MDR1基因表达与原发性上皮性卵巢癌原代细胞体外抗药性关系的 …

探讨ＭＤＲ１基因表达与原代细胞体外抗药性的关系，为原发上皮性卵巢癌便理化疗提供合理化疗提供理论依据。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术和ＭＴＴ法体外药敏试验，检测了３７例原发上皮性卵巢癌原代细胞对临床常用抗癌药物的抗药性及其ＭＤＲ１基因表达情况。     

上皮性卵巢癌多药耐经基因的表达及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌多药耐药（ＭＤＲ）基因的表达及其临床意义。方法 利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３３例初治上皮性卵巢癌病人肿瘤组织ＭＤＲ１基因表达情况，同时用ＭＴＴ比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。结果 １０例（３０．３％）卵巢癌病人ＭＤＲ１基因表达阳性。体外试验表明，ＭＤＲ１基因表达阳性卵巢癌细胞对多种抗癌药耐药，ＭＤＲ１基因的表达与卵巢癌细胞分化程度有关，但与病人的年龄、组织     

上皮性卵巢癌多药耐药基因的表达及其临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌多药耐药（ＭＤＲ１）基因的表达及其临床意义。②方法利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３３例初治上皮性卵巢癌病人肿瘤组织ＭＤＲ１基因表达情况，同时用ＭＴＴ比色法检测肿瘤细胞对抗癌药的敏感性。③结果１０例（３０．３％）卵巢癌病人ＭＤＲ１基因表达阳性。体外试验表明，ＭＤＲ１基因表达阳性卵巢癌细胞对多种抗癌药耐药，ＭＤＲ１基因的表达与卵巢癌细胞分化程度有关，但与病人的年龄、组织学类型及分期无关。④结论ＭＤＲ１基因的表达可作为判断卵巢癌病人预后的一个指标     

RT—PCR技术检测原发上皮性卵巢癌MDR1基因表达

目的建立适于临床检测原发上皮性卵巢癌ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达方法。方法应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ技术对３７例原发上皮性卵巢癌、１０例正常卵巢和２０例外周血新鲜标本ＭＤＲ１基因进行了检测。结果原发上皮性卵巢癌标本中ＭＤＲ１基因阳性表达率为３０％,而正常卵巢和外周血标本则无ＭＤＲ１基因表达。结论ＲＴ－ＰＣＲ技术检测原发上皮性卵巢癌ＭＤＲ１基因表达具有灵敏度高、相对定量和结果可靠的优点,适于临床应用。     

乳腺癌多药抗药相关药物的体外敏感性与mdr—1基因表达

探讨乳腺癌多药抗药（ＭＤＲ）相关药物的体外敏感性与ｍｄｒ－１基因表达的关系，为乳腺癌的合理化疗提供理论依据。方法采用体外ＭＴＴ药敏试验及多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了５６例乳腺癌病人的原代乳腺癌细胞对ＭＤＲ相关药物的敏感性，及乳腺癌组织的ｍｄｒ－１基因表达水平。结果体外抗药乳腺癌的ｍｄｒ－１基因阳性表达率均明显升高；Ｉｍａｘ％与ｍｄｒ－１基因表达水平无关；而ＩＣ５０与ｍｄｒ－１基因性的相关性具有统计学意义。结论乳腺癌抗ＭＤＲ相关药物的主要原因是ｍｄｒ－１基因表达     

MDR1、GST-π、p53、bcl-2在上皮性卵巢癌的表达及意义

目的 探讨ＭＤＲ１、ＧＳＴ－π、ｐ５３、ｂｃｌ－２与上皮性卵巢癌临床病理学特性的关系。方法 采用免疫组化ＳＰ法检测８９例不同性质卵巢组织中ＭＤＲ１、ＧＳＴ－π、ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达情况。结果 ①上皮性卵巢癌,交界性肿瘤,良性上皮性肿瘤,正常卵巢组织中四种指标的表达情况：ＭＤＲ１依次为２２／５２（４２．３％）、３／９（３３．３％）、０／２１、０／７、ＧＳＴ－π依次为４３／５２（８２．７％）、５／     

卵巢癌多药耐药基因表达与其体外药敏试验关系的探讨

采用ＲＴ－ＰＣＲ和ＭＴＴ吸收光度法对３５例卵巢癌分别检测组织中的ＭＤＲ１基因表达和常用化疗药物的敏感性，并对其与临床近期疗效关系分析。结果；１．癌组织中ＭＤＲ１阳性表达率为５７．１％，体外药敏细胞毒性和药物浓度呈正相关。均与临床分期和病理类型无关；２．ＭＤＲ１表达阳性的癌组织对化疗药物敏感的平均数量低于ＭＤＲ１表达阴性者，大部分为ＡＤＭ，ＭＭＣ，ＣＴＸ和ＶＣＲ敏感性降低，而ＤＤＰ，ＣＰ，ＭＤＲ１表     

急性白血病多药耐药基因MDR1表达及临床意义

①目的　探讨急性白血病（ Ａ Ｌ）多药耐药基因 Ｍ Ｄ Ｒ１ 的表达及临床意义。②方法　采用半定量逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ）,对７７ 例 Ａ Ｌ病人及 １０ 例正常人 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达进行检测。③结果　７７ 例 Ａ Ｌ病人 Ｍ Ｄ Ｒ１ 阳性率为６４．９％ （５０／７７）,其平均表达水平为 ０．２６±０．１９,与对照组比较,差异无显著性（χ２ ＝ ０．０９４,ｔ＝１．５４８, Ｐ＞ ０．０５）;复发组和临床耐药组表达水平明显高于初治组和完全缓解组（ｔ＝ ２．４９,２．４４, Ｐ＜ ０．０５）。④结论 Ａ Ｌ的临床耐药和复发与 Ｍ Ｄ Ｒ１ 的过度表达有关     

用逆转录—多聚酶链反应检测巢癌及大肠癌患者多药耐药基因的表达

应用逆转录－多聚酶链反应检测卵巢癌１２例，大肠癌１５例，肝癌２例肿瘤多药耐药基因表达。以长春新碱敏感细胞株ＫＢ和耐药株ＫＢｒ分别作阴性及阳性对照，卵巢癌患者ＭＤＲ１表达增高者为５０％，大肠癌增高者７５％。     

耐药基因MDR1和GST—π在宫颈癌组织中的表达

目的 探讨宫颈癌组织ＭＤＲ１和ＧＳＴ－π基因的表达和临床意义。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了２０例宫颈癌组织耐药基因ＭＤＲ１和ＧＳＴ－π。结果 宫颈癌组织ＭＤＲ１、ＧＳＴ－π阳性表达率分别为６５％（１３／２０）、７５％（１５／２０），ＭＤＲ１和ＧＳＴ－π共表达率为５０％（１０／２０），二者均表达阳性２例（１０％）。两种耐药基因表达与肿瘤分化、临床分期均无关。结论 宫颈癌组织中亦存在较高的ＭＤＲ１和ＧＳＴ－π基因表达，而二者在其先天性耐药机制中均占有重要的作用，这对今后治疗具有一定的参考价值。     

肺癌MDR1基因表达与临床病理特征的关系

目的 探讨ＭＤＲ１基因表达与肺癌病理特征的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对原发性肺癌,癌旁组织及淋巴结中ＭＤＲ１基因的表达进行检测分析。结果 肺癌组织及癌旁组织中ＭＤＲ１阳性率分别为５４％和１０％,两者比较差异显著（Ｐ〈０．００１）;转移淋巴结组织ＭＤＲ１阳性率为５３％,而非转移淋巴结组织未见ＭＤＲ１阳性表达;各病理类型中不同分化程度肿瘤的ＭＤＲ１阳性分布不同,高分化腺癌     

MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响

 [目的]探讨MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响。[方法]设计合成两种针对MDR1 mRNA的siRNA双链分子（#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA）,并转染入COLO 320DM和HT-29结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。并分别与5-FU、阿霉素和长春新碱等抗肿瘤药联用,观察结肠癌细胞活力的变化。用阿霉素处理后,观察转染MDR1 siRNA结肠癌细胞的细胞内阿霉素累积浓度的变化。RT-PCR检测细胞MDR1 mRNA的表达,免疫印迹法检测细胞P-gp的表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内阿霉素累积浓度。[结果]#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA均可抑制COLO 320DM结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,其最低有效浓度分别为5nmol/L和25nmol/L。同时MDR1 mRNA和P-gp表达的抑制伴随着抗肿瘤药（5-FU、阿霉素和长春新碱）对COLO 320DM结肠癌细胞毒性的增强和细胞内阿霉素累积浓度的增加。而在对照HT-29结肠癌细胞却观察不到此效应。[结论]MDR1 siRNAs能特异逆转结肠癌细胞的多药耐药性,为MDR1/P-gp依赖的多药耐药性结肠癌的治疗提供了一条新的途径。     

小分子干扰RNA片段逆转KBv200细胞多药耐药的实验研究

目的：研究小分子干扰RNA片段（siRNA）对舌癌多药耐药（MDR）细胞系KBv200细胞的MDR1基因表达及其功能的影响，探讨siRNA作为未来化疗增敏剂的可能性。方法：运用针对MDR1基因序列的siRNA（MDR1-siRNA）在脂质体的介导下转染KBv200细胞；用RT—PCR分析MDR1 mRNA的表达水平；流式细胞术检测P-糖蛋白（P-gP）的表达；荧光分光光度法检测细胞内多柔比星（Dox）的积蓄；MTT法检测KBv200细胞对长春新碱（VCR）和Dox的敏感性变化。结果：MDR1-siRNA作用24和48h能抑制MDR1基因的表达（P〈0．05），其mRNA水平和P-gP水平均明显下降，同时使KBv200细胞对VCR和Dox的敏感性显著增加（P〈0．01），并显著增加细胞内Dox的蓄积（P〈0．01）。结论：MDR1-siRNA能显著抑制KBv200细胞内MDR1基因介导的MDR。     

ATP-TCA药敏试验测定的胃癌耐药性与MDR1 mRNA和P-gp表达的关系

目的评价三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏试验（ATP—TCA）测定的原发性胃癌耐药性与耐药基因以及蛋白表达的关系。方法选择2009—2011年间收治的胃癌患者52例，采用ATP-TCA检测胃癌患者对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶＋阿霉素＋丝裂霉素、奥沙利铂＋20倍5-氟尿嘧啶5种方案的体外药物敏感性，采用逆转录PCR以及荧光定量PCR检测胃癌患者组织中耐药基因MDR1的表达，采用流式细胞仪检测胃癌患者血中P-糖蛋白（P—gp）表达，采用X^2检验分析ATP—TCA检测结果与MDR1和P—gp表达之间的相关性。结果①5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶＋阿霉素＋丝裂霉素、奥沙利铂＋20倍5一氟尿嘧啶5种方案与临床疗效明显相关（P〈0．01），其中奥沙利铂＋20倍5一氟尿嘧啶方案的ATP—TCA检测结果与临床疗效的符合率最高，达84．6％（44／52）。②ATP—TCA检测化疗敏感和耐药患者MDR1mRNA的表达水平分别为（0．673±0．143）和（1．436±0．594），两者比较差异有统计学意义（P=0．008）。⑧用流式细胞仪检测52例胃癌患者P—gP表达量，其中阳性20例，阳性率达38．4％，P—gP的表达与ATP—TCA药敏试验有明显相关（P〈0．01）。结论ATP—TCA检测耐药结果与MDR1mRNA和P—gp表达之间存在明显的相关性，临床检测MDR1mRNA和P—gp表达可有效预测临床化疗敏感性，指导胃癌的个体化治疗。     

MDR1 and MDR3 Genes and Drug Resistance to Cisplatin of Ovarian Cancer Cells

To investigate the relationship between MDR1 and MDR3 gene and drug resistance to cisplatin of ovarian cancer cells. Two siRNAs (MDR1, MDR3) which specifically targeted MDR1 and MDR3 genes were transfered into A2780/DDP cells. Then double staining with Annexin- V-FITC/PI was used to detect cell apoptosis by the flow cytometry (FCM). A2780/DDP cell viability was determined by MTT. MDR1 and MDR3 mRNA were assessed by RT-PCR. Caspase-3 protein was detected by Western blotting. Transfection of MDR1 and MDR3 siRNA into A2780/DDP cells failed to reverse the drug-resistance of A2780/DDP cells to cisplatin (P>0.05). No significant differ- ence in the apoptosis efficiency was observed between the MDR1 and MDR3 siRNA, pSuppressor- Neo vector transfection cells and untreated cells (P>0.05). In the presence of cisplatin of different concentrations, the viability of A2780/DDP cells was not significantly decreased after the transfection. No changes in MDR1 and MDR3 mRNA were found in MDR1 and MDR3 siRNA-transfected A2780/DDP cells. As compared with pSuppressorNeo and untreated groups, no significant difference existed in the expression of MDR1 and MDR3 mRNA (P>0.05). The expression of caspase-3 protein in MDR1 and MDR3 siRNA transfected A2780/DDP cells was not significantly increased. It is con- cluded that multidrug resistance induced by cisplatin in ovarian carcinoma cell lines is not due to overexpression of MDR1 and MDR3 gene. The drug resistance of ovarian carcinoma cells to cisplatin is not mediated by P-glycoprotein.     

双氢青蒿素对白血病多药耐药K562/ADM细胞的逆转作用

目的:探讨双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)在白血病多药耐药中的应用。方法:采用MTT检测DHA联合阿霉素(adriamycin,ADM)对白血病多药耐药细胞(K562/ADM)生长增殖的影响;应用流式细胞技术分析细胞内罗丹明123(Rhodamine 123)浓度,以检测DHA对白血病细胞膜P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)泵功能的影响;免疫组化方法检测DHA对白血病细胞P-gp表达水平的影响。结果:10、20、40μmol/L DHA实验组的细胞耐药逆转倍数分别为1.46、2.16和3.52倍。DHA使用前、后K562/ADM细胞膜P-gp表达水平无明显差异;Rh123蓄积试验中DHA应用后使K562/ADM细胞内Rh123浓度由用前的22.16%升至89.18%,Rh123外排试验中DHA应用后使K562/ADM细胞内Rh123浓度由用前的27.15%升至60.51%。结论:DHA:能有效逆转白血病细胞的MDR机制为通过抑制肿瘤细胞膜上P-gp的药泵功能,增加耐药细胞内化疗药物浓度逆转耐药性,而不是抑制和P-gp表达。