MORC4在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨染色质重塑蛋白家族CW型锌指结构蛋白4(MORC4)在结直肠癌（CRC）中的表达及其对CRC细胞生物学行为的影响。方法 收集2018年1月至2019年2月台州市第一人民医院经手术切除的CRC组织及癌旁组织,选择CRC细胞系（HCT-15、SW480、SW620、DLD-1、HCT116）和人结肠上皮细胞株（NCM460）。采用q RT-PCR方法检测80例CRC组织及其相应的癌旁组织中MORC4 mRNA的表达。采用免疫组化法检测150例CRC组织及60例癌旁组织中MORC4蛋白表达情况,分析MORC4蛋白高表达与患者临床病理特征的关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析MORC4蛋白表达与CRC患者预后关系。选择MORC4 mRNA表达水平较高的DLD-1细胞为研究对象,构建MORC4敲低细胞DLD-1（敲低组）及空白对照组、阴性对照组,采用细胞增殖/凋亡检测（CCK-8）法、划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测CRC细胞的增殖、迁移及侵袭情况。结果 相比癌旁组织,CRC组织中MORC4 mRNA表达水平及MORC蛋白表达率均显著升高（均P<0.05）。...     

沉默p53凋亡刺激蛋白抑制因子抑制结直肠癌细胞的增殖

目的探索p53凋亡刺激蛋白抑制因子(iASPP)在结直肠癌组织/细胞中的表达及iASPP沉默后对结直肠癌细胞增殖的影响。方法该研究首先检测临床样本结直肠癌组织和癌旁正常组织中iASPP mRNA的表达差异、结直肠癌细胞系和正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC)mRNA和蛋白质iASPP表达差异;然后在人结肠癌细胞SW480中转染iASPPsiRNA,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测iASPP mRNA表达效率,用免疫印迹试验(Western blot)检测iASPP的蛋白表达水平;最后用MTT法和Brd U法检测沉默iASPP对SW480细胞增殖的影响。结果结直肠癌组织中,iASPP mRNA表达相比癌旁正常组织上调;结直肠癌细胞LoVo、SW620和SW480中iASPP mRNA和蛋白质表达相比正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC)均上调;在SW480细胞中转染iASPP-siRNA可下调iASPP的表达;沉默iASPP可抑制结直肠癌细胞的增殖。结论沉默iASPP基因抑制结直肠癌细胞的增殖。     

敲低Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨敲低机械敏感性离子通道Piezo2对人结肠癌细胞HCT116和SW620增殖、迁移侵袭能力的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测结直肠癌组织及其相应癌旁组织中Piezo2的mRNA和蛋白表达情况;Western blot检测Piezo2在正常结肠上皮细胞NCM460、结肠癌细胞SW480和HCT116、结肠癌淋巴结转移细胞SW620的表达;将HCT116、SW620细胞系稳定转染Piezo2敲低慢病毒载体,利用RT-qPCR和Western blot检测转染后HCT116和SW620细胞的Piezo2表达情况;CCK-8法检测转染后HCT116和SW620细胞的增殖能力;Transwell法和细胞划痕修复实验检测转染后HCT116和SW620细胞的侵袭和迁移能力;通过裸鼠皮下成瘤检测HCT116和SW620细胞敲低Piezo2后肿瘤大小变化,通过免疫组化检测ki67表达。结果 RT-qPCR及Western blot实验显示,癌组织Piezo2的mRNA和蛋白表达均高于癌旁组织（P均<0.05）;Wes...     

NK细胞联合西妥昔单抗对大肠癌细胞ADCC作用的研究

目的比较3株肠癌细胞株(LOVO、SW480、SW620)与自然杀伤(natural killer,NK)细胞、西妥昔单抗(Cetuximab)混合作用之后,NK细胞抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody dependent cell cytotoxicity,ADCC),探讨Cetuximab抗肿瘤过程中ADCC的作用。方法免疫组织化学方法检测3种不同肠癌细胞系(LOVO、SW480、SW620)的EGFR表达水平;MTT法检测6种不同浓度Cetuximab作用48h后肿瘤细胞的生长抑制情况;NK细胞与Cetuximab包被的肿瘤细胞共孵育,LDH法检测NK细胞的ADCC功能变化。结果免疫组织化学结果显示,3株细胞EGFR表达:LOVO(),SW480(+),SW620(-);Cetuximab对LOVO细胞和SW480细胞的生长抑制呈剂量依赖,对SW620细胞无抑制作用;LOVO细胞和SW480细胞经Cetuximab处理后,NK细胞的ADCC作用均增强且有统计学意义(P<0.05)。结论单独的Cetuximab可抑制EGFR阳性的LOVO细胞和SW480细胞,而对EGFR阴性的SW620细胞生长抑制作用不明显,所选的2株EGFR阳性肿瘤细胞都可被Cetuximab所介导ADCC作用所抑制,高EGFR表达的肿瘤细胞更加敏感。     

ZNF667-AS1在结直肠癌组织中的表达及其对细胞增殖的影响

目的探讨ZNF667-AS1在结直肠癌（CRC）组织中的表达及其对细胞增殖的影响。方法以2017年3月至2019年3月上海交通大学医学院附属新华医院手术切除的24例CRC组织及癌旁（距离癌组织5cm处）正常组织cDNA及CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）、结直肠上皮细胞系（NCM460）为实验对象,采用RT-qPCR法检测ZNF667-AS1mRNA表达;构建ZNF667-AS1过表达细胞模型,采用RT-qPCR检测ZNF667-AS1mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力。结果与癌旁正常组织比较,CRC组织中ZNF667-AS1mRNA相对表达量明显降低（P＜0.05）。与结直肠上皮细胞系NCM460比较,CRC细胞系（HCT116、SW480、Lovo）ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显降低（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞中,过表达组ZNF667-AS1mRNA相对表达量均明显高于空载组（均P＜0.05）。HCT116、SW480细胞的过表达效率均明显高于空载组（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组与对照组第24h时450nm波长处的吸光度值（OD450）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,第48、72、96h时OD450明显降低（均P＜0.05）。ZNF667-AS1过表达组所形成的克隆数明显少于对照组（P＜0.05）。结论ZNF667-AS1在CRC组织中呈低表达,过表达ZNF667-AS1可抑制CRC细胞增殖及克隆形成能力。     

NKD1调控Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠肿瘤细胞周期的机制研究

目的 探讨NKD1调控Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠肿瘤细胞周期的作用机制。方法 利用免疫组化和RT-PCR方法，检测NKD1在结直肠肿瘤癌组织和癌旁组织中的表达。选择人结直肠癌细胞SW620和HT29,分别转染NKD1干扰(NKD1 siRNA)慢病毒载体，RT-PCR和Western blot检测转染效果；定量蛋白质组学联合生信分析筛选NKD1富集的生物学功能及信号通路；CCK8、平板克隆实验检测NKD1对细胞增殖能力的影响；RT-PCR和Western blot检测NKD1对细胞周期标志物表达的影响；Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路核心分子的蛋白表达。结果 NKD1在结直肠癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.05);下调NKD1导致SW620和HT29细胞中NKD1 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);定量蛋白质组学联合生信分析显示，下调NKD1差异蛋白主要富集细胞增殖和细胞周期生物过程，且显著富集细胞周期信号通路；相比对照组(Control组和NC组),siNKD1组SW620和HT29细胞增殖能力明显下降(P&l...     

磷脂酸磷酸酶2域1A在不同结直肠癌细胞中的表达

目的探讨磷脂酸磷酸酶2域1A(PPAPDC1A)在人结直肠癌细胞中的表达及意义。方法取结直肠癌细胞系高转移潜能细胞LOVO、SW620和低转移潜能细胞SW480、RKO、HCT116、DLD-1进行常规培养,待细胞生长至对数生长期时,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测不同结直肠癌细胞中PPAPDC1A mRNA表达,Western blot检测不同结直肠癌细胞中PPAPDC1A蛋白表达。结果 6种人结直肠癌细胞中PPAPDC1A mRNA和蛋白表达比较差异均有统计学意义(F=41.213、344.116,P<0.05)。高转移潜能细胞LOVO、SW620中PPAPDC1A mRNA和蛋白表达显著高于DLD-1、HCT116、RKO、SW480细胞(P<0.05);高转移潜能细胞LOVO中PPAPDC1A蛋白表达显著高于SW620细胞(P<0.05);DLD-1细胞中PPAPDC1A蛋白表达显著高于HCT116、RKO、SW480细胞(P<0.05);低转移潜能细胞HCT116中PPAPDC1A蛋白表达显著高于RKO、SW480细胞(P<0.05);RKO细胞中PPAPDC1A蛋白表达显著高于SW480细胞(P<0.05)。高转移潜能细胞LOVO与SW620细胞中PPAPDC1A mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05);SW480、RKO、HCT116、DLD-1细胞中PPAPDC1A mRNA表达两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PPAPDC1A在结直肠癌细胞系中存在差异性表达,其可能与结直肠癌的侵袭和转移有关。     

外泌体源性LncRNA ESCCAL-1/miR-874/ITGBL1对结直肠癌细胞增殖凋亡的影响

目的 本研究旨在探究外泌体源性长非编码RNA(LncRNA)ESCCAL-1调控miR-874/整合素β样因子1(ITGBL1)轴在结直肠癌(CRC)进展中的作用机制。方法 运用基因表达综合数据库(GEO)数据库对CRC中的差异表达基因进行分析。应用qRT-PCR检测LncRNA ESCCAL-1、miR-874和ITGBL1在CRC组织和细胞系(SW480、SW620、HCT116和HT29)及癌旁正常组织和NCM460细胞系中的表达；3(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、克隆形成和流式细胞术分别检测细胞增殖、集落形成和凋亡情况；双荧光素酶报告实验分别验证miR-874与ESCCAL-1、ITGBL1间的互作用关系；荧光原位杂交测定LncRNAESCCAL-1的亚细胞定位。使用Exosome提取试剂盒分离血清中的外泌体。结果 ESCCAL-1和ITGBL1在CRC组织和细胞系中的表达高于癌旁正常组织和NCM460细胞系，miR-874则相反(P<0.05)。敲减ESCCAL-1能够抑制CRC细胞增殖和集落形成，促进细胞凋亡。miR-874和ESCCA...     

ETV4在结肠癌中的表达及其对结肠癌侵袭能力的影响

目的 分析E26转录因子变异体4(ETV4)的表达与结肠癌临床病理参数间的关系,并探讨其对结肠癌细胞侵袭能力的作用及分子机制.方法 通过GEPIA和R2在线生物信息学分析并挖掘结肠癌中高表达基因.免疫组化法检测结肠癌组织及配对癌旁组织中ETV4蛋白表达情况,并分析ETV4表达与结肠癌病理参数之间的关系.RT-qPCR检测结肠癌细胞系和永生化正常人结肠上皮细胞中ETV4的mRNA表达情况.在LOVO细胞中沉默或过表达ETV4后,用Transwell法观察细胞侵袭能力的改变.用生物信息学分析预测ETV4的下游基因,并通过Western blot进行验证.结果 GEPIA和R2在线生物信息学分析结果显示,ETV4和MMP7在结肠癌癌组织中高表达.免疫组化结果显示,与配对癌旁组织比较,ETV4在癌组织中表达升高,且其表达水平与肿瘤的T、N、M分期正相关.RT-qPCR结果显示,结肠癌细胞系HCT116、LS174T、SW480、LOVO、SW620和RKO中ETV4 mRNA的表达水平明显高于永生化正常人结肠上皮细胞FHC.Transwell实验结果显示,ETV4促进LOVO细胞的侵袭能力.R2在线分析发现ETV4和MMP7呈正相关.Western blot结果显示,在LOVO细胞中ETV4对MMP7具有正向调控作用;同时恢复实验显示,沉默MMP7逆转了ETV4过表达对LOVO细胞侵袭能力的促进作用.结论 ETV4在结肠癌组织及细胞系中表达升高,并通过上调MMP7基因促进结肠癌的侵袭能力.     

PCBP3 过表达对结直肠癌细胞 增殖和迁移的影响

目的 探讨多聚胞嘧啶结合蛋白（PCBP）3 过表达对结直肠癌（CRC）细胞增殖和迁移的影响。 方法 收集 2022 年 5 至 6 月在嘉兴市第一医院行 CRC 切除术患者的 CRC 组织及癌旁正常组织标本各 10 份,比较 CRC 组织与癌旁正常组 织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平。取人 CRC 细胞系 HCT116、HT29,使用含有 PCBP3 CDS 区序列的过表达质粒分别转染 HCT116 和 HT29 细胞（设为 HCT116 过表达组、HT29 过表达组）,未经转染的 HCT116 和 HT29 细胞分别设为 HCT116 对照组、 HT29 对照组,检测 PCBP3 过表达对 CRC 细胞增殖、侵袭能力以及 E-钙黏蛋白（E-cadherin）、裂解的胱天蛋白酶 3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达水平的影响。 结果 CRC 组织中 PCBP3 mRNA 及蛋白表达水平均明显低于癌旁正常组织（均 P＜ 0.05）。与对照组比较,PCBP3 过表达可明显减弱 HCT116 和 HT29 细胞增殖和侵袭能力（均 P＜0.05）,上调 HCT116 和 HT29 细 胞 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平（均 P＜0.05）。 结论 PCBP3 过表达能抑制 CRC 细胞增殖和侵袭,可能通 过上调 E-cadherin、Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平发挥作用。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点,诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据,做出准确诊断,给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂,腹腔内疾病占64．63％,共17种病因;腹腔外疾病占35．37％,共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查,在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。