人类成纤维的体外细胞转化结合基因突变试验法

以人类成纤维细胞体外转化体系为模型研究致癌多步骤机制黄吉武，ＭｃＣｏｒｍｉｃｋＪＪ（西安医科大学预防医学系毒理室西安７１００６１美国密执安州立大学致癌研究室）以ｖ─ｍｙｃ癌基因转染正常人成纤维细胞建立永生化的近二倍体细胞株ＭＳＵ─１．１。该株具有由４...     

以人类成纤维细胞体外转化体系为模型研究环境致癌多步骤机制

实验使用的人成纤维细胞谱系ＭＳＵ－１包括由ｖ－ｍｙｃ转染正常二倍体人成纤维细胞及随后自发遗传改变而形成的有不同程度生长优势的３个连续细胞株，这些衍生细菌株可能代表着由正常细胞向恶性细胞多步骤进展过程中不同的癌前阶段。使用致癌物诱发恶性转化以鉴别其不同类型细胞的反应，从而建立人类成纤维细胞肿瘤进展的体外模型。结果ＭＳＵ－１．１细胞 接触ＢＰＤＥ和１ＣＲ－１９１后形成转化灶，ＭＳＵ－１．２细胞经＾６０     

重组腺病毒介导反义c-myc基因对人肝癌细胞系的治疗作用

目的：探讨重组腺病毒介导反义ｃ－ｍｙｃ基因（Ａｄ－ＡＳｍｙｃ）治疗人肝癌细胞的作用。方法：观察Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系的转导效率,通过细胞生长曲线、克隆形成实验、ＤＮＡ片段化分析、ＲＴ－ＰＣＲ、裸鼠皮下移植瘤治疗实验,分析Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系Ｂｅｌ－７４０２、ＱＳＧ－７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１和ＨＣＣ－９２０４细胞生长和ｃ－ｍｙｃ基因表达及裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果：Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可高效转导人肝癌细胞系,抑制细胞生长;转染细胞克隆形成能力降低,克隆成活率为对照组的５３．９％～６９．１％,ｃ－ｍｙｃ基因表达下降;Ａｄ－ＡＳｍｙｃ处理肝癌细胞,ＤＮＡ凝胶电泳出现明显的梯形条带,瘤内注射Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可抑制裸鼠皮下移植瘤生长。结论：重组腺病毒介导的反义ｃ－ｍｙｃ基因转移,有可能成为肝癌基因治疗     

反义c—myc寡核苷酸抑制人肝癌细胞SMMC—7721生长

用逆转录病毒载体将反义ｃ ｍｙｃ质粒通过ＰＡ317包装后转染人肝癌细胞 ,能够抑制人肝癌细胞的生长[1 ] ,本研究采用反义ｃ ｍｙｃ核酸技术初步观察了反义ｃ ｍｙｃ寡核苷酸(ＯＤＮ)对人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1生长的抑制作用。材料和方法一　寡核苷酸的合成及修饰　正义、错配及反义ｃ ｍｙｃＯＤＮ(均为 15 ｍｅｒ)的合成和硫代磷酸化修饰均由上海生物工程公司完成。二　人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1培养和基因转染　人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1在 37℃、5 %ＣＯ2 条件下 ,用 10 %胎牛血清(ＦＢＳ) 16 40液进行培养。选取对数生长期ＳＭＭＣ …     

脑胶质瘤c─myc癌基因重排与MDR1基因的变化

作者对２２例脑胶质瘤Ｃ─ｍｙｃ癌基因和ＭＤＲ１基因Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析发现有５例胶质瘤Ｃ－ｍｙｃ癌基因发生基因重排，其中２例伴有重排序列的扩增。这些标本同时出现ＭＤＲ１基因限制片段拷贝量的倍增（ＥｃｏＲＩ，６．６ｋｂ），其倍增是脑组织２～２８倍。这一分子事件不仅反映Ｃ─ｍｙｃ癌基因与脑胶质瘤的恶性程度和预后关系密切，而且也与胶质瘤的耐药性有关。     

丹参酮对人肝癌细胞某些表型的逆转作用

目的观察丹参酮促人肝癌细胞株在体外向正常方向分化的效果。方法体外培养的人肝癌细胞（ＳＭＭＣ┐７７２１）经０．５μｇ／ｍｌ丹参酮处理４天后，作光电镜观察，ＢｒｄＵ掺入试验，ＰＣＮＡ免疫组化及ＦＣＭ检测。结果在镜下，细胞形态趋向良性分化，细胞生长明显被抑制；ＢｒｄＵ标记率和ＰＣＮＡ阳性率均明显低于对照组；流式细胞仪检测显示丹参酮处理组的细胞被阻止于Ｇ０／Ｇ１期，而Ｓ期细胞数量明显减少，ｃ┐ｍｙｃ癌基因蛋白表达降低，ｃ┐ｆｏｓ癌基因蛋白表达明显增加。结论丹参酮可诱导人肝癌细胞某些表型的逆转，可能是一种有前途的分化诱导剂。     

C-myc抑制肺癌细胞的肿瘤发生并且下调血管内皮生长因子表达[英]

Ｃｍｙｃ癌基因在源自肺肿瘤的细胞中频繁地扩增并且同这些癌症的恶性有关。为支持这一点,Ｃｍｙｃ转染提高人类小细胞肺癌(ＳＣＬＣ)细胞体外增殖与软琼脂中的克隆形成。在该研究中,作者惊讶地发现Ｃｍｙｃ表达抑制了ＳＣＬＣ细胞在无胸腺鼠中的肿瘤形成。Ｃｍｙｃ表达下调了这些ＳＣＬＣ细胞内血管内皮生长因子(ＶＥＧＦ)的蛋白表达与转录,以及Ｃｍｙｃ表达控制的鼠成纤维细胞和Ｃｍｙｃ转基因鼠肝细胞内的ＶＥＧＦ的转录。最后,双变量和多变量分析证实肺癌细胞系瘤形成可能性与Ｃｍｙｃ的相对表达呈负相关,与ＶＥＧＦ的相对表达呈正相关,…     

鼻咽癌细胞系SUNE中EBV-LMP1基因对永生化人胚肾上皮细胞生长特性的影响

目的研究鼻咽癌细胞系ＳＵＮＥ中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１（ＬＭＰ１）基因对上皮细胞生长特性的影响，探索ＬＭＰ１在鼻咽癌发生中所起的作用。方法用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞，检测ＬＭＰ１的表达，观察细胞的生长状态、生长速度、在软琼脂中的集落形成能力及对裸鼠的致瘤能力。结果被ＬＭＰ１基因转染的细胞生长旺盛，丧失接触抑制，生长速度增快，在软琼脂中能够形成多个集落，并能在裸鼠体内成瘤。结论ＬＭＰ１基因能明显改变上皮细胞的生物学行为，促进细胞的生长、增殖和转化，使转染的上皮细胞获得肿瘤细胞的生长特征。     

转化生长因子β1正反义基因对人肺巨细胞癌细胞体内外增殖的影响

探讨人转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）正反义基因对人肺巨细胞癌细胞（ＰＬＡ－８０１Ｄ）增殖的影响及调控。方法通过基因转染方法,将ＴＧＦβ１正、反义基因分别导入ＰＬＡ－８０１Ｄ细胞,观察转染和未转染细胞体内外增殖变化、ｎｍ２３基因和ｃ－ｍｙｃ基因表达以及细胞凋亡特征。结果与未转染细胞比较,正义ＴＧＦβ１基因转染细胞培养上清中ＴＧＦβ１活性增加,体外生长速度减慢,软琼脂细胞培养集落形成能力降低,裸鼠体内成瘤率下降约４７％,肿瘤的转移受到抑制。其机制可能与正义ＴＧＦβ１基因转染细胞ｎｍ２３基因表达增加,ｃ－ｍｙｃ基因表达减少以及诱发细胞凋亡有关。而反义ＴＧＦβ１基因转染细胞则出现相反结果。结论ＴＧＦβ１对ＰＬＡ－８０１Ｄ细胞的体内外生长具有负调控作用     

脑胶质瘤c—myc癌基因重排与MDR1基因的变化

作者对２２例胶质瘤ｃ－ｍｙｃ癌基因和ＭＤＲ１基因Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析发现有５例胶质瘤ｃ－ｍｙｃ癌基因发生基因重排，其中２例伴有重排序列的扩增。这些标本同时出现ＭＤＲ１基因限制片段拷贝量的倍增（ＥｃｏＲＩ，６．６ｋｂ），其倍增是脑组织２￣２８倍。这一分子事件不仅反映ｃ－ｍｙｃ癌基因与脑胶质瘤的恶性程度和预后关系密切，而且也与胶质瘤的耐药性有关。     

Special Reports and Review ONCOGENES AND CELL IMMUNOGENITY：v－H－ras SUPPRESSING MHC CLASS I EXPRESSION IN MOUSE FIBROBLAST

ＳｐｅｃｉａｌＲｅｐｏｒｔｓａｎｄＲｅｖｉｅｗＯＮＣＯＧＥＮＥＳＡＮＤＣＥＬＬＩＭＭＵＮＯＧＥＮＩＴＹ：ｖ－Ｈ－ｒａｓＳＵＰＰＲＥＳＳＩＮＧＭＨＣＣＬＡＳＳＩＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＩＮＭＯＵＳＥＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＬｕＹｏｕｙｏｎｇ；吕有勇；Ｓｈｒａｇ...     

壮骨镇痛胶囊对乳腺癌细胞ｎｍ２３-Ｈ１和ｃ-ｍｙｃ基因表达的影响

目的　观察壮骨镇痛胶囊对高转移人乳腺癌ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞抑癌基因ｎｍ２３-Ｈ１和原癌基因ｃ-ｍｙｃ表达的影响,探讨壮骨镇痛胶囊抑制ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞增殖和迁移的可能作用机制。方法　采用ＲＴ-ＰＣＲ法和免疫细胞化学法分别检测不同浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆对ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞ｎｍ２３-Ｈ１和ｃ-ｍｙｃ基因ｍＲＮＡ及其蛋白表达的影响,并分析其对ｎｍ２３-Ｈ１／ｃ-ｍｙｃ蛋白比值的影响。结果　５％壮骨镇痛胶囊含药血浆显著抑制了ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞ｎｍ２３-Ｈ１和ｃ-ｍｙｃ基因的转录和翻译;１.２５％壮骨镇痛胶囊含药血浆抑制了ｎｍ２３-Ｈ１的转录和翻译以及ｃ-ｍｙｃ基因的翻译,对ｃ-ｍｙｃ基因的转录无显著影响;０.６３％壮骨镇痛胶囊含药血浆对ｎｍ２３-Ｈ１和ｃ-ｍｙｃ基因的转录和翻译均无明显影响;５％和１.２５％壮骨镇痛胶囊含药血浆显著提高了ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞ｎｍ２３-Ｈ１／ｃ-ｍｙｃ蛋白比值,０.６３％壮骨镇痛胶囊含药血浆对ｎｍ２３-Ｈ１／ｃ-ｍｙｃ蛋白比值无显著影响。结论　不同浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆对乳腺癌ＭＤＡ-ＭＢ-２３１细胞ｎｍ２３-Ｈ１和ｃ-ｍｙｃ基因的表达具有不同的作用,该药可能通过降低癌细胞ｃ-ｍｙｃ基因表达继而提高细胞中ｎｍ２３-Ｈ１／ｃ-ｍｙｃ蛋白比值来降低癌细胞的增殖和迁移能力。     

EXPRESSION OF c－myc GENE AND BIOSYNTHESIS OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES IN ANTISENSE TRANSFECTANT HL_（60）~R－9

ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦｃ－ｍｙｃＧＥＮＥＡＮＤＢＩＯＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＭＡＣＲＯＭＯＬＥＣＵＬＥＳＩＮＡＮＴＩＳＥＮＳＥＴＲＡＮＳＦＥＣＴＡＮＴＨＬ_（６０）~Ｒ－９ＬｉＹｉｎｘｉｏｎｇ李尹雄，ＦａｎＭｕｚｈｅｎ范慕贞，Ｚｈａ...     

鼻咽癌细胞系SUNE中EBV-LMP1基因对上皮细胞增殖的影响

目的研究鼻咽癌细胞系ＳＵＮＥ中ＥＢＶ┐ＬＭＰ１基因对上皮细胞增殖的影响,探索ＬＭＰ１在鼻咽癌发生中所起的作用。方法用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞,检测ＬＭＰ１的表达,观察细胞在软琼脂中的集落形成能力,ＭＴＴ吸收能力以及ＰＣＮＡ的表达情况。结果被ＬＭＰ１基因转染的细胞生长旺盛,能在软琼脂中形成多个集落,ＭＴＴ吸收能力增强,ＰＣＮＡ的表达水平增高。结论ＬＭＰ１基因能明显改变上皮细胞的生物学行为,促进细胞的生长、增殖和转化,使转染的上皮细胞获得肿瘤细胞的生长特征。     

甲基丙烯酸环氧丙酯对金仓鼠胚胎细胞基因表达的影响

本实验采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂文方法研究了甲基丙烯酸环氧丙酯（ＧＭＡ）对金仓鼠胚胎（ＳＨＥ）细胞原癌基因Ｃ─ｍｙｃ和重要功能基因谷胱甘肽Ｓ─转移酶ｐ（ＧＳＴ─ｐ）表达的影响．结果表明ＧＭＡ促进了这些基因的表达，其中ＧＳＴ─ｐ基因在作用２ｈ表达即见增高，５ｈ后达到高水平，直至１２ｈ仍维持这一高水平；ｃ─ｍｙｃ基因在１２ｈ后出现高水平．本文讨论了ＧＭＡ诱导上述基因表达的改变与细胞转化之间的可能关系．     

人c－myc基因辅助黄曲霉毒素B1体外转化大鼠肝上皮细胞

人ｃ－ｍｙｃ基因辅助黄曲霉毒素Ｂ１体外转化大鼠肝上皮细胞袁宝珠，孙宗棠我们利用基因转染技术，探索黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）在人ｃ－ｍｙｃ基因辅助下，转化体外原代大鼠肝上皮细胞的可能性。首先，我们利用ＥｃｏＲＩ和ＫｐｎＩ将人ｃ－ｍｙｃ基因从ｐＢＲ３２２...     

鼻咽癌细胞系SUNE中EBV—LMP1基因对永生化人胚肾上皮细胞生长 …

研究鼻咽癌细胞系ＳＵＮＥ中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１基因对上皮细胞生长特性的影响、探索ＬＭＰ１在鼻咽癌发生中所起的作用。方法 用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞,检测ＬＭＰ１的表达,观察细胞的生长状态,生长速率,在软琼脂中的集落形成能力及对裸鼠的致瘤能力。     

H—ras癌基因与肝癌转移行为的关系探讨

我们应用基因转移技术,研究了Ｈｒａｓ癌基因对肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１细胞转移的影响,以探讨Ｈｒａｓ基因与肝癌转移行为的关系。１　材料与方法１．１　材料载体质粒ＰＳＶ２ｎｅｏ及载有活化的Ｈｒａｓ基因的重组质粒ＰＳＶ２ｎｅｏｒａｓ由上海复旦大学生物物理系惠赠,人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１由本所细胞室提供。磷酸钙转染试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司。ＤＡＣＤｐ２１ｒａｓ抗体购自Ｓｉｇｍａ公司,它可特异性识别ｐ２１ＨｒａｓＣ末端１２６～１４０氨基酸区域ｃⅣａｓｅ抗体,ＥＧＦＲ抗体购自Ｏｎｃ…     

维甲酸对喉癌细胞株Hep－2的生长及癌基因的抑制作用

为了探索维甲酸用于喉癌保守治疗的可能性，我们研究了它在体外对人喉癌细胞株Ｈｅｐ－２的生长抑制作用及癌基因的变化。结果表明，维甲酸浓度为４～８μｍｏｌ／Ｌ时抑制率可达３５．４％，并使Ｈｅｐ－２细胞的软琼脂克隆形成率降至对照的１９．５％；核酸探针杂交表明，细胞经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸处理３天后Ｃ－ｍｙｃ平均拷贝数由９．２降至１．２，Ｃ－ｍｙｃ及ｃ－Ｈａ－ｒａｓ的ＲＮＡ水平分别降至对照的１５．３％和５０．５％；ｃ－ｅｒｂＢ－２基因处理后无显著变化。上述结果说明，维甲酸在体外对喉癌细胞株Ｈｅｐ－２的生长有明显抑制作用且与Ｃ－ｍｙｃ及ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的调控有重要关系。     

GENE THERAPY RESEARCH IN CHINA

ＧＥＮＥＴＨＥＲＡＰＹＲＥＳＥＡＲＣＨＩＮＣＨＩＮＡＣａｏＸｕｅｔａｏ１曹雪涛ＺｈａｎｇＷｅｉｐｉｎｇ１章卫平ＧｕＪｉａｎｒｅｎ２顾健人１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓ...