新型杂化介孔硅胶色谱固定相的制备及应用

采用1,2-二（三乙氧基硅基）乙烷和胺丙基三乙氧基硅烷为双硅源,阳离子表面活性剂十八烷基三甲基氯化铵（C₁₈ TAC）为模板,在碱性条件下成功制备了一种新型胺丙基杂化介孔硅胶（APMO）。经粉末X-射线衍射法、傅里叶-红外光谱法和扫描电子显微镜等表征方法证明,APMO具有良好的单分散性微球形貌、有序介孔、比表面积大等优点,并将该介孔材料直接用作色谱固定相并进行色谱性能分析。结果表明,APMO自制柱通透性良好,能够有效分离3种多环芳香族化合物,在快速分离分析方面具有一定的优势。     

毛细管电色谱高速分析用的固定相制备

制备了次微米粒径的、适用于制备毛细管电色谱柱使用的键合相固定相 ,制备过程为以sol gel方法从四乙氧基及乙烯基三乙氧基取代硅烷混合物出发 ,得到键合了乙烯基的无机 有机杂合体硅胶颗粒 ,利用这种基质进一步制得将带有甲氧基取代基的聚苯乙烯 二乙烯基苯交联键合相包覆的固定相。将所制得的固定相填充进 0 .32mm内径的毛细管中 ,对所制得的毛细柱作性能检查时 ,发现在这种固定相上 ,所获得的分析速度比以前所获得的高数倍。在类似的、但其上包覆的是不带甲氧基的苯乙烯聚合物、称为“正常”的同类固定相上 ,尽管所加的电压为 1 5kV ,在 3.9min的时间内不保留的组分硫脲才流出色谱柱 ,苯、甲苯和萘分别在 4.9、5 .1和 6.32min时流出。而在包覆了含甲氧基苯乙烯聚合物的固定相上 ,所采用的是低得多的电压 ( 7.5kV) ,但在长度一样的柱上各组分在不到 1min的时间内就全都出峰了 (硫脲、苯、甲苯和萘的保留时间分别为 0 .5 3、0 .62、0 .69和 0 .79min ;所以这种高速分析用的毛细管电色谱固定相可以提供高数倍的分析速度 (上述的 4种溶质在 2种不同的固定相填成的柱上保留时间之比分别为7.3、7.9、7.4和 8.0 )。在包覆了含甲氧基苯乙烯聚合物的固定相上可以在远远低于“常规”的电场强度下导致较大的电渗     

药物分析色谱固定相环糊精聚合物的合成研究

以环氧氯丙烷成交联剂合成了一种非水溶性β－环糊精聚合物,最佳反应条件：ｎ（β－环糊精）：ｎ（环氧氯丙烷）＝１：１２．１,反应温度严格控制在６４～６６℃,反应２４ｈ,通过对聚合物结构分析,β－环糊精聚合物仍保留了β－环糊精分子原有的空腔结构。通过对聚合物质的考察,该聚合物可望成为一种较好的药物分析色谱固定相。     

高效液相色谱中的手性配体交换型手性固定相

当前,手性化合物的拆分在许多领域,特别是在制药行业,已成为热点.由于手性化合物的对映体的物理、化学性质相同,因而实现它们的分离就比较困难,如大多数氨基酸都有右旋体和左旋体,但往往只能获得右旋体和左旋体的混合物,即外消旋体.对于手性药物往往呈现一种对映体(R)具有强的生物活性和药效,而另外一种对映体(S)却无药效,甚至有着很大的毒副作用,因此对手性化合物对映体的拆分就成为迫切的任务[1-3].     

化学酶法制备D—苯甘氨酸

对化学酶法制备Ｄ－苯甘氨酸工艺进行了研究。利用荧光假单胞菌９８０６作为酶源,将ＤＬ－苯海因生物转化为Ｎ－氨基甲酰－Ｄ－苯甘氨酸,后者与亚硝酸钠反应生成Ｄ－苯甘氨酸,收率为４７．５％。     

气相色谱毛细管柱的制备与发展

本文介绍了气相毛细管色谱柱发展过程和特点，并着重介绍了毛细管色谱柱的柱材料、常用固定相及毛细管柱改性和涂渍技术，在涂渍方法中主要介绍了动态涂渍法、静态涂渍法以及新发展起来的溶胶-凝胶涂渍技术。     

高效液相手性固定相环糊精及其衍生物

1　前言对映异构体具有相同的物理和化学性质。但在生物系统中由于酶、受体和载体蛋白的相互作用不同 ,对映异构体可能具有完全不同的行为 ,这会造成对映异构体生物活性的明显差异 ,以及其在分布、代谢和排泄方面的差异。更有甚者 ,两者可表现不同的药理作用。如治疗心率失常的药物索他洛尔 ,进一步的分离表明 ,其Ｌ构型能够阻断β 受体 ,而其Ｄ构型为钾通道阻滞剂 ,能够延长心肌细胞的动作电位时程 (ＡＰＤ)。所以 ,对于手性药物或代谢产物 ,若能够区分它们的立体化学形式 ,将是非常有用的。采用ＨＰＬＣ法拆分对映异构体的方法分为 :间接…     

高效液相色谱手性固定相拆分酒石酸美托洛尔对映体条件的优化

目的：建立高效液相色谱手性固定相拆分酒石酸美托洛尔光学异构体的方法。方法：以正已烷、异丙醇和二乙胺为流动相，用Chiralcel OD-H手性固定相成功拆分了β1受体阻断药酒石酸美托洛尔对映体，并对流动相组成、柱温及流速等条件进行了优化。结果：优化的色谱条件为：正已烷-异丙醇-二乙胺（65：35：0．1，v／v／v）；柱温：25℃；流速：0．5mL／min，该条件下的分离因子为1.82．两对映体在5.005～260mg／L的浓度范围内，以药物浓度为纵坐标，峰面积为横坐标进行线性回归，r=0．9997。结论：该方法拆分及测定两对映体简单，可靠。     

键合型纤维素手性固定相的制备及应用

目的： 制备键合型纤维素手性固定相,并用于手性药物分析。方法： 合成了纤维素10-十一碳烯酰酯/3,5-二氯苯基氨基甲酸酯衍生物,通过自由基聚合反应,将其键合于烯丙基硅胶上,得到手性固定相,并对手性药物进行色谱分离。考察了流动相系统对色谱分离的影响。结果： 吡喹酮等4种对映体化合物得到较好分离。结论： 得到的手性色谱柱对溶剂稳定性好。     

液晶作为气相色谱固定液的研究

本文总结了作者近年的研究工作。内容包括液晶固定液选择性规律的探讨,液晶色谱柱制备方法的探索,及应用液晶柱分离各种二元取代苯异构体、二甲酚和三甲酚异构体、煤焦油各馏分。所获得的令人满意的分离结果,说明了液晶固定液的独特选择性。     

一种具备巯基点击化学功能的二硫代酯RAFT链转移剂的合成

以2,2-二硫二吡啶,2 巯基乙醇为原料,醋酸为催化剂,合成了2-羟乙基-二硫吡啶(PⅠ)。以PⅠ、4-氰基-4-(硫代苯甲酰)戊酸(PⅡ)为原料,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,合成了一种新的可逆加成 断裂链转移自由基聚合(RAFT)链转移剂4-氰基-4-(硫代苯甲酰)戊酸-2-二硫吡啶乙酯(PⅢ)。以PⅢ为RAFT链转移剂,偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂,甲基丙烯酸甲酯(MMA)为单体,采用RAFT制备了聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）。用1H-NMR分析了链转移剂的的分子结构,用GPC测得PMMA聚合物的分子量及其分布。结果表明：能用于巯基点击化学的二硫吡啶基团被接到PⅡ的末端,成功制备了一种具备巯基点击化学功能的二硫代酯RAFT链转移剂(PⅢ),利用PⅢ,通过RAFT聚合制备了分子量分布狭窄的PMMA聚合物。     

3,4-二氯-万古霉素手性固定相拆分克伦特罗和马布特罗对映体

目的在极性流动相条件下,用自制的3,4-二氯-万古霉素手性柱拆分克伦特罗和马布特罗对映体.方法流动相组成为甲醇,添加不同的冰乙酸和三乙胺,观察了流动相中不同的酸碱添加剂,以及不同流速与柱温对拆分对映体的影响.结果当流动相条件为甲醇:冰乙酸:三乙胺=100:0.05:0.05(V:V:V),流速为1 mL/min时,克伦特罗和马布特罗的选择因子分别能达到1.232和1.299,分离度分别为1.006和1.015.结论在自制的3,4-二氯-万古霉素手性柱上克伦特罗和马布特罗得到了较好的分离.     

ICAM-1表位模拟肽的合成与鉴定

目的对合成的ICAM-1模拟肽P1(KLYLIAEGSVAA)的抗原性及生物活性进行鉴定。方法化学合成ICAM-1模拟肽KLYLIAEGSVAA,以间接ELISA及竞争抑制试验鉴定合成肽的抗原性,以玻片免疫组化方法鉴定合成肽的生物活性。结果合成肽能与抗ICAM-1单抗15．2发生特异性结合,并且能够竞争抑制ICAM-1分子及相应的阳性噬菌体克隆与单抗15．2的结合作用。玻片免疫组化显示合成肽及ICAM-1分子均能有效抑制相应的阳性噬菌体展示肽与白细胞的结合。结论合成的短肽具有ICAM-1与15．2抗体结合的抗原性,并能有效模拟ICAM-1分子与白细胞结合的功能。     

KA8肽的合成及其对五肽胃泌素刺激大鼠胃液分泌的抑制作用

胃酸分泌调节肽是一个37肽。1-29肽段即为胰高糖素,而C-端8肽称为KA8。用固相法合成了此八肽,并观察了它的生物活性。实验结果表明五肽胃泌素能明显刺激胃酸分泌,但这种刺激作用可被预先给予的KA8所抑制,因此,KA8可能是一种胃酸分泌调节肽。     

基于点击化学反应的聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物的合成及其表征

聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物在合成上存在过量的聚乙二醇难以后处理的困难,利用点击化学反应能够简单有效的解决这个问题。以天然的壳聚糖为原料,首次通过溴丙炔的卤代反应在其2-NH₂上引入炔基得到炔基化壳聚糖,再通过点击化学反应（一价铜催化的叠氮基与端基炔的1,3-环极化反应）将叠氮化单甲氧基聚乙二醇与炔基化壳聚糖合成为一系列聚乙二醇壳聚糖接枝共聚物。通过¹H NMR、FT-IR对其结构进行表征,通过差示扫描量热法（DSC）及热重分析（TG）对其物理性质进行表征。共聚物结构经¹H NMR、FT-IR确证正确。通过¹H NMR测定共聚物中聚乙二醇取代度约11%,DSC证明共聚物的结晶度降低,TG证明共聚物的热稳定性提高,该类共聚物有望作为药物载体材料。     

C8修饰的胺丙基有序杂化介孔硅胶的制备及其性能研究

目的建立胺丙基杂化介孔硅胶(APMO)表面键合修饰的方法,并对C8修饰的胺丙基介孔硅胶(C8-APMO)进行色谱和吸附性能研究。方法采用共缩聚法制备氨丙基杂化介孔硅胶,后嫁接法对介孔硅胶进行C8修饰,采用元素分析,红外光谱等方法进行表征,吸附和液相方法进行性能测试。结果 C8成功地键合到了AP-MO上,C8-APMO具有大的比表面积(765m2/g)、孔径3.9nm,对苦参素的吸附性能优于商品硅胶,用作色谱固定相,有效分离了3种芳香类化合物苯胺、甲苯和蒽。结论作为吸附和色谱材料,C8-APMO具有较好的应用前景。     

Magainin-Aurein杂合肽基因的合成与克隆

目的:构建抗菌肽Magainin-Aurein杂合肽基因,并将M-A杂合肽基因克隆到载体pUC18上.方法:根据已报道的抗菌肽Magainin-2和Aurein1.2基因的氨基酸序列,推导出其cDNA序列,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略,分别获得大量完整的Magainin-2和Aurein1.2基因片段.将两者连接为杂合基因并克隆到载体pUC18上.结果:构建了M-A杂合肽基因重组质粒,经PCR扩增、酶切和DNA测序分析表明,杂合肽基因的DNA序列及阅读框完全正确.结论:pUC18-M-A重组质粒构建成功,为进一步亚克隆到表达载体并进行高效表达打下基础,并为其他抗菌肽杂合肽的制备提供了参考.     

慢性心力衰竭患者治疗前后心钠素、脑钠素浓度变化

目的观察慢性心力衰竭患者心钠素、脑钠素浓度改变及卡维地洛对其影响。方法慢性心力衰竭患者50例（观察组）和正常健康人20例（对照组）。采用放射免疫法测定治疗前后血浆ANP、BNP浓度；彩色超声心动图测定左心室射血分数、左心室舒张末期内径等。结果观察组血浆ANP、BNP浓度均高于对照组（P均〈0．01）；临床慢性心力衰竭程度越重，血浆ANP、BNP浓度越高（P均〈0．01）；卡维地洛治疗者与常规治疗者治疗满2w后均有血浆ANP、BNP浓度下降，卡维地洛治疗者血浆ANP、BNP浓度下降更明显（P〈0．05）；而满3个月时卡维地洛治疗者左心室射血分数、左心室舒张末期内径均比常规治疗者明显改善（P均〈0．05）。结论ANP、BNP浓度可以反映心功能状态；卡维地洛可以降低ANP、BNP浓度及改善心脏重构及心功能。     

双亲支链梳形共聚物的合成及其自乳化负载药物性能

通过可逆加成-断裂链转移（RAFT）聚合制备出聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（PGMA）,经过叠氮钠与PGMA环氧基团的反应引入叠氮基和羟基,然后依次通过端炔基聚乙二醇（PEG-alk）与叠氮基的点击反应,己内酯（CL）在羟基存在下的开环聚合反应,获得双亲支链梳形共聚物（PGMA-g-PEG/PCL）。利用该梳形共聚物的两亲性,在氯仿-水混合体系中,进行自乳化高效负载阿霉素（DOX）,得到负载DOX的纳米粒子。利用核磁共振氢谱、红外光谱和凝胶渗透色谱确认了最终产物及其前体聚合物的结构。利用动态光散射、紫外可见分光光度计和扫描电镜研究该载药粒子在pH为7.0和5.0的水溶液中的释放。结果表明：该纳米粒子平均粒径约为100 nm,该粒子能有效释放DOX,在酸性条件下释放速率加快,且伴随PCL的降解。     

A Novel Contraceptive Vaccine： Design and Synthesis of the Chimeric Peptide Containing Multivalent Sperm-Specific Epitopes

Objective To develop a novel multivalent chimeric peptide vaccine for bisexual fertility regulation Materials & Methods On the basis of the amino acid sequence of the two peptides respectively selected from the mouse sperm/testis-specific proteins SP17 and Cyritestin, and one T cell epitope in bovine ribonuclease (RNase), a novel chimeric peptide consisting of 35 amino acid was designed and subsequently synthesized on the 430A peptide synthesizer. After being emulified with the equivalence Freund's adjuvant, the peptide with 35 amino acid residues was used to immunogenity the female BALB/c mice to investigate its immunity.Results The peptide was successfully synthesized, after being purified in high performance liquid chromatography (HPLC), its purity reached 95%. The specific antisera collected from the immunogenity mice could identify the corresponding proteins of testis tissues of mice, rats and human. The highest specific IgG titer in serum was 1:6 000, while the IgA titer in the washing of vaginal mucous membrane was 1:300.Conclusion The antibodies from the peptide with specific amino acid sequence can identify the original antigens, and stimulate powerful specific humoral immunity in mice. It provides a experimental bases for polyvalent contraceptive vaccine study.