鼻咽癌细胞PI3K/AKT和ERK/MAPK信号通路活性表达及其临床意义的探讨

目的:探讨鼻咽癌细胞中PK3K/AKT和ERK/MAPK信号传导通路异常激活与鼻咽癌细胞发生发展的关系.方法:蛋白质印迹法检测3例鼻咽低分化鳞癌组织及其细胞株(CNE2)和鼻咽炎性组织中IGF-1R、AKT和ERKl/2蛋白的表达情况;相同实验方法检测鼻咽癌细胞株CNE2中磷酸化的PAKT和pERK1/2蛋白的表达和给予胰岛素样生长因子-1(IGF-1)刺激癌细胞后磷酸化的pAKT和pERK的表达水平,再分别用PKB/AKT和ERK/MAPK通路抑制剂对CNE2细胞信号传导通路磷酸化的调节作用进行抑制试验.结果:3例鼻咽低分化鳞癌组织和cNE2细胞株中IGF-1R、AKT和ERK1/2蛋白表达水平明显高于鼻咽炎性组织;IGF-1可刺激CNE2细胞中PAKT和pERK1/2的表达增加,与空白对照组相比,其pAKT和pERK表达量明显增高;给予wortrnannin和PD98059治疗24和48 h后,CNE2细胞株生长明显受到抑制.结论:IGF-lR的过度表达及其PK3K/AKT、ERK/MAPK信号传导通路的异常激活在鼻咽癌的发生、发展过程中可能起着非常重要的作用,IGF-1R系统有可能作为复发或转移性鼻咽癌治疗中一个潜在的靶分子.中华肿瘤防治杂志.2009,16(1):44-47     

ERK信号转导通路与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌严重的危害着女性的生命健康,近年来其发病率呈逐年上升的趋势,在西方国家和我国发达大城市已位居女性恶性肿瘤发病率之首.正常乳腺细胞的增殖、分化、代谢、凋亡受到体内细胞信号转导通路的精细调节,细胞在致癌因素的刺激下逐渐癌变的过程中,可能涉及到调控细胞的信号转导通路异常改变.     

苦参碱和MAPK/ERK信号通路在抑制肺癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞增殖和迁移中的作用

背景与目的 苦参碱是中国传统中药槐根的主要生物碱成分之一,具有抗炎、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化和凋亡等作用.丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(Motigen-activated proteinkinase/extraceUuar regulated protein kinase,MAPK/ERK)级联通路是血管内皮细胞信号转导的重要途径.本研究目的 是探讨苦参碱(Matrine,Mat)和MAPK/ERK信号转导通路在抑制肺腺癌A549细胞条件培养基(A549 human lung cancer cellsconditioned medium,A549CM)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical veins endothelial cens,HUVECs)增殖和迁移中的作用.方法 应用Mat与MAPK/ERK特异性抑制剂PD98059(PD)处理A549CM培养的HUVECs,采用细胞计数、划痕损伤实验和Western Blot技术,观察Mat、PD98059对A549CM诱导的人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及磷酸化ERK(p-ERK)表达的影响.结果 干预后24h,与对照组相比,A549CM显著促进HUVECs增殖、迁移及P-ERK的表达.与A549CM组相比,Mat能明显抑制A549CM诱导的HUVECs增殖和迁移及p-ERK的表达;PD98059可以抑制HUVECs增殖及P-ETK表达,而对迁移没有作用.结论 Mat和PD98059均能有效抑制A549CM诱导的HUVECs增殖和P-ERK(表达,Mat还能抑制A549CM诱导的HUVECs迁移,而PD98059对A549CM诱导的HUVECs迁移没有影响,提示抑制MAPK/ERK(信号传导通路可能是苦参碱抗肺癌血管生成的部分机制.     

迷迭香酸通过MAPK/ERK信号通路对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

摘 要：［目的］ 探讨迷迭香酸通过丝裂原激活的蛋白激酶/胞外信号调节的蛋白激酶（MAPK/ERK）信号通路对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。［方法］ 取对数生长期LS174T细胞,加入迷迭香酸（0、25、50和100μmol/L）处理24、48 和72h后,CCK-8法检测迷迭香酸对细胞增殖活性的影响。以100μmol/L迷迭香酸处理细胞,24、48 和72h后,采用流式细胞仪检测迷迭香酸对细胞周期和细胞凋亡率的影响;采用蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3蛋白的表达及ERK1/2磷酸化水平。［结果］ 迷迭香酸对LS174T细胞呈时间浓度依赖性抑制细胞增殖;100μmol/L迷迭香酸处理LS174T细胞不同时间后,与对照组相比,迷迭香酸组细胞中S期和G2/M期细胞所占比例明显降低,G0/G1期比例显著升高,但组间时间效应不显著（P>0.05）;而Bcl-2蛋白表达、ERK1/2磷酸化水平明显降低,细胞凋亡率、Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达量显著增强,均表现出明显的时效关系（P<0.05）。［结论］ 迷迭香酸能够抑制结肠癌LS174T细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。     

ERK通路在调节子宫内膜癌增殖凋亡侵袭中的作用

背景与目的 探讨胰岛素/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调节子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和侵袭中的作用.方法 将无血清饥饿的子宫内膜癌Ishikawa3-H-12细胞分为空白对照组、1×10<'6>mol/L胰岛素单独刺激组以及不同浓度MEK抑制剂PD98059预处理后再用胰岛素刺激组.Western blot检测各组ERK磷酸化(P-EPK)水平,MTF试验观察细胞增殖、流式细胞仪观察细胞凋亡、transwell小室观察细胞侵袭情况.结果 胰岛素可引起子宫内膜癌细胞ERK活化并以浓度依赖模式被PD98059完全阻断.胰岛素显著促进子宫内膜癌细胞增殖.PD98059可以阻断胰岛素诱导的细胞增殖,在24 h、48 h、72 h三个时间点均有统计学差异(F=204.160;33.850;90.764,均P<0.001).胰岛素显著抑制子宫内膜癌细胞凋亡,并以浓度依赖模式为PD98059所阻断(F=165.99,P<0.001).胰岛素明显增加子宫内膜癌细胞侵袭,PD98059可以部分阻断胰岛素诱导的细胞侵袭(F=23.841,P<0.001).结论 胰岛素可以促进子宫内膜癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,此过程是ERK途径依赖的;胰岛素可以增加子宫内膜癌细胞侵袭能力.此过程是部分ERK途径依赖的.     

哈萨克族食管癌患者组织中细胞外信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号通路的表达

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在哈萨克族食管鳞癌患者组织中的表达变化及意义.方法 采用Western blot技术检测在血清饥饿条件下、U0126梯度浓度处理下,食管癌细胞系EC9706中磷酸化ERK1(p-ERK1)和磷酸化ERK2(p-ERK2)的表达变化.采用实时荧光定量PCR法检测25例哈萨克族食管癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中总ERK1(t-ERK1)和总ERK2(t-ERK2)mRNA的表达变化.采用Western blot技术检测25例哈萨克族食管癌患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及5例哈萨克族非食管癌者正常食管组织中t-ERK1、t-ERK2、p-ERK1和p-ERK2蛋白的表达变化.采用免疫组化染色法,在126例石蜡包埋标本(正常食管黏膜19例,食管原位癌55例,食管浸润癌52例)中验证p-ERK1和p-ERK2蛋白的表达变化.结果 在食管癌EC9706细胞中,ERK/MAPK信号通路呈高度活化状态.血清瞬时刺激10 min后,p-ERK1和p-ERK2的表达达到峰值.EC9706细胞在50 μmol/L的U0126处理下,p-ERK1和p-ERK2的表达几乎完全被抑制.t-ERK1 mRNA在25例哈萨克族食管癌患者肿瘤组织中的表达量为1.92±3.49,明显低于癌旁组织(3.67±7.47,P<0.05);t-ERK2 mRNA在食管癌组织和癌旁组织中的表达量差异无统计学意义(P>0.05).t-ERK1和t-ERK2蛋白在食管癌组织、相应癌旁组织和正常食管黏膜组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);但p-ERK1和p-ERK2蛋白在食管癌组织中的表达量(分别为0.87±0.14和0.79±0.10)均明显低于癌旁组织(分别为1.10±0.13和1.32±0.12,P<0.05)和正常食管黏膜组织(分别为1.50±0.22和1.64±0.18,P<0.05).免疫组化染色验证的结果 显示,p-ERK1和p-ERK2蛋白在浸润性食管癌组织中的阳性表达率均为7.7%(4/52),在癌旁正常食管黏膜组织中的阳性表达率均为31.6%(6/19),在食管原位癌组织中的阳性表达率均为85.5%(47/55),不同组织间的表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 在食管癌细胞中,ERK/MAPK信号通路呈活化状态.ERK/MAPK信号通路活化水平的改变可能参与了哈萨克族食管癌患者肿瘤的早期发生.

Abstract：

Objective To investigate the expression variation and significance of ERK1/2 MAPK signaling transduction pathway in the pathogenesis of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) in Kazakh patients. Methods The expression level of p-ERK1/2 after serum starvation and treatment with U0126 inhibitor was detected in esophageal cancer cell line EC9706 by Western blot assay. The mRNA level of total ERK1/2 (t-ERK1/2) and expression level of t-ERK1/2 and p-ERK1/2 proteins of 25 pairs of ESCC and adjacent normal esophageal mucosal tissues of Kazakh patients were examined and identified by real-time quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blotting, respectively. The expression of p-ERK1/2 protein was verified by immunohistochemistry in 126 paraffin-embeded specimens, including 19 normal esophageal mucosa, 55 esophageal carcinomas in situ and 52 invasive carcinomas. Results ERK1/2 MAPK signaling transduction pathway was in an active status in the EC9706 cells. The expression level of p-ERK1/2 in Ec9706 cells reached a peak at 10 min after transient serum stimulation, and p-ERK1/2 expression was totally restrained after the treatment with 50 μmol/L U0126. In the 25 pairs of ESCC and adjacent normal mucosa, the t-ERK1 mRNA level was 1.92±3.49 in the ESCC tissues and 3.67±7.47 in the adjacent normal mucosa. The t-ERK1 mRNA level in ESCC tissues was significantly lower than that in adjacent normal mucosa (P<0.05), whereas there was no significant difference of t-ERK2 mRNA level between them(P>0.05). The expression levels of p-ERK1 and p-ERK2 proteins were 0.87±0.14 and 0.79±0.10 in the ESCC tissues, and 1.10±0.13 and 1.32±0.12 in the adjacent normal mucosae. p-ERK1/2 protein in the ESCC tissues was significantly lower than that in the adjacent normal tissue (P<0.01). However, there was no significant difference between their t-ERK1/2 protein levels (P>0.05). In the 126 cases of paraffin-embeded specimens, positive expressions of both p-ERK1 and p-ERK2 in esophageal cancer tissues were 7.7% (4/52), significantly lower than those in adjacent normal mucosa (31.6%, 6/19) and carcinoma in situ (85.5%, 47/55, P<0.05). Conclusions ERK1/2 MAPK signaling pathway is in an active status in esophageal cancer and adjacent normal mucosa. Our results imply that the activation of p-ERK1/2 MAPK signaling transduction pathway plays a role in the early pathogenesis of ESCC in Kazakh patients.     

曲古菌素A通过抑制MAPK/ERK通路上调食管癌EC1细胞CAR的表达

摘 要　目的：观察曲古菌素A（trichostatin A,TSA）对人食管癌细胞EC1膜表面柯萨奇病毒-腺病毒受体(Coxsachievirus and adenovirus receptor, CAR)表达水平的影响,探讨MAPK/ERK信号通路在TSA上调CAR表达中的作用。方法：0.3、0.5、1.0 μmol/L的TSA处理EC1细胞48 h,采用免疫荧光、RT-PCR、Western blotting检测CAR的表达。以1.0 μmol/L TSA作用EC1细胞1、6、12、24、48 h,Western blotting检测p-ERK、CAR表达水平的变化,分析CAR表达和p-ERK水平变化的相关性。结果：0.3、0.5、1.0 μmol/L TSA处理EC1细胞后,CAR蛋白和mRNA水平均明显增加（P<0.05),并呈剂量依赖关系。1.0 μmol/L TSA作用EC1细胞6、12、24、48 h后,CAR蛋白表达较对照组均明显增加（P<0.05);p-ERK表达水平均明显下降（P<0.05),两者变化呈显著负相关（r=-0.886,P<0.01)。结论：TSA能够上调人食管癌EC1细胞膜表面CAR的表达水平,其机制可能与其抑制MAPK/ERK通路有关。     

地塞米松对前列腺癌DU145细胞ERK1/2活性和cyclin D1表达的影响

目的: 〖HT5"SS〗 探讨糖皮质激素地塞米松抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145的机制。〖HT5W〗方法: 〖HT5"SS〗通过细胞培养方法观察地塞米松及其受体阻断剂RU486对前列腺癌DU145细胞增殖的作用;采用流式细胞仪测定地塞米松对DU145细胞细胞周期的影响;利用Western blot技术检测DU145细胞受地塞米松作用后cyclin D1表达水平和ERK1/2活性的变化;用RTPCR技术检测DU145细胞中糖皮质激素受体mRNA的表达。〖HT5W〗结果: 〖HT5"SS〗 地塞米松明显抑制DU145细胞的增殖,并且有剂量依赖效应;地塞米松使细胞周期阻滞于G0/G1期。Western blot结果显示,地塞米松作用DU145细胞3 d后,细胞内ERK1/2的活性降低,cyclin D1表达量下降。RU486可以拮抗地塞米松对DU145细胞的作用效果。RTPCR结果显示DU145细胞有糖皮质激素受体mRNA的表达。〖HT5W〗结论: 〖HT5"SS〗地塞米松具有抑制前列腺癌DU145细胞增殖和阻滞细胞周期的作用,此作用与其降低ERK1/2活性、抑制cyclin D1合成有关,提示糖皮质激素对前列腺癌的治疗有重要意义。     

地塞米松快速抑制卵巢癌细胞系ERK1/2活性

背景与目的:细胞外信号调节的激酶1/2(extracellularsignal-regulatedkinase1/2,ERK1/2)的激活在多种细胞增殖的过程中发挥重要作用。作者曾经发现人工合成的糖皮质激素地塞米松(dexamethasone,Dex)可显著抑制人卵巢癌细胞系HO-8910的增殖。本研究试图观察Dex对HO-8910细胞ERK1/2活性的影响,以探讨其抑制该细胞增殖的信号转导通路。方法:以Westernblot方法测定ERK1/2在HO-8910细胞中的活性,细胞计数方法检测细胞增殖的改变。结果:1×10-7mol/LDex作用于HO-8910细胞5min即出现ERK1和ERK2活性的同步降低,最大作用出现在30min,与对照相比,二者分别减少41%和54%(P均<0.001),4h恢复至对照水平。ERK1/2活性降低的程度随Dex浓度(1×10-10～1×10-6mol/L)升高而增大。该作用不能被糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)拮抗剂RU486所阻断。ERK1/2上游激酶MEK1/2的抑制剂PD98059也具有抑制该细胞增殖作用,并能增强Dex对细胞增殖的抑制。结论:Dex能够以不依赖GR的方式快速抑制HO-8910细胞ERK1/2活性,这可能与其抑制细胞增殖过程有关。     

细胞外信号调节激酶1/2在瘦素促进子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖中的作用

背景与目的:流行病学研究提示瘦素与子宫内膜癌的发生有关,但其作用机制尚不清楚.瘦素作为促有丝分裂原,能够显著促进多种细胞的生长增殖.本研究的目的在于探讨细胞外信号调节激酶1/2(extraeellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)在瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖中的作用.方法:免疫荧光染色检测Ishikawa细胞中瘦素受体的表达;于Ishikawa细胞中分别加入不同浓度的瘦素(0、10、50、100、150 ng/ml),作用不同时间(6、12、24h),MIT法检测各组细胞的增殖情况:同时应用ERK1/2激酶特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2磷酸化,观察其对瘦素促进Ishikawa细胞增殖的影响;应用免疫印迹技术检测100 ng/ml瘦素作用于Ishikawa细胞不同时间后(20、40、60 min)ERK1/2的活化水平(以P-ERK1/2与ERK1/2的比值表示).结果:免疫荧光检测结果证实Ishikawa细胞存在瘦素受体的表达:瘦素能明显促进Ishikawa细胞的增殖.在0～100 ng/ml范围内瘦素浓度越高.细胞增殖越显著,100 ng/ml瘦素作用24h其增殖效应最大(A值=0.73±0.02),100 ng/ml组与150 ng/ml组差异无统计学意义(P=0.129);PD98059能明显抑制瘦素对Ishikawa细胞的增殖作用.100 ng/ml瘦素和100μmol/L PD98059作用24h后,细胞增殖率为(6.88±0.86)%;Ishikawa细胞经100 ng/ml瘦素处理后,ERK1/2活化程度明显增高.结论:瘦素可能通过激活ERK1/2信号转导途径促进子宫内膜癌细胞的增殖.     

鼻咽癌细胞凋亡与血管生成的关系

目的：探讨鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＮＰＣ）细胞凋亡及瘤内血管生成与患者预后的关系。方法：采用ＴｄＴ酶介导的生物素化ｄＵＴＰ缺口末端标记技术（ＴＵＮＥＬ）和免疫组化Ｓ＝Ｐ法,分别检测２０例正常鼻咽粘膜及７３例ＮＰＣ组织的细胞凋亡率（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｒａｔｅ,ＡＲ）,瘤内微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）及血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕ     

宫颈癌中细胞增殖和细胞凋亡的关系研究

Objective To study the relationship between cell proliferation and apoptosis in cervical carcinoma and its clinical significance.Methods The cell proliferation and apoptosis of cervical epithelial cells in archival formalin-fixed,paraffin-embedded tissue sections of normal cervix ,cervical intraepithelial neoplasms(CN) and cervical squamous carcinoma were tested by using immunohistochemistry assay and DNA nick end-labeling technigue.The proliferation index(PI) and apoptosis index(AI) were calculated and their correlation with clinical and pathological data was analyzed. Results PI was gradually increased,but the AI and AI/PI ratio decreased from normal cervical epithelium,CIN to cervical carcinoma. There was no significant relationship among cell proliferation,apoptosis,clinical stages and pathological grades.High AI was always asso-ciated with a poor prognosis of the patients. Conclusion Cell proliferation and apoptosis allow to distinguish among normal epithelium,CIN and cervical carcinoma and are useful for the assessment of the malignant potential of tumor tissues.     

PNCK对鼻咽癌细胞增殖和凋亡作用的研究

目的 研究妊娠上调的非泛素性钙调蛋白激酶(Pregnancy-upregulated nonubiquitous calmodulin kinase,PNCK)在鼻咽癌组织中的表达以及对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测鼻咽癌癌组织和正常组织中PNCK表达水平。构建慢病毒载体干扰PNCK基因表达,并采用Real time PCR和免疫印迹结果证实,采用MTT方法、流式细胞术、Caspase3和Caspase7活性检测鼻咽癌肿瘤细胞增殖和凋亡的变化。结果 免疫组织化学结果显示PNCK蛋白在鼻咽癌癌组织中呈特异性高表达。Real time PCR和免疫印迹结果证实慢病毒成功干扰鼻咽癌CNE-2Z细胞中PNCK表达(PNCK基因在mRNA和蛋白水平表达受到显著抑制)。MTT检测结果显示抑制PNCK表达抑制CNE-2Z细胞增殖。此外,干扰PNCK表达引起CNE-2Z细胞Caspase3和Caspase7活性上升,流式细胞术表明干扰PNCK基因表达可以促进CNE-2Z细胞凋亡。结论 干扰PNCK基因表达抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,可能是治疗鼻咽癌的潜在靶点。     

VEGF-C与鼻咽癌增殖和转移的关系

目的 检测血管内皮生长因子C（VEGF-C）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达,探讨其与鼻咽癌细胞增殖和转移的关系。方法NPC患者放疗前的活检组织标本62例,将每例标本均分2份,一份应用VEGF-C多克隆抗体进行SP法免疫组化染色,另一份应用流式细胞术以Ki67抗体检测其增殖状况。放疗后定期随访患者,统计分析其3年生存率及死亡原因。结果62例NPC标本中,VEGF-C表达范围为0～82％,其中阴性（-）17例（27．4％）,弱阳性（＋）13例（21．0％）,中等阳性（＋＋）18例（29．0％）,强阳性（＋＋＋）14例（22．6％）。Ki67表达范围为0-52％,其中低表达（LPI）者40例（64．5％,含15例阴性）,高表达（HPI）者22例（35．5％）。VEGF-C与Ki67表达之间存在明显的正相关（r=0．323,P〈0．05）。3年生存率为66．1％。有淋巴结转移者的VEGF-C表达显著强于无淋巴结转移者（P〈0．01）。8例死于远处转移的患者中,VEGF-C表达均为强阳性;21例无病生存者中,VEGF-C表达为（-）或（＋）者占80．9％。VEGF-C表达与患者预后存在一定的负相关,但差异无统计学意义（r=-0．219,P〉0．05）。结论VEGF-C高表达与鼻咽癌细胞的增殖和转移能力相关,但不是影响患者预后的独立因素,而是一个预测无病生存期长短的指标。     

JIP影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡的生物学效应研究

背景与目的：研究表明LMP1激活c-Jun N末端激酶（c-Jun N-ternimal kinase,JNK)介导的信号途径在促进鼻咽癌的发生发展有重要作用,并且发现JNK相互作用蛋白（JNK interacting protein,JIP)在鼻咽癌细胞中能够有效抑制JNK信号途径。本实验在此基础上进一步研究JIP对鼻咽癌细胞增殖和凋亡生物学效应的影响。方法：采用MTT法观察不同剂量的JIP及相同剂量JIP作用不同时间后鼻咽癌细胞生长情况;并用集落形成率确定单个鼻咽癌细胞的增殖能力;同时用流式细胞术分析JIP作用不同时间后鼻咽癌细胞生长情况;并用集落形成率确定单个鼻咽癌细胞的增殖能力;同时用流式细胞术分析JIP作用前后细胞周期时相的变化;最后通过流式细胞术检测JIP作用后鼻咽癌细胞凋亡百分率的改变。结果：（1）随着转染JIP量的增加,细胞的存活率逐渐下降,存在剂量依赖效应;1μg/ml JIP作用24、48、72h后,细胞存活率分别为77．8％、59．2％、61．8％。（2）转染JIP后鼻咽癌细胞形成的集落明显减少,且集落体积变小。（3）转染JIP使鼻咽癌细胞周期G0／G1期细胞百分率由66．24％上升到71．89％,S期细胞百分率由25．87％下降到19．96％。（4）与对照组相比,转染JIP后细胞的24h 凋亡百分率由1．25％上升到8．25％,上升约6．6倍,48h由1．04％上升到31．45％,上升约30倍。结论：JIP能够有效抑制鼻咽癌细胞生长增殖,引起鼻咽癌细胞周期G1／S期延长,并明显促进鼻咽癌细胞凋亡,提示JIP是治疗鼻咽癌潜在的分子药物。     

汉黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨汉黄芩素对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 采用不同浓度（2.5 μmol/L、5.0 μmol/L、10.0 μmol/L、20.0 μmol/L）汉黄芩素作用鼻咽癌CNE2细胞,以溶剂为对照组。采用实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖情况,双荧光法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测PCNA、Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达水平。结果 不同浓度（2.5 μmol/L、5.0 μmol/L、10.0 μmol/L、20.0 μmol/L）汉黄芩素作用24 h后CNE2细胞增殖抑制率依次为20.3%、23.7%、33.4%、40.9%,IC₅₀为42.41 μmol/L;36 h依次为18.0%、22.0%、36.1%、40.5%,IC₅₀为34.46 μmol/L;48 h依次为7.4%、20.2%、35.0%、40.9%,IC₅₀为22.81 μmol/L。与溶剂对照组比较,10.0 μmol/L、20.0 μmol/L汉黄芩素组细胞凋亡率均升高（t=23.710,P=0.001;t=43.934,P<0.001）。20.0 μmol/L汉黄芩素处理鼻咽癌CNE2细胞48 h后,与溶剂对照组比较,Bax蛋白表达水平上升（P<0.05）,Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达水平下降（P<0.05）。 结论 汉黄芩素可抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过促进Bax蛋白表达并抑制Survivin、XIAP、Bcl-2蛋白表达发挥作用。     

口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的:通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用.方法:利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,对69例(维族36例、汉族33例)口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较.结果:口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异(P<0.05),不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组(P<0.05),增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系(r=-0.663,P<0.05).结论:口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用.     

口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的：通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用。方法：利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术及增殖细胞核抗原（PC—NA）免疫组织化学染色,对69例（维族36例、汉族33例）口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较。结果：口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异（P〈0．05）,不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组（P〈0．05）,增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系（r=-0．663,P〈0．05）。结论：口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用。     

The activation of protease-activated receptor 1 mediates proliferation and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells

Protease-activated receptor 1 (PAR-1) is a G-coupled membrane protein, which is involved in physiological and malignant invasion processes. It is activated by serine proteases such as thrombin through a unique form or by specific synthetic peptides. In this study, we determined the expression of PAR-1 in five nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell lines with different characteristics of invasiveness and metastasis, and found that the levels of PAR-1 expression were higher in invasive or metastatic cell lines than those in low invasive or metastatic ones. Of the five NPC cell lines, CNE1-LMP1 cells had the highest expression levels of PAR-1, which was mainly distributed at the membrane and in the cytoplasm of tumor cells. Further study showed that the thrombin receptor synthetic activating peptide SFLLRN could stimulate the growth of CNE1-LMP1 cells in a dose-dependent manner. However, thrombin itself had a dual effect on the proliferation of NPC cells. Concentrations of thrombin in the range of 0.1-0.5 U/ml promoted cell growth, but concentrations higher than 0.5 U/ml impaired cell growth. Moreover, thrombin and SFLLRN also enhanced the invasive capabilities of CNE1-LMP1 cells in vitro, and this was partly due to enhancing the activities of MMP-2 and MMP-9. Our findings suggest that PAR-1 may contribute to the growth and invasive potential of NPC cells.