周氏克金岩方抗肺癌A549细胞有效部位I成分分析研究

目的对周氏克金岩方有效部位I的成分进行定性定量分析,为深入研究周氏克金岩方抗肺癌有效部位群物质基础奠定基础。方法通过试管反应和TLC方法定性鉴别有效部位成分,建立亚硝酸钠一硝酸铝比色法测定总黄酮含量、香兰素-冰醋酸-高氯酸比色法测定总皂苷的含量。结果周民克金岩方有效部位I中主要含黄酮、皂苷类成分,含量分别为0．85％、1．07％,纯度分别为29．7％、37．4％。结论周氏克金岩方有效部位I中主要含有黄酮和皂苷类成分,总纯度为67．1％。     

周氏克金岩方有效部位中黄酮皂苷的分离工艺研究

目的:对周氏克金岩方有效部位中黄酮皂苷类成分进行分离纯化工艺研究,为深入研究周氏克金岩方抗肺癌物质基础、开发新药奠定基础。方法:应用溶剂法分离,以黄酮、皂苷的含量为指标,采用正交设计优选提取物浓度、PH值、静置条件的最佳分离工艺条件。结果:有效部位提取物的浓度为0.5g.mL-1,PH=7,常温静置24h,黄酮和皂苷提取物的纯度分别为70.25%和71.32%;结论:用溶剂法分离周氏克金岩方有效部位中的黄酮皂苷部位,分离工艺简单,操作容易,能达到较好的分离效果。     

周氏克金岩方促进舌苔形成相关细胞凋亡作用机制

目的探讨周氏克金岩方促进舌苔形成相关细胞凋亡的作用机制。方法体外培养SAS和TCA-8113舌鳞癌细胞,撤除血清模拟舌苔形成相关细胞凋亡环境,周氏克金岩方正丁醇部位作用舌鳞癌细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡,ELISA检测细胞培养上清PGE2含量。结果与对照组相比,周氏克金岩方丁醇部位能够降低舌鳞癌细胞的增殖活性,促进SAS和TCA-8113细胞凋亡率升高,抑制细胞分泌PGE2,且具有剂量和时间依赖性。结论周氏克金岩方正丁醇部位促进舌苔形成相关细胞凋亡与抑制PGE2合成相关。     

周氏克金岩方中6种黄酮指标成分的UV在线检测

目的：建立周氏克金岩方中6种黄酮指标成分的快速UV在线检测方法。方法：用HPLC测定39批周氏方提取液中儿茶素、羟基红花黄色素A、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素6种黄酮指标成分含量;同时将这39批提取液在200~500 nm进行UV全波长扫描,取每隔1 nm的紫外吸光度。分别将HPLC测得各提取液6指标成分含量与其301个紫外吸光度进行逐步回归,建立6种指标成分含量的UV预测方程,另取8批周氏方提取液分别用HPLC和UV预测法测定其实际含量和预测含量,检验预测结果的可靠性。结果：6种指标成分UV预测方程的相关系数依次为0.935,0.963,0.911,0.956,0.926,0.890。8批验证提取液中各指标成分的实际含量与预测含量结果的相关系数分别为0.946 5,0.976 5,0.907 9,0.981 9,0.911 4,0.896 2;两组值间偏差小;经t检验,两组数据间没有显著性差异。结论：UV预测法结果可靠、准确,方法快速、方便,可用于周氏方生产过程中6种黄酮指标成分的在线检测。     

不同产地猫爪草中多糖含量的比较

目的 比较不同产地猫爪草中多糖的含量。方法 采用苯酚-硫酸法。结果 河南信阳、河南驻马店、安徽、浙江、江苏、湖北、山东等地猫爪草中多糖含量分别为:12.65%、12.05%、10.46%、9.78%、8.49 %、8.73%、9.47%。结论 不同产地猫爪草中多糖的含量差异明显,其中以河南产猫爪草中多糖含量最高。     

玉竹根茎与须根的生药学比较研究

目的:通过对玉竹多糖和薯蓣皂苷元含量的测定,以及性状和显微特征的比较,研究玉竹根茎与须根之间的关系。方法:采用性状和显微鉴定法;采用苯酚-硫酸分光光度法测定玉竹多糖,检测波长488 nm,通过标准曲线法计算玉竹多糖的含量;采用Ultimate XB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸(95∶5)为流动相,检测波长为203 nm测定玉竹中薯蓣皂苷元的含量。结果:玉竹根茎粗,具纵皱及微隆起的环节;横切面内皮层不明显,维管束散列、有限外韧型。而须根细长多分支;横切面内皮层明显,并且凯式点明显增厚,维管束辐射型。须根中多糖的含量为根茎的1/5~1/2,而须根中薯蓣皂苷元的含量约为根茎的3倍。结论:通过比较可为玉竹须根进一步的开发利用提供科学的依据。     

玉竹多糖脱蛋白方法的比较研究

目的 研究玉竹多糖脱蛋白最佳方法.方法 以sevag法、三氯乙酸法、sevag新法、酶法对玉竹多糖分别进行脱蛋白处理,并将两种最佳方法结合对玉竹多糖进行脱蛋白处理.结果 以回归方程计算多糖和蛋白含量,得出玉竹多糖脱蛋白最佳工艺为:玉竹多糖溶液稀释20倍,取50 ml,10%盐酸调pH值至6.5,加入3%体积的胰蛋白酶,65℃保温6h,沸水浴5 min,4 000 r/min离心,去变性酶沉淀,再加入其体积1/5的氯仿和1/25的正丁醇,剧烈振摇20 min,离心,取水相重复操作3次,得脱蛋白液.结论 酶法与Sevag法结合,可降低多糖损失,提高蛋白质脱除率,是玉竹多糖脱蛋白的一种良好的方法.     

玉竹中多糖的超声提取工艺研究

目的:筛选出玉竹中玉竹多糖的最佳超声提取工艺。方法:用正交试验法进行提取工艺的研究,考察浸泡时间、加水量、超声时间及超声次数等4个因素对玉竹多糖提取效率的影响,并用紫外-可见分光光度法对玉竹多糖的提取液进行了含量测定。结果:最大吸收波长490 nm,平均回收率为99.02%,RSD=0.44%。玉竹多糖的最佳提取工艺为:加入60 m l水,浸泡20 m in超声提取2次,每次20 m in。结果:该方法简单、快速、准确,为从玉竹中提取多糖提供参考。     

玉竹多糖铁的抗氧化性和FAAS法测定铁含量

目的以三氯化铁和玉竹多糖为原料制备多糖铁,测定其铁含量和抗氧化性。方法化学法制备多糖铁,采用火焰原子吸收光谱法(FAAS)测定多糖铁的铁含量,分光光度法测定多糖铁对氧自由基的清除作用。结果红外光谱显示在600~800cm~(-1)附近出现多糖铁核(β-FeOOH)的吸收峰。经原子吸收光谱测得多糖铁含量为140.80mg·g~(-1),加标回收率为100.93%,RSD为0.17%。精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于0.20%。多糖铁对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O_2~-)的清除作用均比对照品VC强。结论玉竹多糖与Fe3+形成了稳定的多糖铁复合物,FAAS法测定玉竹多糖铁含量简便、快速、回收率好、精密度和准确度都较高。在化学模拟体系中玉竹多糖铁对氧自由基具有很强的清除活性。     

玉竹中酸性多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:对玉竹粗多糖进行分离纯化,并对所得均一多糖进行定性分析.方法:采用热水提取玉竹粗多糖,乙醇分级沉淀,收集乙醇体积分数为80％条件下析出的多糖沉淀物.再经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100分子筛色谱得到玉竹酸性多糖(POAPS0).应用紫外光谱、凝胶柱色谱、纸色谱分析POAP80的纯度,红外光谱和PMP柱前衍生化高效液相色谱分析其结构和单糖组成.结果:从玉竹粗多糖中分离纯化了1种酸性多糖POAP80,主要含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、半乳糖4种单糖,其摩尔比为0.93∶2.65∶ 29.38∶3.47.结论:POAP80为玉竹中新发现的均一组分多糖,上述方法提供了玉竹POAP80的一些结构信息,为进一步研究其结构和功能提供参考.     

ISSR法鉴定中药玉竹与小玉竹

目的:鉴别中药玉竹及其掺伪品小玉竹,探索中药玉竹鉴别的新方法。方法:采用显微鉴定和ISSR法鉴定中药玉竹,共考察了28条随机引物,从中筛选出引物(CA)8G,(ATG)5用于分析,经18%琼脂糖电泳分离产物。结果:所选引物进行的PCR扩增可产生用于分析的多态性谱带。通过显微鉴定以及ISSR标记法可以将玉竹及其主要掺伪品区分开。结论:本实验所建立的ISSR标记方法可用于中药玉竹和小玉竹的区分。     

玉竹总皂苷超声波提取工艺研究

目的：对玉竹总皂苷超声提取的最佳提取工艺进行研究。方法：通过正交试验优选出超声波提取玉竹总皂苷的最佳工艺。结果：超声波提取玉竹总皂苷的最佳工艺为提取温度60℃,液料比60,超声时间30min。结论：超声波法与传统加热回流法提取玉竹总皂苷的提取率差异不具有统计学意义,但超声波法具有简单、快捷、省时等优点,为从玉竹中提取总皂苷提供高效、节能的新方法。     

黄芩苷壳聚糖纳米粒的制备及表征

目的：建立小毛茛内酯的含量测定方法,优选猫爪草中小毛茛内酯的提取工艺。方法：采用HPLC测定小毛茛内酯含量,流动相甲醇-乙腈-水（40：40：20）,检测波长254 nm。在单因素试验基础上,以小毛茛内酯质量分数为指标,采用L₉（3⁴）正交试验考察提取时间、料液比、乙醇体积分数及粉碎粒度对提取工艺的影响。结果：最佳提取工艺为粉碎粒度80目,加3倍量70%乙醇提取3次,每次2 h;小毛茛内酯质量分数（1.24±0.22）%。结论：优选的工艺稳定可行且提取率高,为猫瓜草的开发与利用提供参考。     

玉竹中黄酮类成分的薄层色谱指纹图谱研究

目的 :对玉竹的黄酮类成分进行薄层色谱指纹图谱研究 ,以期解决玉竹的专属性鉴别 ,并为其质量控制提供依据。方法 :采用薄层色谱法 ,甲苯 醋酸乙酯 甲酸 (5∶4∶1)为展开剂 ,氨水熏蒸显色 ,用λ_R=5 0 0nm ,λ_S=2 80nm双波长扫描。结果 :建立了由 10个特征荧光斑点构成的玉竹黄酮类成分的薄层指纹图谱。结论 :该方法可以有效地鉴别玉竹 ,并评价其质量。     

猫爪草纳米乳喷雾剂的制备及对慢性咽炎大鼠模型的影响研究

目的:制备猫爪草纳米乳喷雾剂并初步考察其对慢性咽炎大鼠模型的影响。方法:通过溶解度测定,选择溶解猫爪草提取物能力较强的油相、乳化剂和助乳化剂,绘制伪三元相图比较纳米乳区域的大小以确定辅料种类及Km值;考察猫爪草纳米乳喷雾剂对大鼠慢性咽炎模型病理组织的影响,对局部病理检查结果进行半定量分析。结果:以蓖麻油聚氧乙烯醚(EL-40)-甘油-肉豆蔻酸异丙酯(IPM)-水(质量比为21∶7∶10∶61)制得的猫爪草纳米乳性状良好,平均粒径为(84±3. 12) nm,多分散指数(PDI)为0. 106,体系稳定。大鼠慢性咽炎模型病理检查结果表明,阳性药对照组、猫爪草纳米乳喷雾剂(高、中)剂量组的大鼠咽部病理学评分显著低于模型组。结论:猫爪草纳米乳喷雾剂制备简单,纳米乳粒径小,对慢性咽炎具有一定的疗效。     

玉竹中甾体皂苷及高异黄酮类化合物的波谱学特征

玉竹为我国传统中药材,甾体皂苷类和高异黄酮类化合物是其主要活性成分。结合国内外文献,笔者对玉竹中的甾体皂苷及高异黄酮类化合物的化学结构和波谱学特征进行了归纳总结,为今后这两类化合物的结构鉴定和核磁波谱数据归属提供了参考依据。     

海拔高度对黔产太子参总多糖含量的影响

目的:通过考察黔产太子参生长区域海拔高度及其总多糖含量,探讨海拔高度对太子参总多糖含量的影响规律,为该药材的质量评价及科学栽培提供参考。方法:采用水提醇沉法提取太子参总多糖,运用UV测定总多糖含量,硫酸-蒽酮法显色,检测波长626 nm。海拔高度采用手持坐标定位仪测定。结果:不同海拔基地太子参总多糖含量差异较大,含量(281 mg·g-1)最高为施秉县牛大场上坝小朝老,含量(23 mg·g-1)最低为清镇市王庄乡罗田村。相关性分析表明太子参总多糖含量与生长区域海拔高度无显著相关关系。结论:黔产太子参总多糖含量普遍较高,海拔高度对总多糖含量无显著性影响,但应避免在海拔过高区域种植。贵州虽为太子参非道地产区,但可作为太子参的主要种植基地。     

湖南地区玉竹根腐病病原鉴定及其生物学特性研究

目的：明确导致湖南地区玉竹根腐病发生的主要病原。方法：通过调查湖南玉竹主产区玉竹根腐病发生情况,对病原进行分离,并采用柯赫氏法则进行致病性测定,最后根据真菌形态和分子鉴定结果确定病原菌种属,同时对该病原菌基本的生物学特性进行了测定。结果：芬芳镰刀菌Fusarium redolens为玉竹根腐病主要病原,该菌菌丝生长适宜碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏,温度为25℃左右,pH为8～9。结论：本研究明确了湖南玉竹主产区玉竹根腐病病原及其基本的生物学特性,不但为该病害的防控提供了依据,还可为抗病育种奠定基础。     

多倍体黄精中多糖和皂苷的提取及含量测定

目的：比较1年生人工栽培多倍体（四倍体）黄精与1年生人工栽培二倍体黄精、4年生野生二倍体黄精中多糖以及皂苷的含量。方法：多糖采用索氏抽提法提取,蒽酮硫酸比色法测定含量;总皂苷采用超声波提取法提取,香草醛高氯酸比色法测定含量。结果：以葡萄糖计,4年生野生二倍体黄精、1年生人工栽培多倍体黄精以及1年生人工栽培二倍体黄精中多糖含量分别为17．7％、18．6％和17．0％;以人参皂苷Rb,计,4年生野生二倍体黄精、1年生人工栽培多倍体黄精以及1年生人工栽培二倍体黄精中总皂苷含量分别为7．5％、7．5％和3．6％。结论：1年生人工栽培多倍体黄精主要活性成分（多糖和皂苷）的含量接近或略高于4年生野生二倍体黄精,皂苷含量明显高于1年生人工栽培二倍体黄精。