半边旗提取物5F诱发结直肠癌细胞生长抑制及细胞凋亡

目的：检测半边旗（PsL）提取物5F（ent -11α- hydroxy -15- oxo - kaur -16- en -19- oic - acid）对HCT -116结直肠癌（CRC）细胞的抗增殖及促细胞凋亡效果。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞毒性。通过有代表性的细胞凋亡相关蛋白表达及 Annexin V/ PI 染色确定细胞凋亡。采用标准实验方案测量活性氧（ROS）水平。结果5F 以剂量依赖及时间依赖方式抑制 HCT -116细胞增殖。免疫印迹分析表明5F 提高了 HCT -116细胞中的 Bax/ Bcl -2比值。5F 能既够增强顺铂（cisplatin）对 HCT -116细胞生长的抑制效果又能够提高顺铂诱导的 HCT-116细胞凋亡水平。5F 不仅没有提高活性氧水平,反而降低了顺铂诱导的活性氧生成。结论5F 能够诱导结直肠癌细胞凋亡并因此表现出癌症治疗潜力。     

半边旗中二萜类化合物5F对K562细胞MAPK活性、表达的影响

目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 对映贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞MAPK活性、表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,以MBP为底物检测MAPK的活性、用蛋白印迹法测定MAPK的表达。结果　半边旗中二萜类化合物 5F作用于K5 6 2细胞使MAPK活性增强 ,表达增多 ,且有量效关系。结论　推测异常激活和表达的MAPK是化合物 5F抗肿瘤的机制之一     

半边旗抗肿瘤有效成分5F的纯化及其体外增效作用

目的　寻找半边旗中二萜类有效成分之一 5F纯化的新方法 ,研究 5F对常用抗肿瘤药物的体外增效作用。方法　应用结合了AgNO3的普通层析用硅胶来纯化 5F ,应用台盼蓝拒染法测定药物对细胞的抑制率。结果　纯化后所得到的产品中 5F的含量达到 99%以上 ,是迄今为止纯度最高的产品。较低浓度的 5F分别与氟尿嘧啶 (5 Fu)、顺铂 (CD DP)及长春新碱 (VCR)合用可以增强它们对HL 60、K562细胞株的杀伤作用。结论　结合了AgNO3的普通硅胶可有效地分离纯化 5F。 5F可增强上述几种药物对HL 60、K562细胞的杀伤作用 ,可能与几种药物对细胞周期影响不同有关     

半边旗提取物5F对SPCA-1细胞周期及DNA、RNA合成的影响

目的：观察半边旗提取物5F对SPCA-1细胞的抑瘤作用及对细胞周期、DNA、RNA合成的影响.方法：用MTT法观察5F对SPCA-1细胞的抑瘤作用;流式细胞术分析细胞周期变化;[^3H]-TdR和[^3H]-UTR掺入法观察5F对SPC-A-1细胞DNA、RNA合成的影响.结果：5F对SPCA-1细胞有显著抑制生长作用;在一定剂量5F作用下SPCA-1细胞表现为G1期明显减少,而G2和S期相对增多;5F作用 24 h 后细胞[^3H]-TdR和[^3H]-UTR掺入量明显减少.结论：半边旗提取物5F具有体外抗肿瘤活性;干扰肿瘤细胞的周期;对肿瘤细胞DNA、RNA合成有抑制作用.     

半边旗抗肿瘤有效成分对HL-60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞周期的影响(英文)

研究半边旗（Ｐｔｅｒｉｓ ｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａ 　Ｌ, ＰｓＬ）有效成分５Ｆ,６Ｆ,Ａ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶活性和细胞周期的影响．方法：应用ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ作为底物测定酶的活性;细胞周期用流式细胞仪测定;应用噻唑蓝（ＭＩＴ）法测定药物对细胞生长的抑制率．结果：５Ｆ,６Ｆ,Ａ均能够抑制ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅰ,Ⅱ的活性,化合物６Ｆ作用细胞２４ ｈ后,可升高 Ｓ期和 Ｇ２／Ｍ期细胞,同时降低Ｇ０／Ｇ１期细胞,低浓度６Ｆ（５７．８和 １１５．６ｎｍｏｌ·Ｌ－１）与金雀异黄素（Ｇｅｎ）合用可增强它对ＨＬ－６０细胞的杀伤作用, ｑ＞１．１５．结论： ５Ｆ, ６Ｆ和 Ａ明显抑制ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶的活性;６Ｆ阻断细胞于 Ｇ２／Ｍ期,增强Ｇｅｎ对 ＨＬ－６０细胞的杀伤作用。     

半边旗提取物5F体外对猪脑微管蛋白聚合的影响

目的　研究半边旗提取物5F对微管蛋白聚合的影响。方法　在离体条件下,将受试化合物加入到微管蛋白聚合解聚反应体系中,于37℃、350nm下检测反应体系吸光值的变化。结果　5F能抑制反应体系吸光值升高,提示它对微管蛋白聚合具有抑制作用并能抑制其解聚。结论　5F能抑制体外微管蛋白聚合,从而可能是影响细胞的细胞周期及诱导凋亡途径之一。     

半边旗提取物5F对乳腺癌细胞内活性氧水平的影响

目的 观察中草药半边旗提取物5F(Ent-11a-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid,5F)对乳腺癌细胞的抑制作用及其对乳腺癌细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法 不同浓度(0、5、10、20、40μg/m L)的5F分别处理3种不同乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231以及SK-BR-3),用CCK-8法检测5F对不同乳腺癌细胞株增殖的影响;流式细胞仪检测5F处理后的各乳腺癌细胞株的凋亡率;检测不同浓度的5F处理后的乳腺癌细胞内ROS的水平。结果 5F可抑制MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3三种乳腺癌细胞的增殖,其抑制效果与5F的浓度及作用时间呈显著正相关(P<0.05);经5F作用24 h后,MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞及SK-BR-3细胞的凋亡率较阴性对照组明显增加(P<0.05);5F作用于乳腺癌细胞株,ROS相对含量均较未处理组降低,且随5F浓度升高ROS水平降低越明显(P<0.05)。结论 5F可抑制乳腺癌细胞的增殖,其抑制效果与5F浓度和作用时间相关;5F能降低细胞内ROS的生成水平,并呈现剂量依赖性。     

半边旗5种成分体外细胞毒活性比较及构效关系分析

用多种人癌细胞株以MTT试验,体外筛选半边旗抗肿瘤活性成分。结果显示:化合物5F,6F,A及半边旗乙醇提取物PSE对5种人癌细胞均有不同程度的杀伤作用,且呈明显的剂量依赖关系。其中6F的活性最强,其次是A,5F,而化合物4F和B对5种细胞均无细胞毒活性。分析它们的构效关系可以推测,α-β-亚甲基环戊酮结构是其活性部位,结构中羟基数目和位置的不同可以影响化合物的活性强度。     

半边旗中二萜类化合物6F对肝癌细胞SPC-A-1细胞周期及细胞DNA、RNA和蛋白质合成的影响

目的研究半边旗中二萜类有效成分之一６Ｆ对肺癌细胞细胞周期及细胞中ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成的影响。方法采用体外培养的人癌细胞株——肺腺癌上皮细胞ＳＰＣ－Ａ－１作实验对象,以噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定细胞存活率;用细胞光度术（ＦＣＭ）测定６Ｆ对ＳＰＣ－Ａ－１细胞周期的影响［３Ｈ］－ＴｄＲ、［３Ｈ］－ＵＴＲ和［３Ｈ］－Ｌｅｕ参入的方法观察６Ｆ对ＳＰＣ－Ａ－１细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成的影响。结果化合物６Ｆ可强烈抑制ＳＰＣ－Ａ－１细胞的生长,２４ｈ的半数抑制浓度ＩＣ５０为２．３４μｍｏｌ·Ｌ－１;细胞周期分析显示６Ｆ作用细胞２４ｈ后,均能使细胞的Ｇ２／Ｍ期细胞比例升高,同时Ｇ０／Ｇ１期比例下降,并呈一定的剂量效应关系,６Ｆ对［３Ｈ］－ＴｄＲ、［３Ｈ］－ＵＴＰ和［３Ｈ］－Ｌｅｕ参入作用在培养２４ｈ后均有明显抑制作用,且呈剂量依赖关系。结论化合物６Ｆ明显抑制ＳＰＣ－Ａ－１细胞的生长,阻断细胞于Ｇ２／Ｍ期,抑制细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质的合成。     

半边旗中二萜类化合物5F对K562细胞几种癌基因表达的影响

目的　研究半边旗中二萜类化合物 5F(11α 羟基 15 氧 16 烯 ent贝壳杉烷 19酸 )对K5 6 2细胞癌基因Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun表达的影响。方法　 5F作用K5 6 2细胞 2 4h后 ,用蛋白印迹法检测Bcl 2、Bax、c Fos、c Jun的表达。结果　半边旗中二萜类化合物 5F作用于K5 6 2细胞 2 4h后 ,Bcl 2表达减少 ,Bax、c Fos、c Jun表达增多。结论　推测化合物 5F抗肿瘤的机制之一是上调Bax、c Fos、c Jun表达和下调Bcl 2的表达     

半边旗的生药学研究

本文对半边旗的植物来源、药材性状、显微及理化鉴别作了初步研究 ,为开发生药资源提供了鉴别依据。     

半边旗药材提取工艺的研究

目的优选半边旗的提取工艺。方法采用b（3。）正交试验，考察乙醇浓度（A）、提取时间（B）、提取次数（c）和溶剂用量（D）4个影响因素，以5F（11β-hydroxy-15-OXO-ent-kaur-16-en-19-oicacid）含量为评价指标，并采用薄层扫描法进行含量测定。结果半边旗回流提取的最佳工艺为A282C3D3，即加12倍量70％乙醇，回流提取3次，每次2h.结论优选出的工艺稳定可行。     

高效液相色谱法测定半边旗中芹菜素含量

目的建立草药半边旗中芹菜素含量的准确测定方法，并测定不同采收期的半边旗中芹菜素的含量。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相为甲醇一水（梯度洗脱），流速为0，2mL／min，检测波长为283nm，柱温为35℃。结果芹菜素进样量在0．076～0．76μg范围内与峰面积线性关系良好（r^2=0．9986），平均回收率为98．1％（RSD=1．24％）。结论高效液相色谱法操作简便，测定结果可靠，可用于半边旗草药的质量控制。     

半边旗有效成分5F注射液体内外抗肿瘤药理作用研究

目的　观察半边旗有效成分 5F注射液体外体内抗瘤活性、急性毒性作用及其对免疫器官的影响。方法　用MTT法观察 5F注射液对SPCA 1,K5 6 2瘤株的体外抗肿瘤作用 ;采用荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率检测 5F注射液对小鼠移植性肿瘤S180、HepA肝癌的抑制作用 ;通过检测LD50 、胸腺指数、肝脏指数、脾脏指数、白细胞数等指标观察 5F注射液的急性毒性及对其免疫器官的影响。结果　 5F注射液对SP CA 1,K5 6 2瘤株有显著的体外抗肿瘤作用 ;对荷瘤小鼠肝癌HepA、S180在体内也有抗肿瘤活性 ,5F注射液的半数致死量 (LD50 )为 4 14 4mg·kg-1。结论　 5F注射液具有一定的体内体外抗肿瘤活性 ,同时对免疫功能有一定抑制作用。     

半边旗提取物5F联合5-Fu对A/J小鼠诱发性肺癌的影响

目的研究半边旗提取物5F与5-氟尿嘧啶合用对A/J小鼠诱发性肺癌的影响。方法以苯并[a]芘和甲基亚硝胺吡啶基丁酮混合剂灌胃,每周1次,连续8周,诱发小鼠肺癌。从第9周开始,分别腹腔注射5F、5-氟尿嘧啶或(5F+5-氟尿嘧啶),连续给药14周后处死小鼠。观察肺癌数量,计算肿瘤抑制率,检测肝脏系数、肾脏系数,检测血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、尿素氮和血肌酐水平,检测超氧化物歧化酶和丙二醛的含量变化。结果 5F与5-氟尿嘧啶联合用药显著抑制A/J小鼠诱发性肺癌,具有协同效应,且对肝肾功能无明显毒副作用,还可以提高血清超氧化物歧化酶水平。结论 5F与5-氟尿嘧啶合用可协同抑制A/J小鼠诱发性肺癌。