急性寒冷刺激诱导小鼠米黄色脂肪细胞 形成方法的建立

目的：建立急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法。方法：连续3天每天4 h预冷刺激使小鼠适应寒冷环境,然后持续24 h进行急性寒冷刺激,诱导小鼠皮下脂肪中米黄色脂肪细胞形成。采用免疫组化检测皮下脂肪中Ucp1阳性细胞,荧光定量PCR检测米黄色脂肪细胞标志性基因Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea的转录,Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Prdm16和Ucp1的表达。结果：急性寒冷刺激后小鼠皮下脂肪中Ucp1阳性细胞数量明显增加,Ucp1、Prdm16、Pgc1α、Cidea转录明显上调,Prdm16、Ucp1蛋白表达明显升高。结论：本研究建立的急性寒冷刺激诱导小鼠皮下米黄色脂肪细胞形成的方法可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制的研究。     

他汀类药物治疗骨质疏松症研究

随人口老龄化而来的骨质疏松引起各国政府及卫生部门的极大关注,过去由于缺乏刺激骨形成的药物,治疗方法主要以提供钙剂和维生素D3以及抑制骨吸收等为主,近期研究发现他汀类药物可通过促进骨形成蛋白2表达诱导成骨细胞分化、抑制骨髓基质细胞成脂分化等机制刺激骨形成。基础研究及临床实验均提示他汀类药物可提高骨密度,并降低骨折危险性。但还需要更大规模的临床试验研究来证实。     

子宫腺肌瘤淋巴浸润刺激形成淋巴瘤

子宫平滑肌瘤淋巴浸润是一种罕见的疾病,可刺激形成恶性淋巴瘤,到目前为止仅有9报道。本文首次报道1例子宫腺肌瘤淋巴浸润刺激形成淋巴瘤。标本切取自1例30岁的中国妇女,是一个5cm×5.5cm×5.5cm大小、界限清楚的实性结节。剖面与腺肌瘤相似,内含深棕色的斑点和小囊。显微镜下可见平滑肌细胞与大量淋巴细胞混杂在一起。有许多位于薄壁血管一侧并突入其中的淋巴滤泡。肿瘤中还可见子宫内膜样腺体和间质。本例为子宫腺肌瘤淋巴浸润刺激形成淋巴瘤的首次报道。子宫腺肌瘤淋巴浸润刺激形成淋巴瘤@张虹     

粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子的研究概况

早在1965年,Pluznik,DH和SachsL在研究中就发现,某些生长因子能刺激肥大细胞形成集落,根据此功能就将这类因子称为集落刺激因子,(Colony Stimula—ting Factors—CSF)。后来发现集落刺激因子可分为四类:多集落刺激因子(Mulit—CSF,又称白细胞介素3)、粒细胞—巨噬细胞集落刺激因于(Granulocyte—Macrophagc CSF,GM—CSF)、粒细胞     

80 Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱行为形成的影响

目的:探讨80 Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱形成的影响.方法:雄性SD大鼠30只,随机分为吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组、正常对照组,每组各10只.3组大鼠分别在不同条件下进行条件性位置偏爱实验,其中吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组分别进行预测试、手术、训练、刺激、测试5个阶段实验,正常对照组进行预测试、手术、训练、测试4个阶段实验;在训练阶段,吗啡-刺激组和吗啡-假刺激组每天交替注射吗啡和生理盐水各1次,正常对照组每天注射2次生理盐水;在刺激阶段,吗啡-刺激组采用80 Hz电刺激伏隔核,吗啡-假刺激组不刺激伏隔核.分别记录预测试和测试阶段3组大鼠在白箱内平均停留时间,并给予比较.结果:吗啡-假刺激组训练后,在白箱内平均停留时间明显长于训练前和同期的正常对照组(P＜0.01),吗啡诱导的心理依赖模型建立成功.吗啡-刺激组在伏隔核刺激条件下完成条件性位置偏爱训练后,在白箱停留时间长于吗啡-假刺激组(P＜0.01),表明电刺激伏隔核显著强化了大鼠的觅药行为.结论:80 Hz电刺激大鼠双侧伏隔核可明显地促进吗啡诱导的位置偏爱行为的形成,表明该频率电刺激可强化吗啡诱导的心理依赖.     

集落刺激因子在肿瘤治疗中的应用

已经证实,多种激素可在体外刺激造血祖细胞生长形成集落,在体内对造血有一定的生理调控作用。这些激素包括能在体内刺激红系增生的红细胞生成素(Epo)和能在     

“血瘀”病理模型探索(一)

依据中医内伤忧怒及外感寒邪可致“血瘀”的理论建立“血瘀”实验模型。通过血液流变学方法测定其血粘度和红细胞电泳的变化。 对大白鼠皮下注射Adrenaline 0.1％～0.2ml每日二次,并在其间进行一次冷刺激(冰水)5min以形成“血瘀”。在处置一日或二日后形成模型。血液增粘、增浓、易凝。 单用冷刺激不能形成“血瘀”。单纯注射Adr只能使血液增粘、增浓,但不易凝。     

单克隆抗体HIP_2有明显刺激造血祖细胞增殖的作用

我们曾报道一种抗人血小板单克隆抗体(McAb)HIP_2能识别GPⅡ_b(M.W.140KD),并有明显刺激血小板引起聚集和释放的功能.并提出基于其对血小板功能的不同影响,可将抗血小板抗体分为刺激型、抑制型和无作用型三种。 最近发现HIP_2 McAb有明显刺激多系造血祖细胞增殖的作用。用半固体培养集落形成技术研究发现,在CFU-E体系中HIP_2有同等或优于红细胞生成刺激素(EPO)的作用。CFU-E集落形成     

激光生物刺激的治疗作用

来自美国得克萨斯的消息,体外试验表明,激光生物刺激可加快伤口愈合并能刺激免疫细胞对抗感染。但如何应用低剂量激光能产生有效的生物调节作用,这一问题缺乏一致的对照研究,且尚待明确,因此难以决定是否会有临床上的希望。体内和体外研究表明,激光生物刺激除增强免疫反应应答之外,还能促进ATP合成和胶原蛋白的合成,促进纤维组织的形成,增加乙酰胆碱的生成以及改变前列腺素水平。激光生物刺激上述作用有临床意义,如伤口的愈合、     

三七总皂甙对兔高胆固醇血清刺激的兔主动脉平滑肌细胞增殖及其释放一氧化氮的影响

目的 :为观察tPNS对HCS刺激的RASMC增殖及其释放NO的影响。方法 :运用兔HCS刺激体外培养的RASMC而形成的细胞异常增殖为模型 ,通过MTT法、电镜观察和Green法 ,观察了tPNS对RASMC的保护作用及其对NO释放的影响。结果 :HCS可明显抑制NO的释放、刺激RASMC增殖并导致其表型的改变 ,而tPNS可诱导NO的释放 ,明显抑制HCS对RASMC的刺激增殖作用 ,与HCS组相比具有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :tPNS抗动脉粥样硬化作用可能部分是通过调节NO的合成而抑制RASMC增殖来实现的。     

体外诱导糖尿病小鼠模型中性粒细胞胞外诱捕网的研究

目的 建立佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成的模型,为研究糖尿病足溃疡NETs产生和调节机制奠定基础。方法 提取链脲佐菌素 (streptozocin,STZ)诱导的糖尿病小鼠骨髓来源中性粒细胞,使用100、200、400nmol/L的PMA刺激细胞 3~7h。采用核酸染料Sytox Green染色胞外DNA,通过激光共聚焦显微镜检测各组网状结构的形成、荧光免疫组化法检测瓜氨酸化组蛋白H₃(citrulline histone H₃, Cit-H₃)的表达、荧光探针测定细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平,电子扫描显微镜下观察NETs 形成情况。结果 各组PMA刺激中性粒细胞,刺激5h形成少量NETs,6h时形成大量网状NETs结构,其中100nmol/L PMA处理组有明显NETs生成,7h时各组NETs开始消退;同时100nmol/L PMA刺激中性粒细胞6h时Cit-H₃的表达以及ROS水平显著升高;扫描电子显微镜可见NETs网状结构。结论 100nmol/L PMA刺激STZ诱导的糖尿病小鼠骨髓中性粒细胞6h,可显著促进Cit-H₃表达和ROS生成,诱导NETs生成,可作为研究糖尿病小鼠NETs研究的模型。     

推拿治疗椎动脉型颈椎病临床研究进展

1　椎动脉型颈椎病的发病机制椎动脉型颈椎病是由于颈椎退行性改变 ,脊柱内外平衡失调 ,压迫或刺激椎动脉及交感神经等 ,引起椎 -基底动脉供血不全为主要临床表现的综合征。其发病机制主要有椎动脉机械压迫学说、交感神经刺激学说、椎间失稳或软组织炎症直接或间接刺激神经 (交感神经、窦椎神经等 )学说三种解释。赵定麟 [1]认为 ,脊椎退变失稳、骨赘形成、椎间隙改变及髓核脱出等可刺激或压迫椎动脉及其周壁上的交感神经而引起椎动脉痉挛、狭窄或折曲改变 ,导致椎 -基底动脉供血不全。李春生[2 ] 分析亦认为 ,颈椎退行性改变可刺激交感干神…     

Pannexins——新发现的机械刺激敏感通道蛋白

多项研究表明,机械应力刺激可以促进体内、外成骨。一定强度和形式的机械应力刺激,可以引起细胞形态变化、细胞突起数量增加、细胞间隙连接（GJ）形成、细胞骨架结构变化等反应;这些机械物理信号会转变为可传递的化学信号,并通过细胞表面及细胞之间的分子通道传递和控制这些化学信号,从而导致应力敏感细胞的各种生理变化发生。     

光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响

目的 探讨光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响。方法 应用体外管腔形成试验(UVA照射剂量分别为0、2.0、5.0 J/cm2)观察光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力的影响,同时应用逆转录链式酶反应及流式细胞术分别检测光化学疗法对内皮细胞整合素mRNA及蛋白表达的影响。试验中根据诱导剂分为bFGF刺激组和PMA刺激组,每组内又根据UVA的剂量(0、2.0、5.0 J/cm2)分为三个亚组。结果 2.0和5.0 J/cm2的长波紫外线联合100 ng/mL的8-MOP可在体外明显抑制内皮细胞的管腔形成能力,并下调整合素mRNA及蛋白的表达。结论 光化学疗法可能通过下调整合素的表达抑制内皮细胞管腔形成能力的抑制效应。     

血管内皮细胞中ABCA1的表达及其在动脉粥样硬化发生中的意义

目的 以人的血管内皮细胞ECV304为靶点,研究Ox-LDL和8-Br-cAMP对ATP-结合盒转运子A1(ABCA1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)基因mRNA和蛋白质表达的影响,阐明ABCA1基因在动脉粥样硬化(AS)形成中的可能机制。方法 复苏培养血管内皮细胞,无血清培养基培养静止12 h后,分别加入Ox-LDL (30 ng/ml)、8-Br-cAMP (0.5 mmol/L)刺激3、6、12、24 h,设未加刺激同时孵育24 h的细胞为阴性对照组,以RT-PCR和Western蛋白印迹法检测ABCA1、ICAM-1及MCP-1 mRNA和蛋白质表达量。结果 血管内皮细胞ECV304在给予Ox-LDL刺激后,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平均增高,ICAM-1的高峰时间在12 h,其余高峰时间在6 h;在8-Br-cAMP的刺激下,ABCA1、ICAM-1、MCP-1的mRNA和蛋白质水平也增高,高峰时间均在6 h。结论 公认的致AS因素Ox-LDL可通过引起血管内皮细胞ECV304中炎性细胞因子ICAM-1、MCP-1 mRNA及蛋白质水平增加,参与AS的形成,同时抗AS基因ABCA1在Ox-LDL刺激下代偿增加,具有AS保护作用。cAMP不仅可增加ABCA1的表达,而且可增加ICAM-1、MCP-1表达。     

在造血中细胞的交互作用

体外培养造血细胞,已提供了在血液形成细胞之间有决定意义的交互作用的一些新知识。已表明淋巴细胞亚群可产生集落刺激因子,并与巨噬细胞交互作用,同时它对红细胞生成的最早阶段有重要作用。巨噬细胞在其它造血细胞的分化和增殖方面具有各种影响。原始多能造血干细胞有形成粒细胞、红细胞、免疫细胞所有血液成分的能力。通过小鼠红细胞和粒细胞系的干细胞,可在被照射的与其相同遗传基因的受休中形成遣血脾集落的能力,这些干细胞可被检验出来。因此,干细胞常被称为 CFU——S 脾集落形成     

牛膝多糖促进骨髓细胞粒细胞集落形成

目的探讨中药牛膝来源的多糖刺激粒细胞集落形成的能力.方法使用软琼脂培养体系,培养骨髓造血干细胞,设置粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、牛膝多糖(APP)、G-CSF和APP联合作用实验组以及对照组(0.1ng/ml G-CSF),分别检测有效集落数.结果 G-CSF联合APP能有效促进粒系集落形成单位(CFU-G)的形成,与G-CSF单独作用相比差异显著(P＜0.05).0.8mg/ml APP对CFU-G的刺激形成作用与1ng/ml的G-CSF相似.结论 APP具有刺激粒细胞集落形成的能力,并与G-CSF有明显的协同作用,有望成为一种有效的粒细胞刺激因子.     

牛膝多糖促进骨髓细胞粒细胞集落形成

目的探讨中药牛膝来源的多糖刺激粒细胞集落形成的能力.方法使用软琼脂培养体系,培养骨髓造血干细胞,设置粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、牛膝多糖(APP)、G-CSF和APP联合作用实验组以及对照组(0.1ng/ml G-CSF),分别检测有效集落数.结果 G-CSF联合APP能有效促进粒系集落形成单位(CFU-G)的形成,与G-CSF单独作用相比差异显著(P＜0.05).0.8mg/ml APP对CFU-G的刺激形成作用与1ng/ml的G-CSF相似.结论 APP具有刺激粒细胞集落形成的能力,并与G-CSF有明显的协同作用,有望成为一种有效的粒细胞刺激因子.     

CH50多肽对IFN-γ基因转染癌细胞体内生长及免疫刺激作用的影响

探讨重组FN多肽CH50对IFN-γ基因转染癌细胞体内生长及免疫刺激作用的影响。将小鼠IFN-γ基因转染黑色素瘤B16/Fl细胞,测定其表达产物与CH50协同刺激巨噬细胞产生NO的作用、转染细胞接种小鼠并注射CH50时对脾细胞的免疫刺激作用及瘤细胞的体内生长特性。结果表明,转染细胞表达产物可与CH50协同作用刺激巨噬细胞产生NO。转染细胞表达IFN-γ水平较低,仍可在体内形成肿瘤,注射CH50能够抑制其形成肿瘤。基因转染细胞和CH50能够促进脾细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。研究表明,CH50不仅可以提高肿瘤疫苗的安全性,也可以提高肿瘤疫苗刺激机体免疫系统的作用。并提示,表达CH50和IFN-γ双因子的肿瘤疫苗可为提高肿瘤疫苗治疗肿瘤的效果开辟新的途径。     

VEGF及其受体家族与白血病

血管内皮生长因子(VEGF)是一类能促进内皮细胞分裂增殖、促进新生血管的形成、提高血管通透性的生长因子。它与细胞表面的血管内皮生长因子受体结合，通过激活酪氨酸激酶信号转导途径发挥功能。血管内皮生长因子可直接刺激白血病细胞的增殖、生长，也可通过刺激血管内皮细胞增殖，间接促进白血病细胞的增殖、生长。目前，国内外已进行很多相关研究，现给予简要综述。