ORP8对结直肠癌DLD-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 观察和分析氧化固醇结合蛋白相关蛋白8(ORP8)蛋白对人结直肠癌DLD-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探究其影响机制.方法 通过在结直肠癌DLD-1细胞中转染ORP8表达质粒或特异性沉默siRNA上调和下调ORP8的表达,采用CCK-8、Transwell实验检测干扰或过表达ORP8对DLD-1细胞增殖...     

探讨Snail调控上皮间质转化在结直肠癌侵袭、转移方面的作用及意义

目的:转录因子Snail能够抑制E-cadherin (E-cad)的表达促进上皮间质转化(Epithelial to mesenchymal transition,EMT),从而促进肿瘤侵袭与转移.本研究通过检测Snail及E-cad在结直肠癌组织、癌旁组织及结肠癌SW480细胞中的表达,探讨Snail调控EMT 在...     

内皮素3基因对结直肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制.方法 实时荧光定量PCR检测EDN3 mRNA在人结直肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB) mRNA在结直肠癌细胞(CaC02、LoVo、HT-29)中的表达情况.将包装过载体pCDH-CMV-MCS-EFl-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞LoVo,MTS、克隆形成法、划痕法、Transwell检测EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变.Western blot检测LoVo中p-ERK1/2和t-ERK 1/2蛋白改变.结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低.表达EDN3基因的重组载体成功感染至LoVo细胞.MTS和克隆实验结果显示,实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P＞0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P＜0.01).Western blot检测结果显示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P＜0.01).结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌LoVo细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关.     

LINC01285促进结直肠癌细胞的增殖和转移

目的 探究长链非编码RNA LINC01285在结直肠癌（CRC）中的表达特点及临床意义,阐明潜在的生物学功能及调控机制。方法 基于Starbase生物数据库检索LINC01285在CRC及癌旁组织中的表达量;收集本单位结直肠癌患者的CRC样本及周围正常样本各70例,分组为肿瘤组与非肿瘤组;利用荧光定量PCR实验（RT-qPCR）验证本中心CRC队列、肿瘤细胞中LINC01285的表达量,并分析其与患者临床病理参数及无瘤生存时间的关系。采用脂质体转染技术构建LINC01285低表达细胞株并分为si-Control（对照组）、si-LINC01285-1（敲低组1）、si-LINC01285-2（敲低组2）3个组,采用CCK-8实验、流式细胞学、Transwell 法及蛋白印迹法检测 LINC01285 对结直肠癌细胞的增殖、凋亡及转移能力的影响及潜在的调控机制。结果Starbasev3.0 公共数据库获取 TCGA-COAD 转录组测序数据发现 LINC01285 在癌组织中的表达量明显高于正常组织（P=0.00016）;RT-qPCR结果显示：与非肿瘤组相比,LINC01285在肿瘤组表达水平显著上调（P=0.0002）,其表达量与肿瘤组织学分化程度（P=0.036）、T分期（P=0.000）、淋巴结转移（P=0.001）、TNM分期（P=0.000）、Duke分期（P=0.009）和无瘤生存时间（P=0.0102）密切相关。相比于正常结直肠粘膜细胞,CRC细胞（尤其在SW620和HT-29）内LINC01285的表达水显著高表达（P<0.001）。相比于 si-Control 组,脂质体转染的细胞（si-LINC01285-1、si-LINC01285-2）内 LINC01285 表达量显著下降（P<0.001）。同时相比于si-Control组,LINC01285敲低CRC细胞组的增殖能力明显降低（P<0.001）、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显升高（P<0.05）。相比于si-Control组,LINC01285敲低组的CRC细胞迁移和侵袭能力显著下降（P<0.001）,且上皮-间质转化相关通路的E-钙粘蛋白表达量显著升高（P<0.001、N-钙粘蛋白显著下调（P<0.001）。结论 LINC01285的表达与CRC的预后高度相关,可调节上皮-间质转化通路影响CRC细胞的增殖、凋亡与转移能力。     

干扰FUT8的表达抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的作用及机制

目的 研究岩藻糖基转移酶8(fucosyltransferase 8,FUT8)对结直肠癌细胞增殖和转移能力的影响,并探讨其发挥作用的分子机制.方法 采用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库分析FUT8在结直肠癌组织中的表达水平;常规培养结直肠癌细胞系SW480,分为si-NC组和si-FUT8组,分别转染NC ...     

健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法从人结肠癌Lovo细胞株中获得结直肠癌干细胞,细胞表面标记物双标法流式检测鉴定结直肠癌干细胞。制备低、中、高剂量的含药血清,设立低、中、高剂量组,正常组及对照组。采用CCK-8法及Transwell实验观察健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果流式细胞术结果显示微球体细胞大量表达CD133、CD44,并较贴壁细胞多。CCK-8法及Transwell实验结果发现低、中、高剂量组细胞较正常组及对照组细胞增殖、迁移及侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组细胞较中、低细胞增殖能力减弱,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组较低剂量组迁移及侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论健脾消癌方可抑制结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的能力,且高剂量组抑制作用明显,可通过降低癌细胞增长能力,减少癌细胞扩散抑制结肠癌的发展。     

ZNF750在结直肠癌细胞增殖中的作用和分子机制研究

目的 探讨锌指蛋白750(ZNF750)在结直肠癌细胞增殖中的作用和分子机制。方法 用干扰siRNA转染结直肠癌细胞株SW620和LoVo,沉默ZNF750的表达;运用MTT实验和平板克隆实验检测ZNF750沉默成功的实验组细胞和对照组细胞增殖能力的差别;运用荧光定量PCR检测实验组细胞株中Kruppel样因子4(KLF4)的表达水平与对照组的差异。结果 MTT实验和平板克隆实验显示ZNF750沉默后,结直肠癌细胞的增殖能力较对照组明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光定量PCR显示结直肠癌细胞株ZNF750沉默后,KLF4的表达水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ZNF750抑制结直肠癌细胞的增殖,可能通过调控KLF4的表达参与结直肠癌的发生发展。     

Lnczc3h7a对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的 分析Lnczc3h7a在结直肠癌细胞中的表达及其对结肠癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨其潜在的作用机制.方法 选择6种结直肠癌细胞株SW620、SW480、HCT116、DLD-1、Caco-2、HT-29与正常结直肠上皮细胞株FHC,采用RT-PCR法检测Lnczc3h7a在结直肠癌细胞株及正常结直肠上皮细胞株中...     

miR-212-3p抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探索miR-212-3p在膀胱癌增殖、迁移和侵袭中的作用及其调控机制.方法:采用实时荧光定量PCR检测miR-212-3p在膀胱癌组织和细胞中的表达;将miR-212-3p mimic和miR-212-3p mimic NC转染到膀胱癌细胞中,通过平板克隆实验和CCK8实验证明其对细胞增殖能力的影响,通过划痕实验...     

EG00229对卵巢癌细胞增殖侵袭的作用及机制

目的:初步探讨EG00229对卵巢癌细胞侵袭、增殖的作用及其分子机制。方法:采用铺Matrigel基质胶Transwell实验检测细胞的侵袭能力;采用细胞计数方法检测细胞的增殖能力;采用Western blotting检测下游信号分子的表达变化。结果:EG00229显著抑制SKOV3卵巢癌细胞的侵袭、增殖,EG00229发挥作用的机制是通过抑制VEGFR2磷酸化和抑制ERK MAPK信号通路而抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭。结论:EG00229可以作为一个潜在的卵巢癌治疗药物。     

miR-584下调CCN2对结直肠癌SW1116细胞增殖、侵袭的影响及机制研究

目的 探讨miR-584下调CCN2对结直肠癌SW1116细胞增殖、侵袭的影响及机制.方法 2020年1—4月于辽宁省肿瘤医院中心实验室进行实验,设立SW1116直肠癌细胞组、miR-NC组(空白载体)、miR-584 mimics组(过表达)、miR-584抑制剂组(低表达);各组细胞每孔设6个平行样,培养72 h....     

CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制

目的：检测胶原三股螺旋重叠蛋白（CTHRC1）在结直肠癌组织及细胞中的表达,探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达;将靶向作用于CTHRC1的shRNA和NC转染进LOVO细胞;CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比,20例癌组织中的CTHRC1 mRNA的平均表达量为0.0411±0.054,显著高于正常黏膜组织P=0.016,蛋白水平的结果与之一致;同时,CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达（mRNA水平和蛋白水平）均显著高于HT29细胞株;较之对照组,CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力,差异均具有统计学意义P<0.05。当CTHRC1在mRNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时,总ERK1/2在保持基本不变的的前提下,P-ERK1/2明显降低,EMT出现逆转（即MET,E-cadherin升高,N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低）。结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。     

Hsa_circ_0005019在结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移中的作用及其预后预测价值

目的:评估环状RNA hsa_circ_0005019在结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移中的作用及对结直肠癌预后的影响.方法:人结肠癌细胞HCT116分为2组,分别转染hsa_circ_0005019 siRNA(siRNA组)和对照siRNA(阴性对照组).采用CCK-8法和Transwell小室分别检测2组细胞增殖、侵...     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398体外抑制结肠癌细胞增殖和侵袭

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对结肠癌细胞增殖、侵袭的影响,探讨COX一2作为结肠癌治疗靶标的可行性.方法:用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞CW-2、COLO-320中COX-2基因及蛋白的表达.MTT法观察NS-398对COLO-320细胞增殖的抑制作用;体外细胞侵袭试验检测NS-398对细胞侵袭能力的影响;Western印迹检测NS-398对基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.结果:结肠癌细胞株CW-2、COLO-320中COX-2均有阳性表达.NS-398能抑制结肠癌细胞株COLO-320的生长,抑制作用具有时间、浓度依赖性.细胞侵袭试验表明,NS-398体外能抑制结肠癌细胞株COLO-320的侵袭.Western印迹结果表明NS-398可以抑制COLO-320中MMP-2的表达.结论:COX-2抑制剂NS-398体外可显著抑制结肠癌细胞的生长、侵袭,COX-2可作为结肠癌治疗的靶点.     

血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力影响机制研究

目的 探讨血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响机制.方法 分别用MTT法、流式细胞仪、细胞划痕实验、Transwell小室检测血根碱作用后的宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力.Western blot检测经血根碱作用后宫颈癌细胞中E-Cadherin、PTEN、β-catenin、MMP2的蛋白表达水平.结果 0.6、0.8μmol/L血根碱对宫颈癌细胞增殖具有抑制作用.0.8 μmol/L血根碱作用48 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha凋亡率高达(45.68±2.26)％和(31.89±3.80)％.0.8μmol/L血根碱作用3 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha黏附率仅有(67.45士2.13)％和(73.59±2.61)％.0.8μmol/L血根碱作用16 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha侵袭数目仅有(39.64±1.98)个和(43.87±2.83)个.经血根碱作用后的宫颈癌细胞中E-Cadherin和PTEN的表达量增加,β-catenin和MMP2的表达量减弱.结论 血根碱对宫颈癌细胞具有抑制增殖及促凋亡作用,其机制可能与黏附蛋白E-Cadherin、β-eatenin和PTEN、MMP2有关.     

SOX15基因对Caco2结肠癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响

目的 检测SOX15在结肠癌细胞株中表达水平以及对细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的影响.方法 应用RT-PCR检测SOX15在Cac02、SW480、HT29、HCT116结肠癌细胞以及正常结肠组织中的表达水平.通过脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒pEGFP-N1-SOX15及空质粒pEGFP-N1转染进Caco2细胞,应用RT-PCR及Western blot分别检测SOX15在Caco2细胞中的mRNA以及蛋白表达水平;CCK-8检测SOX15对Caco2细胞活力的影响,克隆形成实验观察细胞增殖变化,Transwell检测SOX15对细胞迁移及侵袭能力的调控,流式细胞仪分析细胞凋亡率.结果 SOX15在Caco2、SW480、HT29、HCT116结肠癌细胞中mRNA及蛋白质表达明显低于其在正常组织中的表达水平(P ＜0.01).pEGFP-N1-SOX15转染组细胞mRNA(1.23 ±0.10)和蛋白(1.13±0.08)表达显著高于pEGFP-N1对照组[(0.54±0.06)、(0.19±0.03),P＜0.01]及空白对照组[(0.51±0.03)、(0.14±0.02),P＜0.01];与空白对照组及pEGFP-N1对照组相比,pEGFP-N1-SOX15转染组可明显抑制细胞增殖及迁移侵袭能力(P＜0.01),并诱导细胞发生凋亡(P＜0.01).结论 SOX15在结肠癌细胞中低表达,过表达SOX15可明显抑制结肠癌细胞Caco2的增殖及迁移、侵袭能力,并促进细胞凋亡.     

敲减TLR2基因对结直肠癌细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：应用慢病毒RNA干扰技术敲减结直肠癌细胞中Toll样受体2（TLR2）基因,探讨其对结直肠癌细胞增殖的作用,并阐明其作用机制。方法：将处于对数生长期的结直肠癌HCT116细胞和HT29细胞分为未感染对照组、阴性对照组及基因敲减组（TLR2-RNAi组）,分别给予无慢病毒感染、慢病毒RNAi及慢病毒TLR2-RNAi稳定转染。感染后采用蛋白印迹法检测各组细胞中TLR2蛋白表达水平,采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞增殖活性及不同细胞周期细胞百分率,蛋白印迹法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶（PI3K/Akt）和核因子κB（NF-κB）细胞信号通路相关蛋白及细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin D3蛋白表达水平。结果：与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞中TLR2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞增殖活性明显降低（P<0.05）,S期和G₂期细胞百分率明显降低（P<0.05）,G₁期细胞百分率明显升高（P<0.05）。与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞中PI3K、p-Akt、p-NF-κβ、cyclin D1和cyclin D3蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。结论：敲减TLR2基因可以通过调控PI3K/Akt和NF-κB细胞信号通路及细胞周期相关蛋白cyclin D1和cyclin D3的表达而抑制结直肠癌细胞的增殖。     

光甘草定对结直肠癌细胞RKO增殖和凋亡的影响

目的 研究光甘草定(Gla)对人结直肠癌细胞株RKO增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 选取RKO细胞为研究对象,采用MTT比色法测定Gla对RKO细胞增殖的影响,通过Hoechst 33258染色检测RKO细胞凋亡情况;Western blot法检测RKO细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)、半胱天冬氨酸蛋白酶-9前体(Procaspase-9)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果 Gla抑制RKO细胞的增殖,并呈浓度与时间依赖性(P<0.05);Gla能调节MAPK信号通路JNK1/2,p38磷酸化的水平;Gla可诱导RKO细胞凋亡,下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Procaspase-9的表达水平(P<0.05),上调Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),而Caspase-8蛋白水平在各组变化均不明显.结论 Gla能抑制结直肠癌RKO细胞的增殖,并通过下调Bcl-2/Bax的比值诱导凋亡,其可能与MAPK信号通路的激活有关.