海嘧啶对细胞膜功能及细胞凋亡影响的研究

[目的]研究海嘧啶对细胞膜功能以及肿瘤细胞凋亡的影响,阐明海嘧啶抗肿瘤作用机制。[方法]海嘧啶给予S180、H22荷瘤小鼠,观察其红细胞及肿瘤细胞膜功能变化及肿瘤细胞凋亡的情况。细胞膜功能实验测定红细胞膜免疫黏附肿瘤细胞能力、红细胞膜和肿瘤细胞膜上唾液酸含量、红细胞膜和肿瘤细胞膜的封闭度。细胞凋亡实验用流式细胞仪检测细胞分期和凋亡细胞的比例。[结果]海嘧啶对肿瘤细胞和红细胞膜功能均有影响,主要表现在:使荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力有明显提高;可提高红细胞膜唾液酸含量而降低肿瘤细胞膜唾液酸含量;可提高红细胞膜封闭度的同时降低肿瘤细胞膜的封闭度。海嘧啶具有一定程度上的诱发细胞凋亡的作用,不同剂量海嘧啶对细胞周期有不同的影响,小剂量海嘧啶使肿瘤细胞主要集中在G0-G1期,随着剂量的加大,停滞于G2-M期的肿瘤细胞增多。[结论]海嘧啶抗肿瘤作用机制存在多种途径,体现在提高红细胞免疫功能、降低肿瘤细胞膜功能和具有一定程度的诱发肿瘤细胞凋亡的作用。     

龙葵碱对H22荷瘤小鼠细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响

目的观察龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响。方法采用荧光探针DPH标记法测定肿瘤细胞膜流动性，考马斯亮蓝法测定肿瘤细胞膜蛋白水平。结果龙葵碱可显著降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性，降低H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白水平。结论龙葵碱是通过影响肿瘤细胞膜的流动性和肿瘤细胞膜上的蛋白水平恢复细胞的正常生理活性而达到抗肿瘤作用。     

龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸和封闭度的影响

目的研究龙葵碱对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜唾液酸(SA)水平和封闭度的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型,荷瘤小鼠分别sc生理盐水、环磷酰胺、龙葵碱(9.375、18.75、37.5mg/kg)。采用比色法测定H22小鼠肿瘤细胞膜SA水平和封闭度。结果龙葵碱可剂量依赖性地降低荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度。结论龙葵碱通过降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜SA水平和肿瘤细胞膜封闭度起抗肿瘤作用。     

海嘧啶对H22小鼠完整细胞膜脂流动性及人胃腺癌细胞内DNA含量影响的研究

目的 研究海嘧啶对H22荷瘤小鼠红细胞膜的影响以及对人胃腺癌细胞DNA合成的影响。方法 采用荧光分光光度法及激光扫描共聚焦显微镜进行研究。结果 海嘧啶可使荷瘤小鼠红细胞微粘度下降,膜脂流动性升高,体外实验对胃腺癌细胞内DNA荧光强度降低,DNA合成减少。结论 海嘧啶可改善荷瘤机体的血液循环,提高红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力,同时通过影响肿瘤细胞内DNA的合成发挥抗肿瘤作用。     

龙葵多糖对红细胞CR1数量及S180A和H22荷瘤小鼠机体红细胞免疫力的影响

 目的 研究龙葵多糖对S₁₈₀及H₂₂荷瘤小鼠红细胞补体受体1（CR1）数量及活性的影响,探讨龙葵多糖抗肿瘤作用的红细胞免疫机制。方法 采用体内移植S₁₈₀和H₂₂肿瘤细胞株造模的方法,评价龙葵多糖的体内抗肿瘤疗效;红细胞免疫花环实验检测红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;CR1单克隆抗体标记,流式细胞术检测荷瘤小鼠红细胞CR1数量;酵母多糖免疫黏附荷瘤小鼠红细胞的能力评价荷瘤小鼠红细胞CR1受体的活性;比色法测定荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量。结果 龙葵多糖能够抑制S₁₈₀荷瘤小鼠实体瘤生长,延长H₂₂荷瘤小鼠生存时间;提高荷瘤小鼠红细胞免疫花环率（DTER）;增加荷瘤小鼠红细胞CR1受体的数量和活性;增加荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量。结论 龙葵多糖通过提高荷瘤小鼠红细胞膜上唾液酸含量,进而提高CR1的活性和数量,改善和提高荷瘤小鼠红细胞免疫黏附能力,发挥抗肿瘤的作用。     

芦荟多糖对S180小鼠红细胞膜功能的影响

目的　研究芦荟多糖对S180 荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响。方法　采用荧光分光光度法、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳以及唾液酸试剂盒分别测定S180 小鼠红细胞膜脂流动性、膜交联蛋白、带 3蛋白以及膜唾液酸 (SA)含量。结果　两种芦荟多糖各剂量组均能不同程度地提高S180 荷瘤小鼠降低的红细胞膜脂流动性、带 3蛋白和SA的含量 ,降低红细胞膜交联蛋白的含量 ,且中剂量均非常显著 (P <0 0 1)。结论　芦荟多糖对S180 荷瘤小鼠红细胞膜功能具有促进作用 ,这可能是芦荟多糖抗肿瘤作用的主要机制之一。     

龙葵碱对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的探讨龙葵碱对S180及H22荷瘤小鼠红细胞免疫功能的作用。方法观察S180荷瘤小鼠和H22荷瘤小鼠的红细胞免疫黏附肿瘤细胞能力,采用DPH荧光探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P),并计算膜的微黏度(η)研究红细胞膜脂流动性(LFU)。结果龙葵碱能升高S180和H22荷瘤小鼠的红细胞黏附肿瘤细胞的花环率,提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性。结论龙葵碱可能是通过提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性,从而恢复荷瘤小鼠红细胞免疫功能进而达到抗肿瘤作用。     

H22肝癌荷瘤小鼠辨证论治操作规程的研究

目的构建早期常见证候肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程。方法采用小鼠计量化辨证方法,从大量荷瘤小鼠中筛选出邪毒壅盛、气虚、肿瘤居中等证候荷瘤小鼠,分为对照组与治疗组,对治疗组进行对症治疗;综合带瘤生存时间等计量化辨证指标,对辨证论治方案进行评价。结果构建起早期常见证候肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程,观察到3种辨证论治方案在带瘤生存期及常见证候等方面的疗效差异。结论所构建的肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程是可行的。     

螺旋藻多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及红细胞免疫功能的影响

目的 研究螺旋藻多糖对 S₁₈₀ 荷瘤小鼠的抑瘤率及对红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、唾液酸 (SA) 活性的影响,以此来评价螺旋藻多糖对红细胞的免疫作用。方法 使用紫外检测的方法考察不同剂量螺旋藻多糖 (200、100、50 mg/kg) 对 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞 SOD、CAT、SA 活性的影响。结果 与阴性对照组比较,螺旋藻多糖能明显抑制肿瘤生长,抑瘤率均在 30% 以上,其中高剂量组 (200 mg/kg) 效果最好,达到 59.26%,并提高 S₁₈₀ 荷瘤小鼠 SOD、CAT、SA 的活性。结论 螺旋藻多糖提高了 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞 SOD、CAT、SA 活性,这可能是增强 S₁₈₀ 荷瘤小鼠红细胞免疫作用的物质基础,是螺旋藻多糖抗肿瘤作用的免疫机制之一。     

芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响

[目的]考察芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响.[方法]芦笋多糖对S180小鼠腹腔注射给药7d,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量,采用试剂盒测定红细胞膜磷脂、胆固醇和唾液酸含量,荧光偏振法结合探针1,6一二苯-1、3、5己三烯测定红细胞膜流动性.[结果]芦笋多糖能增加S180小鼠红细胞膜表面带3蛋白、血型糖蛋白A的含量;升高S180小鼠红细胞膜磷脂含量,降低胆固醇含量;增加S180小鼠红细胞膜表面唾液酸含量;提高S180小鼠红细胞膜流动性.[结论]芦笋多糖可以改善S180小鼠红细胞膜组分的异常变化,从而保持细胞膜的流动性,恢复红细胞的结构和功能.     

苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的体外抑制作用

组织损伤修复是人体自我保护的一个正常病理过程,而过度修复则会出现组织纤维化,影响组织、器官的正常功能,人增生性瘢痕是创伤过度修复的异常结果。苦参碱(matrine,Mat)广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中,近年研究发现其具有较强的抗组织纤维化作用[1],目前关于Mat对人增生性瘢痕成纤维细胞(下文简称为成纤维细胞)作用的报道较少。本实验以成纤维细胞为靶细胞观察不同质量浓度的Mat在体外对该细胞增殖的影响,并对其抗纤维化作用机制进行初步研究。1材料与仪器苦参碱标准品(中国药品生物制品检定所提供);DMEM培养基(Gibco公司产…     

海嘧啶抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究海嘧啶的抗肿瘤作用。方法 采用MTT实验和集落形成实验观察海嘧啶的体外抗肿瘤作用;通过海嘧啶对FC小鼠和S180、H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的研究,观察了海嘧啶的体内抗肿瘤作用。结果 海嘧啶对8种人癌细胞具有一定的杀伤作用,以对BGC-823、Eca-109、HCT-8细胞的抑制作用最强;对BGC-823、Eca-109、HCT-8细胞的集落形成有明显的抑制作用,以对Eca-109细胞集落形成抑制作用最强;可明显抑制FC小鼠和S180小鼠瘤体的生长,明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间。结论 海嘧啶由中药复方和5-Fu两部分复合而成,其抗肿瘤作用与二者相比具有明显的协同作用．倬抑瘤率大幅度提高．     

参麦注射液在荷瘤小鼠的被动皮肤过敏试验

目的:通过在荷瘤小鼠进行被动皮肤过敏试验,研究参麦注射液在荷瘤小鼠的过敏情况。方法:按照《中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏反应)研究的技术指导原则》设计,对不同剂量的参麦注射液进行被动皮肤过敏试验。结果:阳性组及低剂量组均出现1例阳性蓝斑,高剂量组、低剂量组及阴性组过敏反应阳性率无明显差异;高剂量组及低剂量组IgE均明显高于阴性组,但高剂量组与低剂量组之间IgE无统计学差异。结论:参麦注射液在荷瘤小鼠中的安全性较好,其过敏反应的发生可能与个体差异有关。     

薯蓣皂苷元对灌胃FT-207荷瘤小鼠的减毒作用

目的:研究薯蓣皂苷元(D iosgen in,D io)对替加氟(FT-207)抗肿瘤的增效减毒作用。方法:以小鼠MFC,HepA,H22和S180移植性肿瘤为模型测定其抑瘤率、生命延长率及荷瘤小鼠的免疫功能。结果:薯蓣皂苷元对小鼠MFC有明显的抑瘤作用,能提高巨噬细胞的功能,血清溶血素的含量。结论:薯蓣皂苷元可增加替加氟的抑瘤效果,提高机体免疫功能,减轻化疗毒副反应。     

黑木耳多糖对荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响研究

目的:研究黑木耳多糖对荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响.方法:通过细胞培养观察黑木耳多糖对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖和IL-2产生的影响,并利用激光共聚焦显微镜检测其对荷瘤小鼠淋巴细胞内游离钙离子浓度的影响.结果:黑木耳多糖能提高荷瘤小鼠的生存时间;黑木耳多糖可以全面提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能:包括提高淋巴细胞的增殖;提高IL-2的产生;提高淋巴细胞内钙离子浓度.结论:黑木耳多糖具有一定的抗肿瘤作用,此作用与调节机体的细胞免疫功能有关.     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠血管生成相关因子的影响

目的 探讨消癌解毒方对H22荷瘤小鼠移植瘤血管生成相关因子及蛋白的影响。方法 建立H22荷瘤小鼠腹水瘤株体内移植肿瘤模型,空白组每日生理盐水灌胃,消癌解毒方低、中、高剂量组每日10,30,90 g?kg _-1灌胃,顺铂组每日1 g?kg _-1腹腔注射给药,连续给药10 d,记录瘤体体积及移植鼠体重。给药结束,取瘤体组织,称重,计算各给药组的肿瘤抑制率;通过肿瘤组织的全基因组表达谱芯片,Elisa、qRT-PCR、Western-blot观察各给药组对移植瘤的血管生成因子及相关基因STAT1、VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2的影响。结果 与空白组比较,顺铂组及消癌解毒方低、中、高剂量组移植瘤小鼠瘤体重量显著降低（P < 0.05）,VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2细胞因子水平显著降低（P < 0.05）;qPCR、western-blot实验结果表明,与空白组比较,消癌解毒方各剂量组STAT1基因及蛋白表达能够显著升高,VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2基因、蛋白的表达显著下降,差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论 消癌解毒方能够有效抑制H22荷瘤小鼠移植瘤生长,其中抑制肿瘤血管新生是其可能的作用机制之一。