流行性乙型脑炎急性期特异性IgM抗体检查应用于早期诊断的初步探讨

1.实验证明乙脑病人在病后4～8天大多数可查到 IgM 特异性抗体。2.17例双份血清抗体有4倍增长的乙脑患者,急性期单份血清查 IgM 抗体,可以作出诊断的有14例,占82%。3.急性期单份血清查到 IgM 抗体的有22例,其中21例双份血清血抑抗体有2～4倍增长,1例双份血清血抑抗体不增长,但补体结合抗体却有4倍以上增长。4.本文对国产2-ME 和71℃加温法代替进口2-ME 用于乙脑早期诊断的可能性进行了研究和讨论。5.实验观察到病情越重的病人,急性期血抑抗体滴度较低。     

流行性乙型脑炎早期诊断的研究——特异性乙脑IgM抗体的测定

本文重点研究了IgM抗体在乙脑早期诊断中的意义。本实验证明乙脑病人在病第2～6天在血中已能查到IgM抗体,经144例双份血清抗体有4倍增长可以确诊为乙脑的患者,有69例急性期单份血清就可以查出IgM抗体,早期诊断率为47.9％,实验还证明国产2-ME(2-巯基乙醇)和70℃加温法可以代替进口2 ME。     

SPA-ELISA方法检测患者脑脊液中乙型脑炎抗体初步报告

1985年12月,我们同时用SPA-ELISA、HI及IFA三种方法对贵县医院和浦北医院临床诊断为乙脑病例的29份脑脊液标本,其中7个病例同时收集血清标本进行乙脑抗体的检测比较研究。检测的29份脑脊液标本结果,ELISA阳性反应18份,阳性率18/29。IFA阳性反应19份,阳性率19/29,HI阳性反应7份,阳性率7/29;在22份HI检测阴性的脑脊液中用ELISA检测有11份呈阳性反应。二者差异显著(x~2=9.09,P<0.01).IFA与ELISA的符合率为94.73％。结果表明ELISA与IFA法的敏感性近似,但比HI     

广州管圆线虫感染大鼠血清IgG抗体水平动态观察

目的了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgG抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgG抗体滴度的检测，以了解其抗体水平的动态变化。并比较了感染血清经过或不经过2-琉基乙醇处理和给大鼠灌服吡喹酮的情况下，ELISA检测值的变化。蛄果大鼠感染广州管圆线虫后，其血清特异性IgG抗体水平随时间的推移而逐渐升高。用2-ME处理后各时点采集的感染大鼠血清OD值均较不加处理者有不同程度的提高。服药结束后第3d大鼠血清IgG抗体ELISA检测值约为未服药组感染大鼠的2．2倍。结论以2-ME处理的血清及服用吡喹酮能提高阳性检出率。     

应用三种血清学方法诊断流行性乙型脑炎

在1977年我区流行性乙型脑炎(简称乙脑)流行期间,应用红血球凝集抑制试验、补体结合试验和特异性IgM抗体测定三种血清学诊断方法,检测了市传染病医院收住的乙脑患者的血清,并对三种血清学方法的诊断价值加以讨论。材料和方法 1.血清采自石家庄市传染病医院收住的乙脑患者,大部分采得急性期(发病一周内)及恢复期(发病2～4周)双份血清,少部分只采得急性期单份血清,所得血清试验前均保存于低温冻箱。     

上海市部分人群乙型脑炎抗体水平的调查

用超速离心纯化的乙型脑炎病毒抗原,建立了间接ELISA方法检测乙脑IgG抗体。该法敏感性优于常规的血凝抑制试验(HI)和间接免疫荧光法(IFA)方法,特异性为93.3％。用此法调查了上海市666份人群血清中的乙脑抗体。结果<10岁儿童阳性率为50％左右,市区和郊区接近:10～19岁市区和郊区阳性率分别为30.1％和77.8％;20～60岁者市区阳性率为65.9～89.7％,而郊区几乎全部阳性。对不同年龄,市区和郊区抗体水平差别的原因及其与接种乙脑疫苗和乙脑疫情的关系进行了讨论。     

2006年宁夏监测点农村健康人群乙脑免疫水平监测结果分析

目的了解2006年宁夏乙脑监测地区农村健康人群乙脑免疫水平。方法在宁夏2个监测点分别随机抽取6个乡，每乡分为7个年龄组，每个年龄组抽5名调查对象，于2006年5月和11月进行调查并采集血清标本，应用间接法ELISA检测乙脑IgG抗体。结果监测点人群5月份抗体阳性率为16．43％，11月份抗体阳性率为20．71％。不同年龄组人群乙脑抗体阳性率差异有显著性，有免疫史人群的抗体阳性率为13．66％。结论宁夏监测点农村健康人群乙脑抗体阳性率较低，应警惕乙脑流行。要进一步抓好乙脑疫苗免疫接种工作，提高疫苗接种率和接种质量，提高人群免疫水平。     

U-试验在流行性乙型脑炎血清学早期诊断上的初步探讨

当机体受病毒感染后,在血清中最初产生 IgM 抗体,在数周后出现 IgG 抗体。IgM 抗体是含有双硫键(S—S)的19S 的大分子抗体球蛋白,可以被2-巯基乙醇(2-mercapto-ethanol 简称2-ME)裂解成为7S 的小分子球蛋白,即称为2ME 敏感抗体。IgG 抗体则不被2-ME 裂解,称为2ME 不敏感抗体。据资料报道,用半胱氨酸可以代替2-ME,但根据我们试验的结果不够理想。原因可能是,半胱氨酸盐酸盐是用0.4N的NaOH 配制,pH 可达10左右,在某些不受 pH 影响的试验中是可行的,而在流行性乙型脑炎(以下简称乙脑)血抑试验中 pH 条件要求极为严格,血抑最适 pH 为6.4～6.8左     

黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热患者血清标本抗体检测

目的 检测黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)疑似患者血清标本中的汉坦病毒急性期和恢复期抗体水平,为该疾病防控提供科学依据。方法 应用酶联免疫吸附法对采集到的肾综合征出血热疑似患者急性期血清样本进行汉坦病毒IgM抗体检测,对恢复期血清标本进行IgM单抗体、IgG单抗体检测,使用SPSS 19.0软件对各年份间患者急性期血样IgM抗体阳性率进行χ²检验分析,使用EpiData 3.1和Excel2003软件对患者性别、职业、年龄、发病日期及初诊间隔时间数据进行整理分析。结果 共检测肾综合征出血热疑似患者急性期血清351份,恢复期血清208份。急性期血清标本IgM抗体阳性317份,阳性率为90.31%,各年份之间患者急性期IgM抗体阳性率差异无统计学意义(χ²=0.895,P=0.639)。患者恢复期血清IgM单抗体阳性32份(15.39%);血清IgG单抗体阳性28份(13.46%);IgM、IgG抗体双阳性148份(71.15%)。男女患者性别比4...     

哈尔滨地区婴幼儿呼吸道合胞病毒感染的研究——Ⅱ.呼吸道合胞病毒感染快速诊断—间接血凝试验检测特异性IgM抗体

本文应用微量间接血凝试验,配合SPA吸收法和2-ME破坏法检测患急性呼吸道疾病病儿血清中RSV-IgM抗体,结果66份病儿血清中,阳性为21份,阳性率为31.8%。RSV-IgM抗体于病后第二,三天卽可检出,可达到快速诊断目的。     

潞西市健康人群乙型脑炎免疫水平调查及分析

目的了解潞西市农村健康人群的乙型脑炎免疫水平,为制定乙脑防治对策提供科学依据。方法将潞西市设为乙脑监测点,于流行季节前后分别采集健康人群血清标本,采用间接法ELISA检测乙脑IgG抗体,并进行统计分析。结果 2006年流行季节前(5月)采集血清199份,阳性21份,阳性率10.55%,流行季节后(11月)采集血清209份,阳性58份,阳性率27.75%,统计学检验有显著性差异。结论潞西市乙脑免疫水平较低,有发生乙脑流行危险,要通过疫苗接种提高免疫水平。     

龙岗区2003年人群乙脑抗体水平监测结果分析

目的 了解龙岗区健康人群乙脑抗体水平，为有效预防乙脑提供科学依据。方法：采用横断面研究，按整群抽样的方法，于2003年7～9月在龙岗区的2所幼儿园、2所学校及从业人员中采集不同年龄人群血清标本，应用间接法ELISA检测乙脑抗体。结果共采集不同年龄人群血清标本246份，乙脑抗体阳性17人，抗体阳性率为6．9％，其中，〈10岁年龄组的抗体阳性率最高，为22．2％，其他年龄组的抗体阳性率为1．2％．2．5％之间，各年龄组抗体阳性率差异有统计学意义（P〈0．001）；男性抗体阳性率为8．7％，女性抗体阳性率为5．6％，差异没有统计学意义（P〉0．05）。结论龙岗区健康人群乙脑抗体阳性率较低，要警惕乙脑流行。建议提高乙脑疫苗免疫接种率；开展乙脑监测工作；加大防蚊、灭蚊力度。     

海南省一起流行性乙型脑炎暴发的调查分析

目的：为了寻找导致本次流行性乙型脑炎（乙脑）暴发的因素，以防止类似暴发疫情提供科学依据。方法：按疫情暴发调查方法，对病例进行个案调查和疫区处理，并采用ELISA和间接免疫荧光血清学方法检测所采集的患，疫区生猪静脉血以及对患粪便标本进行肠道病毒分离。结果：本次暴发疫情呈高度散发，年龄集中在10岁以下儿童，共有19例病例，2例死亡，病死率为10．53％，临床以轻型与普通型为主，表现为发热，头痛，呕吐等主要症状，实验室检测9份病例血清标本，间接免疫荧光法乙脑IgG抗体均阴性，IgM8例阳性，其中有6例用ELISA法检测乙脑IgM抗体阳性，双阳性符合率达到75％，2例生猪血标本未检出乙脑抗体，粪便培养不出肠道病毒，结论：儿童乙脑疫苗基础免疫空白是导致本次乙脑疫情暴发的主要原因。     

30例实验室确诊乙型脑炎病例的流行病学特征分析

目的了解30例流行性乙型脑炎(乙脑)病毒致脑炎/脑膜炎病例的流行病学和临床特征。方法对河北省脑炎、脑膜炎监测点2007-2011年报告的病例流行病学进行调查,并采集急性期血清和脑脊液,采用传统的ELISA方法检测乙脑IgM抗体。结果 2007-2012年报告的1 812例脑炎脑膜炎病例中,30例病例血清和/或脑脊液标本乙脑IgM抗体检测阳性,男女性别比为2∶1,平均年龄16岁,70.0%的病例集中在15岁以下儿童,发病以夏秋季为主。平均每个病例伴有5种以上的临床症状及体征;平均每个病例住院21 d。结论乙脑主要侵犯低龄儿童,而且会引发较为严重的临床表现。需加强乙脑疫苗接种为主的综合措施防制,以有效控制乙脑的流行。     

乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1基因的重组表达及其与黄病毒属病毒抗原抗体反应研究

目的 阐明重组表达乙脑病毒非结构蛋白1(Non-structural protein 1,NS1)与包括乙脑病毒在内的多种蚊传黄病毒的抗原抗体反应，以及对乙脑病毒感染患者急性期血清标本的抗原抗体反应。方法 本研究使用大肠杆菌原核表达载体（prokaryotic expression vector, pET）系统，重组表达乙脑病毒NS1基因。使用Western Blot实验方法检测重组表达蛋白质与多种，包括乙脑病毒在内的蚊传黄病毒抗体的反应，以及乙脑病毒感染患者急性期血清的抗原抗体反应。结果 乙脑病毒（P3株）NS1基因表达产物以包涵体形式存在，经过变性和复性的表达产物在聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE，简称变性胶）显示为单一条带，分子量约为45 000。进一步的抗原抗体分析结果表明，表达产物与乙脑病毒（蚊虫分离株，脑炎患者分离株）多克隆或者单克隆抗体以及乙脑病毒感染病人急性期血清标本可以获得完全一致的抗原/抗体杂交反应。重组表达产物与蚊传黄病毒，如登革病毒和黄热病毒多克隆抗体之间抗原/抗体杂交反应为阴性，但与西尼罗病毒...     

ELISA在解决登革与乙脑交叉反应实验诊断中的观察

登革热是东南亚地区和我国的一个重要疾病,过去血清学诊断多采用血凝抑制试验(HI)。HI虽敏感,但与乙脑有免疫交叉反应不易判断。本文应用ELISA检测临床疑似登革患者血清,同时与HI法进行比较,对解决这个问题取得满意结果,现报告如下: 材料与方法一、血清来源:1986年9～11月采集广西北海市医院临床疑似登革热患者静脉血,分离出血清保存在-20℃待检。6份登革阳性血清(补体结合抗体>1∶64)和2份阴性对照系收集登革非疫区的人血清。另外还采集乙型肝炎(HEP);风疹(RUV),单纯疱疹(HSV)和巨细胞病毒(CMV)抗体阳性血清;单纯疱疹、巨细胞病毒和风疹抗体阴性血清、乙脑病毒(JEV)抗体阳性血清.     

重组乙脑抗原对乙型脑炎病毒IgG抗体反应活性的研究

目的对克隆表达的乙脑重组抗原反应原性、特异性以及稳定性等进行评价优化,用于乙脑血清Ig G抗体ELISA诊断试剂盒的研制。方法基于乙脑病毒(JEV)SA14-14-2株的抗原蛋白经克隆表达,灭活纯化后作为包被抗原,利用ELISA方法对其最佳包被浓度,稳定性,反应活性以及特异性进行一系列的评价。结果重组抗原在1∶500的稀释条件下,阳性血清/阴性血清值最大为6.647,具有最佳反应原性,因此此稀释度为最佳;在1∶500稀释条件下,能准确地反映出乙脑病人血清IgG的变化。重组抗原37℃保存6 d活性仍保持75%以上,具有较好的稳定性;与市售同类型试剂盒比较,符合率达到95%。重组乙脑抗原与27份人正常血清和31份登革热病毒IgG抗体阳性而乙脑病毒IgG抗体阴性的血清均无交叉反应,表明具有良好的特异性。结论重组乙脑抗原蛋白稳定性好,特异性强,具有良好的血清学检测价值。     

酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙型脑炎病人血清中特异性IgG

本文研究了ELISA在测定乙型脑炎病人血清中抗乙脑IgG的几个条件。比较了五种抗原。发现以高顺生株乳鼠脑悬液高速或超速离心的抗原最好。抗原的活性与附着塑料板的能力似与乙型脑炎表面血凝素有关。用这两种抗原做ELISA及血凝抑制试验,测定了31份乙型脑炎病人双份血清中乙脑特异性IgG。以抗体四倍增长作为判断标准,两种方法的结果绝大多数相符。92份单份血清,两次测定结果,符合率达93％。ELISA与血凝抑制试验所测血清乙脑特异性IgG滴度相仿。但ELISA血清用量小,方法简便。在本试验中发现Dynatech Lab.聚乙烯板略优于上海塑料三厂聚苯乙烯板。     

酶联免疫吸附试验检测乙脑IgM,IgG抗体的研究

本文报导了间接微量酶联免疫吸附试验检测乙脑病毒抗体的实验条件和方法。抗元系用乙脑病毒感染的幼鼠脑,经鱼精蛋白和聚乙二醇处理的半提纯抗元,将抗元包被于国产聚苯乙烯微量塑料板,应用马抗人IgG辣根过氧化物酶结合物和马抗人IgM辣根过氧化物酶结合物检测人血清中乙脑病毒特异性IgM IgG抗体;与HI、CF试验比铰,三种方法结果基本一致,有一定相关性。经阻断试验,取代试验等ELISA结果是特异性的。ELISA和HI试验检测IgG抗体敏感性相近;ELISA检测IgM抗体比2ME—HI试验的敏感性稍高,是一种帮助乙脑早期诊断比较理想方法。ELISA检测病人血清较HI、CF试验快速、简便、节省材料、而且被检血清不需事先处理等优点,有可能代替HI、CF试验供检测乙脑病毒抗体,作为常规诊断之用。     

流行性乙型脑炎患者血清中IL-6、IL-10及sTNFRⅠ的表达

目的 检测流行性乙型脑炎(以下简称乙脑)患者急性期血清中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-10及可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ(sTNFRⅠ)的表达.方法 使用ELISA方法检测13例乙脑确诊住院病例血清中细胞因子IL-6、IL-10及sTNFRⅠ表达水平.结果 乙脑患者急性期血清中IL-6、IL-10及sTNFRⅠ的表达水平均比健康对照者明显升高(P<0.01).结论 IL-6、IL-10及sTNFRⅠ可能在乙脑致病过程中起重要作用.