环孢菌素A在体内直接抑制存活的人皮肤角朊细胞的增殖

本文应用5-溴-2′-脱氧尿核苷(BrdU)间歇标记法,研究了环孢菌素A(CsA)在体内对移植于裸鼠身上的人表皮角朊细胞(EK)增殖的影响。作者选用6周龄先天无胸腺雌鼠作人皮片移植,移植后2周,将小鼠分为两组:一组每天在小鼠背部皮下注射用橄榄油稀释的CsA(50mg/kg/d),共3周;另一组则注射等体积橄榄油作对照。第3周     

环孢素对毛囊细胞凋亡和部分生长因子mRNA表达的影响

目的：探讨环孢素A(CsA)促毛发生长的作用机制。方法：应用小鼠触须毛囊体外培养模型，通过观察毛囊生长速度、细胞增殖、细胞凋亡和部分生长因子mRNA的表达，对CsA促毛发生长的机制进行研究。结果：CsA明显促进毛囊生长和抑制毛囊进入退行期。CsA促毛发生长的作用可以完全被抗血管内皮生长因子(VEGF)和抗肝细胞生长因子(HGF)受体中和抗体所阻断。CsA可促进Ki67抗原表达，抑制毛囊细胞的凋亡。逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测发现，培养的第4和（或)第6天，CsA处理组VEGF、HCF和神经生长因子(NGF)mRNA表达高于阴性对照组，而follistatin mRNA表达则明显低于阴性对照组。结论：小鼠触须毛囊体外培养为研究CsA促毛发生长机制的研究提供了一个较好的模型。CsA通过刺激毛囊细胞增殖和抑制细胞凋亡而刺激小鼠触须毛囊生长。该作用可能是通过影响VEGF、HGF、NGF以及follistatin的表达而发挥作用的。     

环孢素A、FK506对培养的角朊细胞的增殖及分泌IL-8的影响

环孢素A(CsA)和FK506作为免疫抑制剂在器官移植以及免疫相关疾病如风湿性关节炎、银屑病的治疗中得到了广泛应用。 该研究的目的是评定CsA和FK506是否对培养的正常人表皮角朊细胞(NHEK)的增殖及其分泌IL-8的活性有直接抑制作用。取正常新生儿包皮传代培养的角朊细胞(KC),经4、5次传代,当60％～80％的细胞进入增殖期时,     

银屑病中的因和果

银屑病的原发损害是角朊细胞过度增生引起,此理论引导了研究者近三十年。1951年抗代谢药物白血宁和甲氨喋呤治愈银屑病皮损,这似乎进一步证实了这一理论。1979年瑞士学者偶然发现环孢素A(CsA)可治疗银屑病皮肤损害,他们指出CsA可抑制快速细胞增生,这     

UVA诱导抗Ro/SSA血清注射多巴色素异构酶基因敲除小鼠表皮细胞凋亡

目的 探讨人抗Ro/SSA血清腹腔注射多巴色素异构酶基因敲除小鼠(Dct~(-/-))与野生型C57BL/6J小鼠对慢性UVA照射诱导表皮细胞凋亡的易感性.方法 将高滴度人抗Ro/SSA血清间断腹腔注射于Dct~(-/-)、鼠与野生型C57小鼠,随后给予小鼠慢性UVA照射.每次照射剂量为10 J/cm~2,共6次,累计剂量为60 J/cm~2.取尾部照射区域皮肤,行石蜡包埋组织切片,经HE染色和TUNEL标记在光镜下分别计数每个视野100个表皮细胞中日晒伤细胞(SBC)数和凋亡细胞数.结果 经慢性UVA照射后,抗Ro/SSA血清注射Dct~(-/-)-小鼠SBC数为(14±1.0)/100个表皮细胞,凋亡细胞数为(62 ±2.7)/100个表皮细胞.血清注射C57野生型小鼠SBC数为(7±0.6)/100个表皮细胞,凋亡细胞数为(30±1.6)/100个表皮细胞,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05).而未注射血清的Dct~(-/-)小鼠SBC数为(6±0.9)/100个表皮细胞,凋亡细胞数为(42±2.5)/100个表皮细胞,与注射血清的Dct~(-/-)小鼠相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 当一定浓度的抗Ro/SSA抗体存在时,表皮黑素细胞Dot基因缺陷能增强慢性UVA诱导的表皮细胞凋亡,可能关系到红斑狼疮患者抗Ro/SSA抗体介导皮肤光敏感性发生.     

住院病人白念珠菌分离株的电泳核型

电泳核型(EK,即用脉冲场凝胶电泳分离染色体大小的DNA的带型)已用于描述医学上重要酵母菌的种间及种内菌株特征。已经发现实验室保存的各株白念珠菌EK变异很大,其同源染色体中一条明显变异而另一条固定不     

环孢素A的外用

口服环孢素A(CsA)能有效的治疗银屑病、异位性皮炎、变应性接触性皮炎、扁平苔藓、坏疽性脓皮病以及斑秃。而外用CsA治疗上述疾病时,则疗效很差,为探索其原因和找到更理想的外用制剂,作者设计了以下3个实验进行研究。 ①以5％CsA溶液[异丙醇/油烯基醇(oleyl-alcohol)4:1]外用于无毛鼠、大鼠、豚鼠     

基于MAPK/Wnt3a/mTOR/VEGF信号通路上调miR-23对子宫肌瘤细胞凋亡、侵袭、迁移的影响

目的基于丝裂原活化蛋白激酶/人Wnt-3a蛋白/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/血管内皮生长因子(MAPK/Wnt3a/mTOR/VEGF)信号通路探究上调miR-23对子宫肌瘤细胞凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法选取子宫肌瘤细胞,经培养后分为对照组、下调组、上调组,对三组增殖、凋亡、侵袭、迁移能力进行检测,检测miR-23、肾素活性(PRA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、上皮型黏附蛋白(E-cadherin)、MAPK、Wnt3a、mTOR、VEGF表达量。结果与对照组比较,下调组miR-23表达较低,PRA表达较高,上调组miR-23表达较高,PRA表达较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,下调组凋亡率、增殖抑制率较低,侵袭细胞数、迁移细胞数较高,上调组凋亡率、增殖抑制率较高,侵袭细胞数、迁移细胞数较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,下调组MAPK、Wnt3a、mTOR、VEGF、MMP-2相对表达量较高,E-cadherin相对表达量较低,上调组MAPK、Wnt3a、mTOR、VEGF、MMP-2相对表达量较低,E-cadherin...     

用特异性单克隆抗体测定异位性皮炎患者-T细胞和抑制性T细胞水平降低

鼠杂交瘤技术制备的特异性抗人类T细胞和T细胞亚群的单克隆抗体的应用对人类T细胞亚群的分析提供了新的工具.作者应用对人类T细胞表面标志特异的单克隆抗体OKT_3、OKT_4、OKT_8,通过间接免疫荧光法分别检测了三个年龄组(Ⅰ组15～50岁,Ⅱ组2～15岁,Ⅲ组4月～2岁)共40例男女异位性皮炎(AD)患者和30名性别相匹配的正常健康人对照者外周血中的总T细胞数、辅助—诱导性T细胞及抑制—细胞毒性T细胞亚群.结果发现:1.外周血T细胞总数:Ⅰ组和Ⅱ组中,AD病人外周血总T细胞数(OKT_3+细胞)显著低于对照者.Ⅰ组AD病人的总T细胞均数±标准误为58.8±8.8%,正常人为69.4±11.1%;(P<     

槲皮黄酮抑制LRIG2/EGFR信号转导诱导人皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡

目的 研究槲皮黄酮(Qu)对人皮肤鳞状细胞癌(CSCC)A431细胞增殖、凋亡及免疫球蛋白样结构域2(LRIG2)/表皮生长因子受体(EGFR)信号转导的影响.方法 CCK8法和流式细胞术分析Qu对A431细胞活力、增殖及凋亡相关指标的影响;倒置显微镜观察A431细胞的克隆数;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测5-溴...     

女贞子对黑素细胞的黑素合成、细胞增殖和c-kit基因表达的影响

目的研究女贞子对体外培养的黑素细胞的影响.方法采用免疫印迹法检测酪氨酸酶蛋白(TRP)和酪氨酸激酶受体蛋白(KIT)含量;405 nm比色测定黑素细胞黑素含量;采用细胞数统计和显微镜观察的方法测定细胞毒性和对细胞增殖的影响.结果研究表明女贞子对黑素细胞的增殖和黑素合成有促进作用;对KIT蛋白合成有显著的促进作用.结论女贞子对黑素细胞增殖和黑素合成具有促进作用,该药物治疗白癜风的疗效可能与酪氨酸激酶受体蛋白含量提高相关.     

白介素、集落刺激因子和肿瘤坏死因子在体外培养中对人毛囊生长的影响:白介素1和α肿瘤坏死因子可能与斑秃发病有关

表皮角朊细胞可以合成一系列的细胞因子,包括白介素1α(IL-1a)、-1β、-3、-6、-8和-10以及粒细胞-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和α肿瘤坏死因子(TNF-α),它们不仅介导调节免疫和炎症反应,而且参与组织的非免疫性反应,包括细胞的增殖分化,伤口的愈合及组织的修复。实验表明,免疫抑制剂环孢素A(CsA)可以刺激毛发的生长。同时一些毛发疾病的发生,如斑秃(AA)也和免疫系统的功能密切相关。为此,作     

毛发研究的新模型——猪毛囊体外培养的研究

目的：对猪毛囊体外无血清培养的条件和方法进行了研究，并就其在体外培养中对环孢素A(CsA)、胰岛素生长因子-1（IGF-I）和转化生长因子β-1（TGF-β）的反应性进行观察。结果发现：（1）猪毛囊在Williams E加L-谷酰氨等成分的培养基上生长良好，从而建立了猪毛囊体外无血清培养模型，并使毛囊分离和培养的方法标准化。建立的猪毛囊体外培养模型毛囊生长曲线与人毛囊非常相似。（2）体外培养的猪毛囊对CsA、IGF-I和TGF-β1均有敏感的反应性，反应浓度与人毛囊体外培养的浓度相似。（3）猪毛囊体外培养中CsA明显促进毛囊细胞分裂增殖和抑制毛囊细胞凋亡。所以猪毛囊体外培养模型是研究毛囊生理较好的方法。     

NK细胞与尖锐湿疣转归关系研究

目的 :　研究尖锐湿疣患者外周血NK细胞数 ,探讨NK细胞数在尖锐湿疣转归中的作用。方法 :　用流式细胞仪检测尖锐湿疣患者外周血NK细胞数目 ,皮损给予液氮冷冻、上臂内侧皮下注射转移因子、皮损局部注射干扰素治疗 ,疗程结束后随访 3个月 ,观察尖锐湿疣复发情况。结果 :　 74例患者 47例临床治愈 ,2 7例复发。 74例患者外周血NK细胞数明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,病程小于 3个月组高于病程大于 3个月组 (P <0 .0 5 ) ,未复发组高于复发组 (P <0 .0 5 ) ,未复发组 15例复查了NK细胞 ,基本恢复正常。结论 :　尖锐湿疣患者外周血NK细胞数增高 ,增高的程度与病程有关 ,短病程者高于长者 ,NK细胞增高的程度与复发有一定关系 ,明显增高者不易复发。     

皮下注射环孢素可抑制小鼠皮肤的细胞因子基因表达

应用RNA的聚合酶链反应(PCR)研究环孢素A(CsA)在体内对皮肤细胞因子基因表达的作用。 方法:隔日皮下注射5或10mg/kg的CsA橄榄油溶液于8～10周龄C57BL6雌鼠的背部,共3周。对照组小鼠注射等体积的橄榄油。处死小鼠,切取背部皮肤,刮除皮下组织和部分     

小檗碱衍生物HB-13体外抗单纯疱疹病毒的研究

目的 探讨小檗碱衍生物HB-13及其前体小檗碱体外抗HSV-1和HSV-2的活性.方法 利用Vero细胞体外培养模型,以阿昔洛韦(ACV)为对照药,通过观察细胞病变效应,检测HB-13和小檗碱的细胞毒性、HSV-1和HSV-2液的病毒滴度及药物抑制病毒致细胞病变效应.结果 HB-13、小檗碱和阿昔洛韦的半数中毒质量浓度(TC50)分别为31.99,380和>800 μg/mL;对HSV-1的半数抑制质量浓度(IC₅₀)分别为1.328,>100和0.443 μg/mL,治疗指数分别为24.09,<3.80和>1805.87;对HSV-2的IC₅₀分别为1.344,>100和0.679μg/mL;治疗指数分别为23.80,<3.80和>1178.20.结论 HB-13具有明显的抗HSV作用,而小檗碱无实用抗HSV活性.     

环孢菌素对裸鼠毛发生长的影响

全身应用环孢菌素 A(CsA)最常见的皮肤副作用之一是与剂量有关的多毛症。约占30%～95%。本研究目的是进一步了解除口服外,在外用和皮下应用 CsA 时对裸鼠毛发生长的刺激作用。用5周龄的雌性裸鼠50只,分为10组:将 CsA 粉剂溶于纯橄榄油,制成0.2%,1.0%,2.0%,2.5%的 CsA 溶液,分别涂在4组裸鼠背部,连续3用。另外按 CsA500mg/kg/d 的剂量溶于0.05ml 橄榄油,分别外用、口服及皮下应用于另3组裸鼠,连续4周。其余3组分别外用、口服及皮下应用橄榄油作为对照。在鼠龄20周时重复 CsA治疗一次。在9月龄时再应用4周。每周从     

恶性黑素瘤细胞中的谷氨酸信号通路及其与细胞骨架蛋白分子的作用机制

目的 探讨谷氨酸受体通路对恶性黑素瘤(恶黑)细胞树突形态以及细胞骨架蛋白的作用.方法 激光共聚焦显微镜及原子力显微镜分析微管相关蛋白2a(MAP2a)、离子型谷氨酸受体(NMDAR2A)、代谢型谷氨酸受体(mGluR1)在人侵袭性恶黑细胞中的亚细胞定位,以及NMDAR拮抗剂MK-801及mGluR1拮抗剂CPCCOEt对微管蛋白分布、细胞树突形态的作用.测定细胞生长曲线,观察MK-801及CPCCOEt对恶黑细胞增殖的影响.结果 研究发现,上述分子具有相似的亚细胞分布:均主要位于细胞树突内;MK-801及CPCCOEt均可使细胞树突内微管密度增加,使恶黑细胞树突化;且与MAP2a具有协同作用;MK-801及CPCCOEt均对恶黑细胞增殖具有显著抑制作用.结论 谷氨酸受体通路参与恶黑细胞树突发育的生理功能,谷氨酸受体拮抗剂可抑制恶黑细胞增殖.     

香菊胶囊溶液在Vero细胞中对单纯疱疹病毒2型的抑制作用

目的研究香菊胶囊溶液对单纯疱疹病毒2型的抗病毒作用,为生殖器疱疹的治疗寻找新的治疗手段。方法以Vero细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率和病毒抑制率来评价香菊胶囊溶液体外对单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的抑制作用。结果香菊胶囊溶液对Vero细胞的半数毒性浓度(TC_(50))为12.5mg/m L,药物和HSV-2共同作用2h后、病毒感染2h后加入药物、预防给药途径三种条件下对HSV-2的半数有效浓度(IC_(50))分别为1.901mg/m L,1.871mg/m L和1.942mg/m L,治疗指数(TI)分别为6.58,6.68和6.44,其抗病毒效果与阿昔洛韦差异无统计学意义(P0.05)。结论香菊胶囊溶液在体外对HSV-2直接灭活作用明显,且对HSV-2的吸附和穿入细胞均有抑制作用,具有很好的体外抗疱疹病毒作用。     

阿维A抑制鼠黑素瘤B16细胞的增殖作用

目的:探讨阿维A(acitretin)、顺铂及两者联合应用对鼠黑素瘤B16细胞株(简称B16细胞)的作用.方法:分别采用阿维A(浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)、顺铂(浓度为2、4、8 mg/L)及两药联合处理B16细胞,对照组B16细胞培养不加上述药物.在显微镜下观察细胞形态变化,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,应用两药相互作用指数(CDI)分析阿维A与顺铂的作用.结果:不同浓度阿维A对B16细胞增殖均具有抑制作用,与对照组相比,吸光度(A)值均有不同程度下降(P<0.01);对照组细胞贴壁生长良好,用药组细胞皱缩、破裂;两药CDI均>0.85.即阿维A和顺铂联合应用对B16细胞的增殖抑制具有相互协同作用.结论:阿维A对B16细胞的增殖有抑制作用,与顺铂联合应用相互间可增强诱导B16细胞的凋亡作用.