深圳市1例黑热病病例实验室检测与分子鉴定

目的 对深圳市1例输入性黑热病病例进行实验室检测和分子溯源分析以确定感染虫株。方法 收集2023年3月15日深圳市确诊1例黑热病病例的骨髓穿刺液和血液进行实验室检测。对患者骨髓穿刺液涂片姬姆萨染色后进行显微镜检查,对血液样品采用内脏利什曼原虫快速诊断试剂（rk39）进行血清抗体检查,并提取全血DNA,PCR扩增内转录间隔区Ⅰ(internal transcribed spacer-1, ITS-1)序列并测序比对,同时基于ITS-1序列构建系统进化树。结果 对患者骨髓涂片显微镜检查查见大量利什曼原虫无鞭毛体,确诊为黑热病,患者血液采用rk39快速诊断试剂检测结果呈阳性,PCR扩增出ITS-1基因产物序列与预期大小一致,经NCBI数据库中比对,与婴儿利什曼原虫ITS-1基因序列相似度为100%,确定感染虫株为婴儿利什曼原虫。对扩增的ITS-1序列进行系统发育树构建发现与婴儿利什曼原虫聚到一个分支,且与所选的参比序列中的KC347299距离较近。结论 深圳市1例黑热病病例是由婴儿利什曼原虫引起的,黑热病在我国仍时有发生,应加强非疫区医务人员诊断技术,积极配合使用新的诊断技术进行辅助诊断,同...     

甘肃省文县、迭部县家犬感染利什曼原虫危险因素研究

目的 了解甘肃省黑热病流行区犬感染利什曼原虫的危险因素,为探索犬源型黑热病防控新方法提供依据。方法 采用分层整群抽样的方法 确定文县兴隆村和迭部县洛大村为研究点。入户调查家犬的基本状况和症状体征,采集犬血并用PCR方法开展检测。运用IBM SPSS 23.0、Pearson χ²检验和多元Logistic回归方法评估犬的基本情况、临床症状和阳性感染犬之间的影响关系,筛选犬感染利什曼原虫的危险因素。结果 共调查2县家犬537只,利什曼原虫PCR 检测阳性率41.15%（221/537）。单因素回归显示豢养方式（χ²=12.357,P<0.05）、精神是/否活跃（χ²=11.883,P<0.05）、眼睑有/无分泌物（χ²=4.314,P<0.05）和趾甲是/否增长（χ²=37.292,P<0.05）4个变量与犬感染利什曼原虫差异有统计学意义。犬的性别、犬龄、身高、体重、品种、犬毛长短6个变量之间与犬感染利什曼原虫差异无统计学意义。多因素Logistic回归显示：犬的豢养方式[OR=3.051,CI=（0.965~9.645）]与犬感染利什曼原虫存在显著的相关性。结论 在甘肃省文县、迭部县存在大量利什曼原虫感染犬,犬放养是当地家犬感染利什曼原虫的危险因素,应加大群众防治黑热病意识,改善管理犬只方式,疾控部门加强犬监测,对有症状犬采取淘汰措施,减少黑热病传染源。     

两种不同方法在黑热病诊断中的应用比较

目的:比较用骨髓检查和rK39试纸条2种不同方法对于临床黑热病现症患者检测的效果.方法:以rK39试纸条样品带区出现红色条带为阳性,骨髓检查中查到利什曼原虫为阳性,并比较两种不同方法对诊断黑热病的效果.结果:检测病例372例.354例做骨髓检查,阳性254例(阳性率(71.75%),阴性100例,未做18例(rK39均阳性);做rK39检测125例,阳性110(阳性率88.0%),阴性15(骨髓检查阳性13例);骨髓+rK39均做107例,双阳性51例,双阴性2例,骨髓阳性,rK39阴性13例,骨髓阴性,rK39阳性41例.结论:两种方法单一阳性检出率统计学差异有显著性,说明rK39试纸条法在诊断黑热病中更具有优势,该法快速、简便、敏感性和特异性高,费用相对低、患者痛苦小,更适于黑热病的诊断.骨髓检查做为病原学检查,是确诊实验,两者结果应互为参考.     

孕妇血清风疹病毒抗体IgM的检测与分析

目的：了解孕妇风疹病毒感染情况。方法：应用ELISA间接法检测120例孕妇血清中风疹病毒抗体IgM(RV-IgM)。结果：120例中,RV－IgM阳性15例,阳性率为12．5％;RV－IgM阳性检出率在＜25a,25-30a和＞30a年龄组分别为13．11％、12．20％、11．11％。多次妊娠者RV－IgM阳性检出率明显高于初次妊娠者（P＜0．05）。结论孕妇风疹病毒感染与孕次有一定的关系,与孕龄无关。     

检测大鼠细小病毒抗体的ELISA、IEA和HI法比较

对检测大鼠细小病毒(RV株)抗体的ELISA、IEA和HI三种方法作了比较。ELISA、IEA和HI法的重复性分别为92.5％、88.2％和68.6％。经对同一批血清检品的检测,ELISA法IEA和检测结果的符合率为90.5％,抗体阳性检出率均为81％,而HI与前两法的符合率均仅为69％,抗体阳性检出率为69％。以上结果表明:ELISA和IEA法在重复性和抗体阳性检出率方面均优于HI(P<0.05)。经ELISA法检测,普通级大鼠中RV抗体阳性率达59％,而在清洁级大鼠中仅为7％。     

ELISA法、荧光免疫法及PCR检测婴幼儿腹泻常见病毒

目的 了解不同方法学检测婴幼儿腹泻常见病毒的检测结果差异及一致性情况.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法(四联法)及聚合酶链式反应(PCR)技术筛查深圳市福田区引起临床婴幼儿急性腹泻的轮状病毒(RV)、肠道腺病毒(EAdV)、诺如病毒(NV)和星状病毒(AstV)的抗原,并将检测结果数据进行对比.结果酶免法与荧光免疫法检测数据对比:对RV,NV,EAdV的抗原阳性检出率差异有统计学意义(P＜0.05),对AstV抗原阳性检出率差异无统计学意义(P＜0.05);两种方法对RV的检测结果具有较好的一致性(Kappa值为0.558),对NV,EAdV和AstV的检测结果一致性较差(Kappa值分别为0.142,-0.025和0.361);ELISA法和PCR检测数据对比:ELISA法除对EAdV阳性检出率低于PCR外,对其他3种病毒的阳性检出率均高于PCR,且经x2检验显示两种方法对4种病毒的阳性检出率差异均有统计学意义(P＜0.05).两种方法对RV,NV,AstV的检测结果具有很好的一致性(Kappa值均＞0.75),对EAdV的检测结果一致性较好(Kappa值为0.537);荧光免疫法(四联法)和PCR检测数据对比:除AstV外,两种方法对其他3种病毒的阳性检出率差异均有统计学意义(P＜0.05).对RV的检测结果具有很好的一致性(Kappa值为0.764),对EAdV的检测结果一致性较好(Kappa值为0.452),NV和AstV的检测结果一致性差(Kappa值分别为0.181和-0.017).结论 ELISA法和荧光免疫法(四联法)对腹泻病毒的检测,除轮状病毒外,其它病毒检测结果的一致性较差,只可用于腹泻病原的初步筛查,确认必须进一步做培养或分子诊断;ELISA法、荧光免疫法(四联法)与PCR三者间的阳性检出率差异均有统计学意义,ELISA法与PCR检测结果的一致性明显较好.以PCR检测结果作为评估标准,ELISA法对四种腹泻病毒抗原的检测灵敏度、特异性及准确性均优于荧光免疫法,荧光免疫法检测结果的假阳性率较高.     

PCR法检测白血病患儿HCMV DNA的临床意义

收集31例白血病患儿晨尿，10例患儿EDTA抗凝血。对照组取自未患白血病且免疫功能正常的儿童，包括10例晨尿和12例EDTA抗凝血。用PCR法检测HCMVDNA。结果白血病患儿晨尿中检出2例阳性，对照组检出1例阳性，阳性检出率分别为6．5％和10％，两者之间无差异(0．75＞P＞0．5)。白血病患儿血液中，检出3例阳性，而对照组血液无1例检测为阳性，阳性检出率分别为30％和0％，两者之间有差异(0．025＜P＜0．05)。认为白血病患儿在急性期易出现HCMV活化现象，用PCR法检测HCMVDNA，可在临床表现出现前作出HCMV感染的诊断，但要注意区分活动性感染与潜伏性感染。     

检测RNA病毒及其IgM抗体在病脑病原学诊断中的应用

目的：探讨检测RNA病毒和相应IgM抗体在病脑病原学诊断方面的应用价值。方法：RT－PCR方法检测脑脊液（CSF）中B组萨奇病毒（COX－B）和风疹病毒（RV）；用ELISA方法检测CSF和血液中相应病毒的IgM。结果：101例病脑患，其CSF标本COX－B和RV的检出率分别为32．7％和7．9％；其COX－IgM和RV－IgM的检测阳性率，血液标本37．6％和7．9％，CSF标本无1例阳性结果；成人组和儿童组的检出率比较，COX系列差别无显性（P＞0．05），RV系列差别有显性（P＜0．05）。32例对照组，其CSF中未检出RNA病毒和IgM抗体；而血液中COX－IgM检出率均为6．2％。结论：RT－PCR方法可以用作病脑的病原学诊断手段，用RT－PCR方法检测脑脊液中的RNA病毒与用ELISA方法检测血清中抗体相结合，能增加实验诊断资料的可靠性。     

聚合酶链反应（PCR）在检测和研究HBV中的应用

目的：探讨PCR技术在检测和治疗乙型肝炎中的应用。方法：同时应用ELISA法和PCR技术对168份血清标本中HBV五项标志物作检测，并用PCR技术测定各稀释度的HBV-DNA的含量。结果：“大三阳”（HbsAg阳性，HbeAg阳性，抗-HBc阳性）HBV-DNA检出率为94．1％，“小三阳”（HbsAg阳性，抗-Hbe阳性，抗-HBc阳性）HBV-DNA检出率为83．3％，HBV-M五项全阴HBV-DNA检出率为3．22％。结论：PCR技术有利于HBV感染的早期诊断，同时其对HBV患者的病程发展和治疗有一定的预测及评价作用。     

黑热病杜氏利什曼原虫超微结构观察

本文报告一例黑热病患者骨髓内杜氏利什曼原虫的超微结构。结果表明其基本结构与其他利什曼原虫相似,但虫体大小、膜下微管数及膜下微管中心间距有一些区别     

扬州市2015～2017年无偿献血者抗-HIV及HIV-RNA检测结果调查分析

目的?了解扬州市2015年2月～2017年12月无偿献血者抗-HIV抗体及HIV-RNA检测情况。 方法 针对扬州市2015年2月～2017年12月121 617例无偿献血者标本先进行2遍ELISA法检测抗-HIV抗体，然后对ELISA法结果两侧阴性或单侧阴性的116 500例核酸标本再用PCR法检测HIV-RNA。抗-HIV抗体阳性送扬州CDC确证，HIV-RNA阳性送江苏省血液中心进一步确证。 结果 2015年2月～2017年12月抗-HIV抗体检出阳性57例，占0.05%，确证阳性13例，占0.01%；确证阳性均为ELISA法双试剂阳性标本，ELISA法单试剂阳性经确证均为阴性；HIV-RNA阳性检出 4例，占0.003%，确证阳性2例，占0.002%。?结论?采、供血机构相关部门在献血前征询招募时，应充分考虑人群HIV感染分布特征，调整策略，相关部门应加强HIV相关知识的宣传普及工作，进一步确保血液安全。在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测各具优势，两者互补，给予二者联合应用，提高血液病毒检测准确性。     

Real time PCR与常规血培养在血流感染未知病原体鉴定中的比较研究

目的：观察real time PCR在血流感染病原体检测中的敏感性和特异性,并与常规血培养对比,探讨其临床应用价值。方法以该院各临床科室收集的108份脓毒血症患者血液标本进行real time PCR检测,同时进行常规血培养,比较两种方法的特异性和敏感性。结果108份标本当中,两种方法检测出12种病原微生物。 Real time PCR共检测出阳性标本25份,阴性标本83份。其中与血培养共同阳性标本9份,共同阴性标本78份。两方法的一致性为80.6%。Real time PCR的阴性预测值是0.94,敏感性64%,特异性83%。16例标本real time PCR阳性而血培养阴性,5例标本血培养阳性而real time PCR阴性。同时,有2病标超出real time PCR的检测范围,而血培养阳性。此外,real time PCR无法检测光滑念珠菌。结论real time PCR虽然能快速检测血液感染中病原微生物,但依然不能完全替代血培养。     

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒检测的探讨

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)活动性感染的有效检测方法。方法分别应用普通PCR、巢式PCR、流式细胞仪同步检测13例allo-HSCT后患者117份外周血标本的CMV DNA和pp65抗原。结果普通PCR 检测阳性率为44．4％,巢式PCR检测阳性率为24．8％,流式细胞仪检测阳性率为30．8%。临床活动性感染率为27．4％。普通PCR 检测阳性率与临床活动性感染率之间无明显相关性(r=0．207,P>0．05)。巢式PCR和流式细胞仪的阳性检出率之间的差异无统计学意义(P>0．05),它们和临床活动性感染有明显的相关性(r分别为0．518和0．529,P<0．05)。结论巢式PCR检测CMV DNA和流式细胞仪检测pp65抗原可用于allo-HSCT后CMV活动性感染的诊断。     

检测弓形虫的PCR法和ELISA法的比较

目的:建立快速、敏感、特异的PCR方法,用于检测弓形虫感染。方法:选择弓形虫B1基因194bp片段作为扩增模板,优化反应条件,并测定其敏感性和特异性;以104弓形虫RH株速殖子腹腔接种小鼠,用PCR法检测感染动物全血DNA,并与ELISA法检测血清IgM进行比较。结果:本实验中,PCR方法的检测阈值为0.2pg弓形虫DNA,并且与人、小鼠、疟原虫、旋毛虫等DNA均无交叉反应。用PCR法检测感染动物全血DNA,感染后第2d即可测出阳性,总阳性数为1(313/15);而ELISA法检测血清IgM则到感染后第6d才测出阳性,总阳性数为2(2/15)。经统计学检验,二者存在显著差异(P<0.05)。结论:PCR是一种快速、敏感、特异的检测方法,可用于弓形虫病的早期诊断。     

实验大鼠泰泽病原体三种检测方法的比较

目的 利用不同的检测方法调查了解我国实验大鼠中泰泽病原体的携带情况,并比较三种方法的检测结果,为合理选择实验室检测方法提供依据.方法 应用ELISA法,间接免疫荧光（IFA）法和套式PCR法三种检测方法对国内大型实验动物生产厂家送检的125只实验大鼠同时进行泰泽病原体检测,并对比分析检测结果,评估我国实验大鼠泰泽病原体的携带情况.结果 共检测125只实验大鼠,其中清洁级54只,SPF级71只,IFA法检出36只阳性,89只阴性,阳性检出率28.8%：ELISA法检出24只阳性,101只阴性,阳性检出率19.2%：PCR法检出6只阳性,119只阴性,阳性检出率4.8%;ELIsA法和IFA法阳性检出率要高于PCR法.结论 对于泰泽病原体的检测,可以采用IFA法或ELISA法进行抗体检测,对可疑的样品用PCR法验证.相比而言,IFA法具有简单,可靠、价格低廉的优点,可以用于实验大鼠泰泽病原体感染状况的初步调查和流行病学监测.     

海口地区病理性黄疸新生儿G6PD缺陷合并HCMV感染分析

目的了解海口地区病理性黄疸新生儿G6PD缺陷及合并人类巨细胞病毒（HCMV）感染情况。方法采用聚合酶链反应（PCR）技术对176例被确诊为病理性黄疸新生儿患者进行血清巨细胞病毒检测，并同时进行G6PD、血常规、胆红素等各项指标的测定，进行比较。结果176例病理性黄疸新生儿中，HCMV感染45例（25．6％），G6PD缺陷24例（13．6％），感染HCMV17例，其感染率为70．8％。G6PD缺陷＋HCMV感染者17例（9．7％），两者合并感染者的总胆红素、间接胆红素、血红蛋白均比单纯G6PD缺陷者或单纯HCMV感染者明显增高。结论G6PD缺陷的病理性黄疸新生儿HCMV感染较高。     

HTLV-I infection in selected populations in Australia and the western Pacific region.

The prevalence of infection with human T lymphotropic virus type I (HTLV-I) in 19,975 blood samples from Australia and the western Pacific was determined by measuring the presence of specific antibody (anti-HTLV-I) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with confirmation by western blot and/or radioimmunoprecipitation techniques. In Australia no evidence of HTLV-I infection was found in injecting drug users, patients with the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), subjects attending a sexually transmitted diseases clinic, female prostitutes, or transfusion recipients. A low prevalence of infection was detected in people with haemophilia (0.5%) and in male homosexuals (0.5%-1%). No antibody was detected in sera from Vanuatu, Kiribati, American Samoa, the Cook Islands, New Caledonia, the Federated States of Micronesia, French Polynesia and Fiji, but a low frequency of anti-HTLV-I was detected in sera from the Solomon Islands (1.2%) and Nauru (0.6%).     

抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近的风险探讨

目的应用化学发光免疫分析（CLIA）法,检测抗-HCVELISA法结果在临界值附近（O．4≤S／CO〈1）的血清标本,探讨HCV感染的风险性。方法笔者对19份抗-HCVELISA法检测结果在临界值附近,胶体金法均阴性的血液标本,分别经抗．HCVELISA法试剂①、试剂②、胶体金法和CLIA法试剂进行了检测。结果HCV-CLIA法阳性16份、ELISA法试剂①和试剂②分别阳性5份9份,胶体会法阳性0份。cuA法与ELISA法和胶体金法比较检出率灵敏度显著高于ELISA法（P〈0．05或P〈0．01）和胶体金法（P〈0．01）。结论抗-HCVELtSA法检测结果在临界值附近的血液标本存在HCV感染的可能．尤其是献血者标本存在感染受血者的风险。对可疑标本应更进一步的应用丙型病毒性肝炎核心抗原检测法、CLIA法、核酸扩增和微流芯片法或RNART—PCR荧光定量法进行检测,以保证结果的准确性。     

不同方法检测深圳献血人群梅毒感染结果分析

目的探讨TRUST、ELISA和TPPA法检测梅毒抗体的效果,评价深圳献血人群的梅毒感染情况.为临床安全用血提供依据.方法12 600例无偿献血标本皆采用TRUST和ELISA两种方法平行进行梅毒检测.对其中任何一种方法检测阳性,用TPPA方法进行确认(1:80以上为阳性).结果TRUST方法检测梅毒,阳性例数有62例,阳性检出率为0.49%;ELISA法为118例,阳性检出率为0.94%.后经TPPA确认,结果为116例阳性,确认阳性率为0.92%.TRUST检出率明显低于ELISA法和TPPA法. 结论单纯采用TRUST检测筛查献血人群梅毒抗体检出率低,不适用于健康人群梅毒抗体的筛查.     

献血员血清抗－HCV－IgM检测及其意义

目的探讨献血员血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ与ＨＣＶ感染的关联性。方法献血员血清８３６份。以ＨＣＶ混合抗原包被聚苯乙烯反应板微孔，以辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＭ单克隆抗体为酶标抗体，建立ＥＬＩＳＡ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。以第二代ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ，以ＰＣＲ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ或抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性样品中的ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果２－巯基乙醇破坏试验及ＨＣＶ抗原抑制试验结果显示，以所建立的ＥＬＩＡＳ检测到的为ＨＣＶ特异ＩｇＭ，批内变异系数为３．４７％，批间变异系数为７．０６％。８３６份献血员血清中，有２份抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性而抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论本研究中建立的ＥＬＩＳＡ可较好地用于检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、献血员筛选及防止丙型肝炎传播。