舒马曲坦联合左乙拉西坦治疗顽固性偏头痛患者的临床研究

目的 观察舒马曲坦联合左乙拉西坦对顽固性偏头痛的治疗效果以及安全性.方法 将52例患者依据随机数字法分为对照组26例与试验组26例.对照组给予琥珀酸舒马普坦片,每次100 mg,qd,口服.试验组在对照组的基础上给予左乙拉西坦片,每次250 mg,qd,口服.2组治疗时间均为10周,在治疗期间若发生难以忍受的头部疼痛,...     

舒马曲坦联合左乙拉西坦治疗顽固性偏头痛的疗效 及对血浆 5- 羟色胺水平的影响

目的：观察舒马曲坦联合左乙拉西坦治疗顽固性偏头痛的效果及对患者血浆 5- 羟色胺水平的影响。方法：选取 2018 年 4 月—2020 年 1 月本院收治的 100 例顽固性偏头痛患者为观察对象,随机分成观察组和对照组各 50 例。对照 组采用舒马曲坦治疗,观察组采用舒马曲坦联合左乙拉西坦治疗,比较两组患者的治疗效果及治疗前后血浆 5- 羟色胺 含量的变化。结果：治疗后,总有效率观察组明显高于对照组,血浆 5- 羟色胺含量观察组明显高于对照组,组间差异 均有统计学意义（P＜0.05）。结论：舒马曲坦联合左乙拉西坦治疗顽固性偏头痛可提高治疗效果、改善血浆 5- 羟色胺 水平,有临床应用价值。     

四乙铵对正常及肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流作用的比较

以全细胞膜片钳制技术观察了正常及慢性常压低氧肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流，并进行了四乙铵(TEA)对两种动脉外向钾电流作用的量效关系比较. 结果表明：将细胞膜电位钳制在-50 mV，当指令电位大于-50 mV时，可以记录到电压依赖性的外向钾电流，且慢性常压低氧肺动脉高压时该电流较正常时为小；当指令电位为+70 mV，TEA 降低肺动脉高压大鼠外向钾电流的量效曲线较正常时右移.     

丙泊酚抑制去甲肾上腺素诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度升高作用的机理

用荧光分光光度法及同位素放射免疫分析法检测丙泊酚(30-300 μmol·L^-1)影响大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)内游离钙离子浓度(［Ca²⁺］_i)与肌醇-1,4,5-三磷酸(IP₃)合成作用,以探讨丙泊酚舒张肺动脉平滑肌的作用机理.结果表明,与丙泊酚共同培养72 h,对PASMC ［Ca²⁺］_i 基础水平无明显影响,但可浓度依赖性抑制去甲肾上腺素(NE 3 μmol·L^-1)引起的［Ca²⁺］_i升高作用;当细胞外液无钙或存在钙通道阻滞剂维拉帕米(30 μmol·L^-1)时,丙泊酚抑制NE升高［Ca²⁺］_i作用被增强;丙泊酚还可浓度依赖性抑制NE促进 IP₃合成作用. 结果提示丙泊酚舒张血管平滑肌作用与抑制IP₃介导的细胞内钙释放密切相关.     

钩藤碱对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

用膜片钳单通道记录法研究钩藤碱(Rhy)对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(K_Ca)的影响.结果：Rhy 30, 45和60 μmol·L^-1缩短通道的开放时间, 但浓度依赖性增加K_Ca开放概率,Rhy 15, 30, 45和60 μmol·L^-1使开放概率由加药前的0.085±0.005分别增加到0.176±0.011, 0.315±0.009, 0.485±0.016和0.761±0.012(x±s, 均P<0.01).说明Rhy有增加肺动脉平滑肌细胞K_Ca开放作用.     

海兰地嗪对正常及肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞延迟整流钾电流作用的比较

The delayed rectifier potassium currents of normal and chronic normobaric hypoxic pulmonary hypertensive rats and the effect of hernandezine on them were observed. The results showed that when cell membrane potential was held at -50 mV and command potential was larger than -50 mV, potential and time-dependent delayed rectifier potassium currents were recorded, and the delayed rectifier potassium current of pulmonary hypertensive rats was smaller than that of normal rats. When command potential was +70 mV, the effect of hernandezine (0.1 mmol·L^-1) on the increased delayed rectifier potassium currents of pulmonary hypertensive rats (31±13%) was smaller than that of normal rats (59±13%).     

坎地沙坦,PD123319及金雀异黄素对大鼠血管平滑肌细胞迁移影响

目的:探讨血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)不同受体亚型(AT1,AT2)在血管平滑肌细胞(VSMC)迁移中的作用。方法:以体外培养VSMC为基础,采用改良Boyden小室,对不同浓度AT1拮抗剂坎地沙坦(CV)、AT2拮抗剂PD123319(PD)和酪氨酸激酶(PTKs)抑制剂金雀异黄素作用下AngII诱导产生的VSMC跨膜迁移细胞数进行评价。分对照组、AngII组、AngII+10-10～10-5mol·L-1CV组、AngⅡ+10-9～10-6mol·L-1PD组、AngⅡ+CV+PD组、AngⅡ+金雀异黄素组。结果:与对照组相比,AngⅡ组跨膜迁移细胞数明显增加,P<0.01。坎地沙坦在10-10～10-5mol·L-1的浓度范围内,呈剂量依赖性抑制由AngⅡ介导的VSMC迁移(r=0.95,P<0.05)。PD123319对此无明显的增强或抑制作用。金雀异黄素组VSMC跨膜迁移细胞数低于AngⅡ组,高于对照组。结论:AngⅡ影响VSMC迁移能力的生物学效应由AT1介导;AT2在VSMC迁移过程中不起作用或者不起主要作用。酪氨酸激酶的激活也参与了AngⅡ诱导的VSMC迁移的信号转导过程。     

粉防己碱对高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

探讨了粉防己碱 (Tet)抑制培养的大鼠主动脉平滑肌细胞 (AVSMC)增殖的作用 ,MTT法分析细胞增殖 ,[3 H]TdR参入法分析细胞DNA合成 .结果显示 :①肾血管性高血压〔RH ,二肾一夹 (2K1C)术后18周〕大鼠AVSMC超微结构呈典型的合成细胞特征 ;②RH大鼠AVSMC具有更活跃的增殖倾向 ,血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和去甲肾上腺素 (NE)刺激下指数增长期细胞数和在NE刺激下的AVSMC生长率均明显增高 ;③Tet(50mg·kg- 1·d- 1,po ,2K1C术后 9周始 ,连续 9周 )治疗组的AVSMC对NE和AngⅡ诱导的细胞增殖反应性和生长率较RH组明显降低 ;④对RH组和伪手术组大鼠的AVSMC ,Tet(0 .1～ 10μmol·L- 1)体外给药可浓度依赖性地抑制NE或AngⅡ诱导的增殖和 [3 H]TdR参入 .研究表明 ,RH大鼠AVSMC对NE和AngⅡ促增殖作用敏感性及反应性增高 ;Tet可降低其对NE和AngⅡ的反应性 ,抑制AVSMC增殖和DNA合成 .     

硝苯地平对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的研究钙拮抗剂硝苯地平对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 ;探讨钙离子拮抗剂对肺血管构型重建的抑制作用。方法分离培养大鼠肺动脉平滑肌细胞 ;用MTT法检测细胞增殖 ;用流式细胞仪分析细胞周期。结果硝苯地平能剂量依赖地抑制血清诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖 ,对照组的增殖指数和S期细胞分数为 36 0 2 %和 15 88% ;硝苯地平 1× 10 -8mol·L-1、1× 10 -7mol·L-1、1× 10 -6mol·L-1组的PI和SPF分别为 31 16 %、2 6 94 %、2 4 95 %和 13 10 %、11 4 7%、9 6 0 %。结论肺动脉平滑肌细胞增殖中有钙离子信号的参与 ;硝苯地平能够抑制血清诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖 ;硝苯地平对肺血管构型重建可能有一定的抑制作用     

原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT实验检测原花青素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性＂梯状＂条带检测细胞凋亡,采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-9、Caspase-3的活性。结果原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞具有明显的抑制作用,且其作用有剂量依赖性。流式细胞仪检测显示原花青素可以显著诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡,DNA电泳显示原花青素作用于人冠状动脉平滑肌细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原花青素作用后人冠状动脉平滑肌细胞Caspase-9、Caspase-3活性明显升高。结论原花青素可能通过线粒体信号通路抑制人冠状动脉平滑肌细胞的生长并诱导其凋亡。     

普洛托品对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　观察普洛托品 (Pro)对正常和内皮素 (ET)诱导的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　采用组织块贴壁法培养兔胸主动脉VSMC ,应用细胞计数、[3 H] TdR参入量、微量MTT比色测定及电镜法 ,观察Pro对VSMC增殖、DNA合成和细胞超微结构的变化。结果　ET对VSMC的增殖和DNA合成有显著的促进作用 ;1、10、10 0μmol·L-1浓度Pro能够逆转ET所致的 [3 H] TdR参入量、MTT比色的吸光度、细胞计数的增多及电镜下细胞超微结构的改变 ,且随着浓度的增加及时间的延长 ,抑制作用愈显著 ;10、10 0 μmol·L-1浓度Pro对未经ET处理的VSMC有抑制其增殖作用 ,但其抑制作用弱于ET处理组。结论　Pro可显著地抑制正常及ET诱导的VSMC增殖 ,并且对ET诱导的VSMC增殖抑制作用更明显 ,提示Pro可作为临床防治动脉粥样硬化的有效药物。     

氟西汀对大鼠肺动脉平滑肌细胞体外增殖的影响

目的观察氟西汀对大鼠肺动脉平滑肌细胞体外增殖的影响并探讨其可能的机制。方法采用肺动脉平滑肌细胞(PASMC)体外培养的方法,观察氟西汀对PASMC增殖及细胞周期的影响。实验细胞分为4组:①正常对照组(Control):培养液含10%胎牛血清的高糖DMEM;②5-HT组:培养液含10%胎牛血清的高糖DMEM,其中加入终浓度为5μg/mL的5-HT的培养液100μL;③Flu组:培养液含10%胎牛血清的高糖DMEM,其中加入终浓度为10μg/mL的Flu的培养液100μL;④5-HT+Flu组:培养液含10%胎牛血清的高糖DMEM,其中加入培养液100μL(其中5-HT终浓度为5μg/mL,Flu终浓度为10μg/mL)。4组细胞均在常规条件下培养,分别于实验第24、48及72小时采用MTT法测定各组细胞的吸光度值(A490),并采用流式细胞周期分析方法测定各组细胞不同时间点细胞周期分布的特点。结果 PASMC离体干预实验结果表明,5-HT+Flu组细胞随着氟西汀浓度增高或时间延长,A490较对照组逐渐降低。细胞周期分析显示,氟西汀作用于PASMC 72 h后,细胞周期分布表现为S期细胞比例下降,G0/G1期细胞比例上升。结论氟西汀可有效拮抗5-HT刺激所致的PASMC增殖,且这一作用可能与氟西汀阻碍PASMC向DNA合成期转化有关。     

大鼠肺动脉平滑肌细胞培养及对不同类型激动剂刺激产生的反应

目的分离和培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCc）,并检测其功能状态。方法显微分离肺内小动脉,并在含胶原酶（1750 U&#183;mL^-1）和木瓜蛋白酶（9．5U&#183;mL^-1）的低钙HBSS溶液中酶解和培养PASMCs,采用动态细胞荧光成像技术检测PASMCs胞浆游离Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]i）的变化。结果在18～24h内可获得PASMCs,并可观察到环匹阿尼酸和5-HT可引起PASMCs[Ca^2＋]i的升高效应。结论大鼠PASMCs一步酶消化法,方法简便实用。所分离的PASMCs细胞形态和功能正常,适用于动态细胞荧光成像技术检测实验及PASMCs信号转导功能的研究。     

几种药物对肺主动脉平滑肌细胞增殖作用影响的比较研究

目的研究钙拮抗剂硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)、ACEI类卡托普利(Cap)、依那普利(Ena)抑制肺主动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的作用,比较两类药物对抑制肺主动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法培养大鼠肺主动脉血管平滑肌细胞并观察钙拮抗剂、ACEI类及药物合用对细胞增殖作用的影响。结果Nif,Dil,Cap,Ena在10-4,10-5,10-6,10-7mol/L浓度下,对15%胎牛血清(FBS)所致的PASMC增殖均有明显抑制,且呈剂量依赖性的关系(P<0.05,与对照组相比);Nif+Cap及Dil+Ena合用,在10-10mol/L药物浓度下,能明显抑制15%FBS所致的PASMC增殖(P<0.05,与对照组相比);Dil与Nif,Cap,Ena相比较,对15%FBS所致的PASMC增殖作用的影响更明显(P<0.01,与对照组相比);结论钙拮抗剂Nif,Dil,ACEI类Cap,Ena能够浓度依赖性地抑制PASMC的增殖且作用显著。与其他药物相比,Dil抑制PASMC增殖的作用非常显著。Nif+Cap,Dil+Ena合用,在较低药物浓度下具有抑制PASMC增殖的协同作用。     

西地那非通过上调电压依赖性钾通道抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨西地那非抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的机制与电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)及环鸟甘酸依赖性蛋白激酶(cGMP-dependent protein kinase,PKG)的关系。方法采用MTT法及细胞免疫荧光法等检测细胞增殖情况;应用膜片钳技术记录低氧刺激PASMCs前后及西地那非或KT-5823干预前后的Kv通道电流,运用Kv1.5抗体透析细胞后的Kv通道电流;应用siRNA干扰技术沉默Kv1.5基因。结果低氧下西地那非组的细胞增殖水平较低氧对照组明显降低;西地那非反转了低氧对细胞K +通道电流,尤其Kv1.5通道电流的降低作用;siRNA组的Kv1.5蛋白表达明显减低,沉默Kv1.5通道基因逆转了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用;PKG抑制剂KT-5823阻断了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用,并且反转了西地那非对低氧下的Kv通道电流的上调作用。 结论 西地那非可通过上调Kv通道亚型主要是Kv1.5通道,抑制低氧刺激的人PASMCs增殖,且可能与PKG有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人脐带动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的: 考察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对体外培养的人脐带动脉平滑肌细胞(HUASMCs)增殖的抑制作用及作用机制,为临床治疗相关的心血管疾病提供参考。方法: 组织块贴壁法原代培养HUASMCs,选传至3代的细胞进行免疫组织化学染色法鉴定;MTT比色法,测定EGCG(109.08 μmol·L^-1)在不同作用时间(3~96 h)和不同作用浓度(1.09~1 090.75 μmol·L^-1)下对HUASMCs增殖的抑制作用;RT-PCR法,测定EGCG(2.18,21.82,218.15 μmol·L^-1)对HUASMCs表达IL-6 mRNA的影响;ELISA法,测定EGCG(2.18,21.82,218.15 μmol·L^-1)对HUASMCs分泌IL-6水平的影响。结果: EGCG在各个检测时间点均可抑制体外培养HUASMCs的增殖(P<0.01),3~48 h抑制作用随作用时间延长而增加,48 h增殖抑制最强,72 h,96 h与48 h增殖抑制作用相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。EGCG各浓度对HUASMCs体外增殖均有抑制作用(P<0.05或P<0.01),EGCG呈剂量依赖性,IC₅₀为413.39 μmol·L^-1。EGCG(21.82,218.15 μmol·L^-1)对HUASMCs表达IL-6 mRNA有抑制作用(P<0.01)。EGCG(2.18,21.82,218.15 μmol·L^-1)可抑制HUASMCs分泌IL-6(P<0.05)。结论: EGCG对HUASMCs的体外增殖有抑制作用。EGCG可抑制HUASMCs IL-6 mRNA的表达和IL-6因子的分泌。