含量、调节兴奋性氨基酸类递质的代谢平衡以及调节抑制性氨基酸的代谢平衡达到改善SAMP10的学习记忆的作用。     

六味地黄汤及其拆方对快速老化小鼠免疫功能的调节作用

目的比较六味地黄汤全方（LW）及其拆方三补（地黄、山茱萸、山药）和三泻（茯苓、泽泻、牡丹皮）对快速老化小鼠（SAM）免疫功能的调节作用。方法分别灌胃给予SAM亚系小鼠（SAMP8）LW（10g/kg）、三补（6.4g/kg）和三泻（3.6g/kg）,每日1次,连续60d;抗快速老化亚系小鼠（SAMR1）作为对照。采用3H-TdR掺入法检测脾脏淋巴细胞增殖能力,流式细胞术观察脾脏CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋淋巴细胞百分率。结果与SAMR1组相比,SAMP8组经刀豆蛋白A（ConA）和脂多糖（LPS）诱导的脾细胞增殖能力、脾脏CD3＋、CD4＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋和CD4＋/CD8＋比值均显著下降,而CD19＋细胞百分率显著上升;灌胃给予LW全方及折方对上述指标具有不同程度的改善作用,其中,LW对LPS诱导的脾细胞增殖能力、CD3＋和CD19＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋比值、CD4＋细胞百分率及CD4＋/CD8＋比值的改善作用优于三补和三泻;三补对升高ConA诱导的脾细胞增殖能力优于LW和三泻,对脾脏CD3＋和CD19＋细胞百分率、CD3＋/CD19＋细胞比值及CD4＋细胞百分率的改善作用优于三泻;三泻升高CD4＋/CD8＋比值的作用优于三补。结论 LW可显著改善SAMP8低下的T、B淋巴细胞功能,纠正脾脏CD4＋/CD8＋T细胞亚群比例失衡,其作用优于单独应用三补和三泻;三补和三泻对SAMP8的免疫改善作用各有侧重,三补的作用可能在于调节T、B淋巴细胞的数量和功能,三泻则可能着重于调节T细胞亚群的比例。本研究提示LW对免疫功能的调节是三补和三泻相互协调综合作用的结果 ,该结果为揭示LW配伍规律及其科学内涵提供了一定的实验依据。     

黄芪对自然衰老小鼠肠道功能及菌群稳态的作用研究

伴随着衰老的进程,机体内多个组织、器官功能发生退行性改变。肠道功能失调及菌群稳态失衡是老年人常见表现。本研究旨在探讨黄芪对自然衰老小鼠肠道功能及菌群稳态的影响,为进一步的抗衰老机制研究提供依据。采用自然衰老小鼠模型,动物实验遵循南京中医药大学动物伦理委员会规定。首先采用“虚弱指数”综合评分对小鼠衰老表型进行整体评价。检测小鼠肠道葡萄糖吸收能力、肠道运输时间、肠道脂肪酶以及淀粉酶的活性,评估肠道吸收和运输功能,酶联免疫吸附法(ELISA)检测结肠炎症因子水平,苏木精-伊红(H&E)染色评价肠道绒毛长度,阿立新蓝(AB)染色评价肠道黏膜厚度及杯状细胞数量,利用qRT-PCR方法检测肠道干细胞增殖与分化相关基因的转录水平, 16S rDNA测序分析肠道菌群组成。结果显示,在衰老整体表型方面,黄芪具有降低衰老小鼠“虚弱指数”的趋势,但并没有显著性差异。在衰老表型的某些指标上,黄芪对衰老小鼠毛发以及体能的改善作用最为显著。在肠道功能方面,黄芪可增加衰老小鼠肠道葡萄糖吸收能力,缩短肠道运输时间,促进脂肪酶分泌。黄芪可降低衰老小鼠肠道组织中炎症因子如肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白介素6 ...     

白芍延缓小鼠肾脏衰老的形态计量学研究

本文通过光镜和电镜研究了白芍延缓肾脏衰老的作用。形态计量结果表明,白芍使老年小鼠肾小体的大小,数量,肾小囊腔大小,滤过屏障基膜厚度及足细胞裂孔隙大小均有改变。     

运动对快速老化小鼠海马突触素表达的影响

目的研究运动对快速老化小鼠（SAMP8）海马突触素表达的影响,探讨运动改善阿尔茨海默病（AD）学习记忆功能的机制。方法 3月龄SAMP8小鼠40只随机分为运动组（采用跑笼运动训练）和对照组,2个月后HE染色观察2组海马神经元形态改变;免疫组化技术检测2组海马突触素表达。结果 5月龄SAMP8小鼠对照组海马部分神经元细胞变性、死亡,核浓缩,空泡变性;运动组偶有神经元细胞变性、死亡,大部分细胞形态正常。海马突触素表达运动组较对照组显著增高（P〈0.05）。结论运动可以延缓SAMP8小鼠海马神经元变性,提高海马突触素表达,这可能是运动改善AD学习记忆功能的重要机制之一。     

环磷酰胺介导小鼠骨髓抑制动物模型的建立

目的建立环磷酰胺(CTX)介导的小鼠骨髓抑制动物模型。方法将小鼠随机分为两组即正常对照组(n=8)和CTX组(n=8)。CTX组腹腔注射CTX(120mg·kg-1),一天一次,连续三天,取外周血细胞和骨髓细胞分别计数,并通过流式细胞仪分析骨髓细胞的细胞周期。对照组腹腔注射生理盐水,其他处理同CTX组。结果与正常对照组相比,CTX组WBC和骨髓细胞数分别降至(1.81±0.58)×109.mL-1和2×105.mL-1(P<0.01)。CTX组小鼠骨髓细胞G0/G1期的的比例为(88.57±2.79)%,S期的比例为(7.52±1.59)%,正常对照组分别为(76.61±3.78)%和(18.55±2.99)%,两者有显著差异(P<0.01)。另外,CTX组的骨髓细胞增殖指数(PI)为12.38%,明显低于正常对照组(23.34%)(P<0.01)。结论小鼠骨髓抑制动物模型成功建立。