肝素对生长因子诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞分裂和增殖的影响

目的：探讨肝素是否能抑制生长因子诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）分裂和增殖。方法：应用含１０％ＦＢＳ的Ｍ－１９９培养液培养大鼠ＰＡＳＭＣ。细胞分裂及细胞增殖分别用［ｍｅｔｈｙｌ－＾３Ｈ］ＴｄＲ和细胞计数监测。结果：ＦＢＳ（１０％），以及ＦＢＳ（１％）与ＰＤＧＦ（５０μｇ·Ｌ＾－１），ＦＧＦ（５０μｇ·Ｌ＾－１），或ＩＬ－１α（１００ｎｇ·Ｌ＾－１）联合应用均能增加大鼠ＰＡＳＭＣ分裂。肝素（     

Tumor necrosis factor mediated release of platelet-derived growth factor from bovine cerebral microvascular endothelial cells

研究ＴＮＦ介导的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ及药物对ＢＣＭＳＭＣ增殖的保护作用．方法：体外培养ＢＣＭＥＣ和ＢＣＭＳＭＣ，用结晶紫染色法观察ＴＮＦ引起的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而促进ＢＣＭＳＭＣ增殖作用．结果：ＴＮＦ不能促进无血清培养的ＢＣＭＳＭＣ增殖，但ＴＮＦ（５－２０μｇ·Ｌ－１）剂量依赖地促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ．ＴＮＦ（２０μｇ·Ｌ－１）促进ＢＣＭＳＭＣ增殖的百分率为３４±４％．药物Ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ，ｉｓｏｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ和ＰＭＤＰ不影响ＴＮＦ引起ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ，但能剂量依赖地（１－１００μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制ＰＤＧＦ促ＢＣＭＳＭＣ增殖的作用．结论：ＴＮＦ促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而引起ＢＣＭＳＭＣ的增殖．药物能抑制ＰＤＧＦ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖．     

Detection of DNA damage in peripheral lymphocytes by 7 compounds using comet assay

目的：检测过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）、甲磺酸乙酯（ＥＭＳ）、丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、二甲基亚硝胺（ＤＭＮＡ）、苯并（ａ）芘（ＢａＰ）、２氨基芴（２ＡＦ）和环磷酰胺（ＣＰ）诱发小鼠、大鼠及人外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂．方法：体外单细胞微量凝胶碱性电泳试验（慧星试验）．结果：除ＥＭＳ０９７ｍｍｏｌ·Ｌ－１在小鼠淋巴细胞，ＭＭＣ３０μｍｏｌ·Ｌ－１在小鼠、人淋巴细胞中呈阴性外，其余均为阳性．最低可检测浓度分别为Ｈ２Ｏ２１μｍｏｌ·Ｌ－１，ＥＭＳ０４８ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＢａＰ５０μｍｏｌ·Ｌ－１，ＣＰ２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＭＭＣ１０μｍｏｌ·Ｌ－１，ＤＭＮＡ２７３ｍｍｏｌ·Ｌ－１，２ＡＦ６２５μｍｏｌ·Ｌ－１．ＣＰ、ＢａＰ、２ＡＦ需经Ｓ９Ｍｉｘ代谢活化才显示毒性．结论：彗星试验检测出ＭＭＣ诱导大鼠，ＥＭＳ诱导大鼠和人，以及Ｈ２Ｏ２、ＤＭＮＡ、ＢａＰ、ＣＰ和２ＡＦ诱导小鼠、大鼠和人外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂损伤．     

粉防己碱，Fura 2－AM和Bay k 8644对脂多糖刺激大鼠腹腔巨噬细胞释放血小板活化因子的影响

目的：研究钙与脂多糖（ＬＰＳ）刺激大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭ）释放血小板活化因子（ＰＡＦ）的关系．方法：通过ＰＡＦ的生物测定法，观察了粉防己碱（Ｔｅｔ）、Ｆｕｒａ２ＡＭ和Ｂａｙｋ８６４４对ＬＰＳ刺激ＰＭ释放ＰＡＦ的影响．结果：ＬＰＳ刺激ＰＭ释放ＰＡＦ，但并不使其细胞内钙增高，Ｔｅｔ在０１，１０，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ－１和Ｆｕｒａ２ＡＭ在００１，０１，１０，１０μｍｏｌ·Ｌ－１时降低ＬＰＳ刺激的ＰＭ释放ＰＡＦ（分别为９８±１１，６５±１６，４７±０８，３４±０４，９２±１７，５２±１３，３７±０４，３．２±０３μｇ·Ｌ－１，无药物时１１８±１２μｇ·Ｌ－１），Ｂａｙｋ８６４４在１０，５０，１０μｍｏｌ·Ｌ－１时能增加ＬＰＳ刺激的ＰＡＦ释放能增加ＬＰＳ刺激的ＰＡＦ释放（分别为１３２±１７，１６２±１４，１７６±１５μｇ·Ｌ－１），并且Ｂａｙｋ８６４４在５０μｍｏｌ·Ｌ－１时能全部或部分逆转Ｔｅｔ和Ｆｕｒａ２ＡＭ对ＰＡＦ释放的抑制作用．结论：尽管ＬＰＳ并不明显增加巨噬细胞内钙，但细胞内钙对ＬＰＳ刺激的ＰＡＦ释放是必要的．     

Effects of recombinant humanen dothelial-derived interleukin-8 on hemorhagic shock in rats

目的：研究重组人内皮细胞衍生的白细胞介素－８（ＩＬ８）对失血性休克的作用．方法：大鼠股动脉放血至ＭＡＢＰ５３２ｋＰａ，维持９０ｍｉｎ，复制晚期失血性休克模型．输血后，静脉注射ＩＬ８２５０μｇ·ｋｇ－１．放免法测定血浆ＥＴ１和６ＫＰＧＦ１α含量．结果：给予ＩＬ８后，ＭＡＢＰ显著提高，休克状态改善，２ｈ存活率相应提高；休克晚期血浆ＥＴ１水平比正常明显升高（２１±４ｖｓ８２±１８ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１），血浆６ＫＰＧＦ１α含量明显降低（１０７±１２ｖｓ１５７±１１ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１）．ＩＬ８显著降低血浆ＥＴ１水平（１０±４ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１），提高血浆６ＫＰＧＦ１α含量（３６８±１６ｎｇ·Ｌ－１，Ｐ＜００１）．结论：ＩＬ８具有较好的抗休克作用．     

Basic fibroblast growth factor enhanced LAK cell cytotoxicities against human bladder neoplasm cells 1

目的：探讨白细胞介素Ⅱ（ＩＬ２）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对膀胱癌患者淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）的作用．方法：用细胞计数观察不同浓度ｂＦＧＦ对ＬＡＫ细胞增殖的影响．以膀胱癌细胞系ＥＪ及新鲜分离患者自体肿瘤细胞（ＢＴＣ）为靶细胞,用ＭＴＴ法测定ＬＡＫ细胞对膀胱癌细胞的细胞毒作用．结果：虽然外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）的增殖可被ｂＦＧＦ５μｇ·Ｌ－１所抑制,ＩＬ２所诱导的ＬＡＫ细胞的增殖却不受ｂＦＧＦ的影响,ｂＦＧＦ明显加强ＬＡＫ对ＥＪ细胞和ＢＴＣ的细胞毒作用．结论：虽然ｂＦＧＦ抑制ＰＢＭＣ的增殖,但ｂＦＧＦ又增强膀胱癌患者ＬＡＫ细胞对肿瘤细胞的细胞毒性．     

Inhibitory effect of antisense basic fibroblast growth factor oligonucleotides on proliferation of cultured aortic smooth muscle cells induced by angiotensin Ⅱ in SHR rats

目的：研究转染反义碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）寡核苷酸（ＯＤＮ）对培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）生长的影响．方法：用脂质体介导法将反义ｂＦＧＦＯＤＮ转入ＳＭＣ内，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｂＦＧＦ基因表达，并测定［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入和细胞计数．结果：转染反义ｂＦＧＦＯＤＮ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）几乎完全抑制血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ，１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导增高的ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达和明显抑制ＳＭＣ增殖，在基础状态和ＡｎｇⅡ刺激条件下，［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入分别被抑制２６５％（Ｐ＜００１）和４２０％（Ｐ＜００１），细胞数分别被抑制１７３％（Ｐ＜００１）和２２２％（Ｐ＜００１）．结论：反义ｂＦＧＦＯＤＮ能有效抑制ＡｎｇⅡ诱导的ｂＦＧＦ基因表达和ＳＭＣ增殖．     

Regulatory role of protein tyrosine phosphorylation in platelet activating factor induced signal transduction in platelets 1

目的：研究蛋白酪氨酸磷酸化（ＰＴＰ）在血小板激活因子（ＰＡＦ）诱导血小板信号传导中的作用．方法：用水洗兔血小板考查Ｇｅｎ抑制聚集及５羟色胺释放,Ｆｕｒａ２和ＢＣＥＣＦ负载测胞内钙及ｐＨ,特异性抗酪氨酸单抗及免疫印迹法检测ＰＴＰ．结果：Ｇｅｎ１００和２００μｍｏｌ·Ｌ－１分别抑制ＰＡＦ诱导的５羟色胺释放为２３７％±２０％及４１％±８％,对胞内钙增加和Ｎａ＋／Ｈ＋交换也有抑制作用．ＰＡＦ增加Ｍｒ为７００００,６００００,５００００,４２０００／４００００,３４０００的ＰＴＰ．Ｇｅｎ２００,４００μｍｏｌ·Ｌ－１明显抑制该效应．用Ｓｔａ２０ｎｍｏｌ·Ｌ－１,ＢＡＰＴＡ２００μｍｏｌ·Ｌ－１,依他酸２ｍｍｏｌ·Ｌ－１,分别阻断ＰＫＣ及胞内钙增加和内流,也减少ＰＴＰ形成．结论：ＰＴＰ参与ＰＡＦ诱导血小板信号传导途径,ＰＫＣ活化和胞内钙动员对ＰＴＰ有调节作用．     

Inhibitory effects of ginkgolides on nitric oxide production in neonatal rat microglia in vitro

目的：观察银杏内酯Ａ和Ｂ，ＰＡＦ拮抗剂阿帕泛（Ａｐａ）和ＮＯＳ抑制剂ＬＮＡ对新生大鼠小胶质细胞（Ｍｉ）产生ＮＯ的影响．方法：以Ｇｒｉｅｓ反应测定亚硝酸盐含量表示ＮＯ量．结果：在静息Ｍｉ，ＧＡ，ＧＢ和Ａｐａ在１－１００００ｎｍｏｌ·Ｌ－１范围对Ｍｉ产生ＮＯ没有影响，但ＬＮＡ可浓度依赖性地抑制ＮＯ产生，其ＩＣ５０（９５％可信限）值为３．４（０．８－１４９）μｍｏｌ·Ｌ－１．而在激活的Ｍｉ，ＧＡ，ＧＢ和ＬＮＡ可浓度依赖性地抑制ＮＯ产生，其ＩＣ５０（９５％可信限）值分别为５．７（１．８－１８１），１．１（０．３－４４）和０．５（０．１－２．８）μｍｏｌ·Ｌ－１，但Ａｐａ不能抑制ＮＯ产生．结论：ＧＡ和ＧＢ抑制ＬＰＳ诱导Ｍｉ产生ＮＯ．     

粉防己碱对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF和相关癌基因表达的影响

用［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］ＴｄＲ）参入法，电镜，免疫组化，原位杂交方法，在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了粉防己碱（Ｔｅｔ，０．０３μｍｏｌ·ｋｇ－１·ｄ－１×８周ｉｇ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ的抗原表达及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达的影响．结果发现：Ｔｅｔ在降低ＳＨＲ血压（Ｐ＜０．０１）同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和［３Ｈ］ＴｄＲ参入量（Ｐ＜０．０１），并能逆转ＶＳＭＣ增殖时ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ抗原（Ｐ＜０．０５）及ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ的表达增强．提示：Ｔｅｔ抑制ＳＨＲ的ＶＳＭＣ增殖与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关     

肝细胞生长因子对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的通过体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞研究肝细胞生长因子(HGF)对结缔组织生长因子表达(CTGF)的影响。方法差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CFs)及免疫组化法对其进行鉴定,选AngⅡ(10~(-6)mol/L)作诱导浓度,与HGF100ng/ml孵育48h,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果肝细胞生长因子能够在mRNA及蛋白水平上大部分抑制AngⅡ对CTGF表达的诱导。结论初步证实在心肌纤维化的过程中,HGF与CTGF是一对拮抗生长因子,HGF可能通过抑制CTGF表达的途径逆转心肌纤维化。     

血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在正常成人皮肤中的表达及其意义

目的探讨两种促血管生成因子血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在正常成人皮肤组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化SP法检测20例正常成人皮肤组织VEGF、bFGF的表达及分布.结果正常成人皮肤组织中,VEGF、bFGF阳性细胞均主要位于基底层,呈弱阳性表达.结论正常成人皮肤组织中,基底层是表达VEGF、bFGF的主要细胞,在维持真皮微血管的正常生理功能中可能发挥重要作用.     

Effects of anthralin and hypericin on growth factor signalling and cell proliferation in vitro

The effect of the anthranoids, anthralin and hypericin, on epidermal growth factor receptor (EGF-R) activation and their degree of specificity was examined. Hypericin, but not anthralin, was found to inhibit binding of [¹²⁵I]-labelled epidermal growth factor (EGF) to HN5 squamous carcinoma cells that overexpress EGF-R. This effect was a result of a dose- and time-dependent reduction of EGF-R number and affinity. Neither compound directly inhibited EGF-induced tyrosine phosphorylation of the EGF-R in HN5 cells. Although anthralin and hypericin both inhibited the mitogenic effect of EGF in NR6/HER cells (IC₅₀s = 100 nM and 10 μM, respectively), they also had comparable effects on DNA synthesis in response to acidic fibroblast growth factor (aFGF) and platelet-derived growth factor (PDGF). When tested in proliferation assays using cells expressing differing numbers of EGF-R, the growth inhibitory effects of both compounds were independent of EGF-R number. We conclude that, although anthralin and hypericin both inhibit EGF signalling, they do not act specifically on the EGF-R pathway. Moreover, their mechanisms of action do not appear to be comparable.     

急性肾衰患者尿液和肾组织中表皮生长因子的检测及动态变化的意义

应用放射免疫法对6例急性肾功能衰竭（ARF）患者尿中表皮生长因子（EGF）的水平进行测定和动态观察，并用免疫组化法对其中5例患者肾活检组织中肾小管上EGF和EGF受体（EGF－R）进行定量分析。结果ARF恢复期尿中EGF含量的不断增加，血清肌酐水平和钠滤过分数逐渐下降，在伴有肾小管上皮细胞再生表现者其肾小管上EGF的增加尤为明显，并且与肾活检时尿中EGF含量的变化相平行。揭示在ARF恢复期尿中EGF含量的变化可反映肾小管和肾功能的恢复状态，而肾小管上EGF的增加可能有利于肾小管上皮细胞的再生。     

短肽支架纤维对创面表皮碱性成纤维生长因子及表皮细胞生长因子的促进作用

目的：探讨自组装纤维支架肽RADA16在皮肤烫伤中的治疗作用。方法：在SD大鼠背部以电力机械方法制造深Ⅱ度烧伤模型,对照治疗组以0.9%NaCl溶液代替,烧伤后按时换药,并在不同时间段（伤后7、10、14d分别取烧伤修复创面的皮肤组织进行免疫组化染色,记录创面碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及表皮细胞生长因子（EGF）的表达,并以图像处理系统软件记录生长因子表达的半定量检测。比较了短肽处理组及空白对照组创面生长因子表达的灰度值。结果：免疫组织化学结果显示,在烧伤修复的不同修复期,短肽处理组bFGF和EGF均明显表达在新生表皮组织中,与空白对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：自组装纤维支架肽对烧伤皮肤生长因子的表达具有促进作用。     

创面愈合过程中EGF、EGFr变化的临床研究

目的 探讨内源性EGF、EGFr变化在创面愈合过程中的作用。方法 取22例中厚断层供皮区创面病人术后4天、10天和16天时创面组织,行HE和ABC免疫组织化学染色对照创面大体变化,观察创面愈合过程中内源性EGF、EGFr的变化及其与组织修复的关系。结果 伤后10天时内源性EGF、EGFr有明显的表达,伤后4天和16天时表达较弱,这些变化与组织学改变较一致。结论 内源性EGF、EGFr变化为机体的生理变化,可以促进修复,也可避免疤痕形成。     

糖尿病视网膜病变患者血清PlGF和VEGF水平的变化及其临床意义

目的探讨糖尿病视网膜病变（DR）患者血清胎盘生长因子（P1GF）水平的变化及其临床意义。方法采用ELISA法检测51例DR患者血清P1GF和VEGF的变化,其中,非增生性DR（NPDR）22例,增生性DR（PDR）29例。并与54例非糖尿病视网膜病变（NDR）患者进行比较,同时以40例健康者作为对照。结果DR患者血清P1GF和VEGF水平明显高于对照组（t值分别为1．907和2．942,P〈0．05）;PDR患者P1GF和VEGF水平明显高于NPDR患者（t值分别为19．024和16．319,P〈0．05）。结论血清P1GF和VEGF水平变化参与了DR的发生与发展,且与病变严重程度有关。     

恶性间皮瘤中各种生长因子的作用

目的恶性间皮瘤是一种起源于间皮细胞的高度恶性肿瘤。研究表明,胰岛素样生长因子等多种生长因子与恶性间皮瘤的发生发展预后有密切的联系,有些将可能成为其化疗的新靶点。     

系统性红斑狼疮患者血管生成因子的表达及临床意义

目的探讨血管生成因子中胎盘生长因子(PIGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的表达及相互关系。方法采用ELISA法检测54例SLE患者(SLE组)及28例健康人(对照组)血清PIGF、bFGF、VEGF的水平并分析其相关性;同时常规检测血沉、SLE活动性指数(SLEDAI)评分和补体C3等。根据SLEDAI评分,将SLE患者分为活动期组和缓解期组。结果 SLE组PIGF、bFGF、VEGF水平均明显高于对照组(P<0.05);活动期组PIGF、bFGF、VEGF及缓解期组PIGF、bFGF水平均明显高于对照组(P<0.05)。活动期组PIGF、bFGF、VEGF水平与缓解期组相比无统计学差异(P>0.05)。SLE组的PIGF与VEGF、bFGF和VEGF水平均呈正相关(P<0.05),PIGF、VEGF水平与血沉、SLEDAI评分亦呈正相关。结论血清PIGF、bFGF、VEGF可能参与了SLE的发病机理。     

血浆IGFBP-2在高级别脑胶质瘤手术加放化疗前后的变化

目的:探讨脑胶质瘤病人血浆类胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein 2;IGFBP-2)浓度在病情判定、预测复发中的临床意义.方法:用酶联免疫法(EUSA)对健康体检者、不同级别胶质瘤及高级别胶质瘤病人综合治疗后复发前后血浆IGFBP-2浓度进行统计学比较,随访其中55例高级别胶质瘤病人2.5年.分析术前血浆IGFBP-2浓度与其元瘤生存期关系.结果:(1)血浆IGFBP-2浓度随着胶质瘤级别的升高而增加(F=17.745,P=0.000);(2)高级别胶质细胞瘤病人经过手术、放疗、化疗综合治疗后,未复发病人血浆IGFBP-2明显下降(t=2.164,P=0.041),而复发后明显升高(t=8.295,P=0.000);(3)血浆中IGFBP-2浓度＜600 ng/ml的高级别脑胶质瘤病人的无瘤生存期明显长于浓度＜600 ng/ml的高级别脑胶质瘤病人(Z=2.272,P=0.023).结论:血浆IGFBP-2浓度的动态监测对判定胶质瘤病人病变恶性程度、预测高级别胶质瘤的复发有一定的临床意义.