鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的:在家兔膝关节骨性关节炎模型的基础上观察鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞的影响。方法:随机分成两组,实验组建立Hulth骨性关节炎模型,对照组仅行双侧膝关节切开术,以建立模型。以正常新西兰大白兔膝关节软骨为正常对照组,以鹿茸多肽为实验药,法滋隆为阳性对照药。分别进行MTT法检测、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及琼脂糖电泳检测,获取前后软骨细胞核酸中金属蛋白酶表达情况。结果:鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞具有促进增殖作用;骨性节炎软骨细胞直接分泌到胞外的金属蛋白酶含量变化不明显;骨性关节炎软骨细胞核酸中金属蛋白酶出现高表达。结论:骨性关节炎软骨细胞在软骨细胞正常分化及增殖发生改变的过程中,骨性关节炎软骨基质降解可能是金属蛋白酶与其他因子协同作用的结果;鹿茸多肽可促进骨性关节炎软骨细胞增殖,并可抑制骨性关节炎软骨细胞中金属蛋白酶的过度表达,可能对治疗骨性关节炎有较好的作用。     

骨性关节炎人群血清基质金属蛋白酶-13水平临床观察

目的临床观察骨性关节炎患者血清基质金属蛋白酶－13水平,并与正常人对比,探讨二者的差异。方法入选76例骨性关节炎患者及65例正常对照者,采用ELISA法测定人选者血清基质金属蛋白酶－13水平。结果骨性关节炎患者血清基质金属蛋白酶－13水平（2．26±1．59）ng／mL高于对照组（1．33±0．16）ng／mL（P〈O．05）。结论骨性关节炎患者血清基质金属蛋白酶－13水平明显增高;基质金属蛋白酶－13对软骨可能有降解作用,导致关节软骨进行性破坏;基质金属蛋白酶释放失衡,可能是其引起软骨分解的主要机制。     

富血小板血浆对兔骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasm,PRP)抑制兔骨关节炎软骨表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达而发挥软骨保护作用。方法 选取30只成年清洁级新西兰大白兔,采用数字表法随机分为对照组、关节炎组、PRP组,每组各10只。关节炎组和PRP组按Hulth法制备后肢左膝关节炎模型,对照组行假手术。造模后第1周开始,各组抽取耳缘静脉血制备PRP 0.2 mL,仅PRP组给予关节腔注射。至第6周处死实验动物,获取各组左膝关节,分别行软骨组织HE染色测量软骨厚度,免疫组织化学染色计数MMP-13阳性细胞数,免疫荧光及Western blotting法检测MMP-13表达量。结果 对照组显示关节软骨形态接近正常,关节炎组软骨破坏明显,而PRP干预组较关节炎组,关节厚度得以保留,MMP-13阳性细胞及其表达量明显受到抑制。结论 PRP可减少MMP-13软骨细胞的数量和抑制MMP-13表达而发挥软骨保护作用。     

骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影响

目的研究骨碎补总黄酮对兔膝骨性关节炎的治疗效果,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补总黄酮组和维固力组。以关节制动法建立兔膝骨性关节炎模型。成模后灌胃给药,8周后镜下观察骨碎补总黄酮对动物模型关节软骨、滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-3表达的影响。结果骨碎补总黄酮组与模型对照组比较滑膜及软骨组织形态学改变明显较轻（P〈0.01）,滑膜、软骨组织中基质金属蛋白酶-3表达减少（P〈0.01）;骨碎补总黄酮组与维固力组相比,各指标间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论骨碎补总黄酮能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症,其作用机制可能与调节基质金属蛋白酶-3表达有关。     

灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的：探讨灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的影响。方法选取C518大鼠膝关节软骨细胞株,随机分为中药组（灵仙通络方）、西药组（氨糖美辛）和对照组（氯化钠溶液）,进行培养、诱导退变等处理,于给药后第1、2、3 d,分别检测中药组、西药组和对照组不同浓度下对软骨细胞增殖、COL-Ⅱ及MMP-13表达的影响。结果同一时间点的中药组、西药组不同浓度之间噻唑蓝（MTT）值差异有统计学意义（P＜0.01）。对照组不同浓度氯化钠溶液的MTT值差异不具有统计学意义（P＞0.05）。在COL-Ⅱ免疫组化染色中,中药组与西药组和对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ2=16.26,df=2,P＜0.01）。在 MMP-13免疫组化染色中,对照组较中药组、西药组差异有统计学意义（P＜0.01）,且中药组优于西药组（染色指数χ2=54.31,df=2,P＜0.01）。结论 C518大鼠膝关节退变软骨细胞经灵仙通络方干预后能够促进其增殖,调节COL-Ⅱ、MMP-13的表达,延缓膝关节骨性关节炎疾病的发展进程。     

基质金属蛋白酶-7及其组织抑制物-1与胎膜早破的相关性研究

目的 研究基质金属蛋白酶-7及其组织抑制物与胎膜早破的关系.方法 将40例孕产妇随机分为胎膜早破组20例（其中未足月PROM产妇10例,足月产PROM10例）与对照组20例（为足月临床胎膜完整产妇）,取上述孕产妇胎膜组织,采用免疫组化的方法检测胎膜中基质金属蛋白酶-7及其组织抑制物-1的浓度.结果 胎膜早破组胎膜中基质金属蛋白酶-7的表达明显高于对照组（P＜0.01）,其组织抑制物-1的表达明显低于对照组（P＜0.05）,基质金属蛋白酶-7与其组织抑制物呈负相关（P＜0.05）.结论 基质金属蛋白酶-7及其组织抑制物可能与胎膜早破有关.     

基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-1在大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白细胞介素-l（IL-1）在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及临床意义。方法将30只3月龄Sprague-Dawley（SD）大鼠,随机均分为基础对照组（BL组）、去卵巢手术组（OVX组）、假手术组（sham组）,每组各10只;BL组在手术开始前处死大鼠,其余两组术后3个月处死大鼠,并与处死前10d和4d分别给予显色双荧光标记;L2-4椎体进行骨密度及硬组织切片分析,k4-5,进行HE常规染色、VG特殊染色及免疫组化检测MMP-13、IL-1的表达,观察椎间盘的病理学改变并据评分标准对腰椎间盘的退变程度（LVD）进行评分。结果大鼠腰椎骨量的下降及椎间盘的退化,OVX组较Sham组严重（P〈0．05）：免疫组化结果显示。OVX组与sham组比较,大鼠椎间盘中MMP-13、IL-1表达明显升高（P〈0．05）。结论MMP-13、IL-1表达量的增加是腰椎间盘退变形成和发展的重要因素。     

MMP-7、MMP-9及其抑制剂TIMP-3在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-7、MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-3)在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义.方法 对40例膝关节滑膜标本应用SABC免疫组化法显色MMP-7、MMP-9及TIMP-3在病变组和正常组的表达,并用HE染色观察细胞形态.结果 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达在正常关节滑膜与重度骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达有显著差异(P<0.05).结论 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达是骨性关节炎重要的标志性诊断指标.     

p38阻断剂对鼠关节炎软骨细胞金属蛋白酶表达的作用

目的观察p38信号转导途径阻断剂SB203580经关节腔注射对实验性鼠膝骨关节炎基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13表达的影响,探讨MMP-3、MMP-13表达与创伤性软骨退变之间的关系。方法40只SD大鼠随机分为A～D组,每组10只。各组均行单侧膝关节前交叉韧带切除术。A、B组分别于术后立即行关节腔内注射0.1ml高、低浓度的p38阻断剂SB203580(100、10μmol/L),每周1次,连续6周。C组注射等量生理盐水,D组不做任何处理。术后7周处死动物。于解剖显微镜下行股骨关节面软骨退变大体观察,免疫组织化学的方法检测MMP-3、MMP-13在软骨中的表达及分布,Westernblot方法检测软骨中MMP-3、MMP-13蛋白表达水平。结果大体观察显示高、低浓度组软骨退变显著轻于生理盐水组和关节炎组(P<0.05);免疫组织化学显示高、低浓度组软骨MMP-3、MMP-13表达降低(P<0.05);Westernblot显示注射抑制剂后MMP-3、MMP-13的蛋白表达降低(P<0.01)。结论p38阻断剂SB203580能抑制MMP-3、MMP-13的表达,对软骨有一定的保护作用。     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13（MMP-1,MMP-13）及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高（P〈0.05）;治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低（P〈0.05）,但与西药组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。     

新血府逐瘀软胶囊对动脉粥样硬化血瘀证患者MMP-9和TIMP-1的影响

目的研究新血府逐瘀软胶囊对动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9/MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metal protease 1/TIMP-1)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将60例动脉粥样硬化血瘀证患者随机分为对照组(n=30)和治疗组(n=30),对照组予阿托伐他汀钙片,治疗组予阿托伐他汀钙片和新血府逐瘀软胶囊,观察12周。对比两组治疗前后血清MMP-9、TIMP-1水平和血瘀证积分。结果两组自身前后比较,两组MMP-9及血瘀证积分水平均较本组治疗前明显下降(P0.05或P0.01);TIMP-1水平升高(P0.05或P0.01)。治疗结束后组间比较,治疗组MMP-9及血瘀证积分水平均明显低于对照组(P0.05);TIMP-1水平明显高于对照组(P0.05)。结论新血府逐瘀软胶囊能够降低血清MMP-9的水平,增高TIMP-1水平,降低血瘀证积分,改善动脉粥样硬化患者血瘀征象,具有抗动脉粥样硬化的作用,提示其可能通过降低炎症反应从而抑制动脉粥样硬化。     

关节腔注射三氧对兔膝骨性关节炎病理改变的影响

目的通过建立兔膝骨性关节炎的模型,了解膝关节腔注射三氧对骨性关节炎软骨病理改变的影响。方法成年新西兰兔40只随机分为5组,每组8只,即正常对照组（A组）,模型对照组（B组）,20μg／ml三氧治疗组（c组）,40μg／ml三氧治疗组（D组）,60μg／ml三氧治疗组（E组）。采用Videman法对B、c、D、E组家兔进行兔膝骨关节炎模型复制。造模6周后将空气1ml注入B组家兔左膝关节腔内作为对照,将20、40、60μg／ml浓度的三氧1ml分别注入C、D、E组兔左膝关节腔内,每3d1次,治疗2次后,处死动物,观察兔膝关节软骨形态学变化及进行病理积分统计。结果B组肉眼外观及病理显示关节软骨有明显破坏,病理积分较A组明显升高（P〈0．01）,C、D两组病理改变较B组显示关节软骨有所修复,病理积分较B组降低（P〈0．05）,E组与B组比较病理改变无明显变化,病理积分的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论20、40μg／ml浓度的三氧关节腔注射可促进早期兔膝骨性关节炎关节软骨的修复,有利于减轻及阻止骨性关节炎的发展;而60μg／ml浓度三氧关节腔内注射对已损伤的软骨无修复作用。     

肺泡灌洗液计数中性粒细胞百分比与血浆MMP-9、 TIMP-1在油酸制备急性肺损伤大鼠模型中的相关性研究

目的检测油酸制备大鼠急性肺损伤模型支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid,BALF）计数中性粒细胞（polymorphonucearleukocyte,PMN）百分比及血浆基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinases9,MMP-9）、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissuematrixmetalloproteinaseinhibitor-1,TIMP-1）含量,分析BALF中性粒细胞百分比与MMP-9及TIMP-1的相关性及临床意义。方法雄性SD大鼠36只随机分为3组：空白对照组（n=12）、油酸造模2h组（n=12）、油酸造模6h组（n=12）。空白对照组大鼠尾静脉注射生理盐水（0．1ml／kg）6h后观察。油酸造模组大鼠尾静脉缓慢注射油酸（OA,0．1ml／kg）2、6h后观察,以复制油酸诱导大鼠急性肺损伤模型。观察及检测指标为光镜下肺组织病理形态学变化、动脉血氧分压（PaO,）、肺湿／干重比（W／D）、血浆MMP-9和TIMP-1含量及肺泡灌洗液中性粒细胞计数百分比。结果光镜下,与空白对照组比较,油酸造模组大鼠肺组织可见明显形态学改变。2h及6h油酸造模组PMN％明显升高,PaO,明显降低,IQA及W／D明显升高,（P均〈0．01）;血浆MMP-9含量明显升高（P〈0．001）,血浆TIMP-1含量明显降低（P〈0．05）血浆MMP-9含量与PMN％均呈高度正相关,血浆TIMP-1含量与PMN％均呈高度负相关。结论油酸制备急性肺损伤大鼠模型肺泡灌洗液PMN％明显升高,血浆MMP-9含量明显升高,TIMP-1含量明显降低。血浆MMP-9、TIMP—l与肺泡灌洗液PMN％呈高度相关性;检测血浆MMP-9、TIMP-1有助于急性肺损伤的病理诊断和治疗,从而为临床急性肺损伤的诊断、治疗及预后提供更为简单、可行、准确的检测方法和途径。     

转GGCX基因治疗兔骨性关节炎的体外实验研究

目的 探索GGCX基因对兔骨性关节炎软骨细胞MMP13的影响及其在兔骨性关节炎软骨退变中的作用.方法 取体质量(2.0±0.2)kg日本大耳兔6只,随机分为3组,每组设立一只对照兔,分别在2、4、6周使用膝前交叉韧带切断术构建模型,6周后模型兔构建成功,分离关节软骨,经消化分离后将软骨细胞接种到6孔细胞培养板,将软骨细胞分为空白组、阴性对照组(转染不合GGCX基因慢病毒)、转染组(转染含GGCX基因慢病毒)3组.转染组则均以LipofectamineTM 2000为转染媒介.用PCR法及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GGCX和MMP13的表达.结果 转染组GGCX有较高的表达水平;转染组MMP13的表达水平降低,且二者与空白组及阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜o.05).结论 GGCX基因过表达可明显降低其软骨细胞MMP13的表达,为将基因治疗运用于体外骨性关节炎提供实验基础.     

白藜三醇对房颤所致猪心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的 研究白藜三醇对心房纤颤（简称房颤）猪心房组织基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响,探讨白藜三醇抗心肌纤维化作用及可能机制.方法 18只小家猪通过起搏器植入法建立猪房颤模型,随机分为3组（每组6只）：对照组、房颤组、白藜三醇干预组（2.5 mg·kg^-1·d^-1）.苏木精-伊红染色、Masson染色法观察心房组织形态学和间质纤维化,Western blotting法检测心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,房颤组MMP-1、MMP-9显著增加（P＜0.05）,而TIMP-1则显著降低（P＜0.05）;与房颤组相比,白藜三醇干预组MMP-1、MMP-9显著降低（P＜0.05）,而TIMP-1则显著增加（P＜0.05）.结论 白藜三醇可能通过调节心肌组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达而发挥抗心肌纤维化的作用.     

HSV-1型载体介导IL-1Rα关节腔内注射治疗兔膝关节炎

目的: 探讨单纯疱疹病毒1(HSV-1)型载体介导白细胞介素1受体拮抗基因(IL-1Rα)局部治疗兔膝关节炎的作用。方法: 采用改良Hulth法构建兔负重膝关节炎模型;造模成功后利用基因重组技术构建IL-1Rα基因单纯疱疹病毒1型表达载体(pHSV-IL-1Rα-LacZ),行兔膝关节腔内注射4周;手术造模和基因治疗后,抽取关节腔灌注液,采用ELISA分析IL-1Rα和IL-1的表达;采用HE染色和甲苯胺蓝染色方法观察局部治疗效果,pHSV-LacZ空白载体设为对照组。结果: 手术造模治疗组注射pHSV-IL-1Rα-LacZ后能明显持续抑制IL-1表达水平,且对膝关节软骨炎进展显著性抑制,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论: pHSV-LacZ是关节腔内局部基因治疗兔膝关节炎模型的理想基因运输体。关节腔内持续表达的IL-1Rα可能通过拮抗IL-1的作用治疗兔膝关节炎。     

关节腔注射5-氟尿嘧啶联合玻璃酸钠治疗大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的：评价关节腔内注射5-氟尿嘧啶（Flurouracil,5-FU）联合玻璃酸钠（sodium hyaluronate,SH）对大鼠膝骨关节炎的疗效。方法：将36只Wistar大鼠制成骨关节炎模型后随机分为5-FU加SH组、SH组和对照组工厂组,分别给予5-FU联合SH、SH和生理盐水关节腔内注射,每周1次连续4次,最后一次治疗后1周处死实验动物,观察3组动物软骨和滑膜组织的基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases-1,MMP-1）免疫组化改变;对软骨进行Mankin＇s评分;比较3组动物血液中白介素-1（interleukin-1,IL-1）的浓度变化。结果：与SH组和对照组比较,5-Fu加SH组软骨病理切片显示软骨细胞凋亡减少,软骨基质结构完整,黏多糖含量多,滑膜细胞减少,滑膜下层的纤维增生减轻;血清中IL-1浓度明显降低（P〈0.01）;关节软骨中MMP-1表达明显减弱（P〈0.01）;Mankin＇s评分有明显改善（P〈0.01）。结论：采用关节腔内5-FU加SH注射法治疗大鼠膝骨关节炎,能保护软骨基质,减轻滑膜增生,延缓软骨退行性变的进展。5-FU与SH联合用药可能成为治疗骨性关节炎的一种新的方法。     

不同海拔COPD患者血清基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达

目的通过ELISA法研究COPD患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）在不同海拔中的表达。方法选取西宁COPD患者31例作为中度海拔组,同期玉树COPD患者24例作为高海拔组。各组均空腹采静脉血标本3mL静置1h后常温下离心（3000G）10min取血清。用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定MMP-9、TIMP—1。比较不同海拔地区COPD患者血清MMP-9、TIMP-1的差异。结果高海拔地区COPD组血清MMP-9、TIMP-1水平为64．198±8．800、10．715±0．630pg／mL;中度海拔地区COPD组血清MMP-9、TIMP-1水平为50．241±5．552、12．025±0．452pg／mL。不同海拔COPD患者血清MMP-9值相比存在显著性差异（P〈0．05）。不同海拔地区COPD患者血清TIMP-1值相比存在显著性差异（P〈0．05）。结论不同海拔COPD患者血清MMP-9、TIMP-1值存在差异。     

益气化瘀补肾方对兔膝骨关节炎关节软骨细胞胶原和基质金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的：探讨益气化瘀补肾方对兔膝骨关节炎（KOA）模型软骨细胞Ⅱ型前胶原基因（Col2A1）、X型胶原基因（ColX）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）mRNA表达的影响。方法：36只新西兰兔随机分为假手术组、模型组和益气化瘀补肾方组,每组12只。模型组和益气化瘀补。肾方组家兔采用改良Hulth方法复制KOA模型,假手术组仅切开膝关节表面的皮肤。益气化瘀补肾方组家兔于造模4周后连续用药1个月。观察各组软骨病理形态学变化及Col2A1、ColX和MMP-13mRNA变化。结果：模型组关节软骨结构破坏较严重,而益气化瘀补肾方组家兔关节软骨退变较模型组明显减轻。益气化瘀补。肾方组家兔膝关节软骨Col2A1mRNA表达明显高于模型组（P〈0．01）,ColX、MMP-13mRNA表达明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）,但与假手术组比较仍有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过促进软骨合成Col2A1和抑制MMP-13及ColX胶原以延缓KOA家兔关节软骨的退变。