康脑液对皮质区干细胞因子基因表达的影响

目的：在康脑液方剂干预下观察皮质区内源性神经细胞干细胞因子（SCF）mRNA在大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间的表达情况。方法：成年SD大鼠,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为模型组、药物干预组和假手术组。原位杂交技术检测脑缺血1.5h再灌注1～14d后,脑皮质区SCFmRNA表达情况。结果：脑缺血再灌注后,药物干预组、模型组SCFmRNA的表达在皮质区均明显高于假手术组,于第7天达高峰,第14天下降。结论：药物干预后脑缺血再灌注脑皮质区SCFmRNA表达在不同时间点与模型组具备相同的表达规律,两组SCFmRNA的表达无显著性差异。     

糖皮质激素对支气管哮喘患者血清干细胞因子表达的影响

目的检测干细胞因子（stem cell factor,SCF）在哮喘患者糖皮质激素治疗前后血清中的含量,评价糖皮质激素对SCF在支气管哮喘中的影响及意义。方法选择2009年3月～2010年4月入住我院呼吸科的支气管哮喘急性发作期患者33例作为研究对象,使用糖皮质激素进行治疗,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其治疗前后的血清SCF水平,同时测定25例正常对照血清SCF水平。结果糖皮质激素治疗后患者血清中SCF的含量较对照组明显增高（P〈0.05）;治疗后患者血清中SCF的含量显著低于治疗前水平（P〈0.05）;治疗缓解后患者血清中SCF的含量与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论糖皮质激素治疗可降低SCF的表达,SCF在哮喘发病及病情判断中可能起重要作用。     

糖皮质激素对哮喘患者血清和诱导痰中干细胞因子表达的影响

目的检测SCF蛋白在哮喘患者糖皮质激素治疗前后血清和诱导痰中的含量,评价糖皮质激素对SCF在支气管哮喘中的影响及意义。方法对32例哮喘患者用糖皮质激素进行治疗,应用ELISA方法测定糖皮质激素治疗前后血清以及诱导痰中SCF蛋白含量。结果糖皮质激素治疗前的哮喘患者与正常健康者比较,血清以及诱导痰中SCF蛋白明显升高,具有显著性差异(P<0.05)。糖皮质激素治疗后,血清以及诱导痰中SCF蛋白比治疗前的哮喘患者明显降低,与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论结果显示SCF在血清以及诱导痰中均有表达,哮喘发作时含量明显增高。糖皮质激素治疗可降低SCF的表达,提示SCF与哮喘疾病紧密相关。     

黄芪多糖对体外培养骨髓间充质干细胞增殖和干细胞因子表达的刺激作用

 目的 探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)体外对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖的影响及干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的刺激作用。方法 采用MTT法检测APS刺激72 h后SD大鼠MSCs增殖情况;RT PCR检测增殖过程中不同细胞因子mRNA的表达;real time PCR定量检测SCF mRNA的表达;Western blot检测SCF蛋白的表达;ELISA法检测培养上清液中SCF的含量。结果 与空白对照组相比,1、2、3 mg/mL APS组均具有促进MSCs增殖的作用,以1 mg/mL促增殖作用最为明显(P<0.01)。与空白血清组相比,10% APS含药血清具有明显促增殖作用(P<0.05),且明显促进SCF mRNA表达及可溶性SCF蛋白的分泌(P<0.05)。1 mg/mL APS明显促进SCF mRNA和SCF蛋白表达(P<0.05)。结论 APS促进MSCs增殖,可能与其促进MSCs表达SCF mRNA及SCF蛋白有关。     

干细胞因子概述

干细胞因子(SCF)是一种重要的多功能细胞因子,它能刺激早期干细胞的增殖及定居,单用或伍用其它细胞因子能刺激造血集落细胞的增生、增大,为人类重要的造血生长因子之一,可应用于致死性急性照射后的造血恢复、放化治疗和骨髓功能衰竭后贫血及其它难治性贫血的治疗等.现已实现了SCF的基因克隆及基因工程表达.     

哮喘小鼠肺组织干细胞因子表达及激素对其的影响

目的　观察干细胞因子 (SCF)在哮喘小鼠肺组织中的表达及激素对其影响 ,以探讨SCF在哮喘发病过程中的作用。方法　通过卵蛋白 (OVA)鼻腔滴注 ,复制出BALB/c小鼠哮喘模型并予地塞米松治疗 ;采用免疫组织化学及半定量RT PCR法 ,于OVA末次激发 2 4h后检测小鼠肺组织SCF蛋白、膜型SCF(mSCF)mRNA和可溶性SCF(sSCF)mRNA的表达。结果　免疫组织化学显示哮喘小鼠肺组织SCF蛋白表达较正常小鼠增强 ,地塞米松可下调SCF蛋白的表达。RT PCR检测显示哮喘组小鼠肺组织的mSCFmRNA的表达为0 .36± 0 .0 2 ,较对照组的 0 .16± 0 .0 3明显增加 (P <0 .0 1) ;地塞米松治疗后 ,小鼠肺组织mSCFmRNA下降为0 .18± 0 .0 3,与对照组的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。哮喘组小鼠肺组织sSCFmRNA的表达为 0 .2 3± 0 .0 2 ,较对照组的 0 .4 1± 0 .0 5明显减少 (P <0 .0 1) ;地塞米松治疗后 ,小鼠肺组织sSCFmRNA明显增加至 0 .87± 0 .0 4 ,显著高于对照组 (P <0 .0 1)。结论　SCF参与哮喘的发病 ,两种不同形式的SCF在哮喘发病过程中的作用可能有所不同 ,地塞米松可通过调节SCF的表达来减轻哮喘炎症反应。     

牛磺酸对细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡的影响

目的：观察牛磺酸对白细胞介素－1β（IL-β）、肿瘤坏死因子（TNF）和γ－干扰素（IFN－γ）诱导的胰岛细胞凋亡的影响。方法：应用体外单层培养的Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL－1β、TNF和IFN－以及牛磺酸对胰岛细胞凋亡细胞百分率,培养液中NO含量及NOS活性以及DNA片段的影响。结果：IL－1β、TNF和IFN－γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率及DNA片段明显增加,同时NO含量和NOS活性亦明显升高（P＜0．01）;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用（P＜0．01）,且有剂量依赖性。结论：NO可能是介导上述细胞因子引起胰岛细胞凋亡的重要途径之一。牛磺酸能够改善细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与抑制NOS活性从而减少NO的生成有关。     

牛磺酸对大鼠辨别学习的影响

本实验以含０．２％及０．５％牛磺酸的混合饲料喂养新生大鼠，观察对辨别学习的影响。结果表明：食物中未添加牛磺酸的对照组大鼠达到学会标准所需的时间为４．７７±０．９７天；添加０．２％牛磺酸大鼠所需时间为４．０９±０．９４天，与对照组相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）；添加０．５％牛磺酸为３．６２±０．６５天，与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。提示自幼食物添加适量牛磺酸的大鼠，辨别学习能力增强，可见牛磺酸参与大鼠辨别学习过程。     

干细胞因子研究概述

干细胞因子(SCF)是一种重要的多功能细胞因子,它能刺激早期干细胞的增殖及定居,单用或伍用其它细胞因子能刺激造血集落细胞的增生、增大,为人类重要的造血生长因子之一,可应用于致死性急性照射后的造血恢复、放化治疗和骨髓功能衰竭后贫血及其它难治性贫血的治疗等.现已实现了SCF的基因克隆及基因工程表达.     

哮喘患者血清干细胞因子水平及其临床意义

目的观察哮喘患者治疗前后血清干细胞因子（SCF）水平的变化。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测30例哮喘患者发作期及治疗缓解后血清SCF水平，同时测定20例正常对照血清SCF水平。结果发作期患者血清中SCF的含量较正常对照组明显增高[（156．8±82．6）pmol／L比（61．5±15．4）pmol／L，P〈0．001]；治疗缓解后患者血清中SCF的含量[（66．2±15．8）pmol／L]显著低于发作期患者（P〈0．001）。治疗缓解后患者血清中SCF的含量与正常对照组比较无显著性差异（P=0．30）。结论发作期患者血清中SCF的含量高于治疗缓解后患者及正常组，SCF在哮喘发病中可能起重要作用。     

人干细胞因子全长cDNA的基因扩增与克隆

目的 探讨人干细胞因子的结构与功能及其在真核细胞中的表达与调控的机制，首先克隆了人干细胞因子全长cDNA。方法 用RPMI1640，体积分数为10％的小牛血清培养HepG2细胞，抽提RNA，行RT－PCR，纯化PCR产物，与pGEM-T克隆载体连接，转化、铺板，筛选阳性克隆，酶切鉴定并进行序列测定。结果 通过酶切鉴定并进行序列测定，成功地获得了人干细胞因子全长cDNA的基因克隆。结论 人干细胞因子全长cDNA的基因克隆的构建成功，为其结构与功能的研究及其在真核细胞中的表达与调控的研究提供了一定的物质基础。     

胰岛素样生长因子1调节胃平滑肌细胞表达干细胞因子的ERKMAPK通路

目的 探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)调节胃平滑肌细胞(SMC)表达干细胞因子(SCF)的信号传导途径.方法 培养SD大鼠胃SMC,α-肌动蛋白免疫荧光鉴定,Western印迹、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃SMC表达SCF的变化情况:(1)IGF-1作用后;(2)IGF-1受体(IGF-1Rα)抗体阻断IGF-1R后;(3)PD-98059、LY-294002分别抑制丝裂原激活蛋白激酶的激酶(MEK)、磷脂酰激醇3激酶(PI3K)后.结果 在无血清培养条件下,SCF在大鼠胃SMC中少量表达,低剂量IGF-1(5和10μg/L)对SCF表达均无影响(均P>0.05);中、高剂量IGF-1(50、100、150 μg/L)诱导分别使SCF蛋白表达上调达2.79、5.51及5.35倍,mRNA表达上调达1.81、2.54及2.38倍(均P<0.05);且促进SCF合成的最高峰在第16小时(蛋白表达上调达2.36倍,mRNA表达上调达5.51倍,均P<0.05).IGF-1Rot抗体可抑制SCF合成,抑制作用呈浓度依赖性(均P<0.05).分别用PD-98059、LY-294002预处理SMC、再用IGF-1诱导,PD-98059能部分阻断SCF的表达(蛋白抑制率为23%,mRNA抑制率为48%,均P<0.05)、LY-294002对SCF的表达无影响(P>0.05).结论 IGF-1可通过IGF-1R以时间和剂量依赖性方式诱导胃SMC产生SCF,且IGF-1诱导SCF的表达可能依赖于ERKMAPK信号传导通路.     

干细胞因子对牙周膜细胞增殖分化能力的影响

目的探讨干细胞因子（SCF）对体外培养的人牙周膜细胞（hPDLCs）增殖、分化能力的影响。方法无菌条件下刮取因阻生或正畸需要拔除的牙齿根中1／3的牙周膜组织，采用组织块法行体外原代培养，所培养的细胞经免疫细胞化学鉴定后接种于塑料培养板，加入含0.1、1、10、100μmol／L SCF的培养液。然后采用MTT法测定细胞增殖、分化能力，并以ELISA法检测碱性磷酸酶（ALP）活性。结果原代牙周膜细胞组织块法培养的细胞生长缓慢，加入SCF后细胞生长旺盛，细胞形态为纺锤形或成纤维样，细胞质透明，状态良好。SCF在0．1、1、10、100μmol／L时对hPDLCs均有明显的促增殖作用，其中浓度为10μmol／L时促进作用最明显（P〈0.05）。此外，SCF还可以增强hPDLCs的ALP活性，其中浓度为10μmol／L时ALP OD值最高（P〈0.05）。结论SCF对hPDLCs的生物学活性有促进作用，能促使其向成骨细胞方向分化，提示SCF可能有促进牙周组织再生的作用。     

神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后GDNF基因表达的影响及意义

目的:探讨神经干细胞(NSC)移植对大鼠脊髓损伤后胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响及其意义。方法:NSC提取自新生Wistar大鼠的海马区,经培养、鉴定。制作大鼠脊髓损伤(SCI)模型,于伤后第7d移植NSC。实验分为3组:NSC移植组(A组)、DMEM填充组(B组)、正常对照组(C组)。应用RT-PCR法和免疫组化法观察细胞移植后不同时间点GDNF基因的表达变化。结果:RT-PCR结果分析,移植术后第1,3,5d,A组GDNF mRNA的表达量明显高于B组,差别有显著性意义(P<0.05)。组化结果分析,移植术后第7,14,28d GDNF的表达量明显高于B组,差别有显著性意义(P<0.05)。结论:NSC在移植后可上调神经营养因子GDNF基因的表达,是修复脊髓损伤的机制之一。     

胃肠道Cajal间质细胞与干细胞因子/c-kit信号途径关系

胃肠道Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal,ICC）是胃肠道慢波的起搏器,在胃肠道运动中具有重要作用。近年来,ICC表达c—kit的发现使人们对其有了更深的认识。c—kit与其配体干细胞因子（stem cell factor,SCF）所启动的信号途径对ICC的发生、发育及表型维持至关重要。从SCF／c—kit信号途径人手将为胃肠动力紊乱的治疗提供新思路。     

环磷酰胺对睾丸组织中SCF表达的影响及意义

目的：通过环磷酰胺对大鼠睾丸组织中干细胞因子的表达及增殖指数影响的研究,以探讨环磷酰胺所致生精功能损害的原因.方法：选取9天龄雄性Wistar大鼠,腹腔注射大、中、小剂量的环磷酰胺后24h、4w、8w分别采集睾丸标本,应用RT-PCR技术检测睾丸组织中SCF的表达,同时光镜下计数4w时睾丸组织的增殖指数.结果：（1）对照组随年龄的增加,睾丸组织中分泌型干细胞因子表达无显著差异（P＞0.05）,膜型干细胞因子均有显著增加（P＜0.05）.（2）同一时期各实验组和对照组比较,分泌型干细胞因子表达无显著差异（P＞0.05）,但膜型干细胞因子表达均有显著降低（P＜0.05）;同一时期各实验组间比较,随环磷酰胺剂量增加,膜型干细胞因子表达有显著降低（P＜0.05）.（3）同一剂量三个时期比较,各实验组分泌型干细胞因子无显著差异（P＞0.05）;膜型干细胞因子比较,大剂量组中无显著差异（P＞0.05）,中、小剂量组中24h较4w、8w均有显著降低（P＜0.05）,4w与8w比较无显著差异（P＞0.05）.（4）增殖指数检测,4w时各实验组与对照组比较,均有显著降低（P＜0.01）,并与剂量负相关.结论：本研究结果提示由于环磷酰胺的毒性作用,导致了睾丸组织中膜型干细胞因子表达下调,进而影响增殖指数降低,这可能即是临床上环磷酰胺使用后产生不同程度生精功能障碍的原因之一.     

慢性酒精暴露对SD大鼠急性脑缺血再灌注后早期海马齿状回颗粒下区神经干细胞的影响

目的探讨慢性酒精暴露对SD大鼠急性脑缺血再灌注后早期海马齿状回颗粒下区（SGZ）神经干细胞（NSCs）的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组（自来水喂养）、对照组[单纯大脑中动脉闭塞（MCAO）,自来水喂养]和酒精组（酒精暴露后MCAO,6%乙醇水溶液喂养）。正常组于饲养28d后灌注取脑,对照组、酒精组分别于造模后1、3、7d灌注取脑。切取以视交叉前缘至垂体后缘包含海马区厚约4mm的组织块进行石蜡包埋、切片、HE染色、巢蛋白（Nestin）染色处理;使用图像分析系统采集图像,计算并比较每张切片Nestin阳性细胞数。结果HE染色可见对照组、酒精组造模后1d脑组织开始出现神经元损伤,造模后3d达到高峰,造模后7d开始恢复,且酒精组更为严重;正常组未见神经元损伤。Nestin染色可见对照组造模后1dSGZNestin阳性细胞开始增多,造模后7d达到高峰;酒精组造模后1dSGZNestin阳性细胞开始增多,3d达到高峰,造模后7d明显回落;正常组SGZ可见少量散在分布的Nestin阳性细胞。酒精组Nestin阳性细胞的数量明显少于对照组（P＜0.05）。结论慢性酒精暴露可明显抑制MCAO后早期内源性NSCs增殖,抑制损伤后神经组织自身的修复,从而导致缺血性脑卒中的预后不良。     

干细胞因子联合抗白细胞介素17A抗体对小鼠脑缺血预后的影响

目的 探讨干细胞因子(stem cell factor,SCF)联合抗白细胞介素-17A抗体(anti-IL-17A)对小鼠脑缺血预后的影响.方法 通过线栓法对C57BL/6小鼠建立大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,60 min后取出线栓,恢复右侧大脑中动脉血流,建立脑缺血再灌注模型.小鼠脑缺血再灌注后分别给予腹腔注射生理盐水(normal saline,NS)、anti-IL-17A、SCF、anti-IL-17A+SCF.观察各组小鼠MCAO术后脑梗死体积、脑组织病理损伤和脑水肿程度、神经功能评分、神经细胞凋亡和炎症反应等变化.结果 与NS组相比,其余各治疗组脑梗死体积、脑组织病理损伤和脑水肿均显著减轻(P＜0.05),神经功能评分得到明显改善(P＜0.05),神经细胞凋亡减少(P＜0.05),且anti-IL-17A+ SCF组显著优于anti-IL-17A组和SCF组(P＜0.05).此外,anti-IL-17A还能明显减少脑组织IL-17A和IL-1 β的表达(P＜0.05).结论 SCF联合anti-IL-17A能更好地改善脑缺血损伤和促进神经功能恢复.