乙型和丙型肝炎重叠感染患者肝组织免疫组织化学双标记研究

探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）重叠感染患者肝组织中病毒的复制状况和相互关系。方法采用免疫组织化学双标记技术，以抗－ＨＣＶＮＳ３、抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体和抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ多克隆抗体，检测２５例尸检肝组织中ＨＣＶＡｇ和ＨＢＶＡｇ的分布和表达。结果ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ同时阳性１１例，ＨＢｓＡｇ和ＮＳ５Ａｇ阳性１２例，ＨＢｃＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ及ＨＣＶＮＳ５Ａｇ阳性各１０例。几乎所有单标记染色阳性切片，其双标记染色也阳性。感染ＨＣＶ或ＨＢＶ的肝细胞各呈灶性、散在或弥散混杂分布，在重叠感染肝组织中，与ＨＢＶ复制有关的表达类型，如ＨＢｓＡｇ膜、浆型和ＨＢｃＡｇ浆型以及ＨＣＶＮＳ３Ａｇ和ＨＣＶＮＳ５Ａｇ的检出例数，同单纯感染组相比差异无显著意义（χ２＝０．１５４及０．１９８，Ｐ＞０．０５）。结论乙型和丙型肝炎病毒在重叠感染时，两种病毒在肝组织内可能不存在互相干扰和抑制。     

庚型肝炎病毒抗原在急性重型肝炎患者肝组织中的表达及意义

目的：探讨急性重型肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况及其与发病的关系；方法：采用免疫组化方法以抗－ＨＧＶ ＮＳ５单克隆抗体对２７例急性重型肝炎患者尸检肝组织中的ＨＧＶ等抗原进行了检测；结果：２７例肝组织中检测出ＨＧＶ ＮＳ５阳性６例（２２．２％）。ＨＧＶ ＮＳ５Ａｇ阳性着色颗粒表达于残存的肝细胞胞浆内，阳性细胞呈片簇状分布于汇管区周围。６例中４例重叠有ＨＧＶ或／和ＨＣＶ感染，肝组织中     

乙型和丙型肝炎重叠感染患者组织免疫组织化学双标记研究

探讨丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重叠感染患者肝组织中 复制状况和相互关系。方法采用免疫组织化学双标记技术，以抗－ＨＣＶ ＮＳ３，抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体和抗－ＨＢｓ，抗－ＨＢｃ多克隆抗体，检测２５例尸检肝组织中ＨＣＶＡｇ和ＨＢＶＡｇ的分布和表达。     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5a蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立及应用

制备抗丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）－ＮＳ５ａ重组蛋白的单克隆抗体（单抗），并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法通过常规细胞融合技术制备分泌单抗的杂交瘤细胞株，用含该杂交瘤细胞的腹水对石蜡包埋肝组织细胞中的ＨＣＶ－ＮＳ５ａ抗原进行免疫组化测定，同时用抑制法检测６７例丙肝血清中的ＨＣＶＮＳ５ａ和ＮＳ３抗体分布，并与ＮＳ３单抗的结果进行比较。结果融合后的阳性克隆中筛选出４株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株，命名为８Ｂ２，６Ｆ１１，４Ｃ６和７Ｄ９。这４株单抗与ＮＳ５ａ抗原有良好的反应性；与ＨＣＶ核心区多肽，ＮＳ３区表达多肽及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的表面抗原均无反应。免疫组织化学检测显示，在ＨＣＶ感染肝组织中，ＮＳ５ａ抗原阳性占５４．９％（１７／３１），而ＮＳ３抗原阳性占５１．６％（１６／３１），抗原分布多呈包涵体分布，少数病例为胞浆型，１例ＮＳ５抗原呈核型表达。在６７例抗ＨＣＶ阳性血清中，ＮＳ５抗体阳性４０例，占５９．７％，而ＮＳ３阳性４７例，占７０％。结论此法制备的单抗有强特异性，在开展ＨＣＶ免疫组织化学研究上具有广阔应用前景。     

丙型肝炎病毒在肝组织的定位分布与病变的关系

为了探讨丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）在肝组织中的分布特点与ＨＣＶ感染引起肝组织病理学变化的机理，作者应用免疫组化和原位核酸杂交方法，分别对２８例急、慢性丙肝患者肝穿刺活检组织标本听ＨＣＶ基因及其表达的ＮＳ３抗原进行了定位检测。ＨＣＶ基因的检出率是５５％，ＮＳ３抗原的检出率是８５．７％。虽然肝细胞中ＨＣＶＮＳ３的分布状态与染色的密度常因疾病类型和组织切片部位有所变化，但在急性和轻度慢性活动性丙肝患     

抗HCV NS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴

目的：为研制抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的ＨＣＶＮＳ３抗原。方法：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的细胞株。结果：获得有实用价值的两株ＭｃＡｂ。两株ＭｃＡｂ与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶＮＳ４、ＮＳ５及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。结论：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。     

丙型肝炎病毒抗原的免疫组化检测及方法学探讨

采用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区、Ｃ区、ＮＳ３区单克隆及多克隆抗体以及丙型肝炎患者血清及血清中ＩｇＧ抗体作为特异性第一抗体，分别应用ＬＳＡＤ、改良ＰＡＰ及直接酶标法对６５例丙型肝炎患者肝组织冰冻及石蜡包埋标本进行ＨＣＶ抗原检测，其中以ＮＳ３区抗体、ＬＳＡＢ法的检测结果较为理想（检出率２７．７％～２９．２％）。ＨＣＶ抗原呈肝细胞胞浆弥漫型、胞核型及胞浆类包涵体型表达。阳性肝细胞多呈单个散在分布。急性丙型肝炎比慢性丙型肝炎的ＨＣＶ抗原检出率更高且抗原颗粒的分布与病理损伤呈正相关，炎症区浸润的淋巴细胞中可见阳性颗粒；而慢性丙型肝炎肝组织中ＨＣＶ抗原与病理损伤无明显关联；支持急性丙型肝炎的肝细胞损伤由病毒的直接作用及免疫攻击协同所致，而慢性丙型肝炎则以免疫反应引起肝细胞持续损伤为主。胞浆弥漫型ＨＣＶ抗原表达是急性或活动性病变时的主要表达形式，而胞核型ＨＣＶ抗原表达多见于病变静止期。     

慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒NS5抗原的检测

目的了解慢性肝病患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况。方法采用免疫组织化学方法,用抗ＨＧＶＮＳ５单克隆抗体对１１０例血清学病毒标记非甲非戊、乙型及丙型肝炎的慢性肝病患者肝组织中的ＨＧＶ抗原进行了检测。结果ＨＧＶ的总检出率为３２７％（３６／１１０）,非甲非戊、乙型及丙型肝炎病毒的检出率分别为２１％（４／１９）、３６％（２５／６９）及３２％（７／２２）;活动性肝硬化、原发性肝癌及慢性重型肝炎中ＨＧＶ的检出率为２２％（１０／４５）、４３％（２０／４７）及３３％（６／１８）,不同血清病毒标志组或病理类型之间其检出率差异均无显著意义（χ２＝４３１,１．５２;Ｐ＞０１０,Ｐ＞０２５）。ＨＧＶＮＳ５Ａｇ主要于肝细胞或癌细胞胞浆内表达,阳性肝细胞呈弥漫或大片灶状分布,免疫组织化学双标记染色显示ＨＢｓＡｇ或丙型肝炎（ＨＣＶ）ＮＳ３Ａｇ阳性细胞呈单个或小片灶状,多与ＨＧＡｇ阳性细胞位于同一区域内,或在同一肝细胞内表达。结论在慢性肝病患者肝组织中ＨＧＶ的感染较为常见     

慢性丙型肝炎患者肝内HLA-Ⅱ类抗原和丙型肝炎病毒NS_3抗原的表达

为了研究丙型肝炎的ＨＬＡ－Ⅱ类抗原相关性免疫发病机制,对４７例慢性病毒性肝炎患者的肝活检组织标本应用免疫组织化学技术研究了肝内ＨＬＡ－Ⅱ类抗原和ＨＣＶ,ＮＳ３抗原的表达。１１例慢性丙型肝炎患者中３例肝内ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达呈阳性,其阳性程度明显低于慢性乙型肝炎患者（１５／１９）和慢性乙型和丙型肝炎病毒重叠感染者（１５／１７）。１０例患者肝细胞内ＨＣＶ,ＮＳ３抗原阳性,其中６例为慢性丙型肝炎患者,４例为慢性乙型和丙型肝炎病毒重叠感染者。慢性乙型肝炎患者的肝细胞中无ＨＣＶ,ＮＳ３抗原阳性。尽管在ＨＣＶ,ＮＳ３抗原阳性肝细胞表面未发现ＨＬＡ－Ⅱ类抗原,但ＨＬＡ－Ⅱ类抗原阳性表达明显与肝组织损伤的严重性有关。因此肝内ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的表达可能在慢性丙型肝炎患者的免疫发病中有一定的作用     

原发性肝癌与乙型,丙型肝炎病毒感染的关系

用酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）对我院外科手术及病理检查证实的１５７例原发性肝癌（ＰＨＣ）进行乙型肝炎病毒血清感染标志（ＨＢＶＭ）及抗－ＨＣＶ检测，发现我国１３０例患者ＨＢＶＭ的阳性率为８８．５％，抗－ＨＣＶ阳性率１０．８％。２７例毕裔印尼（印尼）患者的ＨＢＶＭ及抗－ＨＣＶ阳性率分别为５９．３％及４８．１％，提示我国ＰＨＣ与ＨＢＶ感染关系密切，ＨＣＶ感染不是最主要原因。     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

丙型肝炎的防治

丙型病毒性肝炎 (简称丙肝 )是严重危害人类健康的一种传染病 ,它与肝硬化、肝癌密切相关 ,但由于其隐性感染、亚临床感染较多 ,故对丙肝的防治带来一定的困难。笔者通过对我院 1994年 3月 2 0 0 1年 5月间收治的 46例急、慢性丙肝患者的回顾分析 ,探讨丙肝的防治对策。1　临床资料1.1　一般资料　 46例均符合 1995年北京市病毒性肝炎防治方案 (试行 )诊断标准。其中 ,急性 40例 ,慢性 6例。抗 ＨＣＶ( + ) 4 6例 ,ＨＣＶ ＲＮＡ( + ) 2 6例 ,男 3 1例 ,女 15例 ,男女之比为 2 :1。年龄 2 0 75岁 ,平均 3 8岁 ,潜伏期 142 6ｄ ,平均 48ｄ。…     

输血后丙型肝炎感染及影响因素的研究

采用回顾性定群研究方法，对济南市１１９例输血后丙型肝炎感染情况进行了调查。结果表明，１１９例受血者中，抗－ＨＣＶ阳性３１例，阳性率为２６．１％，其中１４例为临床丙型肝炎患者，罹患率为１１．７％。输入经筛检血液的受血者中，ＨＣＶ感染率和丙肝罹患率分别为１４．６％和４．２％，输入未经筛检血液者分别为３３．８％和１６．９％，差异有显著性（Ｐ＜０．０５，ＲＲ＝２．３０ＲＲ＝４．０２）。对输血量，输血次数及住院天数双向筛选法多元线性逐步回归分析表明，输血量是影响受血者感染ＨＣＶ的主要因素。     

丙型肝炎的血清学及临床特点

用抗-HCV EIA法检测,用排除法诊断为非甲非乙型肝炎27例。其中,输血后非甲非乙型肝炎22例,抗-HCV阳性20例(90.9%);散发性非甲非乙型肝炎5例,抗-HCV阳性2例(40%)。抗-HCV的检出率随着病程的延长而升高。并对丙型病毒性肝炎的主要临床特点进行讨论。     

INFLUENCE OF HEPATITIS B AND HEPATITIS C VIRUS INFECTION ON THE OUTCOME OF KIDNEY TRANSPLANTATION

GREAT improvement inkidneytransplantatioovnerthepasttwo decadesisdue tobetterorganprese-rvatio,nimmunosuppression,and patientselectio.1nA major problem influencinrgenalallografotutcome ispre-sence of chronicliverdisease. In thesecases, hepatitiBsvirus(HBV ) and hepatitiCs virus(HCV ) infectionasrethemain causesofhepaticinjur.yReplicatioonfHBV isenhancedunderimmunosuppressionafterrenaltransplantati,oannd li-verinjuryprogressionseems to be greaterforpatientswithchronicHBV infectionthan th…     

丙型肝炎与丙,乙型肝炎重叠感染：附50例病例分析

对50例丙型肝炎(其中丙型38例,丙、乙型重叠感染12例)进行临床分析,发现丙型肝炎在我科占住院肝炎患者的29.98％,多与手术、输血密切相关,临床表现较轻,发生黄疸者较少,易反复、慢性化。丙型肝炎与丙、乙型重叠感染比较,后者病情较重、预后差,更易转为慢性及发展成肝硬化。     

126例丙型肝炎病者临床病毒血清学分析

分析126例丙型肝炎病者的临床资料,丙型肝炎病毒血清抗体(抗-HCV)滴度及丙型肝炎核酸(HCV-RNA)。发现有明确输血(浆)史者103例,该病史中发现输血后2个月内有肝损者87例占84.4％。抗-HCV检出率为91.3％,其中急性病者检出率82.6％,慢性者95.8％。抗-HCV强阳性者(OD>1.0),HCV-RNA的检出率48.1％,明显高过OD<1.0的低阳性者。抗-HCV阴性者中有18·18％(2/11)检出HCV-RNA。另外,HCV-RNA的检出与谷-丙转氨酶(ALT)水平有一定关系,有肝损者比ALT正常者HCV-RNA检出率明显高。提示HCV-RNA的检出与活动性肝病有关系。     

慢性丙型肝炎患者HCV核心蛋白基因及其肽链的序列分析

为探讨丙型肝炎病毒感染在肝癌发生中的作用，从３５例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的非甲非乙型肝病患者血清中提取ＨＣＶ－ＲＮＡ，经随机引物逆转合成ｃＤＮＡ，在病毒的Ｃ基因区进行分型，再于病毒５‘－末端至Ｅ１区进行测序分析。     

树Qu对丙型肝炎病毒的易感性研究

目的：探讨树Ｑｕ对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的易感性。方法：对来自云南的树Ｑｕ接种含ＨＣＶ的病人血清,然后用ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ血清的ＨＶＣ ＲＮＡ,用反向被动血凝法测定抗－ＨＣＶ抗体,用原位ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ肝细胞内的ＨＶＣ ＲＮＡ。结果：３４．８％的树Ｑｕ（８／２３）在接种ＨＣＶ后,血清中检出ＨＣＶ ＲＮＡ,对４例抗ＨＣＶ阳性和谷丙转氨酶升高的树Ｑｕ的肝组织进行原位ＰＣＲ检测,结果在１例肝细胞中     

EVALUATION OF EFFICACY OF RECOMBINANT-IFN IN TREATMENT OF CHRONIC HEPATITIS C

ＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＥＦＦＩＣＡＣＹＯＦＲＥＣＯＭＢＩＮＡＮＴ－ＩＦＮＩＮＴＲＥＡＴＭＥＮＴＯＦＣＨＲＯＮＩＣＨＥＰＡＴＩＴＩＳＣｊｉｎｇｅｎｄｉ（金根娣）（ＣｌｉｎｉｃａｌＶｉｒａｌＲｅｓｅａｒｃｈＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＲｕｉｊｉｎｇＨｏｓｐｉ...