大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖抑制及细胞内游离Ca2+的作用

目的 对大黄素的防治瘢痕的生物学作用进行初步探索,为瘢痕的防治开辟新的途径.方法 采集我科住院患者的增生性瘢痕标本,进行人增生性瘢痕成纤维细胞培养,分别以不同浓度的大黄素作用于细胞,以MTT法测试药物处理后细胞增殖规律,并以激光共聚焦显微镜观察细胞内[Ca2 ]I荧光强度的变化.结果 在不同浓度组大黄素的处理下,人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖呈现出抑制的趋势(P＜0.05);细胞内[Ca2 ]I的荧光强度也明显上升,其幅度和药物浓度有一定的关联.结论 大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞有显著的抑制作用,其机制可能和细胞内[Ca2 ]I水平的改变有关.     

CO作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况的研究

目的：通过研究CO和低氧作用后大鼠肺血管细胞增殖和凋亡状况，探讨低氧肺动脉高压的发病机制及防治措施。方法：应用免疫组织化学，原位末端标记及Western杂交等方法检测常压低氧大鼠肺血管壁细胞增殖，凋亡及c-myc基因的表达状况。结果：正常组，低氧和锡原卟啉组，低浓度CO和血晶素组大鼠肺动脉均存在增殖和凋亡的阳性细胞，两类细胞在肺内呈不均匀散在分布，低氧和锡原卟啉组大鼠肺血管增殖细胞数显著升高而凋亡细胞数显著减少，细胞增殖凋亡比值分别为对照组的5倍或4倍，而低浓度CO和血晶素组肺血管增殖细胞和凋亡细胞系数均显著增加，细胞增殖凋亡比值均为1．2，c-myc在低氧和锡原卟啉组大鼠肺内表达显著增加，在低浓度CO和血晶素组大鼠肺内表达减少。结论：增殖和凋亡现象共存在于正常和处理大鼠的肺血管细胞中，也许c-myc等基因的异常表达导致了细胞增殖和凋亡的失衡，进而调节了慢性低氧肺血管结构的改建。     

大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨大黄素对人胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响。方法 人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度大黄素（10、20、40、80、160 μmol/L）分别作用 24、48、72 h后,应用CCK-8法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 大黄素对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性,20、40、80 μmol/L大黄素作用Panc-1细胞24 h后凋亡率分别为7.1%、15.2%、21.4%。结论 大黄素可显著抑制人胰腺癌Panc-1细胞生长,大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞株的增殖抑制作用可能以诱导细胞凋亡方式为主。     

大黄素联合5-氟尿嘧啶对人胃癌细胞MKN45增殖抑制及诱导凋亡

目的研究大黄素联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对人胃癌细胞MKN45增殖及诱导凋亡的作用。方法不同浓度大黄素单用或与5-Fu联合作用于人胃癌MKN45细胞,甲氮唑蓝法观察对MKN45的生长抑制作用;荧光染色法、流式细胞仪分析MKN45的凋亡。结果10、20μg／mL大黄素分别与5-Fu联用对人胃癌MKN45细胞有明显的生长抑制作用,其抑制作用呈时间及浓度依赖性（P〈0．05）;流式细胞仪分析大黄素联合5-Fu能浓度依赖性诱导MKN45细胞凋亡和G2／M期阻滞,大黄素与5-Fu联用细胞凋亡率与5-Fu单用组相比差异有统计学意义（P〈0．051;吖啶橙染色观察联合作用组细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光、新月型改变、核固缩或片段化及凋亡小体的形成。结论大黄素联合5-Fu可显著增强诱导人胃癌MKN45细胞凋亡的作用。     

经肝动脉化疗栓塞后c-myc蛋白在肝癌细胞凋亡中的作用

为探讨经肝动脉化疗栓塞（TACE）后c-myc蛋白在肝癌细胞凋亡中的作用，应用免疫组织化学方法检测30例未经肝动脉化疗栓塞和30例经TACE治疗的肝癌组织中c-myc蛋白表达，采用原位末端标记法（ISEL）检测肝癌细胞凋亡。结果显示：两组肝癌组织中c-myc蛋白表达率分别为16.67%和83.33%；肝癌细胞凋亡指数分别为0.0088和0.1901。提示：经TACE治疗后，肝癌细胞凋亡率增高，肝癌组织中c-myc蛋白表达水平显著提高且在促进肝癌细胞凋亡的过程中起重要作用。     

大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究

目的:研究大黄素的体外免疫抑制作用,探讨其可能的作用机制. 方法:通过PHA,IL-2及MLC活化淋巴细胞,给予大黄素和CsA干预,采用MTT法观察比较大黄素和CsA对淋巴细胞活化的抑制作用. 结果:在3×10-6～3×10-5 mol/L的浓度范围内,大黄素对PHA,IL-2及MLC引起的淋巴细胞活化表现出明显的抑制作用,其作用随浓度增加而增强,并与CsA具有协同性. 结论:大黄素在体外通过抑制淋巴细胞增殖来发挥其免疫抑制作用.     

大黄素对狼疮样BXSB小鼠的影响

目的 探讨大黄素治疗狼疮性肾炎的作用与机制。方法 已发生狼疮性肾炎的BXSB雌性小鼠35只，随机分5组，分别胃饲不同浓度的大黄素混悬液和生理盐水，30天后检测24h尿蛋白浓度和血清抗核抗体(ANA)满度。结果 与生理盐水组相比，胃饲大黄素的各组小鼠的24h尿蛋白浓度和血清ANA滴度均有所下降(P＜0．05和P＜0．01)，尿蛋白浓度与大黄素剂量(0—6．25mg/kg)呈直线负相关(P＜0．01)；血清ANA滴度与大黄素剂量呈负相关(P＜0．01)；尿蛋白浓度与血清ANA滴度呈正相关(P＜0．01)。结论 大黄素能降低狼疮样BXSB小鼠尿蛋白水平，其机制可能与降低血清ANA滴度有关。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响

目的: 探讨大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响。方法: SD大鼠30只,随机分为对照组、胰腺炎组和大黄素组,5%牛磺胆酸钠1 ml/kg制作大鼠重症急性胰腺炎模型,大黄素组为模型制作完成时及3 h后腹腔内注射大黄素2.5mg/kg,观察12 h后各组大鼠血清淀粉酶、IL-6和腺泡细胞凋亡情况。结果: 大黄素组血清淀粉酶、IL-6值低于胰腺炎组(P<0.01),细胞凋亡指数增加(P<0.01),病理损害减轻。结论: 大黄素促进重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡,减少淀粉酶和IL-6释放,减轻胰腺病理损害。     

长链非编码RNA-ATB对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨被转化生长因子b激活的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响,并分析其作用机制.方法 检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中ATB、microRNA-200c(miR-200c)和DNA甲基转移酶DNMT3B的表达水平,并分析其相关性.在成纤维细胞中分别转染sh-ATB、o/e-A...     

miR-210对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨microRNA-210(miR-210)对乳腺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 采用RNA干扰技术,构建针对miR-210的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞,采用实时荧光定量PCR技术检测转染后miR-210的表达情况,观察转染后MCF-7细胞的增殖、侵袭和凋亡情况.结果转染后MCF-7细胞中miR-210表达明显下降,同时细胞增殖和侵袭能力减弱、凋亡率上升.结论 miR-210能够影响乳腺癌的生物学行为.     

亚硒酸钠对人增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖的影响

目的：观察亚硒酸钠对人增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取第4代细胞用CCK‐8检测成纤维细胞的增殖情况,分为试验组和对照组,试验组分为6组（A、B、C、D、E、F组）,分别加入等量含2．5、5．0、10．0、20．0、40．0、80．0μmol／L浓度亚硒酸钠的10％胎牛血清培养基;对照组加入等量的10％胎牛血清培养基,分别在24、48、72、96 h用CCK‐8试剂盒检测细胞增殖情况;Live／dead试剂检测加入不同浓度亚硒酸钠24 h后细胞的存活情况;细胞免疫组织化学法检测加入不同浓度亚硒酸钠24 h后,细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达情况。结果（1）亚硒酸钠在2．5～80．0μmol／L浓度范围内,在同一时间内随着浓度的增加,对成纤维细胞的抑制率逐步增加（P＜0．05）;（2）在相同浓度作用下随着时间的延长,亚硒酸钠对成纤维细胞的抑制率逐渐增加（P＜0．05）;（3）Live／dead试剂检测结果显示,随着亚硒酸钠浓度的增加,凋亡细胞数逐渐增加;（4）随着亚硒酸钠的浓度增加,成纤维细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原表达逐渐减弱。结论亚硒酸钠在体外能抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,并且可以降低成纤维细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。     

Effect of emodin in suppressing acute rejection following liver allograft transplantation in rats

<正>Objective:To investigate the mechanism of action of emodin for suppressing acute allograft rejection in a rat model of liver transplantation.Methods:Brown Norway(BW) recipient rats of orthotopic liver transplantation(OLT) were divided into three groups,Group A receiving isografting(with BW rats as donor), Group B receiving allografting(with Lewis rats as donor),Group C receiving allografting and emodin treatment (50 mg/kg daily).They were sacrificed on day 7 of post-transplantation,and their hepatic histology,plasma cytokine levels,and T-cell subset expression were detected.Results:Compared with those in Group A,rats in Group B exhibited severe allograft rejection with a rejection activity index(RAI) of 7.67±0.98,extensive hepatocellular apoptosis with an apoptosis index(Al) of 35.83±2.32,and elevated plasma levels of interleukin-2 (IL-2),interleukin-10(IL-10),tumor necrosis factor-α(TNF-α),CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio.However,recipients in Group C showed a decrease in histological grade of rejection and hepatocellular apoptosis,as well as a decrease in plasma levels of IL-2,TNF-α,CD4~+ and CD4~+/CD8~+ ratio,but elevated levels of IL-10 as compared with the allograft group.Conclusion:Post-OLT acute rejection could be attenuated by emodin,its mechanism of action may be associated with protecting hepatocytes from apoptosis,polarizing the Th 1 paradigm to Th2,and inhibiting the proliferation of CD4~+ T cell in plasma.     

行瘀清热胶囊对大鼠前列腺成纤维细胞增殖及凋亡的影响

目的观察行瘀清热胶囊对大鼠前列腺成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法取健康SD大鼠前列腺组织进行成纤维细胞的原代培养并传代增殖,选用第3～6代细胞,制备行瘀清热胶囊含药血清,于酶标仪490 nm波长处测定吸光度（A）值,计算药物对成纤维细胞的相对抑制率,并以流式细胞仪分析行瘀清热胶囊对前列腺成纤维细胞的凋亡率的影响。结果行瘀清热胶囊能抑制前列腺成纤维细胞增殖;流式细胞仪分析显示行瘀清热胶囊含药血清使成纤维细胞凋亡率增高较为明显。结论行瘀清热法防治慢性前列腺炎的机制与抑制前列腺组织成纤维细胞增殖、促进成纤维细胞的凋亡有关。     

大黄素对缺血性脑卒中模型大鼠的神经保护作用及其对ERK1/2信号通路的影响

目的：研究大黄素对缺血性脑卒中模型大鼠的神经保护作用及其对细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）信号通路的影响,探讨大黄素保护缺血性脑卒中的机制。方法：将200只大鼠随机分为假手术组（n=60）、模型组（n=70）和大黄素组（n=70）。模型组和大黄素组大鼠建立缺血性脑卒中模型,大黄素组大鼠在建模前30 min给予大黄素腹腔注射。评定各组大鼠神经功能障碍评分、脑梗死体积和脑组织含水量,免疫组织化学染色测定各组大鼠缺血侧脑组织皮质细胞凋亡率,Western blotting法测定各组大鼠缺血侧脑组织中Cleavedcaspase-3、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、ERK1/2和磷酸化-ERK1/2（p-ERK1/2）蛋白表达水平。结果：假手术组大鼠无神经功能障碍和脑梗死灶;大黄素组大鼠神经功能障碍评分和脑梗死体积均明显低于模型组（t=8.331,t=3.538,P<0.05）。与模型组比较,大黄素组大鼠脑组织含水量降低（t=9.507,P<0.05）,缺血侧脑组织皮质细胞凋亡率降低（t=57.593,P<0.05）,缺血侧脑组织中Cleavedcaspase-3、Bax和p-ERK1/2蛋白表达水平降低（t=4.088,t=4.463,t=10.659,P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平升高（t=5.035,P<0.05）。结论：大黄素可能通过抑制ERK1/2信号通路抑制神经细胞凋亡发挥对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。     

Effect of emodin on proliferation and differentiation of 3T3-L1 preadipocyte and FAS activity

Objective To study the effects of emodin on proliferation and differentiation of 3T3-L1 preadipocyte and the possible mechanism.Methods Cell proliferation was determined by MTT spectrophotometry, cell differentiation was determined by Oil Red O staining, and fatty acid synthase (FAS) activity was determined by spectrophotometry.Results Emodin promoted proliferation of 3T3-L1 preadipocyte at low concentration and inhibited the proliferation at high concentration in a dose-related manner.In contrast, it inhibited cell differentiation into adipocyte at low concentration in a dose-related manner.In vitro emodin inhibited the activity of FAS in a dose-related manner.Conclusions The effects of emodin on 3T3-L1 cell’s proliferation and differentiation are dose dependent.Emodin inhibits the activity of FAS.Our results suggest that emodin should have a potential to serve as a fat-reducing drug.     

凋亡、PCNA、p53及c-myc表达水平在鼻咽癌放疗中的相关关系

目的 :探讨凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA)、p5 3蛋白及 c- m yc表达水平在鼻咽癌放疗中的相互关系。方法 :对 31例鼻咽癌患者于放疗前及接受放射剂量 1 5 2 0 c Gy后分别从鼻咽部肿物取活检 2次。应用末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记 (TUNEL )技术检测凋亡 ,应用 S- P免疫组化法检测 PCNA、p5 3蛋白及 c- myc。结果 :p5 3蛋白表达水平与放疗前凋亡率、放射诱导凋亡率以及放疗前后 PCNA差值均呈高度负相关 (P均 <0 .0 1 ) ,与放疗前 PCNA呈高度正相关(P <0 .0 1 )。 c- m yc表达水平与放疗前凋亡率呈负相关 (P <0 .0 5 ) ,与放射诱导凋亡率、放疗前 PCNA以及放疗前后 PCNA差值均呈正相关 (P均 <0 .0 5 )。结论 :鼻咽癌的细胞凋亡及细胞增殖与 p5 3基因的突变及 c- myc存在密切的相关性 ,并在放疗中起到重要的调控作用     

大黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及脂肪代谢的影响

目的　探讨大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞增殖分化和对脂肪代谢的影响 ,以及探讨大黄素可能的减肥作用的药理机制。方法　MTT法测定细胞的增殖速度 ,油红O染色法测定细胞的分化速度 ,分光光度法测定脂肪酸合成酶活性。结果　大黄素在较低浓度下对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞的增殖有一定的促进作用 ,但当浓度升高时 ,转化为剂量依赖性抑制作用 ;大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞向脂肪细胞的分化以及对脂肪酸合成酶活性有剂量依赖性抑制作用。结论　本研究在国际上第一次报道大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞增殖与分化及脂肪代谢有影响 ;大黄素可能具有潜在的减肥、降脂作用。     

辛伐他汀对肺成纤维细胞和嗜酸粒细胞相互作用的干预研究

目的 :研究肺成纤维细胞 (FB)和健康人外周血嗜酸粒细胞 (EOS)共同培养对EOS存活率及产生细胞因子粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)的影响 ,探讨FB在哮喘发病机制中的作用 ;比较辛伐他汀和地塞米松对FB与EOS相互作用的干预效果 ,研究辛伐他汀诱导FB凋亡并抑制EOS性炎症的作用 ,从而为治疗哮喘提供新的途径。方法 :将肺FB和健康人外周血EOS共同培养 ,分别加入辛伐他汀或地塞米松进行干预并与对照组进行比较 ,采用台盼蓝拒染法检测EOS存活率 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)检测GM CSF含量 ,TdT介导dUTP缺口末端标记 (TUNEL)法检测FB凋亡。结果 :(1)共同培养组EOS存活率明显高于其它组 (82 2± 10 3 ) % ,加入辛伐他汀或地塞米松干预后 ,EOS存活率下降了几乎 5 0 %〔(3 6 9± 8 1) %〕 ,与其它各组比较均有显著差异 (P <0 0 0 1)。 (2 )共同培养组GM CSF含量最高为 (5 3 9 5± 88 6)ng·L-1,与其余各组比较均有显著差异 (P <0 0 0 1) ,加入辛伐他汀或地塞米松干预后其含量明显下降 ,为 (4 2 2± 4 6)ng·L-1。 (3 )辛伐他汀和地塞米松均能明显诱导FB凋亡〔(5 9 0± 2 6) %、(2 4 1± 4 6) %〕 ,与溶剂组及空白对照组相比均有显著差异。结论 :(1)肺FB在体外能明显提高外周血EOS存活率。 (2 )FB和EOS的     

钙激动剂对心肌肥大有关信号转导的作用

目的 探讨钙激动剂对心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性,ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白核转位表达,及蛋白核酸合成的影响。方法 应用血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）刺激原代培养的心肌细胞钙内流,雷尼丁（ＲＹ,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）刺激胞内钙释放;刺激５ｍｉｎ时测ＭＡＰＫ活性,免疫组化方法检测刺激５、１０、２０、３０ｍｉｎ时ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白定位表达;＾３Ｈ－Ｌｅｕ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测刺激２４ｈ心肌细胞蛋白核酸合成。结果 ＡｎｇⅡ和ＲＹ刺激心肌细胞５ｍｉｎ时ＭＡＰＫ活性均明显增高,与对照心肌细胞相比差异显著（Ｐ〈０．０１）。免疫组化结果显示,ＲＹ刺激心肌细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白核转位表达早于ＡｎｇⅡ。ＡｎｇⅡ和ＲＹ刺激２４ｈ,心肌细胞蛋白核酸合成显著增高,与对照组心肌细胞相比差     

大黄素抑制人口腔鳞癌细胞Tca8113增殖及细胞周期进程的实验研究

目的探讨大黄素对人口腔鳞癌细胞体外生长增殖及细胞周期改变的影响。方法采用2.5、5.0、10、20、40、60和80 μmol/L
大黄素分别干预体外培养的口腔鳞癌细胞Tca8113,作用24、48和72 h后,并设含0.1%二甲基亚砜的培养液作为对照组,通过
MTT检测不同浓度大黄素干预对于口腔鳞癌细胞Tca8113的增殖作用;以FCM检测不同浓度大黄素干预对于口腔鳞癌细胞周
期的影响;结合Western blotting 方法分析大黄素干预后对口腔鳞癌细胞周期相关蛋白CDK2、Cyclin E和P21 表达水平的变
化。结果大黄素能够在72 h内明显抑制Tca8113细胞生长以及增殖行为。MTT结果显示,随作用时间从24、48到72 h,大黄素
对于Tca8113细胞的抑制效应呈明显的时间—浓度依赖关系;由细胞周期检测结果显示,大黄素作用使口腔鳞癌Tca8113细胞
周期表现为G0~G1期细胞时相阻滞;蛋白免疫印迹则表明经大黄素干预口腔鳞癌Tca8113 细胞的细胞周期相关蛋白CDK2、
Cyclin E和P21表达水平明显降低,与空白对照组相比较,具有显著的统计学差异（P<0.05）。结论大黄素能够明确抑制人口腔鳞
癌细胞Tca8113的生长增殖以及影响其细胞分裂周期,这可能与抑制细胞周期调控信号通路中分子的活化与转导有关。