皮肤鳞癌组织中FHIT基因表达及其意义

应用免疫组织化学S-P法检测脆性组氨酸三联体（FHIT）在27例皮肤鳞癌患者（SCC组）癌组织及11例正常人（对照组）皮肤组织中的表达。结果SCC组FHIT蛋白阳性表达率（44．4％）显著低于对照组（90．9％）,P〈0．05。高中分化SCC患者FHIT蛋白阳性表达率（50．0％）显著高于低分化者（38．5％）,P〈0．05;有淋巴结转移者FHIT蛋白阳性表达率（42．1％）显著低于无淋巴转移者（50．0％）,P〈0．05。提示FHIT基因在SCC的发生、发展中起重要作用,其水平可作为SCC发生及转移能力的一项客观指标。     

胃癌组织中FHIT蛋白的表达及意义

应用免疫组织化学SP法检测53例胃癌组织及14例癌旁组织中FHIT的表达.结果 胃癌组织FHIT蛋白阳性表达率(49.1%)显著低于癌旁组织(92.2%)(P＜0.05);53例胃癌组织中,高中分化组(54.8%)与低分化组间(40.9%),淋巴结转移组(44.7%)与无淋巴结转移组间(60.0%),Ⅰ Ⅱ期组(57.9%)与Ⅲ Ⅳ期组间(44.1%)FHIT蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P均＜0.05).认为FHIT基因与胃癌的发生、发展有关,FHIT蛋白可作为判定胃癌发生及转移能力的指标之一.     

FHIT在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因在鼻咽癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测31例鼻咽癌组织、10例鼻咽癌癌旁组织中FHIT的表达情况。结果FHIT蛋白在鼻咽癌组织中的阳性率明显低于癌旁组织。鼻咽癌高、中分化FHIT蛋白阳性率高于低分化者,淋巴结转移者低于无结转移者,Ⅰ＋Ⅱ期者低于Ⅲ＋Ⅳ期者。结论FHIT基因在鼻咽癌发生、发展中起重要作用。     

鼻咽癌组织中FHIT和LMP-1表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体基因（FHTT）和潜伏膜蛋白1（LMP-1）在鼻咽癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化两步法检测63份鼻咽癌组织（鼻咽癌组）和30份正常鼻咽黏膜组织（对照组）FHIT和LMP—1表达,分析其与鼻咽癌临床病理特征的相关性。结果鼻咽癌组FHIT的阳性率显著低于对照组（p〈0．01）,LNP-1阳性率显著高于对照组（P〈0．01）;FHIT和LMP-1阳性率与鼻咽癌病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关（P均〈0．05）;鼻咽癌中FHIT与LMP-1表达呈负相关（r=-0．421,P〈0．05）。结论FHIT低表达、IMP-1高表达可促进鼻咽癌的发生、发展。     

肺癌和癌前病变组织中FHIT、MSH2、p21蛋白表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）、mutS同种组织蛋白2（MSH2）及p21蛋白表达在肺癌发生、发展中的意义。方法应用免疫组化SP法检测89份原发性肺癌组织（原发癌组）、12份淋巴结转移性肺癌组织（转移癌组）、12份肺癌癌前病变组织（癌前变组）及10份正常肺组织（对照组）中FHIT、MSH2及p21蛋白表达情况,分析各指标间相关性及其与肺癌临床病理参数的关系。结果与对照组比较,FHIT、MSH2及p21蛋白在其他三组中表达均下调（P〈0．05）;FHIT、MSH2蛋白表达与肺癌组织学类型、分化程度相关,p21蛋白表达与肺癌分化程度、临床分期及有无淋巴结转移有关（P均〈0．05）;FHIT和MSH2蛋白在原发癌组表达呈显著正相关（P〈0．01）,但均与p21蛋白表达无明显相关。结论FHIT、MSH2及p21蛋白与肺癌发生、发展有关,联合检测三项指标可为临床预测疾病进展提供依据。     

FHIT基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用及机制.方法 采用免疫组化Envision法检测FHIT蛋白在50份NSCLC组织及21份癌旁正常肺组织中的表达,并分析其与NSCLC临床病理特征的关系 .结果 NSCLC组织中FHIT蛋白表达阳性率明显低于正常肺组织(P< 0.05),且其表达与NSCLC组织类型、淋巴结转移、TNM临床分期、5 a生存率有关(P均<0.05).结论 FHIT基因表达下调与NSCLC的发生、浸润、转移及预后有关.     

子宫腺肌病患者在位、异位内膜中FHIT和VEGF表达变化及意义

目的观察子宫腺肌病患者在位、异位内膜组织中异位脆性组氨酸三联体（FHIT）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测30例子宫腺肌病患者在位、异位内膜及30例子宫内膜正常者子宫内膜组织中的FHIT及VEGF。结果子宫腺肌病异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中FHIT阳性表达率分别为40%、63.3%、100%,FHIT在子宫腺肌病在位内膜、异位内膜中的表达低于正常子宫内膜（P均〈0.05）,异位、在位内膜相比P〉0.05。VEGF阳性表达率分别为73.3%、60%、30%,VEGF在子宫腺肌病异位内膜、在位内膜中的表达高于正常子宫内膜（P均〈0.05）,异位、在位内膜相比P〈0.05。结论子宫腺肌病患者在位、异位子宫内膜组织中FHIT低表达,VEGF高表达。二者可能在子宫腺肌病的发生、发展中发挥重要作用。     

宫颈癌患者宫颈组织脆性组氨酸三联体基因表达及意义

目的探讨宫颈癌患者宫颈组织脆性组氨酸三联体（FHIT）基因表达及其临床意义。方法采用实时反转录PCR方法,检测低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、宫颈癌及子宫肌瘤患者宫颈组织中的FHIT基因mRNA表达率,用三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）基因作对照。结果子宫肌瘤、LSIL、HSIL、宫颈癌患者宫颈组织中FHIT基因mRNA表达率分别为100％、80％、40％和18％,组间比较均有统计学差异（P均〈0．01）;患者均有GAPDH基因mRNA表达;宫颈癌细胞株中未检出FHIT基因mRNA表达。结论检测FHIT基因表达可能为早期诊断宫颈癌提供重要参考。     

宫颈癌组织中Fhit、survivin和Bcl-2的表达变化及意义

目的观察脆性组氨酸三联体（Fhit）、生存素（survivin）和Bcl-2在宫颈癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测30例正常宫颈组织、80例宫颈上皮内瘤变（CIN）组织、63例宫颈癌组织中的Fhit、survivin和Bcl-2。结果正常宫颈组织、CIN及宫颈癌组织中的Fhit失表达率分别为0、31.25%和63.49%;survivin的表达阳性率分别为0、46.25%和77.77%;Bcl-2的表达阳性率分别为6.67%、47.50%和82.54%（P均〈0.05）。Fhit表达缺失与病理学分级、临床分期和淋巴结转移无关（P均〉0.05）;survivin、Bcl-2阳性表达与宫颈癌病理学分级、临床分期和淋巴结转移有关（P均〈0.05）。结论宫颈癌组织中Fhit呈失表达、survivin、Bcl-2呈高表达,三者参与了宫颈癌发病,且survivin、Bcl-2与宫颈癌病理学分级、临床分期和淋巴结转移有关。     

肝细胞癌中FHIT、P16和MMP-9的表达和意义

目的研究脆性组氨酸三联体(FHIT)、P16和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肝细胞癌组织中的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化SP法分别检测90例肝细胞癌组织和40例癌旁组织中FHIT、P16和MMP-9蛋白的表达。结合临床病例资料,分析FHIT、P16和MMP-9表达与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴结转移以及门静脉癌栓形成之间的关系。结果 FHIT和P16蛋白在肝细胞癌组织中阳性表达率分别为36.7%(33/90)和38.9%(35/90),均显著低于癌旁组织(P0.05);MMP-9阳性率为75.6%(68/90),显著高于癌旁组织(P0.05)。FHIT的表达与肝细胞癌的分化程度、淋巴结转移情况以及门静脉癌栓是否形成有关(P0.05);P16与肿瘤大小和分化程度有关(P0.05);MMP-9与淋巴结转移情况和门静脉癌栓是否形成有关(P0.05)。结论 FHIT、P16和MMP-9蛋白在肝细胞癌中表达异常,临床检测3种蛋白的表达有可能成为肝细胞癌临床检测新的指标。     

外阴鳞癌组织中HPV检测及FHIT基因杂合性缺失、微卫星不稳定性观察

目的 观察外阴鳞癌( VSCC)组织中HPV感染情况及脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的杂合性缺失(LOH)、微卫星不稳定性(MSI),并探讨其意义.方法 选取VSCC组织24例、外阴尖锐湿疣(VCA)42例、正常外阴组织20例,用PCR法检测上述组织中的HPV6、11、16、18、31、33亚型,用PCR-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)法检测FHIT基因D3S1300位点的LOH和MSI.结果 在正常外阴、VCA、VSCC组织中低危型HPV( HPV6/11)阳性分别为2、38、21例,高危型HPV(HPV16/18/31/33)阳性分别为0、13、10例;VCA、VSCC组织与正常外阴组织比较,P均＜0.05.在正常外阴、VCA、VSCC组织中,FHIT基因D3S1300位点上LOH、MSI阳性分别为0、9、13例,VSCC与VCA、正常外阴组织比较,P均＜0.05.VSCC组织中HR-HPV感染与FHIT基因D3 S1300位点LOH/MSI相关(r =0.438,P＜0.05).结论 VSCC组织中存在较高的低危型、高危型HPV复合感染及FHIT基因LOH和(或)MSI;二者在VSCC的发生发展中发挥重要作用.     

肺癌组织频繁出现FHIT基因转录本的缺失

目的研究肺癌组织中脆性组氨酸三位体（ＦＨＩＴ）基因的改变。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和逆转录聚合酶链反应单链构象多态性（ＲＴＰＣＲＳＳＣＰ）方法分析４７例肺癌组织和其中１６例相应的转移性肺门淋巴结。结果６８％（３２／４７）肺癌原发灶（包括２例肺鳞状细胞原位癌）和９４％（１５／１６）转移性肺门淋巴结出现ＦＨＩＴ转录本缺失,二者统计学差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＦＨＩＴ基因转录本缺失主要发生于编码区。ＲＴＰＣＲＳＳＣＰ分析未发现突变。结论（１）在肺癌组织中ＦＨＩＴ基因转录本缺失是频发事件,且可能为早期事件;（２）ＦＨＩＴ基因突变可能是少见事件;（３）转移性肺门淋巴结ＦＨＩＴ基因转录本缺失频率与肺癌原发灶相比差异有显著性,提示具有ＦＨＩＴ转录本缺失的肺癌细胞具有更明显的恶性表型和恶性行为     

外源性导入抑癌基因FHIT对肝癌细胞Hep3B生长的影响

目的:研究外源性人脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的高表达对人肝癌细胞Hep3B生长的影响.方法:构建一个包含FHIT基因的真核表达载体pcDNA3.1( )/FHIT,体外转染人肝癌细胞Hep3B,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白印迹(Western blot)分别检测目的基因不同水平的表达,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术检测细胞转染前后的细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的变化.结果:转染pcDNA3.1( )/FHIT后Hep3B细胞的FHIT-mRNA,FHIT蛋白表达阳性,转染后对Hep3B细胞的生长有抑制作用,早期细胞凋亡增加,与对照组比较差异有显著性(72.23±0.84 vs 54.36±0.78,53.17±0.52,P<0.05).结论:FHIT基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生G_1期阻滞,在肿瘤基因治疗方面发挥作用.     

原发性胆囊癌组织中脆性组氨酸三联体基因和Ki-67的表达及临床意义

目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因和Ki-67抗原在原发性胆囊癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组织中的表达情况.方法:应用免疫组织化学S-P法,检测51例原发性胆囊癌、15例胆囊腺瘤和12例慢性胆囊炎组织中FHIT和Ki-67的表达情况,并分析其与胆囊癌临床病理因素的关系.结果:胆囊癌组中FHIT阳性率明显低于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组(47.1%vs66.7%,91.7%,P<0.01),而Ki-67阳性率明显高于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组(82.4%vs20.0%,0,P<0.01).FHIT表达缺失不仅与胆囊癌的高分级(18.8%vs56.5%,66.7%,P=0.02)、淋巴结或远处转移(33.3%vs66.7%,P=0.019)明显相关,而且与术后生存时间减少关系密切(31.2%vs77.8%,P=0.041).Ki-67表达与胆囊癌的高分级(58.3%vs87.0%,93.8%,P=0.039)和淋巴结或远处转移(33.3%vs66.7%,P=0.037)明显相关.FHIT与Ki-67表达呈负相关(r=-0.285,P=0.043).结论:FHIT基因是胆囊癌的一个候选抑癌基因.FHIT和Ki-67在胆囊癌的发生和演化中均起着重要作用,联合检测FHIT和Ki-67的表达情况有助于临床评估胆囊癌的生物学行为和判断预后.     

FHIT蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨人脑胶质瘤组织脆性组胺三联体（FHIT）的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学SP法,检测38例人脑胶质瘤组织（观察组;低度恶性13例。高度恶性25例）和8例正常脑组织（对照组）中FHIT蛋白的表达。结果 观察组FHIT蛋白表达率（47．4%）明显低于对照组（100％）,P〈0．01;低度恶性者FHIT蛋白表达率（53．8％）明显高于高度恶化者（44．0％）,P〈0．05。结论 FHIT的异常表达与人脑胶质瘤的发生、发展有关。     

肺腺癌组织中VEGF-D的表达变化及意义

目的观察肺腺癌组织中血管内皮生长因子D（VEGF—D）的表达,探讨其意义。方法分别采用RT-PCR法、免疫组化法检测48例肺腺癌组织中的VEGF—D mRNA和VEGF—D、微淋巴管密度（MLVD）、微血管密度（MVD）。结果VEGF—D mRNA在肺腺癌组织中的表达高于正常肺组织（P〈0．01）,VEGF—D蛋白阳性率肿瘤周边显著高于肿瘤中心（P〈0．01）;其表达与肿瘤分化、MVD无关,与TNM分期、MLVD、淋巴结转移有关（P均〈0．05）。结论肺腺癌组织中VEGF—D高表达,与淋巴管的生成及转移有关。     

TSA对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及FHIT表达的影响

目的观察曲古抑菌素A（TSA）的体外抗人肝癌HepG2细胞作用及机制。方法取人肝癌HepG2细胞培养至对数生长期后随机分为TSA组、对照组、空白组,TSA组加入TSA至终浓度分别为125、250、500、1 000、2 000nmol/L,对照组加入等量二甲基亚砜（DMSO）,空白组只加培养基、无细胞,每组设6个复孔,作用24~72 h后MTT比色法测定HepG2细胞增殖抑制率（IR）,倒置显微镜和电镜观察HepG2细胞形态变化,TUNEL法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测脆性组氨酸三联体（FHIT）基因表达,Western blot检测FHIT蛋白表达。结果与对照组相比,TSA组IR随TSA浓度增加和作用时间延长而增加（P〈0.05）,透射电镜下TSA组HepG2细胞出现凋亡早期改变;与对照组比较,TSA组细胞凋亡率升高,FHIT mRNA及蛋白表达增强（P均〈0.01）。结论 TSA体外能有效抑制肝癌细胞株HepG2生长并促进其凋亡,机制可能为上调FHIT表达。     

外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导人胃癌MKN-28细胞凋亡的影响

目的:探讨外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人胃癌细胞MKN-28,Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;使用不同浓度的长春新碱分别处理各组细胞,MTT法分析细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡:Western blot法检测细胞Bcl-2和Bax的表达.结果:转染FHIT基因后,MKN-28细胞检测到FHIT蛋白的表达;长春新碱处理48 h后,转染FHIT基因组细胞、转染空载体组细胞及未转染组细胞的凋亡率分别是30.967%±2.122%、11.033%±1.724%、10.733%±1.021%,转染FHIT基因组细胞凋亡更明显(F=142.045,P<0.05);转染FHIT基因组细胞经长春新碱处理后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加.结论:外源性FHIT基因表达可以增强长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达有关.