乳腺浸润性微乳头状癌上皮性钙黏附素的表达及意义

目的 研究细胞黏附分子,在乳腺浸润性微乳头状癌肿瘤细胞的集团性浸润、转移中的表达和作用。方法 复习2002年1月～2003年5月所有手术切除乳腺癌组织切片,按WHO乳腺癌分类分组,浸润性微乳头状癌(IMPC)64例、浸润性导管癌(IDC)57例。采用免疫组织化学标记的链霉素抗生物素蛋白-生物素(LSAB)法检测64例IMPC中E-钙黏附素的表达,并同IDC加以比较。结果 E-钙黏附素主要表达于IMPC细胞膜;IMPCE-钙黏附素表达率(85．9％,55／64)明显高于IDC(43．9％,25／57),并且在微乳头状肿瘤细胞集团内的细胞间连接面表达正常,而在细胞集团面向间质侧的表达明显减弱或不表达;IMPC组的淋巴结转移率(85．9％,55／64)明显高于IDC(52．6％,30／57)．．其淋巴结阳性、E-钙黏附素阳性病例的d-连接素、B-连接素共同表达率(45．1％,26／51)也明显高于IDC(15．4％,2／13)。结论 IMPC的微乳头状肿瘤细胞集团内细胞间黏附性强、而与间质间的黏附性减弱或消失的特性可能是IMPC具有高转移潜能的原因之一。     

选择素及其配体与肿瘤转移关系的研究进展

肿瘤转移是复杂且多步骤的肿瘤细胞与宿主相互作用的连续过程,包括肿瘤细胞侵袭周围组织、从原发灶脱离进入循环系统、逃避免疫监视以及在远隔器官形成与原发瘤同样类型的转移灶。黏附分子与肿瘤的侵袭、转移密切相关,其中选择素（selectin）家族在肿瘤转移中的作用日益受到人们关注。     

L-选择蛋白可能介导小鼠肝癌HCa-F细胞经淋巴道转移的研究

目的观察L-选择蛋白是否介导小鼠肝癌HCa-F细胞与淋巴结黏附，探讨HCa-F细胞特异性向周围淋巴结转移的分子机制。方法应用免疫细胞化学方法验证小鼠肝癌HCa-F细胞为非淋巴细胞来源；用免疫印迹分析、RT-PCR及流式细胞术检测L-选择蛋白在HCa-F细胞的表达；并用L-选择蛋白的抗体抑制HCa-F细胞与冰冻淋巴结切片间的黏附实验(Stamper-Woodruff method)检测L-选择蛋白的功能。结果HCa-F细胞为非淋巴细胞来源的肝癌细胞，在其表面有L-选择蛋白的表达，且HCa-F细胞与淋巴结之间的黏附可被L-选择蛋白的抗体抑制。结论非淋巴细胞来源的HCa-F细胞表面表达功能性L-选择蛋白分子，并可协助其与淋巴结黏附，从而可能介导HCa-F细胞向淋巴道转移。     

膜-细胞骨架连接分子Ezrin与肿瘤转移

Ezrin是ERM(Ezrin/Rad ixin/Moesin)家族的重要成员,是真核细胞膜蛋白-细胞骨架的桥梁分子。参与细胞形态学,细胞黏附、运动、细胞骨架的重塑及信号转导过程。Ezrin在不同肿瘤组织中的表达异常,推测它可能参与肿瘤细胞的侵袭转移,但表达的不一致提示Ezrin在不同肿瘤的进展和转移中发挥着不同的作用。     

P-选择素与血栓性疾病

细胞黏附分子是介导细胞与细胞间,细胞与细胞外基质间相互接触和结合的一类分子,其通过受体-配体相互黏附作用而发挥生物学功能.黏附分子参与细胞的生长与分化、细胞间信号转导、血栓形成、创伤愈合、炎症免疫反应以及肿瘤浸润与转移等机体重要的病理生理过程[1～3].P-选择素是一类重要的细胞黏附分子,属选择素家族成员,主要表达在活化的血小板/内皮细胞表面,介导这些细胞间以及与白细胞的黏附,而有利于炎症部位白细胞招募到血栓部位[2～4],进而促进血栓的形成.本文就P-选择素及其在血栓形成中的作用作一简述.     

Ezrin蛋白与肿瘤转移

众所周知,转移是恶性肿瘤患者死亡的主要原因,如何预防和控制肿瘤转移是提高肿瘤患者生存率的关键,Ezrin作为连接使者,将细胞的膜与细胞骨架连接起来,调节诸如细胞存活、黏附和运动等活动,促进肿瘤的发生与发展。Ezrin的高表达促进肿瘤细胞的转移。本文就Ezrin的作用机制作一综述。     

不同转移能力的肺癌细胞系的形态结构与黏附分子表达的比较

肿瘤多细胞球体(multicellular tumor spheroid MTS)是应用组织培养方法使肿瘤细胞生长形成实体细胞团,被称为“肿瘤的体外模型”。细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)是一类细胞膜受体分子(糖蛋白),它们在细胞生长、免疫反应及肿瘤转移等方面发挥重要的作用[1]。近年来,随着对肿瘤转移过程研究的深入,细胞黏附分子与癌转移的关系逐渐受到关注,本实验拟在将MTS用于黏附分子表达的研究以及CD44V6和CD29与肺癌转移关系方面进行探讨,从而为肺癌侵袭转移的研究及其临床治疗提供依据。1材料与方法1·1材料:人肺腺癌细胞系AGZY和…     

E—钙粘附素—连环素复合体与肿瘤细胞的粘附和转移

Ｅ钙粘附素是一种细胞细胞间粘附分子,与连环素结合形成复合体介导同种细胞间粘附反应,在肿瘤浸润转移中发挥重要作用,许多人类肿瘤中有Ｅ钙粘附素连环素复合体的表达下调。本文就Ｅ钙粘附素和连环素分子的生物学特性及其在肿瘤浸润转移中的作用进行综述。     

骨桥蛋白与肿瘤转移

骨桥蛋白是一种分泌型、黏附性的糖基化磷蛋白,与其主要受体整合素和CD44相互作用,参与多器官、多组织的生理病理过程,具有多种功能,如介导细胞移行、抑制钙化、调节免疫细胞功能、控制肿瘤细胞表型以及抑制凋亡等。近年来的研究揭示,骨桥蛋白在肿瘤细胞的黏附、移行、浸润、血管新生以及肿瘤的微环境中起关键作用。本文对骨桥蛋白在肿瘤中的信号转导、基因表达与调控以及肿瘤转移过程中的作用予以综述。     

骨桥蛋白在不同大肠癌细胞株中的转移相关功能研究

目的：探索骨桥蛋白（OPN）在大肠癌转移中的相关功能。 方法:分别构建OPN反义和正义真核表达质粒后，转染入Colo205和SW480大肠癌细胞株。经鉴定后，进一步运用流式细胞仪、免疫组化、同质和异质黏附等技术检测转染细胞的转移相关功能变化。结果:OPN高表达的大肠癌细胞，CD44表达量增强，E-cadherin的表达减弱；细胞之间同质黏附减弱，细胞侵袭运动能力增强，细胞与ECV304细胞之间的异质黏附作用增强。均证明了OPN与侵袭转移的密切相关性。结论:提示OPN影响大肠癌细胞同质黏附和异质黏附能力的作用可能是大肠癌肝转移发生发展的相关机制之一。     

肺癌组织及淋巴管E-cadherin、β-catenin和LYVE-1的表达

目的观察肺癌组织E-cadherin和β-catenin的表达,LYVE-1特异性标记淋巴管;探讨钙黏蛋白及其受体在癌细胞淋巴道转移中的作用。方法取肺癌手术材料30例,通过免疫组化法,观察E-cadherin、β-catenin和LYVE-1在癌细胞及淋巴管的表达。结果癌细胞对E-cadherin、β-catenin呈阳性表达,低分化组、有淋巴结转移组E-cadherin表达减弱。淋巴管对LYVE-1阳性表达,E-cadherin阴性表达,β-catenin弱阳性表达。结论LYVE-1在淋巴管特异性表达;E-cadherin表达与肿瘤分化程度和有无淋巴结转移呈负相关;E-cadherin/β-catenin复合物对肿瘤细胞与淋巴管内皮细胞的黏附不起主要作用。     

人参皂甙Rh-2对细胞间连接黏附分子在小鼠移植瘤淋巴管表达的影响

目的观察细胞间黏附分子(JAM)在小鼠移植瘤淋巴管内皮细胞的表达及人参皂甙Rh-2的影响,探讨JAM在癌淋巴管转移中的意义。方法于小鼠前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水,成瘤后给予人参皂甙Rh-2灌服,6周后取材。用免疫组化法观察LYVE-1、JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达。结果在对照组肿块的周边部可见LYVE-1阳性表达的淋巴管,JAM-1、JAM-2在淋巴管有阳性表达,用药组表达减少。结论JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达可能与癌淋巴管转移有关。     

肿瘤细胞靶器官特异性捕获和黏附行为的研究进展

肿瘤转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,是引起癌症患者死亡的重要原因。肿瘤转移的发生是一个复杂的动态过程,涉及到血管、淋巴道和转移器官微环境等诸多因素调控。在其血管途径的转移过程中,微血管内肿瘤细胞的靶器官特异性捕获和黏附是肿瘤在特定器官内转移形成的关键性步骤。为更好地了解和认识肿瘤细胞捕获和黏附行为及肿瘤转移形成的机制,本文就微血管内肿瘤细胞捕获和黏附研究中的理论假说、研究方法及其生物力学、内皮细胞和趋化因子等调控因素的研究进展进行了简要的综述,并归纳了该领域内若干可供探索的途径和新方向。     

Role of the integrin-binding protein osteopontin in lymphatic metastasis of breast cancer

Although a primary route of breast cancer metastasis is believed to be via lymphatics, the molecular factors involved are poorly understood. We hypothesized that one such factor may be the integrin-binding protein osteopontin (OPN), and we investigated this clinically and experimentally. In breast cancer patients undergoing sentinel lymph node biopsy, OPN levels were significantly higher in lymph node metastases than in the primary tumor (P < 0.001). To test the functional contribution of OPN to lymphatic metastasis and to determine whether the RGD (Arg-Gly-Asp) integrin-binding sequence of OPN is important for this process, we transfected wild-type OPN or mutant OPN (lacking the RGD sequence) into MDA-MB-468 human breast cancer cells. In vitro, cells overexpressing OPN demonstrated increased anchorage-independent growth in soft agar (P = 0.001) and increased RGD-dependent adhesion (P = 0.045). Following mammary fat pad injection of nude mice, cells overexpressing OPN showed increased lymphovascular invasion, lymph node metastases, and lung micrometastases at earlier time points (P = 0.024). Loss of the RGD region partially abrogated this effect in the lymphatics (P = 0.038). These novel findings indicate that OPN is a key molecular player involved in lymphatic metastasis of breast cancer, potentially by affecting RGD-mediated adhesive interactions and by enhancing the establishment/persistence of tumor cells in the lymphatics.     

大鼠原发性大肠腺癌细胞间黏附分子1的表达及其转移

目的:观察大鼠原发性大肠腺癌组织内细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达,并探讨癌的转移。方法:应用免疫组化法检测大鼠原发性大肠腺癌组织中ICAM-1蛋白。结果:正常大肠组织内未见ICAM-1表达;ICAM-1蛋白主要表达于腺癌细胞和淋巴管内皮细胞内,中晚期腺癌细胞ICAM-1的阳性表达率是47．1％,明显低于早期的83．3％;中晚期腺癌组织内淋巴管内皮ICAM-1的阳性表达率82．4％明显高于早期的41．7％。结论:大肠腺癌细胞和淋巴管内皮细胞ICAM-1表达阳性,随大肠腺癌进展腺癌细胞表达减少,淋巴管内皮阳性表达增多,ICAM-1可能与大肠腺癌淋巴道转移有关。     

Tumor cell adhesion to frozen lymph node sections—anin vitro correlate of lymphatic metastasis

Two variant sublines of the murine 3LL carcinoma with divergent potentials for lymphatic metastasis were used to assess the relationship between tumor cell potential for lymphatic metastasis and its ability to adhere specifically to lymphatic tissue. Using fresh cryostat sections of lymph nodes and spleens, it was found that tumor cell adhesion to the lymphatic tissue but not to control sections of the brain correlated well with their ability to metastasize lymphatically. On the other hand, there was no correlation between tumor cell attachment to isolated lymphocytesin vitro and their potential for lymphatic metastasis. When tumor cells were pretreated enzymatically or with the metabolic inhibitor tunicamycin with the aim of modulating cell surface carbohydrates, adhesion to the lymph node sections could be significantly reduced, implicating cell surface glycoproteins and in particular galactosyl groups in the binding. The results suggest that tumor cell attachment to lymph node cryostat sections could provide a useful tool in the study of host-tumor interactions in lymphatic metastasis.This study was supported by a grant from the Medical Research Council of Canada.     

免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管和不同血管内皮细胞的表达

目的比较免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管、大血管和微血管内皮细胞的表达特点,探讨免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管内皮细胞表达的意义。方法从狗的胸导管、颈总动脉、颈内静脉、肺微血管分离内皮细胞,利用免疫荧光标记法检测PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1和CD44在各种内皮细胞的表达,在荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜下观察,并用图像分析仪分析表达强度。结果动脉、静脉和肺微血管内皮细胞表达PECAM—1、ICAM—1、ICAM-3、VCAM—1和CD44。其中,ICAM-1和ICAM-3的表达较弱。VCAM—1在动脉和肺微血管内皮细胞的表达比静脉强。淋巴管内皮细胞表达PECAM—1、ICAM—1、ICAM-3和CD44,未观察到VCAM—1的表达。ICAM-3和CD44的表达比血管内皮细胞强。结论与动脉、静脉和微血管内皮细胞比较,淋巴管内皮细胞不表达VCAM—1,而ICAM-3和CD44表达较强,这有助于解释淋巴细胞和肿瘤细胞与淋巴管内皮的黏附以及淋巴管新生的机制。     

应用表达芯片筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关基因

目的采用表达芯片比较高、低淋巴道转移力小鼠肝癌腹水型细胞株Hca—F和Hca—P的基因表达谱,以筛选出与肿瘤淋巴道转移相关的基因。方法分别提取Hca—F和Hca—P细胞的总RNA,反转录合成生物素标记的cRNA探针,并与Affy—metrix GeneChip MOE430A（包括22690个转录本,对应于约14500个小鼠已知基因和4371个EST）杂交,检测结果利用生物信息学进行分析。结果Hca—F和Hca—P相比,在14500个已知基因中,有901个（6．2％）表达上调幅度≥2倍;在4371个EST中,有129个（3％）上调幅度≥2倍。公布了差异表达≥8倍的37个基因并根据Gene Ontology（GO）分类和TreeView分析,按照其参与的生物学过程和具有的分子功能进行了功能分类。其中有19个基因参与了组织发生、细胞黏附、信号转导、细胞生长、分化及代谢等的生物学过程,29个基因分别具有转运、移动、蛋白激酶、蛋白结合及受体活性等分子功能,7个基因的生物学功能尚不清楚。结论表达芯片检测与肿瘤淋巴道转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供新方法、新思路,一些过量表达的基因将为肿瘤转移机制的研究提供新线索。     

Identification of the novel platelet activation receptor CLEC-2 and Its pathological and physiological roles

We have identified a novel class of platelet activation receptor, CLEC-2, as a receptor for rhodocytin, a platelet-activating snake venom. CLEC-2 activation leads to tyrosine phosphorylation of the YITL motif in its cytoplasmic tail, the binding of Syk, initiation of downstream tyrosine phosphorylation events, and activation of phodpholipas Cgamma2, which result in platelet aggregation. We also identified podoplanin as an internal ligand for CLEC-2. Podoplanin is expressed on the surface of tumor cells and facilitates tumor metastasis by inducing platelet aggregation. We showed that an antibody that blocked the binding between CLEC-2 and podoplanin inhibited tumor metastasis using an experimental lung metastasis model in mice. Podoplanin is also expressed in lymphatic endothelial cells, but the physiological role of the interaction between CLEC-2 and podoplanin in lymphatic endothelial cells has not been elucidated. We generated CLEC-2-deficient mice, and found that these mice die in the embryonic/neonatal stages, associated with disorganized and blood-filled lymphatic vessels and severe edema. Moreover, through the transplantation of fetal liver cells from CLEC-2 +/+ or CLEC-2-/- embryos, we were able to demonstrate that CLEC-2 is involved in thrombus stabilization in vitro and in vivo, possibly through homophilic interactions without any apparent increase in the bleeding tendency. These findings revealed that CLEC-2 plays a crucial role in not only tumor metastasis, but also in lymphangiogenesis and thrombus stabilization. We propose that CLEC-2 could be an ideal novel target protein for an anti-platelet drug, which inhibits pathological thrombus formation but not physiological hemostasis, as well as a novel target protein for an anti-metastatic drug.