甲氨蝶呤联合4-氢过氧环磷酰胺对干燥综合征患者单个核细胞的作用

目的研究甲氨蝶呤（MTX）联合4-氢过氧环磷酰胺（4HC）对体外培养的干燥综合征（SS）患者外周血单个核细胞（PBMC）的周期、凋亡及分泌白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法 MTX、4HC、MTX联合4HC的3组药物在4个浓度水平0、1、10、100μg/ml,与体外培养的SS患者PBMC作用48h。用流式细胞术（FCM）检测细胞周期、凋亡,用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测IL-1β、TNF-α分泌水平。对MTX、4HC在0、1、10μg/ml浓度水平进行析因设计。结果细胞周期：与对照组相比,MTX10组、MTX100组PBMC的G0/G1期比例增加,S期及G2/M期比例减少;不同药物浓度4HC组对细胞各周期影响多数无统计学意义;联合组中MTX1＋4HC1组、MTX10＋4HC10组及MTX100＋4HC100组G0/G1期细胞比例减少,S期及G2/M期比例增加。细胞凋亡：MTX10组、MTX100组、4HC10组、4HC100组和联合组PBMC凋亡率高于对照组。同一药物浓度水平时,MTX1＋4HC1组凋亡率高于MTX1组,MTX10＋4HC10组凋亡率高于MTX10组及4HC10组,MTX100＋4HC100组凋亡率高于MTX100组及4HC100组。细胞因子：不同药物浓度的MTX组、4HC组和联合组IL-1β分泌水平均低于对照组;除MTX10外,各药物组TNF-α分泌水平均低于对照组。比较同一药物浓度水平时,不同组的IL-1β、TNF-α分泌水平,混合组均低于单用药组。交互作用：MTX联合4HC在0、1、10μg/ml3个浓度对G0/G1期比例、凋亡率、IL-1β及TNF-α分泌水平4个方面的F值分别为：4.68、45.19、4.44及3.392,P值均〈0.05,提示MTX和4HC存在交互作用。结论 MTX和4HC联合作用具有协同效应。MTX和4HC联合作用于体外培养的SS患者的PBMC,可有效抑制其G0/G1期的细胞凋亡,降低促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌水平。     

吡格列酮对成骨细胞增殖及凋亡的影响

目的研究吡格列酮对成骨细胞增殖及凋亡的影响。方法以MC3T3-E1成骨细胞株为实验对象，分别用0μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM吡格列酮干预，观察细胞活性、细胞周期及凋亡率的变化。结果随着浓度增加，成骨细胞的活性逐渐降低；与对照组相比，G0／G1，G2／M期细胞增多，S期细胞明显减少；凋亡率在5μM、10μM时低于对照组，20μM略低于对照组但无统计学意义（P〉0．05），30μL、40μM较对照组显著增高（P〈0．01）。结论吡格列酮在低浓度抑制成骨细胞凋亡，对细胞起保护作用，较高浓度则促进细胞凋亡。整体上可抑制成骨细胞DNA合成，抑制细胞增殖，导致细胞活性下降。     

替莫唑胺对人胶质瘤细胞系U251细胞的增殖影响

目的探讨替莫唑胺（TMZ）对人胶质瘤细胞系U251细胞的杀伤作用及其作用机理。方法将人胶质瘤细胞系U251细胞分成空白对照组、TMZ组和常用化疗药物组,TMZ组下设10、25、50、100、200、400μmol／L组,常用化疗药物组（ADM、MTX、VCR、DDP）各药物浓度均为其IC50值。各组分别于作用后24、48、72h观察细胞形态学改变,用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果①TMZ组各浓度对U251细胞的抑制率分别为4．23％、7．43％、31．63％、64．53％、82．18％、86．15％,呈良好的时间—剂量效应关系,其1％为81μmol,初始抑制浓度为50μmol;②ADM、MTX、VCR、DDP对U251细胞的抑制率分别为39．27％．44．59％、54．56％、55．28％,VCR、DDP两药的抑制作用明显优于ADM、MTX（P均〈0．01）,与TMZ的杀伤作用相当（P〉0．05）;③流式细胞仪检测显示,U251细胞经TMZ作用后出现G2／M期阻滞,但促凋亡作用不强。结论TMZ对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用,并呈时间和剂量依赖性;TMZ可使胶质瘤细胞阻滞于G2／M期,但其促凋亡作用不强;替奠唑胺对U251细胞的杀伤作用优于其他4种常用化疗药物。     

替莫唑胺对 Livin基因过表达的胶质瘤TJ905细胞及其干细胞增殖活性的影响

目的分析替莫唑胺（TMZ）干预Livin基因过表达的胶质瘤TJ905细胞及其干细胞模型后对细胞增殖活性的影响,以及对胶质瘤TJ905细胞和TJ905干细胞中Livin、Caspase-3/7的作用机制。 方法使用免疫磁珠方法从胶质瘤TJ905细胞系中分选出CD133阳性胶质瘤干细胞,采用慢病毒过表达技术建立Livin过表达的细胞模型,使用不同浓度（0、25、50、100、200、400 μmol/L）的TMZ干预细胞模型48 h,采用CCK-8、流式细胞术、反转录PCR检测药物干预后细胞增殖活性、细胞周期及Livin、Caspase-3/7基因的表达量。 结果（1）胶质瘤TJ905细胞中Livin基因表达量明显高于同源TJ905干细胞,差异有统计学意义（P<0.05）;（2）TMZ能抑制胶质瘤TJ905细胞及其干细胞的增殖活性,降低增殖速度,并且随药物浓度的增加抑制作用逐渐增强;（3）TMZ能抑制Livin基因的表达,诱导Caspase-3/7的表达,并且随药物浓度的增加抑制作用逐渐增强,差异有统计学意义（P<0.05）;（4）Livin基因转染后胶质瘤干细胞细胞周期G0/G1增加明显,而TJ905细胞周期则是G2/M期少量增加;TMZ干预细胞模型后,TJ905干细胞过表达组在S、G2/M停滞,对照组则是在S期停滞;TJ905细胞过表达组在S期停滞,对照组G2/M则是低浓度诱导停滞,随药物浓度增加其诱导作用减弱,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论TMZ可以通过抑制Livin基因的表达、诱导Caspase-3/7的表达、调控细胞周期变化来降低细胞增殖活性,促进细胞凋亡。     

槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响

目的研究槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响。方法制备浓度为0、3、6、9 mg/ml的槐耳清膏与人肺腺癌A549细胞作用后,采用流式细胞检测观察细胞凋亡率,并分析药物干预36 h对细胞周期和细胞凋亡率的影响。结果流式细胞术检测结果显示,槐耳清膏各浓度组均可发生细胞凋亡,与对照组相比差异显著(P0.05)。各浓度组可使人肺腺癌A549细胞G0/G1、S期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增多。结论槐耳清膏能诱导人肺腺癌A549细胞增殖,可能与细胞被阻滞于G2/M期有关。     

姜黄素对肝癌Hep1细胞增殖及凋亡的影响

目的进一步探讨姜黄素的抗肿瘤作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用不同时间肝癌Hepl细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测Hepl细胞凋亡率以及各周期时相变化。结果姜黄素作用后Hepl细胞增殖抑制率明显升高,呈时间剂量效应关系;15μmol／L作用后,C0＋G1期细胞显著增多,而G2＋M期细胞显著减少,细胞凋亡率增高（P均〈0．05）。结论姜黄素可有效抑制Hepl细胞的生长和增殖,且具有明显的量效关系;其机制可能为干扰细胞周期进程,促进细胞凋亡。     

甲氨蝶呤及环磷酰胺联合用药对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞凋亡的影响

目的 探讨甲氨蝶呤（MTX）和环磷酰胺（CTX）及两者联合治疗对类风湿关节炎（RA）患者外周血淋巴细胞凋亡的影响。方法 入选活动期RA患者30例，随机分为3组（单用MTX组、单用CTX组及联合用药组），Annexin V-FITC及碘化丙锭（PI）双标记RA患者外周血淋巴细胞，应用流式细胞术检测MTX、CTX及联合组治疗前后外周血淋巴细胞凋亡的变化；同时以10例健康志愿者外周血淋巴细胞凋亡情况为正常对照。结果 活动期RA患者外周血淋巴细胞早期凋亡率与正常人比较差异无统计学意义（P〉0．05）。单用MTX及单用CTX组患者用药后较用药前外周血淋巴细胞早期凋亡率均明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）；联合用药后外周血淋巴细胞早期凋亡率较单用MTX、CTX组明显增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。RA患者基线外周血淋巴细胞早期凋亡率与疾病活动指数（DAS）28、血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）疾病活动指标间无相关性。结论 MTX联合CTX治疗能更加有效地诱导RA患者外周血淋巴细胞凋亡。     

斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的探讨斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)增殖抑制率、凋亡率及其细胞周期进程的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测斑蝥酸钠维生素B6对Hep-2细胞增殖抑制率、流式细胞仪定量检测经斑蝥酸钠维生素B6作用后的Hep-2细胞周期进程变化及凋亡率。结果不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液对Hep-2细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,Hep-2细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞生长、增殖有明显的抑制作用,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,从而使S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,诱导Hep-2细胞凋亡。     

苦参碱对白血病HL-60细胞增殖、凋亡及其Bcl-2mRNA、Survivin mRNA表达的影响

目的观察苦参碱在体外对急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养HL-60细胞至对数生长期,分别以苦参碱（苦参碱组）、顺铂（顺铂组）和药物溶媒（对照组）处理,MTI＇法检测细胞生长抑制率、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,RT．PCR法检测Bcl-2mRNA、SurvivinmRNA表达。结果与对照组比较,苦参碱组细胞生长抑制率、凋亡率及G,期细胞比例增高,Bcl．2mR—NA、SurvivinmRNA表达均下调,且呈明显的浓度依赖性（P〈0．05或0．01）。结论苦参碱体外可抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调凋亡基因Bcl一2、Survivin表达有关。     

姜黄素对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的　观察姜黄素对体外培养肝星状细胞 (HSC)增殖与凋亡的影响。方法　不同浓度姜黄素处理HSC株HSC T6 ,MTT法检测细胞增殖 ,流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡。结果　在 2 0～ 10 0 μmol/L浓度范围内 ,姜黄素可剂量依赖性地抑制HSC增殖 (P <0 .0 1)。 2 0、4 0、6 0 μmol/L姜黄素处理HSC 2 4h后 ,细胞周期分析发现S期细胞减少 ,G2 /M期细胞显著增加 (P <0 .0 1) ;流式细胞术检测到明显的亚G1峰 ,各组的凋亡指数 (% )分别是 15 .3± 1.9,2 6 .7± 2 .8,37.6± 4 .4 ,与对照组 (1.9± 0 .6 )相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;4 0 μmol/L姜黄素作用 12、2 4、36、4 8h ,凋亡指数 (% )分别是 12 .0± 2 .4、2 6 .7± 3.5、33.8± 1.8和 4 9.3± 1.6 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;透射电镜观察到细胞皱缩、核染色质浓缩沿核膜排列和凋亡小体形成等 ;琼脂糖凝胶电泳可见到明显的DNA梯带形成。结论　姜黄素可显著抑制HSC增殖 ,使细胞周期停滞于G2 /M期 ,并诱导其凋亡 ,其作用具有时间和剂量依赖性     

Research and Evaluation of the Influence of the Construction of the Gate and the Influence of the Piston Velocity on the Distribution of Gases into the Volume of the Casting

Distribution of gasses to the cast volume and volume of pores can be maintained within the acceptable limits by means of correct setting of technological parameters of casting and by selection of suitable structure and gating system arrangement. The main idea of this paper solves the issue of suitability of die casting adjustment—i.e., change of technological parameters or change of structural solution of the gating system—with regards to inner soundness of casts produced in die casting process. Parameters which were compared included height of a gate and velocity of a piston. The melt velocity in the gate was used as a correlating factor between the gate height and piston velocity. The evaluated parameter was gas entrapment in the cast at the end of the filling phase of die casting cycle and at the same time percentage of porosity in the samples taken from the main runner. On the basis of the performed experiments it was proved that the change of technological parameters, particularly of pressing velocity of the piston, directly influences distribution of gasses to the cast volume.