糖原合成激酶-3β在糖尿病肾病中的研究进展

糖尿病肾病发病机制复杂,糖原合成激酶-3β在其中发挥着重要作用。糖原合成激酶是体内诸多信号通路的参与者,在糖尿病所致慢性肾损伤过程中,参与了肾小球足细胞、系膜细胞、肾小管上皮细胞等的损伤过程,本文就糖原合成激酶-3β在糖尿病肾病中的表达和作用机制进行综述。     

糖原合酶激酶3β在轻型/重症急性胰腺炎细胞模型中的表达

目的 探讨糖原合酶激酶3β(GSK3β)在轻型/重症急性胰腺炎发病中的表达及作用方法 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别构建轻型急性胰腺炎(MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)的细胞模型,分别在2、4、8、12、24 h收集细胞培养基上清,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达变化,流式细胞术检测细胞凋亡率及坏死率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测GSK3β及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9 mRNA表达变化.结果 雨蛙素组和雨蛙素+脂多糖组各时间点淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6较对照组均增高,且在大多数时间点,雨蛙素+脂多糖组组比雨蛙素组水平更高,开始上调时间相同或更早(P＜0.05).刺激24 h后,雨蛙素组凋亡率[(19.2±0.9)％]显著高于雨蛙素+脂多糖组[(10.2±0.5)％,P ＜0.05].雨蛙素组坏死率[(5.8±0.3)％]显著低于雨蛙素+脂多糖组[(13.6±0.7)％,P＜0.05].SAP组的坏死/凋亡比值是MAP组的5倍.GSK3β的mRNA水平在雨蛙素组中是2h短暂下调[相对表达量为(0.5±0.1)倍]后于8h显著上升[相对表达量为(3.0±1.1)倍,P ＜0.05],然后又逐步下降;而在雨蛙素+脂多糖组中则是是8h才缓慢上调[相对表达量为(1.8±0.6)倍,P＜0.05],至24 h达到高峰[相对表达量为(3.6±0.3)倍,P＜0.05].GSK3β和Caspase-3 mRNA水平均有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别建立MAP和SAP细胞模型可行;GSK3β在MAP和SAP中可能通过促进腺泡细胞凋亡来起作用.     

缺血预处理和缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注时糖原合酶激酶-3β活性的影响

目的 探讨缺血预处理和缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注时糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)活性的影响.方法 雄性Wistar大鼠40只,体重200～230 g.随机分为4组(n=10),假手术组(S组)仅分离双侧颈总动脉;缺血再灌注组(I/R组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 min后恢复灌注;缺血预处理组(IPR组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 s,开放30 s,反复3次,最后夹闭10min后恢复灌注;缺血后处理组(IPO组)分离双侧颈总动脉,夹闭10 min,开放30s,夹闭10 s,反复3次后恢复灌注.于术后2 d时取脑组织,计数大脑皮质凋亡神经元,测定脑梗死体积、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达.对神经元凋亡数、脑梗死体积与p-GSK-3β水平做直线相关分析.结果 与S组比较,I/R组、IPR组和IPO组凋亡神经元、脑梗死体积增加,p-GSK-3β水平降低,Bcl-2表达下调,Bax和Caspase-3表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,IPR组和IPO组凋亡神经元和脑梗死体积降低,p-GSK-3β水平升高,Bcl-2表达上调,Bax和Caspase-3表达下调(P＜0.05);IPR组和IPO组间上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).凋亡神经元、脑梗死体积与p-GSK-3β水平呈负相关(P＜0.05).结论 缺血预处理和缺血后处理通过抑制GSK-3β活性而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤.     

糖原合酶激酶3β抑制剂对前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 研究糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂抗前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的效用. 方法 建立前列腺癌PC-3和LNCaP/Bcl-xL细胞株裸鼠移植瘤模型,观测GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)及SB216763腹腔内给药后移植瘤重量及体积的变化.同时通过BrdU掺入的免疫组化染色探讨移植瘤的增殖状态,TUNEL染色比较对移植瘤细胞凋亡的影响. 结果 LiCl及SB216763均可明显抑制移植瘤生长(P＜0.05).与对照组相比,LiCl给药组细胞BrdU标记明显降低(P＜0.05),TUNEL染色差异无统计学意义. 结论 抑制GSK-3β活性可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤细胞在体内的生长,其中LiCl可能通过干扰癌细胞DNA复制发挥作用.     

磷酸化糖原合成酶激酶-3β在大鼠移植肾早期病理改变中的作用

目的 探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在大鼠移植肾早期病理改变中的作用.方法 以F344大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,依照标准的慢性移植肾肾病(CAN)模型要求行左肾原位移植,制作CAN模型(移植组).术后7d切除受者的右肾.以切除一侧肾脏的雄性F344大鼠和Lewis 大鼠为对照(F344对照组和LEW对照组).分别于术后4、8、12、16及24周时收集24 h尿液,采集血液,测定24 h尿蛋白和血肌酐,取移植肾组织,观察组织学改变,并用免疫组化法检测肾组织中磷酸化GSK-3β表达.结果 移植组术后早期(4、8和12周)移植肾病理改变主要表现为单个核细胞浸润、血管平滑肌细胞(SMC)的移行增殖,在后期(16和24周)尿蛋白排泄率显著增高,移植肾病理改变表现为肾间质单个核细胞浸润明显增加及严重的肾间质纤维化、肾小管萎缩.移植组术后各时间点移植肾组织中磷酸化GSK-3β及其mRNA表达水平均显著低于LEW对照组和F344对照组相同时点的表达水平(P＜0.05),并随着移植时间的延长进一步降低.磷酸化GSK-3β表达水平与早期肾间质单个核细胞浸润程度、SMC移行增殖及后期肾间质纤维化、肾小管萎缩、血管硬化程度呈显著负相关.结论 磷酸化GSK-3β表达下调在大鼠移植肾早期的肾间质单个核细胞浸润、SMC移行增殖及后期的肾间质纤维化、肾小管萎缩、肾血管硬化病变的发生中均起重要作用.     

糖原合成激酶3β在二氮嗪后处理糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用

目的 观察糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)在二氮嗪(diazoxide,DZ)后处理糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)中的作用及机制. 方法 单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)制备糖尿病大鼠模型,取造模成功的大鼠48只,复制在体心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,按随机数字表法分为4组(每组12只):假手术组(Sham组)、I/R组(Ⅰ组)、DZ组(D组)、SB216763+DZ组(S组).连续监测血流动力学指标,比色法测血浆乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色分析心肌梗死面积,Western blot测磷酸化GSK-3β(phosphorylated GSK-3β,pGSK-3β)的表达. 结果 与Ⅰ组及D组比较,S组心功能明显改善(P＜0.05),血浆LDH[S组、Ⅰ组、D组为(5 335±502)、(7 943±831)、(7 176±521) U/L,P＜0.05]活性及心肌梗死面积[S组、Ⅰ组、D组为(21.0±1.6)％、(30.8±3.8)％、(31.3±2.9)％,P＜0.05]均显著降低,pGSK-3β表达增加(P＜0.05);Ⅰ组与D组比较上述指标差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 DZ后处理对糖尿病大鼠心肌I/RI无保护作用,GSK-3β抑制剂干预后DZ后处理对糖尿病大鼠心肌I/RI的保护作用恢复.     

GSK-3β在移植肾肾组织的表达及其意义

目的：探讨糖原合成酶激酶在移植肾组织中的表达及其在慢性移植肾失功发病机制中的意义。方法：收集解放军第181医院2007年01月～2009年12月因蛋白尿或肌酐升高而行肾脏穿刺术的肾移植患者的肾穿标本。其中病理诊断符合慢性移植肾失功的病例有28例,包括男21例,平均年龄（45±10）岁,女7例,平均年龄（42±9）岁,肾穿时间为肾移植术后1年～9年,平均3.5年,血清肌酐（206±122）μmol/L。利用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统（imagepro-plus6.0）半定量检测28例慢性移植肾失功患者移植肾组织中糖原合成酶激酶的表达情况,计算GSK表达的平均面积和平均累计光密度,分析GSK-3β表达水平与移植肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩程度之间的关系。5例正常肾组织作为对照组。结果：慢性移植肾失功患者肾组织中GSK-3β的表达比正常肾组织明显增加,并随肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化、小管萎缩程度而递增。结论：糖原合成酶激酶的高表达与移植肾肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩存在正相关关系。     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1表达的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦(Valsartan)对实验性糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1表达的影响,为糖尿病肾病的防治提供实验性理论基础.方法:选择健康雄性SD大鼠24只,任取其中16只腹腔注射链脲佐菌素制成糖尿病大鼠模型.将糖尿病大鼠随机分为糖尿病缬沙坦治疗组(A组,8只,缬沙坦10 mg*kg-1*d-1灌胃);糖尿病对照组(B组,8只);其余8只为正常对照组(C组).分别于实验第6周末测定各组大鼠血糖、血肌酐、尿白蛋白排泄率,对肾脏标本进行光镜观察,用图像分析仪测量各组大鼠平均肾小球面积、平均肾小球体积.并取各组大鼠肾皮质提取RNA,用逆转录-PCR(RT-PCR)方法对肾皮质TGF-β1 mRNA表达进行半定量分析.结果:在糖尿病第6周末,B组上述指标较C组均有不同程度的升高(P＜0.01),而A组则显著低于同时期的B组.其中,A组、C组尿白蛋白排泄率始终无统计学差异,肾小球平均面积、平均体积A组显著低于B组(P＜0.01).RT-PCR半定量结果分析显示,B组TGF-β1 mRNA表达较A组、C组显著增高(P＜0.01),A组TGF-β1 mRNA表达较C组为高(P＜0.01),但仍较B组为低(P＜0.05).结论:缬沙坦能够抑制肾组织TGF-β1 mRNA的表达,减少糖尿病大鼠的尿白蛋白,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用.     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织SOCS3、TGF-β_1、MCP-1表达的影响

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织细胞因子信号抑制因子-3(SOCS3)、TGF-β1、MCP-1表达水平的影响。方法:40只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组(模型组)、益肾胶囊组、氯沙坦组,每组各10只。单侧肾切除加链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立DN大鼠模型,益肾胶囊组每只灌胃益肾胶囊(625mg·kg-1.d-1),氯沙坦组每只灌胃氯沙坦钾片(30mg·kg-1.d-1),正常对照组及模型组每日给予等量蒸馏水。测定各组大鼠体重、24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),并计算内生肌酐清除率(Ccr);取肾组织行病理组织学观察,免疫荧光法检测肾组织中SOCS3、TGF-β1、MCP-1表达水平。结果:实验12周末,模型组大鼠24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、Scr、BUN均高于正常对照组(P<0.05),肾组织中SOCS3、TGF-β1、MCP-1表达水平高于正常对照组(P<0.05);治疗组大鼠24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、Scr、BUN均低于模型组(P<0.05),Ccr较模型组升高(P<0.05),而低于正常对照组(P<0.05),肾组织中SOCS3表达水平明显高于模型组(P<0.05),而TGF-β1、MCP-1的表达受到抑制(P<0.05);两治疗组间比较差异无统计学意义。结论:益肾胶囊可能通过上调SOCS3在肾组织的表达,抑制了TGF-β1、MCP-1的表达,从而减轻了DN大鼠肾小球硬化和间质纤维化的程度,延缓DN的进展。     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶表达的影响

目的：观察缬沙坦对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶（ILK）表达的影响，探讨缬沙坦肾脏保护作用的可能机制。方法：30只Wistar雄性大鼠随机分为正常组（n=10）、模型组（n=10）和干预组（缬沙坦30mg·kg^-1·d^-1，n=10）。第8、16周每组各处死5只大鼠，观察大鼠肾脏病理改变以及免疫组化方法检测其肾小管上皮细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）、ILK的表达并作半定量分析。结果：（1）DN大鼠肾小管上皮细胞ILK与TGF-β1同向表达增高，随病程进展递增；（2）缬沙坦干预后大鼠肾小管上皮细胞ILK表达较模型组显著降低。结论：（1）DN大鼠肾小管上皮细胞ILK与TGF-β1同向表达增高，提示ILK是肾间质纤维化发展的一个重要因素；（2）缬沙坦可能通过下调ILK来改善肾间质纤维化病变而发挥肾脏保护作用。     

二氮嗪后处理对缺氧/复氧成年大鼠心肌细胞存活率及磷酸化糖原合成激酶-3β、Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究线粒体ATP-敏感性钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,mitoKATP通道)开放剂二氮嗪(diazoxide,DZ)后处理对成年大鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)后细胞存活及对磷酸化糖原合成激酶-3β(phospho glycogen synthase kinase-3β,pGSK-3β),Bcl-2,Bax表达的影响. 方法 体外培养原代成年大鼠(30只)心肌细胞建立H/R损伤模型,按随机数字表法随机分为5组(每组6只):①Normal组:在二氧化碳(CO2)培养箱中持续培养6h组;②H/R组:缺氧3h复氧3h组;③DZ组:缺氧3h复氧3h,复氧5 min时给予100 μmol/L DZ组;④DZ+5-HD组:缺氧3h复氧3h,缺氧末给予100 μmol/L 5-羟葵酸盐(5-hydroxydecanoate,5-HD),复氧5 min时给予100μmol/L DZ组;⑤5-HD组:缺氧3h复氧3h,缺氧末给予100 μmol/L 5-HD组.复氧3h末通过计数细胞长杆率测定存活率,免疫印迹法测定心肌细胞内pGSK4β,Bcl-2和Bax的表达. 结果 复氧3h末,Normal组单个心肌细胞收缩幅度为(13.12±0.19)％,与Normal组比较,其他各组单个心肌细胞收缩幅度明显降低[H/R组为(7.97±0.22)％,DZ组为(10.48±0.20)％,DZ+5-HD组为(7.97±0.19)％,5-HD组为(8.22±0.22)％](P＞0.05),心肌细胞内Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高(P＜0.05).DZ后处理组心肌细胞存活率为(64±5)％,与H/R组比较明显增高(P＜0.05),心肌细胞内Bcl-2、pGSK4β表达水平升高,Bax表达水平降低,而缺氧末即刻给予5-HD可以逆转DZ后处理的这些作用(P＜0.05);5-HD组与H/R组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 DZ后处理可能通过激活mitoKATP通道、上调pGSK-3β及Bcl-2,下调Bax的表达增加H/R后成年大鼠心肌细胞的存活.     

负压吸引对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体组织一氧化氮合酶表达的影响

目的研究负压吸引对糖尿病性勃起功能障碍（ED）大鼠阴茎组织一氧化氮合酶（NOS）表达水平的影响。方法25只实验鼠中随机选取5只为正常对照组（A组）,其余火鼠用链脲左菌素和阿朴吗啡诱导建立Ⅰ型糖尿病性ED大鼠模型。之后把造模成功的糖尿病性ED大鼠随机分成糖尿病ED吸引组（B组）和糖尿病ED非吸引组（C组）。在B组大鼠负压吸引治疗结束后将A、B、C3组大鼠处死并取阴茎组织进行石蜡包埋。采用免疫组织化学方法检测各组大鼠阴茎组织中三种一氧化氮合酶亚型（nNOS、eNOS、iNOS）的表达情况。结果A组大鼠阴茎组织中nNOS蛋白表达水平高于B组和C组（均P〈0.001）;A组和B组大鼠阴茎组织中eNOS蛋白表达水平高于C组（均P〈0.01）;A组iNOS蛋白表达水平低于B组和C组（P〈0.01,P〈0.001）,同时B组iNOS蛋白表达水平低于C组（P〈0.01）;剩余其他各组间的比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论负压吸引可以通过升高阴茎组织中的eNOS和降低iNOS的表达来改善勃起功能。     

芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织中SOCS-3及IGF-1表达的影响

目的：探讨芡实对糖尿病肾病（diebetic nephrothy,DN）大鼠肾组织中细胞因子信号抑制因子-3（suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3）及胰岛素样生长因子-1（insulin like growth factor-1,IGF-1）表达的影响及可能机制。方法：采用单剂量腹腔注射链脲佐菌素（ STZ,45 mg/kg）建立大鼠DN模型,将DN模型大鼠随机分为5组：DN组（ DN组）、小剂量芡实组（EL,1.5 g·kg^-1·d^-1）、中剂量芡实组（EM,3.0 g·kg·-1d-1）、大剂量芡实组（EH,6.0 g·kg-1·d-1）及氯沙坦钾组（ LP,30 mg·kg-1·d-1）;另设正常对照组（ NC组）,每组10只。分别治疗12周后测定各组大鼠生化指标;HE、Masson、PAS染色及电镜观察肾组织病理变化;免疫组化、Western blot法检测肾组织中SOCS-3与IGF-1表达情况。结果：12周末,与NC组相比,DN组大鼠24 h尿蛋白定量（24 h Upr）、尿素氮（BUN）及血肌酐（Scr）均明显升高（P〈0.05）,肾小球体积增大、系膜细胞增生、基质增多,肾小管扩张,肾组织中SOCS-3表达增加、IGF-1表达明显增加（P〈0.05）;与DN组相比, LP组与EM组大鼠24 h Upr、BUN及Scr明显降低（P〈0.05）,病理改变减轻,肾组织SOCS-3表达明显增加、IGF-1表达明显下降（P〈0.05）;LP组与EM组间降尿蛋白作用差异无统计学意义。结论：芡实可能通过上调SOCS-3表达,抑制IGF-1过表达进而减少蛋白尿,发挥肾脏保护作用。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及Smad7表达的影响

目的：探讨益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及Smad7表达的影响.方法：将32只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、糖尿病肾病模型组、氯沙坦治疗组、益肾胶囊治疗组,每组8只.治疗组给予氯沙坦钾（20 mg·kg-1·d-1）、益肾胶囊（625 mg· kg-1·d-1）灌胃8周.测定血糖、24 h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）,计算内生肌酐清除率（Ccr）;观察肾脏病理变化及肾组织中TGF-β1和Smad7蛋白的表达.结果：与对照组相比,糖尿病肾病模型组大鼠血糖、24h尿蛋白定量、Scr和BUN明显升高,Ccr显著降低;肾组织出现较明显的病理损伤;且肾组织TGF-β1表达显著上调,Smad7蛋白表达量明显减少.益肾胶囊治疗后,与糖尿病肾病模型组相比,24 h尿蛋白定量、Scr和BUN明显下降,Ccr显著上升;肾组织病理损伤程度减轻;此外,肾组织TGF-β1表达显著下调,Smad7蛋白表达量明显增加.结论：益肾胶囊可能通过调节TGF-β1/Smad的表达,从而对糖尿病肾病发挥肾脏保护作用.     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织GLUT1及TGF—β1表达的影响

目的：探讨芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织GLUT1及TGF—B,表达的影响。方法：雄性sD大鼠60只,随机选取10只为正常对照组（N组）;其余采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ,45mg／kg）制作DN模型,造模成功后随机分为糖尿病肾病组（DN）、芡实小剂量组（EL,1．5g·kg-1^·d-1^）、中剂量组（EM,3．0g·kg-1^·d-1^）、大剂量组（EH,6．0g·kg-1^·d-1^）及氯沙坦钾组（LP,30mg·kg-1^·d-1^）,均采用灌胃给药,N组和DN组给予等量蒸馏水。12周后检测大鼠生化指标;HE、Masson染色及电镜观察肾脏病理变化;免疫组化、western—blot法测定GLUT1和TGF-β1在肾组织表达情况。结果：实验12周末,与正常组比较,DN组大鼠肾小球肥大、系膜基质增多,BUN、Scr、24h尿蛋白定量显著升高（P〈0．05）,肾组织GLUT1、TGF—β1表达明显上调（P〈0．05）;与DN组比较,EM、EH组大鼠病理改变减轻,BUN、Scr、24h尿蛋白定量显著下降（P〈0．05）,同时肾组织GLUT1、TGF—β1表达下调（P〈0．05）。EM、EH组及LP组降尿蛋白作用差异无统计学意义。结论：芡实可能通过下调GLUT1及TGF—β1在肾组织的表达水平,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

人类转化生长因子β诱导基因-克隆3在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及洛沙坦和黄芪对其影响

目的探讨人类转化生长因子β诱导基因-克隆3(TGF-β-inducedgene-human,clone3,βig-h3)在糖尿病大鼠肾组织中的表达意义,以及血管紧张素受体拮抗剂洛沙坦losartan和中药黄芪对糖尿病大鼠肾组织βig-h3表达的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型。将SD大鼠随机分成5组,每组6只:正常对照组(N组)、糖尿病组(D组)、losartan治疗组(DL组)、黄芪治疗组(DA组)和losartan黄芪联合治疗组(DLA组)。治疗8周后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1mRNA的表达;免疫组化方法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1蛋白质的表达水平。结果处理8周后,与N组相比,D组肾小球系膜增生、基质大量堆积,部分肾小球出现硬化;各治疗组系膜增生均有减轻。D组肾组织βig-h3、TGF-β1mRNA和蛋白表达均明显升高(与C组比较,P<0.05);各治疗组上述指标均有不同程度的下降(与D组相比,P<0.05)。βig-h3的表达与TGF-β1呈正相关(r=0.81,P<0.05)。结论βig-h3在糖尿病肾病发生发展过程中可能起重要作用;losartan和黄芪可能部分通过下调肾组织βig-h3mRNA和蛋白的表达对糖尿病肾病发挥抗纤维化作用。     

黄芪对早期糖尿病大鼠肾小球整合素α3β1的影响

目的探讨糖尿病大鼠肾小球整合素α3β1的表达及黄芪对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型，将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（NC组，6只）、糖尿病模型组（DM组，8只）、氯沙坦治疗组（DL组，8只，10mg·kg^-1·d^-1灌胃）和黄芪治疗组（DA组，8只，5ml@kg^-1·d^-1灌胃）。6周末检测各组大鼠血糖、体重、肾重／体重及24h尿白蛋白排泄率（UAER）；观察肾小球病理形态及免疫组化检测肾小球整合素0．3B1的蛋白表达水平。结果糖尿病模型组大鼠血糖、肾重／体重、UAER、肾小球面积及肾小球容积均明显高于正常对照组（P〈0．01），而体重明显减轻（P〈0．01）；黄芪治疗组大鼠血糖无明显变化（P〉0．05），体重有所增加（P〈0．01），余指标均有所降低（P〈0．01或P〈0．05）。糖尿病模型组肾小球整合素α3β1表达明显低于正常对照组（P〈0.01），而黄芪治疗组其表达有所升高（P〈0．01）。结论黄芪对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用，其机制可能部分与上调肾小球整合素α3β1的表达有关。     

微小RNA-1246靶向糖原合成酶激酶3β激活Wnt/β-连环蛋白信号通路促进前列腺癌细胞的迁移、侵袭和增殖

目的探讨微小RNA(miR)-1246靶向糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对前列腺癌(PCa)细胞迁移、侵袭和增殖的作用及分子机制。方法采用miRNA-Seq技术检测PCa组织及癌旁组织中差异表达的miRNA;采用实时荧光定量聚合酶连反应(qRT-PCR)技术检测PCa患者癌组织和血清中miR-1246的表达水平;采用生物信息学分析、荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR、蛋白质印迹法分析miR-1246对GSK3β的靶向调控关系。人PCa细胞DU145和LNCaP分别转染miR-1246类似物(mimics)/阴性对照(NC mimics)或miR-1246抑制剂(inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor), 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的增殖能力, 通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移侵袭能力。两组间比较采用独立样本t检验。结果 miRNA-Seq结果显示, 与癌旁组织比较, PCa组织中有15个miRNA表达显著升高, 51个miRNA表达显著降低, 其中miR-1246在PCa患者组织及血清中表达显著升高(组织:7.93±2.39比...     

氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠肾组织p-JAK2、p-STAT3及VEGF表达的影响

目的：探讨氯沙坦钾对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠肾组织 p - JAK2、p - STAT3及 VEGF 表达的影响。方法：健康雄性 SD 大鼠30只随机分为正常对照组（C 组）、DN 模型组（DN 组）、氯沙坦钾组（L 组）。采用单次腹腔内注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）法建立 DN 大鼠模型,周期12周。实验12周末检测大鼠血糖、Scr、BUN、24 h 尿蛋白定量;光镜及电镜下观察大鼠肾组织病理改变;采用免疫组化方法检测大鼠肾组织 p - JAK2、p - STAT3、VEGF 表达。结果：实验12周末,模型组大鼠血糖、Scr、BUN、24 h 尿蛋白定量均高于对照组（P ﹤0．05）,肾组织中 p - JAK2、p - STAT3、VEGF 表达均高于对照组（P ﹤0．05）;氯沙坦钾组大鼠 Scr、BUN、24 h 尿蛋白定量均低于模型组（P ﹤0．05）,肾组织 p - JAK2、p -STAT3、VEGF 表达均低于模型组（P ﹤0．05）。结论：氯沙坦钾可能部分通过调控 p - JAK2、p - STAT3及 VEGF 的表达而发挥肾脏保护作用。