复合皮移植治疗功能部位深度烧伤39例临床观察

应用脱细胞真皮基质加自体表皮复合移植修复切痂后烧伤创面39例。结果复合皮移植后皮片成活率94％，供、受皮区仅有轻度瘢痕，皮肤外观、弹性及肢体功能恢复良好。认为应用脱细胞真皮基质加自体表皮复合移植修复功能部位获得了类似于中厚皮移植的效果，节省了自体皮源，供皮区损伤小、恢复快，瘢痕轻。     

松质骨骨基质明胶负载软骨细胞移植修复兔膝关节软骨缺损

目的 应用松质骨骨基质明胶(bone matrix gelatin，BMG)负载兔软骨细胞移植修复同种异体关节软骨缺损。方法 BMG载软骨细胞，体外培养12d后植入同种异体新西兰兔膝关节软骨缺损。对照组植入BMG或不作任何植入。移植前用胰蛋白酶处理关节软骨缺损。术后2、4、8、12、24周行解剖显微镜、组织学、电镜观察和免疫组织化学染色。结果 BMG术后8周降解。实验组术后24周关节软骨缺损以软骨组织修复，与周围软骨及软骨下骨愈合良好。Safranin-O、免疫组织化学染色证实其基质有蛋白多糖和Ⅱ型胶原，电镜观察表明修复组织软骨细胞及基质与正常关节软骨一致。BMG对照组以部分软骨组织修复，空白对照组以纤维组织修复。结论 松质骨BMG可作为软骨组织工程的天然细胞支架，其负载软骨细胞移植能修复同种异体兔关节软骨缺损。     

保留软骨的去细胞全喉支架制备方法及在喉软骨缺损中的修复效果

目的探讨保留软骨的去细胞全喉支架的制备方法及在大鼠喉软骨缺损中的修复效果。方法取6只大鼠用于支架的制备,分离颈总动脉,结扎分支,经颈总动脉灌注去污剂(SDS、Triton X-100、PBS离子型),3只大鼠去除喉黏膜、肌肉、韧带的同时,保留细胞外基质和软骨细胞制备保留软骨的去细胞全喉支架,其余3只用于制备对照组支架。另取34只大鼠,建立0.5 cm×0.5 cm全层喉软骨缺损模型,根据处理方法不同随机分为对照组(n=17)和保留软骨组(n=17),对照组植入未经处理的异体喉骨支架,保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架,比较两组的修复效果。结果 (1)两种支架经过脱细胞灌注处理后,全喉大体结构完整,体积未发生明显的变化;(2)保留软骨的去细胞全喉支架未见表面细胞组织填充,可见胶原、细胞外基质成分组成的腔隙,细胞之间结构紧密,存在于会厌、声带、环状软骨等表面;对照组支架组织中的细胞成分被完全去除,但是依稀可见网状连接,结构之间不紧密;(3)免疫荧光结果显示:保留软骨的去细胞全喉支架除了有肌肉、软骨细胞外,主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阴性;对照组支架免疫荧光染色下MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ染色均为阳性;(4)保留软骨组大鼠修复6 w后缺损部位存在少许不成熟的软骨细胞,极少的软骨形成陷窝,表面存在纤维组织及炎症细胞;修复12 w后缺损部位得到修复,形成软骨陷窝,炎症反应减少;对照组修复6 w后缺损部位周围软骨细胞较少,缺损部位与周围组织边界明显,存在大量炎症细胞;修复12 w后存在少量纤维组织,存在炎症因子。结论保留软骨组植入保留软骨的去细胞全喉支架在喉软骨缺损中具有良好的修复效果。     

脱细胞异体真皮加自体刃厚皮复合移植在创面修复中的临床应用

目的 寻找功能部位深度烧伤创面与瘢痕畸形修复的理想覆盖材料.方法将功能部位的深度烧伤创面和瘢痕切除后,创面行脱细胞异体真皮+自体刃厚皮复合移植.结果 25例患者复合皮全部成活,复合皮光滑柔软,局部弹性好,关节功能恢复良好.结论脱细胞异体真皮+自体刃厚皮是功能部位创面修复的理想覆盖材料.     

构建组织工程化人工食管模型的实验研究

用曲拉通X-100将猪主动脉进行脱细胞处理。将体外扩增培养的犬新生食管上皮细胞接种于猪脱细胞血管基质（ACTM）上，通过光镜及扫描电镜观察ACTM是否存在细胞成分以及食管黏膜上皮细胞能否生长于其上。结果：酶化学除垢剂法能使猪主动脉细胞脱落，基质三维结构变疏松。体外扩增的犬食管黏膜上皮细胞可以种植在猪ACTM上并能生长增殖。认为猪ACTM与犬食管上皮细胞具有良好的生物相容性，能结合形成人工食管移植体。     

异种脱细胞真皮基质覆盖自体微粒皮治疗大面积深度烧伤疗效观察

目的：观察异种脱细胞真皮基质覆盖自体微粒皮治疗大面积深度烧伤的临床疗效。方法对46例大面积深度烧伤患者采用早期切（削）痂术,创面行自体微粒皮移植加异种（猪）脱细胞真皮基质敷料治疗,观察脱细胞真皮基质变化以及创面修复情况。结果术后异种脱细胞真皮基质敷料与创面贴敷良好,未见明显溶解脱落;3～4周逐渐脱水干燥,自体微粒皮成活并扩展,异种脱细胞真皮基质敷料与创面逐步分离,直至创面愈合脱落。术后2个月,创面愈后外观、弹性较好,瘢痕增生轻。结论异种脱细胞真皮基质覆盖自体微粒皮治疗大面积深度烧伤疗效较好。     

曲拉通X-100对制备脱细胞真皮基质影响的实验研究

目的探讨由曲拉通X-100制备脱细胞真皮基质(ADM)的最佳浓度及作用时间,为表皮细胞种植于ADM形成组织工程化口腔黏膜提供实验依据。方法取大鼠2cm×2cm大小的皮肤56块,置于0.25% Dispase试剂中4C下孵育48小时,轻轻去掉表皮,随机分成7组,分别浸入0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、1%、3%、10%的曲拉通X-100中作用36～80小时。取标本制作组织切片,HE染色,大体、光镜观察。结果光镜检查结果显示,制备出的脱细胞真皮基质主要由胶原纤维网架构成;曲拉通X-100浓度较低(0.1%～0.5%)时,皮肤脱净细胞成分的时间随浓度升高而逐渐缩短,各浓度间有明显差异(P均<0.01),而当浓度>0.5%时,皮肤脱净细胞时间与浓度无关,组间无显著差异(P>0.05)。结论曲拉通X-100制备大鼠ADM的最佳浓度为0.5%,时间为(45±2.82)小时。     

脱细胞真皮联合自体刃厚皮移植治疗烧伤后瘢痕(附36例报告)

目的探讨脱细胞真皮联合自体刃厚皮移植治疗烧伤后瘢痕的可行性及效果。方法对36例烧伤后瘢痕患者在严格无菌条件操作下将瘢痕切除(保留深筋膜上2~3 mm脂肪组织)后,植入脱细胞真皮和自体刃厚皮,创面用成纤维细胞生长因子(EGF)和抗生素外敷加压包扎,制动肢体。结果修复面积为6 cm×8 cm~28cm×30 cm,脱细胞真皮与自体刃厚皮贴覆成活>98%;6例随访6个月~2 a,无排斥反应,皮肤弹性、外观良好,触之柔软,关节部位功能良好;多次供皮区无瘢痕,仅有轻度色素沉着。结论脱细胞真皮是一种修复瘢痕切除后创面的理想组织工程化材料,其与自体刃厚皮移植联合治疗烧伤后瘢痕增生近期效果良好,尤其对自体皮源有限者可起到自体全厚皮的作用。     

应用人胚软骨细胞修复关节软骨缺损的研究

目的了解应用人胚胎关节软骨细胞修复家兔膝关节软骨大面积深层缺损的效果,为临床上进一步应用人胚胎关节软骨细胞进行同种异体细胞移植的可行性提供佐证.方法将分离的人胚胎关节软骨细胞以天然胶原作为细胞外基质网架,进行体外三维培养1周后,植入家兔关节软骨大面积深层(5 mm×5 mm×4 mm)缺损处,对修复组织进行大体观察及组织学评估.结果移植术后12周,缺损部位平坦、光滑,已为类似关节软骨的半透明组织填充,修复组织与宿主关节软骨组织整合较好,界限模糊;移植术后24周,缺损表面为透明软骨填充,缺损深部的软骨下骨组织已经重建.结论人胚胎关节软骨细胞可以作为软骨组织工程的种子细胞用于修复关节软骨组织的缺损.     

二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响

目的探讨二氢睾酮(DHT)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架移植坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体Trk B的表达和功能恢复的影响。方法 30只成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和DHT+ADSC组。坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经运动功能的恢复,Western印迹检测神经移植体内BDNF及其受体Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突表达,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,DHT+ADSC组神经移植体内BDNF和Trk B蛋白相对表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显著增高(P0.05)。与ANA组比较,ADSC组和DHT+ADSC组电生理波幅明显增高、神经传导速度明显增快、延迟期明显缩短、胫前肌湿重比率明显增高,其中DHT+ADSC组神经恢复作用显著优于ADSC组(P0.05),而且DHT+ADSC组SFI明显高于ANA组和ADSC组(P0.05)。结论 DHT联合ADSC移植对小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与促进神经移植体内BDNF及其受体Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。     

心脏脱细胞基质水凝胶制备及其对心肌梗死修复的研究进展

心肌组织通过物理、化学或其他方法进行脱细胞处理后，制备成的脱细胞基质含有许多细胞外基质成分，包括蛋白质、胶原、多糖以及生长因子等，不仅对细胞生长有很好的生物相容性，而且还能有助于细胞的修复和再生，是一种很有前途的心血管修复材料。脱细胞基质水凝胶是将脱细胞基质进行凝胶化后，所形成的一种具有生物相容性、可降解性以及可注射性的生物材料，不仅保留了脱细胞基质本身的优点，而且增加了可注射性这一优势，可在心肌梗死后进行微创注射，从而对心脏产生修复作用。     

复合皮移植治疗重症烧伤后瘢痕增生30例效果观察

自2000年以来，我们采用脱细胞异体真皮与自体表皮混合移植治疗重症烧伤后瘢痕增生30例，取得较好疗效。现报告如下。     

生长因子与软骨细胞-胶原海绵复合体联合应用修复软骨缺损的研究

目的研究在体条件下碱性成纤维生长因子（bFGF）与软骨细胞-胶原海绵复合体联合应用修复软骨缺损的疗效. 方法取3日龄异体幼兔膝关节软骨细胞,体外培养后接种在胶原海绵支架上,再做移植.同一大白兔双侧膝关节内外髁分为4组：空白对照组、软骨细胞-胶原海绵复合体移植组（复合体移植组）、bFGF应用组和软骨细胞-胶原海绵复合体与bFGF联合应用组.移植术后不同时间分批处死,进行大体、光镜和电镜观察. 结果移植术后12周联合应用组软骨缺损修复以完全修复为主,而复合体移植组以不完全修复为主,差异有统计学意义;20周时2组均得到修复,差异无统计学意义,组织学分析均为软骨组织;在不同时间点空白对照组和单纯bFGF应用组软骨缺损修复差异无统计学意义,但组织学上修复的组织,前者为纤维组织,而后者同时有软骨组织存在. 结论 bFGF在软骨组织工程中有促进软骨缺损早期修复的作用.     

应用同种异体组织工程软骨修复关节软骨缺损观察

目的用胶原蛋白和人血纤维蛋白混合物为载体支架在体外进行软骨细胞三维立体培养,构建人工软骨组织,利用此人工软骨修复关节软骨缺损。方法取2周龄兔关节软骨,经消化、分离的软骨细胞体外培养。培养第3周时,进行免疫组织化学分析;利用培养3周的人工软骨对异体成兔的关节软骨损伤进行修复。结果培养物内软骨细胞均得到较好存活,形成软骨陷窝,出现同源性细胞簇,分泌软骨基质;DNA和糖胺多糖(GAG)在培养第24天时达到高峰,分别为(5.18±0.19)、(214.3±2.8)μg/块;对异体关节软骨损伤的移植修复结果良好,在12周时,移植物与周边正常组织结合紧密、齐高,移植的软骨细胞趋于柱状排列,为透明软骨组织。结论用胶原蛋白和人血纤维蛋白为载体支架体外培养软骨细胞,可构建较大的组织工程软骨,能较好地修复同种异体关节软骨缺损。     

人工真皮联合自体薄层皮片移植修复难愈性创面的疗效观察

目的：观察人工真皮联合自体薄层皮片移植（简称复合皮移植）修复难愈性创面的疗效。方法选取住院的各种难愈性创面患者30例,均存在各种原因导致的不同程度和部位皮肤软组织缺损创面,部分病例伴有肌肉、肌腱、骨外露。一期清创后移植人工真皮,2～3周后局部肉芽组织生长良好,外露肌腱和骨组织被类真皮组织覆盖,二期移植自体薄层皮片。观察人工真皮和自体薄层皮片（复合皮）移植成活率、瘢痕增生、色素沉着和关节活动度等情况,综合评价人工真皮联合自体薄层皮片移植修复难愈性创面的临床效果。结果30例患者人工真皮移植后成活25例,成活率为83.3％;5例溶解失活,原因为局部感染4例,局部固定不良1例。存活的25例人工真皮联合自体薄层皮片移植成活率达100.0％。25例出院后均随访2～6个月,复合皮生长良好,光滑有弹性,无明显瘢痕增生,少量皮肤色泽改变;供皮部位恢复良好,无瘢痕增生,部分患者有少量色素改变。结论人工真皮联合自体薄层皮片移植修复难愈性创面,复合皮移植成活率高,创面愈合质量好,成活后的复合皮部位和供皮区瘢痕增生轻微,关节功能恢复良好,方法简便,为难愈性创面的修复提供了新选择。     

各种组织瓣在口腔颌面部肿瘤手术中的应用

自1982～1990年,我院应用各种组织瓣修复口腔颌面部肿瘤术后的组织缺损23例,经临床观察,效果较满意。1.临床资料本组23例中,男性17例,女性6例;年龄23～77岁。术后组织缺损应用额部皮瓣修复5例(舌癌     

组织工程化肺动脉带瓣管道纤维支架制作方法初步探讨

目的:观察采用酶加去污剂的方法脱去猪肺动脉带瓣管道的细胞和基质的效果,并通过物理和化学等方法对其进行测定,评价其作为组织工程支架材料的可行性。方法:采用0.25%胰蛋白酶和1%的Triton依次对新鲜猪肺动脉带瓣管道进行脱细胞脱基质处理。通过厚度、含水量、抗拉强度及热皱缩温度测定其物理性质与新鲜猪肺动脉对比;通过测定其蛋白多糖含量间接反应基质脱除的大小;通过新西兰幼鼠皮下埋植试验观察异种移植后炎症反应的大小。结果:采用0.25%胰蛋白酶和去污剂1%Triton能够有效脱除肺动脉壁和瓣膜中的细胞和基质成分,产生多孔隙性、低免疫原性的支架材料,初步具备良好组织工程支架材料的基本特点。     

牙龈间充质干细胞在相关口腔颌面部疾病治疗中的作用及作用机制研究进展

间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）是具有自我更新,可向脂肪细胞、软骨细胞及骨细胞多向分化的一类细胞。GMSCs已用于牙周炎、种植体周围炎、口腔癌、颌面部组织缺损、口腔黏膜炎的研究中。GMSCs可抑制M1巨噬细胞活化,抑制血清中促炎细胞因子的表达,促进血清抗炎因子的释放,减轻牙周炎的炎症反应;同时,GMSCs来源的外泌体可促进M1巨噬细胞转化为M2巨噬细胞,减少M1巨噬细胞产生的促炎因子,调节核因子κB信号通路、Wnt-5a信号通路,减轻牙周炎的炎症反应,促进牙周受损组织的再生。GMSCs可控制局部炎症及有效防止放线菌的生长,增强成骨分化促进种植体周围炎的骨再生。GMSCs可以通过上调促凋亡基因表达、下调增殖和抗凋亡基因表达改变口腔癌细胞周围的微环境来抑制口腔癌细胞在体外和体内的生长,同时可作为细胞治疗小分子物质的有效载体,提高药物的治疗效果。GMSCs可分化成不同组织类型的细胞,实现组织再生,从而修复颌面部的组织缺损。GMSCs可促进成纤维细胞的增殖迁移和胶原蛋白分泌,促进内皮细胞增殖、迁移,促进血管生成,增强内源性骨骼祖细胞的功能,促进舌肌粘膜再生...     

游离皮瓣修复口腔颌面部软组织缺损12例的护理

口腔颌面部恶性肿瘤切除术后及严重的颌面部损伤所致的大范围的组织缺损,对患者咀嚼、吞咽、语言和面部形态造成严重影响,同时面部畸形给患者的心理造成严重的精神创伤,患者生存质量明显下降。2009年1月～2010年3月,我们应用前臂皮瓣、股前外侧皮瓣、带腓骨肌皮瓣修复口腔颌面部恶性肿瘤、外伤及放射性骨髓炎所致的组织缺损12例,疗效满意。现将护理方法介绍如下。     

化学去细胞异体神经移植修复鼠全面神经的实验研究

目的利用具有＂一主干多分支＂特征的化学去细胞同种异体神经（CEAN）修复大鼠面神经缺损并评价修复效果。方法取成年SD大鼠双侧面神经进行去细胞同种异体面神经制备和自体面神经冻融处理并进行结构评价。取成年雄性SD大鼠30只,制备大鼠左侧面神经10 mm缺损模型,随机分成3组（n=10）,分别为采用自体神经移植组（A组）、去细胞同种异体面神经移植（CEANA）组（B组）和自体神经液氮冷冻组（C组）,术后行大体观察和组织学观察。结果利用化学法可制备出保留天然成分和空间结构的具有＂一干多支＂特征的CEAN。术后12周,A组、B组有髓神经纤维总数均优于C组（P〈0.05）,A组与B组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论保留天然成分和空间结构的具有＂一干多支＂特征的CEANA可用于修复大鼠全面神经缺损的治疗,具有同自体神经移植相似的修复效果。