抗肾小球基底膜抗体介导肾小球肾炎的肾病综合征

目前,普遍认为有免疫机制参予的肾小球病是由两种主要抗体作用引起的。最多见的是循环性免疫复合物沉积于肾小球基底膜(GBM),由于激活补体而引起组织损     

人抗IgG抗体上的交叉反应性独特型

在类风湿性关节炎和Siogren's综合症患者体内已确定存在高滴度的抗-IgG抗体(类风湿因子,RF),并可能与免疫复合物的形成和组织损伤有关。但在许多正常人血清中也发现了RF。有关在正常和病理状态下RF自身抗体合成的遗传基础仍未确定。为了搞清在许多无     

IL-18在大鼠抗肾小球基底膜肾炎凋亡中作用的研究

目的:探讨IL-18在大鼠抗肾小球基底膜肾炎细胞凋亡中的作用。方法:复制大鼠抗GBM肾炎模型,分别于实验第2、7、14、21和28天,行以下处理:收集24小时尿、血清样本检测大鼠24小时尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;取肾组织经光镜、电镜观察肾组织病理变化;采用TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况;RT-PCR、免疫组织化学和Western blot法分别检测肾组织中IL-18、Fas mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,肾炎模型组24小时尿蛋白、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高(P0.01);光镜和电镜观察到肾小球内可见新月体形成、GBM不规则增厚、足突融合等病变;肾小球内凋亡细胞于第2天开始轻度增加,随后继续增加,于第28天有所减少,但仍维持较高水平;血清IL-18含量第2天开始升高,此后一直维持较高水平;肾组织中IL-18、Fas mRNA和蛋白表达均显著增加(P0.01);且肾炎模型组血清、肾组织IL-18表达与Fas表达均呈正相关(P0.01)。结论:IL-18在大鼠抗GBM肾炎凋亡中发挥重要的促进作用。     

普乐可复防治大鼠抗肾小球基底膜肾炎的实验研究

目的:观察普乐可复(FK506)防治大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的疗效。方法:复制大鼠抗GBM肾炎模型。实验分3组:肾炎+FK506组、肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后6 h内皮下注射FK506注射液(0.5 mg·kg^-1·d^-1), 至第21 d。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第4 d、第14 d和第21 d, 检测大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平, 观察肾组织病理学改变, 以及检测T淋巴细胞转化功能。结果:肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第4d即出现异常蛋白尿, 血清肌酐和尿素氮亦持续上升;肾小球内可见细胞数增加和新月体形成, 肾小管内大量蛋白管型, GBM呈不规则增厚, 足突大片融合;T淋巴细胞转化功能异常。而肾炎+FK506组大鼠上述病变均明显较轻。结论:FK506能够明显改善大鼠抗GBM肾炎的肾功能。     

鼻咽癌抗独特型抗体诱导的体液和细胞免疫应答

目的 探讨抗独特抗体２Ｈ４和５Ｄ３模拟抗原诱导免疫应答的能力。方法 用Ａｂ２免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠获得抗血清,以ＥＬＩＳＡ检测其Ａｂ３,Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ分析其识别抗原的分子质量。用迟发型超敏反应（ＤＴＨ）和淋巴细胞增殖试验,检测Ａｂ２诱发细胞免疫反应的能力。结果 ２Ｈ４,５Ｄ３免疫同系动物产生的含有抗抗蚀特型抗体（Ａｂ３）的抗血清,可特异性地与靶细胞结合。ＦＣ２（Ａｂｌ）和经２Ｈ４免疫的Ａｂ     

抗独特型抗体对小鼠心肌移植耐受的诱导作用

目的探讨抗独特型抗体对小鼠移植耐受的诱导作用.方法以C57BL/6小鼠脾细胞免疫Balb/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1),Ab1交联KLH后,免疫Balb/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2),以之为移植受体,观察Ab2对小鼠心肌移植耐受的诱导作用.结果Ab1交联KLH和弗氏佐剂免疫可以有效诱导抗独特型抗体(Ab2),和对照组相比,Ab2诱导组的小鼠移植物的存活时间明显延长.结论移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型的抗体,可以对小鼠特异性低免疫反应状态起到有效的诱导作用.     

中和抗肾小球基底膜抗体的单链抗体的筛选与鉴定

目的 制备人抗肾小球基底膜(GBM)抗体的特异性人源化单链可变区抗体.方法 采用噬菌体表面展示技术,获得一个与人抗GBM抗体结合活性较强的单链可变区抗体片段的阳性克隆,并对该克隆进行DNA序列测定分析.结果 对噬菌体单链可变区抗体库经过3轮筛选后,与第1轮相比富集了137倍.噬菌体抗体与人抗GBM抗体的结合活性其中有35株克隆ELISA的吸光度较高.对这些噬菌体抗体进行交叉反应后,确定其中有10株交叉反应较弱.确定1株(C31)阳性克隆提取质粒,进行DNA序列测定,大小为750 bp,并符合人源化单链可变区抗体的序列结构.结论 应用噬菌体展示技术成功获得人-抗GBM抗体的单链可变区抗体基因,为临床上治疗Goodpasture综合征奠定实验基础.     

CTLA－4嵌合蛋白对大鼠自身免疫肾小球肾炎的作用

ＣＴＬＡ－４嵌合蛋白对大鼠自身免疫肾小球肾炎的作用［英］／ＫａｚｕｈｉｒｏＮ…／／ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏ－１９９４，２４（６）１２４９～１２５４Ｔ细胞受体与抗原／Ⅱ类ＭＨＣ复合物的相互作用不足以引起Ｔ细胞的最佳活化。Ｔ细胞的最佳活化还需一些协同刺激信号...     

实验性狼疮性肾炎的病理变化:抗肾小球基底膜和抗肾小管上皮细胞的刷状缘抗体在小鼠慢性移植物抗宿主疾病中的作用

慢性移植物抗宿主疾病(GVHD)的病理变化中常伴有肾脏的免疫复合物性炎症损伤。因此人类狼疮性肾炎的组织病理学改变,可用鼠的GVHD 作动物模型。本文介绍     

抗Wistar大鼠抗二硝基苯抗体的独特型抗体的研究——Ⅰ.抗独特型抗血清的制备和鉴定

以DNP-F_γG免疫的Wistar大鼠的脾细胞继承传递给照射过的同系大鼠,得到较多量的个体源性的抗血清。以亲和层折,从中分离得到单相的抗DNP抗体(R A DNP Ab)。用这种抗体免疫豚鼠得到抗血清(GP A Id S),经正常Wistar大鼠的免疫球蛋白(R Ig)吸收后,用ELISA测定其对R A DNP Ab和R Ig的效价,前者明显高于后者,证明了其中含有抗R A DNP Ab独特型的抗体。同时从个体间的交叉反应表明来源于不同免疫次数的个体间的R A DNP Ab具有交叉反应的独特型决定簇。     

自身免疫病最新假说:自身抗体是针对病毒抗体的抗独特型抗体

按照传统说法,病毒感染之所以能诱发自身免疫病,是通过诱发产生交叉反应性抗体、产生改变的自身抗原或通过多克隆刺激而实现的.但是,这些说法对于许多现象不能做出令人满意的解释.为此,作者提出新的假说:与宿主细胞结构发生反应的病毒结构可以刺激宿主产生相应抗体,针对这些病毒抗体的独特型,宿主又可以产生相应的抗独特型抗体.这些抗独特型抗体便是自身抗体.这不仅因为它们是针对自体Ig的抗体,更有意义的,是因为它们和病毒感染后出现的各种自身抗体具有相同的性能.病毒进入易感宿主细胞必须利用细胞的各种结构(如细胞膜受体、多核苷酸合成酶等),才能进入细胞并复制核酸、合成蛋白     

制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案

抗独特型抗体是研究免疫调节的强有力的试剂,而且作为抗肿瘤和抗传染病的疫苗也有着潜在的意义。比较了三种制备大鼠单克隆抗独特型抗体的免疫方案。即先用750μg 纯化的抗恶性疟原虫单克隆抗体作为免疫原。以腹腔和皮下多点免疫雄性Wistar大鼠,基础免疫3次后,接着用以下、三种免     

自身免疫性甲状腺疾病患者血清中抗TG独特型抗体的检测及意义

用6种鼠抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体(h-Tg-mAb)包被,建立了间接ELISA法检测患者血清中的抗TG独特型抗体(A-Tg-Ab_2)。79例甲亢患者有7例阳性,22例桥本氏甲状腺炎患者有5例阳性,40例正常人均阴性。A-Tg-Ab_2在量上与抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG)呈负相关(r=-0.61,P<0.01),提示A-Tg-Ab_2可自然出现于患者血清中,并发挥下调节自身免疫的作用。     

抗肾小球基底膜抗体的抗原决定簇与患者肾损伤程度相关

目的研究抗肾小球基底膜（GBM）抗体的抗原决定簇及其与临床病理表现的关系。方法用辣根过氧化物酶标记的亲和层析纯化的抗GBM自身抗体（APab-HRP）和抗α1、3、5（IV）NC1单克隆抗体（Mab1、3、5）作为识别GBM上不同抗原决定簇的探针,应用竞争性ELISA法测定抗GBM抗体的抗原决定簇。结果59例患者中,58（98．3％）例可抑制Mab3,20（33．9％）例可抑制Mab1,均不抑制Mab5。同一血清对APab．HRP和对Mab3的抑制率呈平行关系（P〈0．01）。不同患者血清抗体对APab．HRP的抑制率与该患者确诊时的血肌酐浓度呈正相关（P〈0．05）。出现少尿或无尿的患者血清抗体对APab-HRP的抑制率较高（P〈0．01）。单纯抗GBM抗体阳性组较合并ANCA阳性组对APab．HRP的抑制率较高（P〈0．05）。是否出现咯血、肾脏病理新月体所占比例、肾转归以及其他临床表现不同的患者,对各种探针的抑制率均无差异。结论抗GBM抗体的主要抗原决定簇位于α3（IV）NC1,但并不完全一致。抗原决定簇的差异可能与肾损害的程度相关。     

抗Wistar大鼠抗二硝基苯抗体的独特型抗体的研究——Ⅱ.应用酶联免疫吸附试验测定抗二硝基苯抗体的独特型

本文以“逆向”ELISA 测定 Wistar 大鼠抗 DNP抗血清中抗体的独特型,即以抗独特型抗体为涂布物来测定抗血清的效价。实验结果表明“逆向”ELISA可以专一地半定量测定大鼠抗 DNP抗血清的独特型,为进一步研究抗独特型抗体对抗体独特型表达的调节作用打下基础。同时,DNP-BSA封闭大鼠抗 DNP抗体的实验初步表明,这抗体的独特型决定簇位于抗体分子的抗原结合部位,至少十分接近抗原结合部位。     

抗人甲状腺球蛋白抗—抗独特型抗体（Ab3）的诱导和鉴定

用抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体（抗ＴＧ－Ａｂ１）免疫家兔，在诱导产生抗－ＴＧ独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ２）同时，诱导产生了抗－抗独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ３）。其特异性经间接ＥＬＩＳＡ、ＴＧ中和抑制试验和抗ＴＧ－Ａｂ２阻断抑制试验证实。     

抗人甲状腺球蛋白抗－抗独特型抗体（Ab_3）的诱导和鉴定

用抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体（抗ＴＧ－Ａｂ１）免疫家兔，在诱导产生抗－ＴＧ独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ２）同时，诱导产生了抗－抗独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｈ３）。其特异性经间接ＥＬＩＳＡ、ＴＧ中和抑制试验和抗ＴＧ－Ａｂ２阻断抑制试验证实。     

大鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

用纯化的小鼠单克隆抗—HBs和纯化的大鼠多克隆抗—HBs免疫LOU/C大鼠,取免疫大鼠脾细胞与IR983F骨髓瘤细胞融合,获得两株(TD_1、TD_2)持续分泌抗—HBs的单克隆抗独特型抗体(抗—Id,Ab_2)杂交瘤细胞系。对TD_2进行了较全面的鉴定,TD_2的Ig类型为IgG,亚类为IgG_(2?),核型分析结果染色体数为65条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,TD_2所分泌的Ab_2既能被不同来源的抗—HBs所中和。又能被HBsAg.所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的TD_2IgG免疫同系大鼠,诱导出了具有抗—HBs活性的抗—抗—独特型抗体(Ab_3)。上述结果证实,TD_2所分泌的单克隆抗体(McAb)是带有HBsAg表位内影像,具有HBsAg免疫源性的抗—HBs的单克隆抗—Id。