鞘氨醇-1-磷酸受体4在口腔鳞状细胞癌中的表达及生物学功能

目的 ：探讨鞘氨醇-1-磷酸受体4(sphingosine-1-phosphate receptor 4,S1PR4)在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达及生物学功能。方法 ：通过实时荧光定量PCR (RT-qPCR)、免疫印迹实验（Western blot）和免疫组织化学染色,分析OSCC组织样本及细胞系（WSU-HN4、WSU-HN6、CAL27、WSU-HN30）中S1PR4的表达。通过S1PR4拮抗剂（CYM50358）抑制S1PR4活性,利用CCK-8以及克隆形成实验检测CYM50358对OSCC细胞增殖的影响。通过流式细胞术分析CYM500358对OSCC细胞凋亡的影响。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计学分析。结果：OSCC中的S1PR4转录及表达显著上调,CYM50358处理组OSCC细胞增殖活性显著低于空白对照组（P<0.05）,CYM50358处理组OSCC细胞克隆形成能力显著低于空白对照组（P<0.05）,CYM50358处理组OSCC细胞凋亡比例显著高于空白对照组（P<0.05）...     

牙髓细胞迁移的研究进展

牙髓在受到外来刺激时,会启动自身的防御性反应,分泌和释放一些细胞因子并启动特定信号通路,以促进修复性牙本质的形成,从而达到隔绝刺激、保护牙髓的目的 ,其中牙髓细胞向损伤部位的定点迁移发挥了至关重要的作用.本文就目前对牙髓细胞迁移的研究进展作一综述.     

SPHK1在舌鳞癌中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移能力的影响

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPHK1)在舌鳞癌组织中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移的影响。方法:采用免疫组织化学检测45例舌鳞癌组织、36例癌旁异常增生组织和45例正常舌上皮组织中SPHK1蛋白的表达。利用脂质体2000将SPHK1 siRNA和对照siRNA分别转染Tca8113细胞,Western blotting检测细胞中SPHK1蛋白的表达;分别采用CCK-8和Boyden小室检测细胞增殖和细胞迁移能力的变化;用Western blotting检测细胞迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达的变化。结果:舌鳞癌组织中SPHK1蛋白的表达显著高于癌旁异常增生组织和正常舌上皮组织(χ2=55.608,P=0.000)。SPHK1 siR-NA能显著下调Tca8113细胞中SPHK1蛋白的表达,其表达下调能明显抑制舌鳞癌细胞的增殖和降低细胞的迁移能力。SPHK1表达的下调能明显降低舌鳞癌细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结论:SPHK1的过表达可能在舌鳞癌的发生发展过程中发挥重要作用,其表达下调介导的舌鳞癌细胞迁移能力的降低可能与MMP-2和MMP-9的下调密切相关。     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:以组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Transwell培养法和ALP活性检测法,观察10 ng/mL bFGF对体外培养人牙髓细胞迁移和分化能力的影响。结果:bFGF可显著诱导体外培养牙髓细胞迁移,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并能抑制细胞ALP活性(P<0.05),随着培养时间延长,该抑制作用更加显著(P<0.05)。结论:bFGF能促进牙髓细胞迁移,抑制ALP活性,在牙本质牙髓复合体修复中可能发挥重要作用。     

高迁移率族蛋白B1对人牙髓细胞迁移能力和增殖效应的影响术

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGBl）在人牙髓细胞（Human dental pulp cells,hDPCs）中的表达,以及对hDPCs增殖和迁移能力的影响。方法：采用组织块培养法,培养原代hDPCs,取第3-6代细胞用于实验。免疫荧光检测HMGBl在hDPCs中的表达及定位;分别用含不同质量浓度（0．1ng／mL、1ng／mL、10ng／mL、50ng／mL、100ng／mL、500ng／mL、1000ng／mL）HMGBl的培养液培养hDPCs,5天后采用CCK一8法检测细胞增殖能力;细胞划痕实验法观察1ng／mL质量浓度HMGBl对hDPCs迁移能力的影响。结果：HMGBl表达在hDPCs胞核：低浓度HMGBl（O．1ng／mL、1ng／mL、10ng／mL、50ng／mL、100ng／mL）明显促进细胞增殖;1ng／mLHMGBl明显促进hDPCs迁移能力。结论：HMGBl表达在正常hDPCs胞核中,细胞外低浓度HMGBl可以促进细胞增殖和迁移。     

rhBMP2和rhTGF-β1联合应用对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的:探讨rhBMP2和rhTGF-β1联合应用对人牙髓细胞ALPase活性的影响.方法:采用酶动力学的方法,比较不同浓度rhBMP2和rhTGF-β1单独或联合应用对人牙髓细胞的ALPase活性的影响.结果 :rhBMP2对人牙髓细胞的ALPase活性呈浓度依赖性增强,rhTGF-β1对人牙髓细胞ALPase活性的影响与其本身浓度有关 .当rhTGF-β1浓度为1μg/L与rhBMP2联合应用时, ALPa se活性比rhBMP2单独应用明显增高.结论:rhBMP2、rhTGF-β1单独及联合应用于人牙髓细胞时,对人牙髓细胞的ALPase活性作用不同,其对人牙髓细胞的生理功能可能有调节作用.     

促红细胞生成素对人牙髓细胞迁移能力的作用

目的研究促红细胞生成素（EPO）对人牙髓细胞（hDPC）迁移能力的影响,并初步探讨相关分子机制。 方法实时荧光定量聚合链反应（PCR）检测EPO对hDPC表达趋化因子mRNA的影响;Transwell实验观察不同浓度的EPO对hDPC迁移能力的影响;Western blot检测不同时间点hDPC中p38、ERK1/2、JNK磷酸化水平的变化;细胞划痕实验观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路抑制剂对EPO诱导hDPC迁移的影响。 结果EPO上调趋化因子CXCR4、SDF-1 mRNA的表达（t_CXCR4= 5.727,P_CXCR4= 0.005;t_SDF-1= 3.412,P_SDF-1= 0.027）;与对照组相比,EPO显著促进hDPC的迁移能力（F= 207.775,P_{10 U/ml}= 0.000,P_{20 U/ml}= 0.000,P_{40 U/ml}= 0.000）;EPO可升高MAPK信号通路中关键蛋白ERK1/2（t_{15 min}= 6.554,P_{15 min}= 0.000;t_{30 min}= 17.305,P_{30 min}= 0.000;t_{60 min}= 8.913,P_{60 min}= 0.000;t_{120 min}=-5.896,P_{120 min}= 0.934）和p38的磷酸化程度（t_{15 min}= 4.396,P_{15 min}= 0.004;t_{30 min}= 6.447,P_{30 min}= 0.000;t_{60 min}= 34.676,P_{60 min}= 0.000;t_{120 min}= 4.689,P_{120 min}= 0.003）;MAPK信号通路抑制剂U0126、SB203580可抑制EPO诱导的hDPC迁移（t_EPO-U0126= 2.422,P_{EPO- U0126}= 0.025;t_EPO-SB203580= 3.837,P_EPO-SB203580= 0.001）。 结论EPO上调趋化因子CXCR4和SDF-1 mRNA的表达,通过激活MAPK信号通路,促进hDPC迁移。     

人重组骨形成蛋白-1对牙髓细胞生物学效应的研究

通过细胞培养技术，噻唑盐比色测定，酶动力学方法和放射免疫技术，了解人重组骨形成蛋白－１对体外培养的人牙髓细胞增殖，碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明，ｒｈＯＰ－１牙促进牙髓细胞增殖，提高牙髓碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达，在本实验剂量范围内呈浓度依赖关系，具有诱导牙髓细胞中成骨方向转化的趋势。     

一氧化氮对人牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响

目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)对人牙髓细胞生物学特性的影响.方法:利用组织块法培养人牙髓细胞,取生长良好的第3代细胞,在正常培养基与促矿化培养基中分别加入浓度为10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L的NO供体亚硝基化合物-18(NOC-18),通过MTT检测细胞增殖能力,测定细胞ALP活性.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析,检测NOC-18对牙髓细胞增殖和ALP活性的影响.结果:NOC-18呈浓度依赖性地抑制牙髓细胞的增殖;在促矿化培养基中,牙髓细胞体现出更高的ALP活性,呈浓度依赖性增强,但在正常培养基中却没有变化.结论:NO对牙髓细胞的生物学活性有较大影响,提示NO在修复性牙本质形成与牙髓炎的发生、发展中起到一定作用.     

大鼠牙髓细胞复合β-磷酸三钙多孔陶瓷体外培养的实验研究

目的:研究大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养后的生长情况及细胞活性,探讨β-TCP作为大鼠牙髓细胞支架材料的可行性。方法:实验分两组,实验组为大鼠牙髓细胞与β-TCP复合培养,对照组为大鼠牙髓细胞常规培养。采用相差显微镜、电子显微镜观察细胞生长、贴附情况;采用MTT、细胞蛋白检测、碱性磷酸酶检测的方法评价大鼠牙髓细胞生长情况及细胞活性。结果:大鼠牙髓细胞复合β-TCP后生长良好,贴附于材料表面及孔隙内壁。MTT及细胞蛋白检测复合培养组和对照组无差异,6 d、9 d时复合β-TCP培养的大鼠牙髓细胞碱性磷酸酶活性明显高于对照组。结论:复合β-TCP进行培养的大鼠牙髓细胞生长良好,没有出现生长抑制现象,其细胞活性更明显增强,表明β-TCP完全符合牙髓细胞支架材料的要求,是一个具有很好应用前景的牙髓组织工程支架材料。     

脂多糖刺激人牙髓干细胞分泌的外泌体联合基质细胞衍生因子-1对牙髓再生的影响

目的探讨轻度炎症状态下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSC)产生的外泌体与基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)联合应用对牙髓组织再生的影响。方法分离培养hDPSC,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激hDPSC,超速离心法提取hDPSC经LPS刺激后产生的外泌体(exosomes from lipopolysaccharide-stimulated hDPSC,L-EXO)和正常状态下分泌的外泌体(exosome from normal hDPSC,N-EXO),通过透射电镜和蛋白质印迹法鉴定提取物。将40只6~8周龄的SD大鼠通过随机数字表法分为S组(单独应用SDF-1)、L+S组(SDF-1与L-EXO联合应用)、N+S组(SDF-1与N-EXO联合应用)和空白对照组(根管内不植入任何物质),每组10只。以双侧下颌第一磨牙为实验牙,建立大鼠无髓根管模型,根据分组分别在根管内植入不同的内容物。植入后30 d过量麻醉处死所有大鼠,取大鼠双侧下颌骨组织,应用HE、Masson及免疫组织化学染色法进行组织学评价。结果HE染色结果显示,除空白对照组外,其他3组根管内均可见新生牙髓样组织,其中L+S组根管内新生组织的量及组织中的细胞数量最多,S组最少。Masson染色结果显示,L+S组矿化组织沿根管壁纵向排列,胶原纤维有序排列,N+S组呈无规律紊乱分布。定量分析各组新生血管面积,结果显示L+S组血管密度[(2.03±0.65)%]显著高于S组[(0.65±0.05)%]及N+S组[(1.06±0.38)%](F=5.879,P<0.05)。免疫组织化学结果显示,S组及L+S组的趋化因子受体4表达量显著低于N+S组(F=8.633,P<0.01)。结论hDPSC分泌的外泌体联合SDF-1可提高根管内新生组织的量和组织中的血管密度,L-EXO的作用较N-EXO强,并且新生组织中胶原纤维及矿化组织的排列更规律有序。     

模拟微重力对人牙髓干细胞微丝及细胞迁移能力的影响

目的:探讨模拟微重力对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)微丝及迁移能力的影响。方法:利用旋转培养系统(rotary cell culture system,RCCS)将HDPSCs分为常规对照组和微重力培养组,分别于4、12、24、48、72h行免疫荧光染色,观察微丝的变化;72h后,透射电镜观察微丝骨架变化及细胞迁移实验检测细胞迁移能力。结果:4h时即有粗大的微丝纤维束解聚,24～72h变得模糊,紊乱,且出现多向排列趋势;实验组细胞迁移数量少于对照组(P<0.05)。结论:人牙髓干细胞微丝在模拟微重力环境下发生改变,呈时间依赖性并使细胞迁移能力降低。     

内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响

目的：研究具核梭杆菌的内毒素（ＬＰＳ）对重组人成骨蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法：采用噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术。结果：在较低浓度ＬＰＳ作用时,可协同增加ｒｈＯＰ－１对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性,但对骨钙素（ＢＧＰ）无明显影响,而高浓度ＬＰＳ则起抑制作用。结论：提示适度的ＬＰＳ在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。     

DKK1对脂多糖感染人牙髓细胞生物学行为的影响

目的:研究DKK1对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)感染人牙髓细胞生物学行为的影响.方法:使用改良酶组织块法分离培养人牙髓细胞并通过免疫荧光染色鉴定细胞来源;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验、茜素红染色、荧光定量PCR等实验检测DKK1对LPS感染人牙髓细胞的生物学行为的变...     

人类牙髓细胞中基质细胞衍生因子-1α/CXCR4轴的调控（英）

引言尽管有报道认为间质细胞性因子（SDF）-1α/CXCR4轴存在于牙髓组织中,但关于牙髓干细胞（DPSCs）中该轴的调控知之甚少。本研究目的就是要搞清炎症或组织缺氧状态对牙髓细胞中的SDF-1α/CXCR4轴是否有调控作用。方法：用不同浓度的脂多糖LSP刺激原代牙髓细胞     

细胞间粘附分子－1对炎症细胞定向迁移的作用

在牙种植体周围炎和牙周炎的发生、发展过程中，细胞间粘附分子-1对中性粒细胞和淋巴细胞的定向迁移、浸润周围结缔组织以及纤维结缔组织、骨组织的破坏起了重要的作用。本文从细胞间粘附分子-1的分布、受体、功能及其表达的影响因素的角度，概速了细胞间粘附分子-1的粘附机制对炎症细胞定向迁移的作用。     

白细胞介素-1β诱导牙髓细胞的金属蛋白酶-1和COX2的表达

目的 :探讨白细胞介素 1β对人牙髓细胞金属蛋白酶 1(matrixmetalloproteinase 1,MMP 1)、环氧合酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX2 )基因表达变化的生物学意义。方法 :培养人牙髓细胞 ,传代至第 4代 ,PT PCR检测人牙髓细胞是否表达IL 1β受体 ,进而用 1nmol/L人的重组IL 1β刺激人牙髓细胞 18h ,提取细胞总RNA ,反转录为cDNA ,半定量PCR检测IL 1β对人牙髓细胞的金属蛋白酶 1、COX2的mRNA的表达变化。结果 :人牙髓细胞表达IL 1β受体 ,而且用 1nmol/L人的重组IL 1β明显地刺激牙髓细胞的金属蛋白酶 1、COX2的mRNA表达。结论 :牙髓炎时牙髓组织内的IL 1β生成增多 ,会进一步引发金属蛋白酶 1、COX2基因异常表达相应增多 ,而金属蛋白酶 1导致炎症基质降解、COX2将引发炎性痛的病理改变。     

人牙髓细胞来源外泌体对脐静脉内皮细胞迁移能力的影响

目的探讨牙髓细胞外泌体（DPC-Exos）对脐静脉内皮细胞（HUVEC）迁移能力的影响。 方法超速离心法分离提纯DPC-Exos,透射电镜和蛋白印迹法（Western blot）进行鉴定;划痕实验和Transwell实验检测DPC-Exos对HUVEC迁移的影响。采用SPSS 20.0软件进行分析,划痕实验迁移率和Transwell实验细胞迁移数采用两独立样本的t检验进行统计。 结果DPC-Exos呈双层膜包被和茶托样结构,表达CD63膜蛋白标记物。划痕实验结果显示,DPC-Exos作用6 h后HUVEC细胞迁移能力下降26%,差异具有统计学意义（t= 6.534,P<0.001）。Transwell实验结果显示,DPC-Exos作用6 h后HUVEC迁移能力下降32%,差异具有统计学意义（t= 5.846,P<0.001）。 结论DPC-Exos抑制HUVEC迁移。     

内皮素1对人牙髓细胞胶原合成的影响

目的 探讨内皮素１地人牙髓细胞胶原合成的影响。方法 采用细胞培养、酶联免疫吸附分析及免疫组化染色等方法,就ＥＴ－１对ＨＤＰＣ胶原合成的影响进行了研究。结果 ＥＴ－１较对照组除２４小时时相外,均有不同程度的促ＨＤＰＣ可溶性Ｉ型胶原合成作用,但对Ⅲ型胶原作用不明显;经免疫组化染色证实;ＥＴ－１尚可同时促进细胞非溶解性Ｉ型胶原合成。结论 ＥＴ－１促进ＨＤＰＣＩ型胶原合成增加,可能对牙髓组织的自身修复起作