重组人血管抑制因子Vasostatin对视网膜血管内皮细胞增殖的影响

目的 探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)增殖的影响。方法 以bFGF刺激增殖，体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)至4代，分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白，并采用MTT法、^3H-TdR法检测2、4、6d时其对血管内皮细胞增殖抑制的作用，同时利用流式细胞仪对重组人Vasostatin蛋白是否诱导细胞凋亡进行了探讨。结果 MTT法、^3H-TdR两种方法均显示重组人Vasostatin蛋白以质量浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)的增殖。流式细胞仪检测显示加入重组人Vasostatin蛋白后，G0／G1期无明显的亚二倍体核形峰出现，其不是通过诱导细胞凋亡的方式来抑制细胞增殖的。结论 重组人Vasostatin蛋白在体外具有抑制bFGF诱导的血管内皮细胞增殖的作用，其有可能成为一种有效的血管新生抑制剂。     

BAMBI过表达抑制缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和迁移

目的　探讨过表达激活素膜结合抑制剂（ｂｍｐａｎｄａｃｔｉｖｉｎｍｅｍｂｒａｎｅ-ｂｏｕｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＢＡＭＢＩ）对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）增殖和迁移的影响。方法　将ＲＦ／６Ａ细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧＋ｐＦＬＡＧ组和缺氧＋ＢＡＭＢＩ组。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞中ＢＡＭＢＩ的表达,倒置显微镜观察各组细胞形态和密度,ＣＣＫ-８法和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和周期情况,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ检测细胞的迁移,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β１,ＴＧＦ-β１）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达。结果　与对照组相比,缺氧组细胞数目明显增多,增殖增加,培养１２０ｈ后,对照组细胞增殖倍数为５．００±０．２８,缺氧组为７．６４±０．３２（Ｐ＜０．００１）;缺氧组Ｓ期进程显著加快,占（１０．４４±２．６１）％,对照组Ｓ期占（２０．７９±２．２３）％（Ｐ＜０．０５）;细胞迁移增加,缺氧组细胞数目为３３．８０±４．２０,对照组为８．３５±２．５０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显增加（Ｐ＜０．０５）。缺氧＋ＢＡＭＢＩ组:缺氧处理的细胞转染ｐＦＬＡＧ-ＢＡＭ-ＢＩ后,与缺氧组相比,ＢＡＭＢＩ蛋白表达显著上调,细胞数目明显减少,增殖显著降低,培养１２０ｈ后,增殖倍数为５．５３±０．２７（Ｐ＜０．００１）,细胞Ｓ期受到阻滞,占（１８．７５±２．９２）％,迁移显著下降,数目为１３．００±２．８０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显下调（Ｐ＜０．０５）。结论　过表达ＢＡＭＢＩ可抑制缺氧诱导的ＲＦ／６Ａ细胞的增殖和迁移,进而有望抑制视网膜血管新生。     

缺氧、bFGF和VEGF对牛视网膜血管内皮细胞和周细胞增殖的影响

目的　探讨缺氧和细胞生长因子对视网膜血管内皮细胞和周细胞增殖的影响。方法　 ( 1)采用细胞克隆、机械除杂法培养视网膜血管内皮细胞和周细胞。 ( 2 )四唑盐比色试验 (MTT)和细胞计数法描绘正常和缺氧状态下牛视网膜血管内皮细胞和周细胞的增殖生长曲线。 ( 3 )加入碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)后用MTT法观察它们对内皮细胞增殖的影响。结果　 ( 1)缺氧组牛视网膜血管内皮细胞在第 4、5d数目较正常组显著增加 (P <0 0 5 ) ,周细胞则在 4～ 7d数目明显增多。 ( 2 )加入VEGF可使四甲基偶氮唑盐 [3 ( 4 ,5 dimethylthia zolzyl) 2 ,5 diphenyltetrazo diumbromide ,MTT]值达到 2 1786,加入bFGF可使MTT值达到 2 9897,加入VEGF和bFGF使MTT值达到 2 943 1,而对照组仅为 1 0 13。结论　 ( 1)缺氧环境能刺激培养的牛视网膜血管内皮细胞和周细胞的增殖。( 2 )VEGF和bFGF能促进视网膜血管内皮细胞增殖 ,且bFGF促增殖的能力更强 ,但两者相加并不能增加促增殖作用。     

缺氧促进视网膜微血管内皮细胞的增殖及C-fos癌基因表达

目的研究缺氧在视网膜新生血管形成中的作用。方法采用细胞计数及免疫组化的方法，将培养的视网膜微血管内皮细胞接种于24孔板,分别放入正常及缺氧（50ml·L-1O2）环境中，37℃进行培养。不同时间后进行计数及抗FOS蛋白抗体染色。结果缺氧组的细胞计数均高于正常组（P＜0.01）,抗FOS蛋白抗体染色，缺氧组明显强于正常组。结论缺氧可以明显促进视网膜微血管内皮细胞的增殖．其机理是通过诱导C－fos癌基因的表达而起作用。     

血管内皮细胞生长因子抑制剂对视网膜血管内皮细胞自噬的促进作用

目的　观察血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）抑制剂对小鼠视网膜血管内皮细胞（retinal vascular endothelial cells,RVECs）自噬水平的影响。方法　将RVECs随机分为五组:正常对照组、缺氧对照组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）组、VEGF抑制剂（anti-VEGF）组和3-MA+anti-VEGF组。采用Western blot法检测RVECs中两种自噬标志蛋白微管相关蛋白1 轻链 3 （LC3）及Beclin-1的表达;计算绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）阳性斑点细胞占比;透射电子显微镜下观察细胞内形成的自噬体的超微结构。结果　正常对照组、缺氧对照组、3-MA组、anti-VEGF及3-MA+anti-VEGF组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ分别为0.182±0.125、0.587±0.101、0.309±0.151、0.914±0.037及0.585±0.098;Beclin-1分别为0.205±0.035、0.590±0.120、0.425±0.082、0.842±0.087及0.607±0.022;GFP阳性斑点细胞比例分别为17.107%±3.521%、90.278%±2.684%、82.591%±4.490%、94.798%±1.760%及89.472%±3.764%。与正常对照组相比,缺氧对照组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白表达增高,GFP阳性斑点细胞的比例增加（均为P<0.05）,同时自噬体增多。与缺氧对照组相比,3-MA组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率降低（均为P<0.05）,同时自噬体减少;anti-VEGF组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率升高（均为P<0.05）,同时自噬体增多。与anti-VEGF组相比,3-MA+anti-VEGF组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率降低（均为P<0.05）,同时自噬体减少。结论　VEGF抑制剂对缺氧状态下视网膜血管内皮细胞的自噬水平有促进作用。     

缺氧条件下骨髓间充质干细胞对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响

目的:探讨缺氧条件下骨髓间充质干细胞(BMSCs)对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响。方法:制备3种细胞的条件培养基(CM),分别为对照组(血管内皮细胞培养基,VCM)、常氧条件下BMSCs的CM组(NCM)和缺氧条件下BMSCs的CM组(HCM)。分别用以上3种CM培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)和猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)6~24h后,观察血管内皮细胞迁移和管腔形成的能力。结果:相对于对照组和常氧组的CM,缺氧组即HCM作用下的血管内皮细胞的迁移数目和成管数量(包括成管总长度和分支数)均显著增加(均P<0.05)。在RF/6A细胞,对照组VCM、常氧组NCM和缺氧组HCM作用24h后,迁移的细胞数分别为19.00±3.61、32.33±3.06、114.00±11.53个(F=153.3,P<0.001);而HUVECs的3组细胞迁移个数则分别是76.00±9.54、122.00±18.68、307.70±25.97个(F=121.5,P<0.001)。RF/6A细胞经各组CM孵育6h后,成管数目分别为12.00±3.00、37.00±4.58、51.00±3.61个(F=81.7,P<0.0001);3组HUVECs细胞管腔形成的结果类似。结论:缺氧条件下BMSCs可促进血管内皮细胞的迁移和成管能力,这种机制可能在视网膜新生血管中发挥作用。     

脂联素对高糖条件下视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的作用

目的：观察脂联素(APN)对高糖培养条件下恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)增殖、迁移和管腔形成的影响。

方法：将体外培养的RF/6A细胞随机分为空白对照组(正常培养基培养)、甘露醇对照组(含20mmol/L甘露醇的培养基培养)、高糖组(含25mmol/L D-葡萄糖的培养基培养)和高糖+APN组(含25mmol/L D-葡萄糖+10μg/mL APN的培养基培养)。分别采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移,基质胶(Matrigel)法检测细胞管腔形成能力。

结果：空白对照组与甘露醇对照组细胞增殖率(100.00%±0.00% vs 99.09%±0.46%)、迁移数(121.60±6.02个 vs 119.60±9.39个)及管腔形成数(12.11±0.84个 vs 12.22±0.96个)均无差异(P>0.05)。高糖组细胞增殖率(71.42%±2.29%)明显低于空白对照组和甘露醇对照组,细胞迁移数(144.20±9.65个)和管腔形成数(16.00±2.90个)均明显高于空白对照组和甘露醇对照组(P<0.05)。高糖+APN组细胞增殖率(90.87%±1.68%)明显低于空白对照组和甘露醇对照组,明显高于高糖组; 细胞迁移数(73.00±6.04个)和管腔形成数(7.89±0.38个)均明显低于空白对照组、甘露醇对照组及高糖组(P<0.05)。

结论：APN可以促进高糖条件下RF/6A细胞存活及增殖,抑制细胞迁移和管腔形成,提示APN对高糖导致的RF/6A细胞损伤具有一定的保护作用,抑制病理刺激条件下的血管生成。     

曲安奈德对缺氧条件下恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞VEGF表达的影响

目的:研究曲安奈德对缺氧条件下恒河猴视网膜脉络膜内皮细胞VEGF表达的影响,探讨曲安奈德治疗视网膜脉络膜新生血管的作用机制。方法:采用免疫组化图像分析和半定量RT-PCR方法,检测曲安奈德对正常和缺氧条件下RF/6A细胞VEGF表达的影响。结果:缺氧条件下VEGF蛋白在细胞胞质中的染色强度明显增强,加入曲安奈德后VEGF蛋白在细胞胞质中的染色强度明显减弱,正常条件下的VEGF蛋白的A值为276.8±8.6;正常加药组的A值为137.1±10.2;缺氧条件下的A值为406.1±8.8;缺氧加药组的OD值244.2±12.8。半定量RT-PCR表明VEGFmRNA在正常对照组RF/6A细胞中的相对表达量为1.38±0.05;缺氧对照组RF/6A细胞中的相对表达量为5.41±0.06;正常加药组RF/6A细胞中的相对表达量为0.70±0.06;缺氧加药组RF/6A细胞中的相对表达量为4.23±0.05,以上两种方法,缺氧对照组与正常对照组比较、缺氧对照组与缺氧加药组比较、正常对照组与正常加药组比较差异均有显著性意义(P=0.000)。结论:缺氧状态下RF/6A细胞中VEGF的表达明显增高,曲安奈德能显著抑制正常和缺氧状态下RF/6A细胞中VEGF的表达。     

葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞增殖的影响

目的观察不同浓度葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞增殖的影响。方法取第7代牛视网膜血管内皮细胞用于实验。葛根素组中加入含不同浓度葛根素的培养液,对照组加入等量空白培养液。24h及48h后采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测视网膜血管内皮细胞的增殖情况。结果与空白对照组比较,0.05mg·L-1、0.50mg·L-1、5.00mg·L-1、50.00mg·L-1和500.00mg·L-1葛根素组作用24h及48h后视网膜血管内皮细胞增殖明显。24h葛根素组OD值(按照葛根素浓度由低到高分别为:0.283±0.060、0.337±0.030、0.349±0.030、0.405±0.030、0.352±0.020)明显高于对照组(0.161±0.060),差异均有统计学意义(均为P<0.01);48h葛根素组OD值(按照葛根素浓度由低到高分别为:0.371±0.030、0.377±0.040、0.410±0.040、0.400±0.020、0.310±0.040)也明显高于对照组(0.279±0.050),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞有明显的促增殖作用,其作用与葛根素的剂量有关。     

姜黄素抑制人血管内皮细胞增殖的研究

目的观察姜黄素对体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新方法。方法用0~160μmol/L姜黄素作用体外培养的HUVEC,24~96h后观察不同浓度姜黄素对HUVEC的影响。MTT法及免疫组织化学染色增殖细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化。结果在40~160μmol/L浓度作用24~72h范围内,姜黄素可剂量和时间依赖性的抑制HUVEC增殖(P<0.05)。20,40,80,160μmol/L姜黄素作用24h后,流式细胞仪检测结果发现,姜黄素作用组均出现典型的亚二倍体凋亡峰,G0/G1期细胞百分比上升(P<0.05),S期细胞百分比下降(P<0.05),说明细胞阻滞于G0/G1期。当姜黄素的浓度在40~160μmol/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论姜黄素可显著抑制HUVEC增殖,使细胞周期停滞于G0/G1期,并诱导其凋亡,作用呈时间和剂量依赖性。提示姜黄素通过抑制新生血管治疗翼状胬肉具有潜在的应用前景。     

莪术油对高糖下视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的影响

目的：研究不同浓度的莪术油对高糖条件下体外培养的人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells, HRCECs)增殖、调亡及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达的影响。

方法：体外培养从角膜移植术后新鲜人眼球提取的HRCECs。取生长良好的第 3～4代细胞用于实验,实验分为低糖对照组、高糖对照组、高糖+(60,80,100,120μg/mL)不同浓度莪术油组,用噻唑蓝(MTT)比色法检测HRCECs的增殖,通过免疫细胞化学法观察各分组HRCECs中VEGF的表达情况。

结果：MTT比色法结果显示：高糖对照组与低糖对照组没有显著差异(P>0.05),用60,80,100,120μg/mL的莪术油处理高糖下HRCECs作用24h高糖+不同浓度莪术油组与高糖对照组相比具有显著性差异(P<0.05),高糖+不同浓度莪术油组之间呈时间和浓度的显著性差异(P<0.05)。免疫细胞化学检测显示：与低糖对照组相比,高糖对照组VEGF表达明显(P<0.05),用80,100,120μg/mL的莪术油处理高糖下HRCECs 24h,高糖+不同浓度莪术油组与高糖对照组相比VEGF表达有显著性差异(P<0.05),高糖+不同浓度莪术油组之间两两比较均具有显著性差异(P<0.05)。

结论：莪术油可抑制高糖下人视网膜血管内皮细胞增殖和VEGF表达。     

缺氧促进视网膜微血管内皮细胞的增殖扩C—fos癌基因表达

目的 研究缺氧在视网膜新生血管形成中的作用。方法 采用细胞计数及免疫组化的方法，将培养的视网膜微血管同皮细胞接种于２４孔板，分别放入正常及缺氧（５０ｍｌ·Ｌ＾－１Ｏ２）环境中，３７℃进行培养。不同时间后进行计数及抗ＦＯＳ蛋白抗体染色。结果：缺氧组的细胞计数均高于正常组（Ｐ〈０．０１），抗ＦＯＳ蛋白抗体染色，缺氧组明显强于正常组。结论 缺氧可以明显促进视网膜微血管内皮细胞的增殖，其机理是通过诱导Ｃ－     

白藜芦醇对视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的影响(英文)

目的:探讨白藜芦醇对缺氧诱导的视网膜血管内皮细胞增殖的影响。方法:用100μmol/LCoCl2模拟缺氧环境,以体外培养的人视网膜血管内皮细胞为模型,采用MTT法测定细胞增殖、SABC法检测血管内皮生长因子的表达,并以计算机图像分析仪进行分析,观察研究白藜芦醇对CoCl2诱导的视网膜血管内皮细胞增殖的影响。结果:白藜芦醇对CoCl2诱导的视网膜血管内皮细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.01),且呈时间和剂量依赖关系;同时,各给药组均抑制VEGF的表达(P<0.01)。结论:白藜芦醇能抑制CoCl2诱导的视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF的表达,将为视网膜新生血管疾病的药物治疗提供一条新思路。     

缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1α及其mRNA的表达

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1 α（HIF-1 α）及其mRNA表达的时空规律。方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养，采用免疫组织化学和逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）检测不同缺氧时间HIF-1 α及其mRNA的表达。结果正常对照组HIF-1 α有极低表达，缺氧1h表达量显著上升，4h达到高峰，16h后下降。与对照组比较，各缺氧组HIF-1 α的表达均有显著统计学差异（P〈0．01）。但各缺氧组HIF-1 αmRNA的表达无显著统计学差异。结论视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1 α表达有短暂、迅速的增加，但其mRNA的表达无明显变化，提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1 α的表达，但不是在基因的转录水平。     

重组干扰素诱导蛋白-10对视网膜血管内皮细胞增生、迁移及管腔形成的影响

目的 观察重组干扰素诱导蛋白-10（IP-10）对人视网膜血管内皮细胞（HREC）和人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增生、迁移及管腔形成能力的影响。方法 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HREC和HUVEC中CXC趋化因子受体3（CXCR3） mRNA的表达情况;以细胞计数试剂盒-8（CCK-8)增生分析法比较HREC和HUVEC在不同IP-10浓度下增生能力的差异;采用细胞划痕法测定IP-10对HREC和HUVEC迁移的作用;采用基质体外三维成型法检测IP-10对HREC和HUVEC管腔形成的影响。结果 HREC和HUVEC均在基因水平表达CXCR3。CCK 8增生分析法检测结果显示IP-10抑制HREC增生,并呈剂量依赖性（F=6.202,P＜0.05）,但IP-10对HUVEC增生无明显影响（F=1.183,P＞0.05）。细胞划痕法测定结果显示,HREC和HUVEC在10、100 ng/ml IP-10干预时的迁移距离均小于对照组迁移距离,差异有统计学意义（F=25.373、23.858,P＜0.05）。10、100 ng/ml IP-10对HREC完整管腔形成数量无明显影响,1000 ng/ml IP-10可使HREC完整管腔形成数量明显减少;10、100、1000 ng/ml IP-10干预和未行IP-10干预的HREC完整管腔形成数量比较,差异有统计学意义（F=5.359,P＜0.05）。结论 IP-10对HREC的增生、迁移、管腔形成均有抑制作用,对HUVEC的迁移有抑制作用。     

脂联素对视网膜血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究

目的：研究脂联素对缺氧损伤的恒河猴脉络膜/视网膜内皮(RF/6A)细胞的保护作用及相关机制。

方法：将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、缺氧损伤(CoCl₂刺激诱导24h)组和缺氧损伤+脂联素(5、50、100μmol/L脂联素预处理6h)组。采用MTT法检测细胞活力,选择合适的脂联素内皮细胞保护作用浓度,并采用Western blot检测凋亡相关因子Bax、Bcl-2的表达情况,同时测定细胞内活力氧簇(ROS)的表达水平。

结果：与对照组相比,缺氧损伤组和各浓度脂联素预处理的RF/6A细胞活力均下降(均P<0.01); 与缺氧损伤组相比,各浓度脂联素预处理后细胞活力均显著增加(均P<0.05),其中50μmol/L脂联素是较为合适的保护作用浓度。与对照组相比,缺氧损伤组细胞活力降低,Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量降低,ROS生成增加(P<0.01); 与缺氧损伤组相比,脂联素预处理后细胞活力增加,Bax蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量增加,ROS生成减少(P<0.01)。

结论：脂联素可明显减轻缺氧造成的视网膜血管内皮细胞损伤和凋亡,其机制可能与脂联素减轻氧化应激有关。     

姜黄素对氧诱导的视网膜新生血管形成的影响

目的 观察姜黄素对高氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型新生血管形成的影响.方法 C57BL/6J小鼠72只,分为正常组、OIR模型组、二甲基亚砜(DMSO)组及100、50、10 mg姜黄素治疗组.正常组小鼠饲养于正常空气的氧浓度中,其余各组小鼠参照文献建立OIR模型.治疗组在建立OIR模型后分别腹腔注射100,50、10 mg/kg姜黄素0.1 ml,DMSO组腹腔注射1‰的DMSO 0.1 ml.所有小鼠于17日龄处死,摘除眼球,苏木精-伊红染色观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核的数目.取各组小鼠视网膜组织,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF受体-2(VEGFR-2)、内皮抑素(ES)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)在视网膜中的表达.结果 与正常组比较,OIR模型组小鼠视网膜有大量新生血管形成,突破内界膜的内皮细胞核数,OIR模型组为(46.00±16.00)个,正常组为(0.17±0.41)个,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR及Western blot检测显示100 nag治疗组与其余两个剂量的治疗组相比在对VEGFA、ES、p-p38MAPR表达的影响上具有更为显著的作用(P<0.05),但不同剂量治疗组之间VEGFR-2的表达,差异无统计学意义(P>0.05).结论 姜黄素能够显著抑制氧诱导视网膜新生血管的生成.     

缺氧时视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α及其mRNA的时序性表达

目的探讨在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其mRNA表达的时空规律.方法对分离的牛视网膜血管内皮细胞分别进行常规和CoCl2模拟缺氧培养,采用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测不同缺氧时间HIF-1α及其mRNA的表达.结果正常对照组HIF-1α有极低表达,在缺氧1h时表达量显著上升,4h达到高峰,16h后下降.与对照组比较,各缺氧组HIF-1α的表达均有显著性差异(P＜0.01).但各缺氧组HIF-1αmRNA的表达无明显差异.结论视网膜血管内皮细胞在缺氧早期HIF-1 α表达有短暂、迅速的增加,但其mRNA的表达无明显变化,提示缺氧可以促进视网膜血管内皮细胞HIF-1α的表达,但不是在基因的转录水平.     

姜黄素对氧诱导的视网膜新生血管形成的影响

Objective To investigate the effects and mechanism of cureumin on the retinal neovasularization in mice with oxygen-induced retinopathy (OIR). Methods A total of 72 C57BL/6J mice were divided into normal, OIR model, vehicle control [dimethyl sulphoxide (DMSO)], and curcumin group(100, 50, and 10 mg). The mice in normal group lived in normoxia condition; OIR model was set up according to standard methods in the literature. Five days after OIR establishment, the mice in curcumin group received an intraperitoneal (IP) injection of 0.1 ml curcumin (100, 50, and 10 mg), and the mice in DMSO group received an IP injection of 0. 1 ml 1‰ DMSO. All of the mice were executed at the age of postnatal day 17 (P17) and the eyeballs were collected. Endothelial cell nuclei breaking through the internal limiting membrane were counted after stained with hematoxylin and eosin (HE). The expression of vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A), vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2),endostatin (ES), and phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase (p-p38MAPK) in the retina in each group were measured by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot methods.Results Compared with the normal group, retinal neovascularization was found in OIR model group (P<0. 05). The number of endothelial cell nuclei was 46.00 ± 16. 00 in OIR model group and 0. 17 ± 0.41 in normal group (P<0. 05). The expression of VEGF-A, ES, and p-p38MAPK in 100 nag curcumin group differed statistically from which in 50 and 10 mg curcumin group (P<0. 05). The expression of VEGFR-2 was same in the three curcumin groups (P>0. 05). Conclusion Curcumin can inhibit the formation of retinal neovascularization; the mechanism may be associated with inhibiting the expression of VEGFA and VEGFR-2, increasing the expression of ES, and inhibiting the p38MAPK signal transduction pathway.     

姜黄素对氧诱导的视网膜新生血管形成的影响

Objective To investigate the effects and mechanism of cureumin on the retinal neovasularization in mice with oxygen-induced retinopathy (OIR). Methods A total of 72 C57BL/6J mice were divided into normal, OIR model, vehicle control [dimethyl sulphoxide (DMSO)], and curcumin group(100, 50, and 10 mg). The mice in normal group lived in normoxia condition; OIR model was set up according to standard methods in the literature. Five days after OIR establishment, the mice in curcumin group received an intraperitoneal (IP) injection of 0.1 ml curcumin (100, 50, and 10 mg), and the mice in DMSO group received an IP injection of 0. 1 ml 1‰ DMSO. All of the mice were executed at the age of postnatal day 17 (P17) and the eyeballs were collected. Endothelial cell nuclei breaking through the internal limiting membrane were counted after stained with hematoxylin and eosin (HE). The expression of vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A), vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2),endostatin (ES), and phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase (p-p38MAPK) in the retina in each group were measured by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot methods.Results Compared with the normal group, retinal neovascularization was found in OIR model group (P<0. 05). The number of endothelial cell nuclei was 46.00 ± 16. 00 in OIR model group and 0. 17 ± 0.41 in normal group (P<0. 05). The expression of VEGF-A, ES, and p-p38MAPK in 100 nag curcumin group differed statistically from which in 50 and 10 mg curcumin group (P<0. 05). The expression of VEGFR-2 was same in the three curcumin groups (P>0. 05). Conclusion Curcumin can inhibit the formation of retinal neovascularization; the mechanism may be associated with inhibiting the expression of VEGFA and VEGFR-2, increasing the expression of ES, and inhibiting the p38MAPK signal transduction pathway.