青少年慢性每日头痛:患病率、影响和用药过度

目的:调查现场样本中青少年原发性慢性每日头痛(CDH)的患病率、影响和相关药物使用或用药过度情况。方法:在中国台湾地区5所经挑选的中学,对年龄为12～14岁的所有学生进行一项双相CDH问卷调查。CDH受试者在过去一年由神经病学家确诊并访谈。CDH的定义为:头痛频率为≥15d/月,平均头痛时间≥2h/d,持续3个月以上。主要依据头痛疾病国际分类标准(第2版)来确定CDH的亚型。结果:7900例受试者中,有122例(1.5%)患者过去一年的表现符合原发性CDH诊断标准。女孩的患病率高于男孩(2.4%vs0.8%,P<0.001)。在CDH受试者中,有88例(72%)可划分为慢性…     

慢性每日头痛研究进展

慢性每日头痛(chronic daily headache,CDH)是一组每天或几乎每天发生的头痛,其定义为平均每月发作大于或等于15d,持续3个月以上的头痛。CDH可为原发性头痛,其病因和发病机制至今仍不十分明确,也可继发于某些颅内或全身性     

慢性天天头痛的临床特点及用药调查

目的 分析慢性天天头痛(CDH)的临床特征并进行用药调查.方法 研究77例慢性天天性头痛患者的临床表现及其既往用药情况,并进行头痛程度分级、汉密尔顿抑郁及焦虑量表评分.结果 77例CDH患者中,男女比为1: 2.35,CDH分型中TM最多,占53.2%,集中发病在31～50岁,61.04%的患者头痛程度评分为1级,伴焦虑者占64.93%,临床用药不合理情况严重.结论 CDH患者的临床表现、年龄分布较为特殊,并发症多且严重,多数有药物使用过量、使用不合理等情况,非常有必要对该类患者进行宣教.     

自身免疫性垂体炎随访一例

患者女,57岁.因头痛、纳差、乏力1个月,多饮多尿伴发热2周于2008年1月2日第1次入院.患者入院前出现头痛、纳差、恶心、多饮多尿伴发热,每日饮水量与尿量均超过6 L,体温38～39℃,无咳嗽、咯痰、腹痛、腹泻、尿急、尿痛,无视力、视野改变.既往甲状腺功能亢进症(甲亢)病史6年,间断服甲巯咪唑5 mg/d治疗.     

黛力新治疗慢性每日头痛112例疗效观察

目的 观察抗抑郁药黛力新对慢性每日头痛(CDH)的治疗效果。方法 头痛病人在常规治疗基础上添加黛力新口服，治疗后1个月以上判断疗效。结果 黛力新治疗组疗效优于常规治疗组，两组总有效率(痊愈 有效)分别为90．2％、78．3％。结论 黛力新对慢性每日头痛有效，慢性头痛患者可以试用抗抑郁剂黛力新治疗。     

喉鳞状细胞癌中LOX和CDH13的表达及意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)和H-钙黏蛋白(H-cadherin,CDH13)mRNA的表达与肿瘤的临床病理学参数之间的关系.方法 应用逆转录多聚酶链反应检测49例LSCC组织及22例癌旁组织中LOX和CDH13 mRNA表达情况.结果 46例LSCC中LOX和CDH13的表达率分别为75.5%(37/49)和44.9%(22/49);22例癌旁组织中的表达率分别为100.0%(22/22)和72.7%(16/22).LSCC中LOX和CDH13的表达均低于癌旁组织(P<0.05).LOX和CDH13的表达均与LSCC的病理学分级明显相关(P<0.05).在LSCC中LOX与CDH13 mRNA表达呈正相关(r=5.120,P<0.05).结论 LOX和CDH13 mRNA在LSCC中表达下调或缺失,可能与LSCC发生有关;LOX和CDH13 mRNA表达随LSCC恶性程度呈下降趋势.     

乳腺癌组织及血浆中RASSF1A,CDH1甲基化的检测及临床意义

目的 研究乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤组织及相应患者血浆中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)、上皮型钙黏附素(CDH1)基因启动子区异常甲基化状态及其临床意义.方法 应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法对乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤组织及相应血浆中RASSF1A,CDH1基因甲基化状态进行检测.结果 34例乳腺癌组织RASSF1A基因启动子甲基化率为73.53%(25/34),CDH1基因启动子甲基化率为50.00%(17/34),相应血浆中RASSF1A的甲基化检出率为55.88%(19/34);CDH1的甲基化检出率为35.29%(12/34);联合检测血浆中RASSF1A和CDH1基因启动子区甲基化的敏感性为64.71%(22/34);而25例良性肿瘤组织RASSF1A基因启动子甲基化率为12.00%(3/25),CDH1基因启动子甲基化率为4.00%(1/25),相应血浆中未检测出甲基化的RASSF1A和CDH1基因.RASSF1A,CDH1甲基化率与肿瘤病理类型、患者年龄、有无淋巴结转移的差异无显著性(P>0.05).结论 联合检测血浆中RASSF1A和CDH1基因启动子区甲基化,可用于乳腺癌的辅助诊断.     

人CDH22基因RNAi慢病毒载体的构建及稳定干扰CDH22基因的表达

目的 构建人CDH22基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默大肠癌细胞的CDH22基因表达,为研究CDH22在大肠癌转移中参与的信号转导机制提供研究基础.方法 利用在线软件设计人CDH22基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核酸后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序.得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体.在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助质粒和CDH22基因重组慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染大肠癌细胞SW480,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰CDH22基因的细胞亚系.结果 成功构建CDH22真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8×105U/ml.荧光定量PCR结果表明,所获得的细胞克隆11中CDH22 mRNA水平的表达显著降低.结论 成功构建出CDH22基因慢病毒RNAi表达载体,并获得CDH22基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系,为研究CDH22在大肠癌转移中的作用机制提供了研究基础.     

急性髓系白血病病人CDH13基因甲基化状态检测及其临床意义

目的:检测急性髓系白血病(AML)病人CDH13基因甲基化状态,探讨其与病人临床特征及预后的相关性.方法:用甲基化特异性PCR法分别检测34例AML病人(AML组)和22例非恶性肿瘤的缺铁性贫血病人(对照组)骨髓标本中CDH13基因启动子甲基化状态,用半定量反转录PCR法检测2组标本中CDH13 mRNA相对含量.AML组病人随访2年,统计总体生存时间.结果:AML组标本CDH13基因甲基化阳性率为61.76%,高于对照组的27.27%(P<0.05);AML组CDH13mRNA相对含量为0.355 ± 0.109,明显低于对照组的0.745 ± 0.271(P<0.01).不同性别、年龄以及临床分型AML病人的CDH13基因甲基化差异均无统计学意义(P>0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析显示,CDH13基因甲基化阳性的AML病人总体生存时间为(12.4 ± 3.3)个月,明显短于甲基化阴性病人的(18.6 ± 4.1)个月(P<0.01).结论:AML病人中存在CDH13基因甲基化现象,检测CDH13基因表达水平有助于判断AML病人预后.     

正常血压产妇发生产后子痫1例

患33岁，因“停经37^ 2周，下腹痛，头痛、眼花1天”入院。末次月经2003年7月18日，预产期：2004年4月25日，停经40余天出现妊娠反应，停经4个月自感胎动，停经5个月进行B超检查，结果示双胎妊娠。患自诉平素血压偏低，为90/60mmHg，自妊娠晚期，血压逐渐上升，但未超过140/90mmHg。入院前1天，自感头痛，眼花。入院查体：BP120/80mmHg，腹围106cm，宫高36cm，     

T-钙黏蛋白高甲基化与肺癌发生、发展关系探讨

目的：通过检测肺癌组织、良性病变组织和对照组织中CDH13基因及其甲基化水平,结合临床病理资料,找出其与肺癌发生、发展的关系.方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和特异性甲基化PCR （MSP）法.结果：肺癌组CDH13基因甲基化阳性率为46.67％（21/45）,对照组为2.22％（1/45）,良性病变组为6.67％（3/45）,前组与后两组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）.CDH13基因在肺癌中为0.5273±0.0687,在对照组中为0.8345±0.0385、在良性病变组织为0.8632±0.0465,前组与后两组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）.Ⅲ期肺癌组织的CDH13基因甲基化阳性率61.90％（13/21）明显高于Ⅰ＋Ⅱ期33.33％（8/24） （P＜0.05）.有淋巴结转移的肺癌组织中CDH13基因甲基化阳性率70.59％（12/17）与无转移组的32.14％（9/28）差异有统计学意义（P＜0.05）.肺癌组织中CDH13基因甲基化阳性组的T-钙黏蛋白阳性率23.81％（5/21）显著低于甲基化阴性组54.17％（13/24） （P＜0.05）.结论：肺癌组织中T-钙黏蛋白基因含量明显降低,存在着CDH13基因启动子5＇CpG岛高甲基化,且CDH13基因的高甲基化水平随着肺癌临床分期和淋巴结转移而增高.     

临床病例讨论——头痛、呕吐、抽搐

患儿男11(2/12)岁,因阵发性头痛、头昏伴反复抽搐两月.于1980年6月1日入院.平时素健.两月前(4月1日)原因不明突然头痛、头昏、非喷射性呕吐数次,次日晚12时突然尖叫一声后双眼凝视.四肢抽搐伴尿失禁,历时约1—2分钟后抽搐自行停止,抽后神     

CDH17调节TGF-β自分泌影响胃癌细胞侵袭作用的研究

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β自分泌在钙黏蛋白17(CDH17)调节胃癌细胞侵袭性中 的作用及可能机制.方法 构建siRNA-CDH17并转染入胃癌细胞系MKN-45,沉默其表达.通过免疫荧光染色、 Western blot、ELISA检测CDH17沉默前后细胞TGF-β表达及培养上清液中TGF-β水平变化,观察TGF-β的自分 泌情况.同时采用Western blot检测TGF-β/Smad3信号通路活化情况,并通过Transwell侵袭实验观察在给予 信号通路抑制剂后,胃癌细胞侵袭力的变化,评价TGF-β自分泌及相关信号通路活化在CDH17调节胃癌细胞侵袭 性中的作用.结果 转染siRNA-CDH17沉默MKN-45细胞CDH17表达后,细胞TGF-β表达较未转染组明显下降,其培 养上清液中TGF-β水平也显著减少[(510±55.0)pg/mL vs.(115±20)pg/mL,P<0.05].Western blot显示 CDH17沉默后Smad3磷酸化水平也明显降低,而给予TGF-β/Smad3信号通路抑制剂SIS3(10 μmol/L)也可抑制 CDH17高表达时的Smad3磷酸化水平.同时,沉默CDH17及抑制Smad3磷酸化均可明显降低MKN-45细胞侵袭性 (P<0.05).结论 CDH17可能通过促进自分泌TGF-β活化TGF-β/Smad3信号通路参与调节胃癌细胞侵袭性.     

CDH1受幽门螺杆菌感染调控及其在胃癌组织中表达分析

目的 探究幽门螺杆菌(Hp)对E-钙黏蛋白(CDH1)表达的影响及CDH1在胃癌(GC)组织中的表达情况,为进一步探索CDH1在Hp引起胃癌中的作用提供理论基础.方法 用Hp灌胃蒙古沙鼠,3、12、24个月后分别取其胃组织,进行免疫组化染色检测CDH1的表达;Hp感染胃上皮细胞AGS,24 h后收集样本,Western...     

下调CDH17基因对cisplatin耐药性人胃癌BGC823细胞裸鼠移植瘤模型的影响

目的 研究下调 CDH17 基因对cisplatin耐药的人胃癌 BGC823 细胞裸鼠移植瘤模型的影响,从体内实验研究治疗胃癌新的治疗手段.方法 以人胃癌BGC823细胞为研究材料,建立人胃癌BGC823细胞裸鼠移植瘤模型.同时,构建干扰质粒从基因和蛋白水平对CDH17进行干扰,成功构建慢病毒载体.将细胞分为三组,分别是WT对照组,siNC阴性对照组,siCDH17干扰组.通过 TUNEL方法和Annexin V/PI双染色法检测各组细胞的凋亡水平.结果 Real-time PCR和蛋白免疫印迹实验证实成功构建了CDH17的干扰表达载体.TUNEL检测实验表明下调CDH17基因可以促进对cisplatin耐药的人胃癌BGC823细胞裸鼠移植瘤模型细胞凋亡.Annexin V/PI双染色检测siCDH17干扰组细胞早期凋亡率远高于WT对照组和siNC阴性对照组的细胞.结论 下调CDH17基因可以促进cisplatin耐药性人胃癌BGC823细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖而达到治疗胃癌的目的.     

CDH22基因克隆及其真核表达载体的构建与表达

目的克隆人CDH22基因并构建其真核表达载体。方法设计CDH22特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人CDH22cDNA,经T-A克隆,通过双酶切及测序鉴定,将CDH22克隆至pCDNA3/HA,构建人CDH22基因的真核表达载体pCDNA3/HA-CDH22,转染HEK293A细胞,用WesternBlot及免疫荧光细胞化学技术检测目的蛋白的表达。结果成功扩增出人CDH22全长cDNA,双酶切鉴定证实成功构建pCDNA3/HA-CDH22真核表达载体,测序结果表明CDH22全长cDNA与GeneBank中CDH22序列完全一致,转染HEK293A细胞后,可检测出Mr约为86KD的目的蛋白,而免疫荧光细胞化学技术也检测到蛋白表达。结论获得人CDH22基因全长cDNA并成功构建了CDH22真核表达载体,证实pCDNA3/HA-CDH22转染HEK293A细胞后可表达HA-CDH22蛋白,为深入研究CDH22基因在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。     

慢性经常性头痛及一氧化氮与偏头痛的关系

慢性经常性头痛(Chronic daily headache,CDH)是一种常见病,但是关于该病的确切发病率和其流行病学的资料却很少,大约有40％的头痛病人属于该病的范畴。人们曾用过许多名字来描述本病,如:慢性紧张性头痛、转移性偏头痛、间歇性偏头痛、复合性头痛综合征、慢性经常性头痛、进行性偏头痛,以及血管紧张性头痛等。而且到目前为止,国际头痛协会在分类中还未能将其作为一个独立的疾病。     

单发胃癌和食管/胃双原发癌中胃癌CDH1基因甲基化研究

目的研究单发胃癌和食管/胃双原发癌中胃癌组织CDH1基因启动子区CpG岛甲基化变化及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR法,检测62例单发胃癌、30例食管/胃双原发癌中胃癌组织、癌旁组织及18例正常胃组织CDH1基因甲基化情况。结果单发胃癌和食管/胃双原发癌中胃癌组织CDH1基因甲基化率分别为61.3%和76.7%,癌旁组织分别为22.6%和23.3%,正常胃组织为0。单发胃癌和食管/胃双原发癌患者癌组织CDH1基因甲基化率与癌旁组织、正常组织比较,差异均有统计学意义(P<0.05),癌旁组织CDH1基因甲基化率与正常组织比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。单发胃癌与食管/胃双原发癌中胃癌组织CDH1基因甲基化阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。单发胃癌和食管/胃双原发癌患者CDH1基因甲基化与性别、年龄、烟酒史和上消化道肿瘤家族史均无关(P>0.05)。结论 CDH1基因甲基化在单发胃癌和食管/胃双原发癌胃癌中是一常见的表观遗传学事件,可能是一个独立的危险因素。     

先天性髋臼发育不良术中假体周围股骨骨折原因分析

目的探讨先天性髋臼发育不良(CDH)患者关节置换术中假体周围股骨骨折的原因及预防措施.方法对2002年1月～2007年6月32例CDH患者髋关节置换术中出现骨折的原因进行分析.结果 345个CDH髋关节术中发生假体周围股骨骨折32个,发生率9.3%.所有患者获得随访,平均随访时间27.8(5～47)个月.采用Mallory分型,其中Ⅰ型骨折26个,Ⅱ型骨折6个,未发生Ⅲ型骨折.所有患者均采用术中固定.除1个外其余31个均愈合,术后平均Harris评分为91分.结论 非骨水泥假体、粗隆下截骨、假体大小和类型选择不当以及CDH患者股骨近端解剖结构异常是造成股骨骨折的主要原因.完善的术前计划、良好的暴露和预防性钢丝环扎可减少术中骨折的发生.     

肝肠钙粘连蛋白单克隆抗体的制备及其对HepG2的生长抑制作用

目的 制备及鉴定肝肠钙粘连蛋白(CDH17)的单克隆抗体,研究其对肝癌细胞系HepG2的生长抑制作用.方法 利用重组CDH17蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗CDH17的单克隆抗体杂交瘤细胞株,通过ELISA和Western blotting分别对其效价和特异性进行鉴定,以不同浓度的单抗分别作用于HepG2细胞24、48、72和96 h.观察细胞数量和形态的变化,MTT法检测其对HepG2细胞的增值抑制作用.结果 成功建立了2株稳定分泌抗CDH17的单克隆抗体杂交瘤细胞株.两株单抗通过Western blotting实验都能特异性地结合真核细胞内源性的CDH17蛋白.不同浓度的单抗作用后细胞数量明显减少、形态不规则.不同浓度的单抗均能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,药物浓度和用药时间之间有交互效应(P<0.05).结论 成功建立了两株效价高、特异性好的抗CDH17蛋白的单克隆抗体,其能抑制HepG2细胞增殖,并呈剂量-时间依赖效应.