流式细胞术检测亚砷酸、硼替佐米对淋巴瘤细胞株细胞周期和凋亡率的影响

 目的　研究不同浓度的亚砷酸（As2O3）、硼替佐米（BOR）单用及联合应用对恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞细胞周期的影响。方法　采用流式细胞术（FCM）检测不同浓度梯度As2O3、BOR单用及联合应用对Raji细胞作用后,不同时间（24、48、72 h）G1、S期占整个细胞周期的比例以及凋亡率。结果　FCM检测细胞周期显示：As2O3使Raji细胞细胞周期阻滞在G1期,使G1期细胞占细胞周期的比例明显增高,S期明显减少,呈现剂量、时间依赖效应（P＜0.0001）,并出现明显凋亡峰。BOR对Raji细胞G1、S期所占比例与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。而两药联合组与单用As2O3组亦无明显差异（P＞0.05）。但两药联合组凋亡率由16.98 %提高到45.84 %。结论　As2O3阻抑细胞周期于G1期来对Raji细胞发挥作用,两药联合增加促凋亡作用。     

雷公藤内酯醇抑制淋巴瘤Raji细胞增殖并诱导其凋亡的实验研究

目的:研究雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)对人淋巴瘤Raji细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:体外培养人淋巴瘤Raji细胞,设不同浓度TPL作用不同时间处理Raji细胞的实验组和对照组。采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。经瑞氏-姬母萨染色,光学显微镜下观察雷公藤内酯醇处理后细胞的形态变化。应用流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期分布。结果:CCK-8法实验表明,实验组TPL各浓度作用于Raji细胞24、48及72h后抑制率为11.02%-81.05%,呈时间、剂量依赖。细胞形态学检查表明,TPL各浓度作用于Raji细胞24h后细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征:光镜下可见细胞胞体固缩、核固缩、核碎裂及凋亡小体。流式细胞术检测显示,TPL各浓度作用于Raji细胞24h后出现明显的凋亡峰。细胞周期分析显示,TPL各浓度作用于Raji细胞24h后,TPL可阻滞Raji细胞于G0/G1期。结论:TPL对Raji细胞有增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,且呈时间、剂量依赖。其机制可能与细胞周期阻滞有关。     

亚砷酸与甲磺酸伊马替尼单用及联用对淋巴瘤细胞Raji增殖和凋亡的影响

 目的　研究不同浓度的亚砷酸（As2O3）、甲磺酸伊马替尼（简称伊马替尼）单用及联用对恶性淋巴瘤细胞株Raji的影响。方法　采用MTT法检测两药对Raji细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪检测两药对Raji细胞Caspase-3的表达及G1期、S期的比例变化。采用免疫组织化学SABC法检测p16蛋白的表达。结果　As2O3、伊马替尼及两药联用均使细胞抑制率升高,两药联合组与各单药组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。As2O3上调Raji细胞Caspase-3表达呈时间、剂量依赖效应（P＜0.0001）。伊马替尼对Caspase-3表达无明显影响（P＞0.05）,且两药联用无协同上调Caspase-3作用（P＞0.05）。Raji细胞随As2O3浓度升高、作用时间延长,p16蛋白平均吸光度值增加（P＜0.05）。伊马替尼在低浓度72 h与高浓度48 h、72 h时p16蛋白表达与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。但两药联用无协同上调p16蛋白表达的作用（P＞0.05）。As2O3可使G1期细胞比例明显增高,S期比例降低,呈现剂量、时间依赖效应（P＜0.0001）,并出现明显凋亡峰。伊马替尼对Raji细胞周期无影响（P＞0.05）。两药联合组与单用As2O3组差异亦无统计学意义（P＞0.05）。结论　As2O3可通过激活Caspase-3表达诱导Raji细胞凋亡、上调p16蛋白、阻滞细胞周期于G1期来发挥抗肿瘤作用。伊马替尼在高浓度时可以上调Raji细胞p16蛋白的表达。As2O3和伊马替尼对恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞无协同作用。     

干扰素及三氧化二砷诱导淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的；分析梯度浓度的干扰素（IFN－α）及三氧化二砷（As2O3）对EB病毒感染的Burkitt淋巴瘤Raji细胞株和EB病毒阴性Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株直接作用。方法：以MTT法测定梯度浓度的IFN－α／As2O3对淋巴瘤细胞株增殖作用的影响，以膜联蛋白V（Annexin-V)法，DNA末端标记法，流式细胞术，电镜观察测定IFN－α对Raji,Daudi细胞株增殖周期的影响及凋亡诱导作用。结果：低浓度IFN－α对Raji,Daudi细胞增殖无明显抑制作用，高浓度IFN－α（10000U/mL)可 显著抑制2种细胞增殖，且有时间相关性。IFN－α作用细胞24－48h,G0/G1期细胞显著增多，S期细胞减少，72－96h细胞凋亡细胞明显增多，IFN－α和As2O3有显著协同作用，EB病毒感染的Raji细胞对IFN－α／As2O3的敏感性强于Daudi细胞。结论：IFN－α／As2O3可抑制淋巴瘤细胞增殖，使细胞阻滞在G0／G1期，进一步诱导凋亡坏死，IFN－α／As2O3作用有显著时间，剂量依赖性，对EB病毒感染的Raji细胞作用强于Daudi细胞。     

干扰素及三氧化二砷诱导淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的 :分析梯度浓度的干扰素 (IFN α)及三氧化二砷 (As2 O3 )对EB病毒感染的Burkitt淋巴瘤Raji细胞株和EB病毒阴性Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株直接作用。方法 :以MTT法测定梯度浓度的IFN α/As2 O3 对淋巴瘤细胞株增殖作用的影响 ,以膜联蛋白V(Annexin V)法、DNA末端标记法、流式细胞术 ,电镜观察测定IFN α对Raji、Daudi细胞株增殖周期的影响及凋亡诱导作用。结果 :低浓度IFN α对Raji、Daudi细胞增殖无明显抑制作用 ,高浓度IFN α(10 0 0 0U/mL)可显著抑制 2种细胞增殖 ,且有时间相关性。IFN α作用细胞 2 4～ 4 8h ,G0 /G1期细胞显著增多 ,S期细胞减少 ,72～ 96h细胞凋亡细胞明显增多 ,IFN α和As2 O3 有显著协同作用 ,EB病毒感染的Raji细胞对IFN α/As2 O3 的敏感性强于Daudi细胞。结论 :IFN α/As2 O3 可抑制淋巴瘤细胞增殖 ,使细胞阻滞在G0 /G1期 ,进一步诱导凋亡坏死 ,IFN α/As2 O3 作用有显著时间 ,剂量依赖性 ,对EB病毒感染的Raji细胞作用强于Daudi细胞。     

三氧化二砷诱导卵巢癌OVCAR-3细胞周期阻滞及凋亡

目的探讨As2O3对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.方法采用MTT法及集落形成实验测定细胞的增殖活力,通过细胞形态学观察细胞分裂及凋亡,应用流式细胞仪进行细胞周期解析、凋亡及bcl-2蛋白表达的检测.结果As2O3呈剂量依赖性抑制OVCAR-3细胞增殖,抑制50%细胞生长的药物浓度(IC50)为2μmol/L.0.5～5μmol/L的As2O3作用7天,集落抑制率均在40%以上(P＜0.01).2μmol/L与5μmol/L的As2O3作用12 h后,细胞周期出现了G2/M期阻滞及亚二倍体凋亡峰,随着作用时间的延长,凋亡细胞随G2/M期细胞减少而逐渐增多.细胞形态学观察可见分裂期细胞及凋亡细胞明显增加.0.5～5μmol/L的As2O3均能下调bcl-2蛋白的表达.结论As2O3能够抑制卵巢癌OVCAR-3细胞的增殖,诱导M期阻滞及细胞凋亡.     

As2O3联用IFN-α诱导肾癌细胞株789-0凋亡的实验研究

目的:研究不同浓度As2O3对肾癌细胞株789-0的凋亡影响及联用IFN-α有无协同作用,并探讨其作用机制.方法:采用MTT法检测As2O3单用及联用IFN-α对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期和凋亡的影响.结果:(0.5-4)μmol/L的As2O3对肾癌789-0细胞的增殖均有一定抑制作用,且随浓度增加呈增强趋势.联用1000IU的IFN-α后,肾癌细胞的增殖抑制率明显高于相应浓度的单用As2O3组,具协同作用.2.83μmol/L.(IC50)的As2O3作用于肾癌789-0细胞48h后呈现G2/M期阻滞,凋亡特征明显;联用IFN-α后呈现Go/C1期、G2/M期阻滞,凋亡率显著增高.结论:As2O3能抑制肾癌789-0细胞的增殖并诱导细胞凋亡,联用IFN-α可产生协同作用.其机制可能与干扰细胞周期的不同时相有关.     

As2O3对人膀胱癌细胞株BIU-87作用的体外研究

目的　观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌细胞株BIU 87的作用 ,并探讨其作用机制。方法　采用四氮唑蓝(MTT )法检测As2 O3 不同浓度、不同作用时间对BIU 87细胞株的生长抑制率 ;流式细胞术 (FCM )检测不同浓度As2 O3 作用 72h后细胞中凋亡相关蛋白Fas、bcl 2的表达及细胞周期变化。结果　As2 O3 可有效抑制BIU 87细胞株的生长 ,具有浓度、时间依赖性特点。Fas、bcl 2的表达与As2 O3 浓度增高分别呈正、负相关 (P <0 .0 5 ) ,且随As2 O3 浓度增高Fas、bcl 2的表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。随As2 O3 浓度增高细胞周期被阻滞在G0 /G1期。结论　As2 O3 可有效抑制人膀胱癌BIU 87细胞株的生长增殖 ,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起了重要作用     

三氧化二砷对人AFP阳性胃癌细胞株FU97的作用及其机制

目的研究三氧化二砷（As2O3）抑制AFP阳性胃癌（alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma.APGC）细胞株FU97增殖、诱导凋亡及其机制。方法MTT法检测药物效应;DNA凝胶电泳和流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡;化学发光法、实时荧光定量PCR及ELISA检测AFP、STAT3、VEGF表达变化。结果As2O3可明显抑制FU97细胞增殖,且呈时间和浓度依赖关系;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征性梯状条带;FCM检测在细胞周期G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞周期分析显示G2／M期阻滞;化学发光法、免疫细胞化学法、实时荧光定量PCR以及ELISA结果证实As2O3可下调FU97细胞AFP、VEGF、STAT3基因的表达。结论As2O3可抑制FU97细胞的增殖、阻滞细胞周期进程诱导凋亡。同时通过下调AFP、VEGF、STAT3基因的表达阻止APGC的恶性进程。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。