多药耐药相关蛋白研究进展

多药耐药相关蛋白是一种蛤导多药耐药性的跨膜转运蛋白，分布于细胞内及细胞膜上，能减少细胞内药物聚积，或改变药物内分布，从而降低化疗疗效。本文综述了多药耐药相关蛋白的结构，功能，基因表达及调控，在组织细胞中分布，以及多药耐药相关蛋白的诱导，耐药机制和耐药性逆转因素。     

胃癌组织中多药耐药和多药耐药相关蛋白基因的表达及其意义

我们通过检测胃癌组织中多药耐药(multidrug resistance，MDR1)和多药耐药相关蛋白(multidrug resistanceassociated protein，MRP)基因表达，探讨其与肿瘤临床病理特征及其预后的关系。     

多药耐药相关蛋白与骨肉瘤化疗耐药相关性

多药耐药是导致骨肉瘤患者化疗失败的重要原因之一,而多药耐药相关蛋白(MRP)表达增加是介导多药耐药重要机制之一。MRP是一类三磷酸腺苷能量依赖型跨膜转运蛋白,可有选择性和特异性地将细胞内药物外排至细胞外。作为药物排出泵,MRP导致细胞内化疗药物浓度降低,使肿瘤细胞对多种抗肿瘤药物产生耐药。研究发现骨肉瘤一线化疗药物阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤、异环磷酰胺及部分二线化疗药物均为MRP的药物底物。深入研究MRP与肿瘤化疗耐药的关系,可为防止骨肉瘤及其他肿瘤化疗耐药开辟新途径。该文就MRP与骨肉瘤化疗耐药相关性研究进展作一综述。     

胃肠道恶性肿瘤多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白流式细胞术检 …

ｍｄｒ1基因编码的Ｐ糖蛋白(Ｐｇｐ)过度表达是胃肠道恶性肿瘤产生多药耐药(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)的重要机理之一[1]。最近研究发现的另外两个跨膜转运蛋白———多药耐药相关蛋白(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ)和肺耐药蛋白(ｌｕｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎ,ＬＲＰ),也参与恶性肿瘤的ＭＤＲ[2,3]。我们研究ＭＲＰ和ＬＲＰ在胃肠道恶性肿瘤中的表达及其临床意义。一、对象和方法1.对象:经病理学检测确诊的胃肠道癌症患者19例,其中胃癌14例,大肠…     

可溶性耐药相关钙结合蛋白同肿瘤多药耐药关系的研究进展

可溶性耐药相关钙结合蛋白（sorcin）是一种广泛存在于多种正常组织细胞及肿瘤细胞中的胞浆蛋白。sorcin可在多种耐药细胞中高表达,其耐药机制可能是它可以与细胞中钙离子结合,也可能与其阻断内质网膜上钙离子通道引起的细胞凋亡相关,但sorcin表达的量与耐药程度之间的关系还不明了。本文主要对sorcin的结构及其在耐药肿瘤细胞中的表达和导致耐药的机制进行综述。     

多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因在食管、贲门癌中的表达

目的　探讨多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)在食管癌、贲门癌中表达的临床意义。　方法　采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR),对29例食管癌、贲门癌癌组织及癌旁组织中MDR1和MRP的表达进行检测。　结果　癌组织中MDR1阳性率为65.5%,高于癌旁组织中MDR1的阳性率,为37.9%(P<0.05),癌组织MDR1信使核糖核酸(mRNA)表达水平也显著高于癌旁组织(P<0.01);癌组织的MRP阳性率为48.3%,高于癌旁组织(27.6%),但无差异(P>0.05),而癌组织MRPmRNA表达水平与癌旁组织比较则有差异(P<0.05);中、低分化肿瘤的MDR1和MRP表达阳性率增高,两基因的mRNA表达水平显著高于高分化肿瘤(P<0.05)。　结论食管、贲门癌具有内源性多药耐药性;MDR1和MRP表达与食管、贲门癌的组织学类型及TNM分期无关,但可反映其肿瘤组织分化不良的生物学特征     

胃癌体外药敏试验与多药耐药基因、多药耐药相关蛋白表达的关系

目的 探讨胃癌体外化疗药物敏感试验与胃癌组织中多药耐药基因（MDR1）和多药耐药相关蛋白（MRP）基因表达的关系。方法 收集42例手术切除胃癌标本，采用噻唑蓝（MTT）比色法进行胃癌原代细胞培养体外药物敏感试验，检测其对9种临床常用化疗药物的敏感性，并应用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测胃癌组织中MDR1和MRP mRNA表达，分析药敏试验结果与MDR1、MRP mRNA表达的关系。结果42例胃癌组织中MDR1、MRP mRNA表达阳性率分别为38．1％和28．9％。CDDP、ADM和OXA耐药组中，MDR1 mRNA表达阳性率显著高于敏感组；在CDDP和HCPT耐药组中，MRP mRNA表达阳性率显著高于敏感组。结论MDR1和MRP高表达是胃癌对多种化疗药物具有耐药性的标志，结合体外药敏试验，有助于临床筛选有效的化疗药物。     

小干扰RNA沉默多药耐药相关蛋白基因2对人肝癌细胞HepG2多药耐药的逆转作用

目的 检测小干扰RNA(siRNA)对肝癌耐药细胞株HepG2/阿霉素(ADM)多药耐药相关蛋白基因2(MRP2)及其蛋白产物的抑制作用,观察对多药耐药性的影响.方法 使用浓度梯度法制作HepG2耐ADM细胞株(HepG2/ADM),ADM浓度从0.1～2.0 m/L:设计合成针对MRP2的siRNA小片段,转染HepG2/ADM耐药细胞,24 h后通过实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测siRNA对MRP2基因mRNA和蛋白的抑制效果;噻唑蓝(MTT)比色法观察抑制MRP2基因表达后,HepG2/ADM细胞对化疗药物的敏感性变化,并计算各药物的半数抑制浓度(IC50).结果 HepG2/ADM对ADM、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、长春新碱和奥沙利铂的IC50值分别为0.3204、3.8002、0.2014和0.1221;siRNA明显抑制了HepG2/ADM细胞MRP2基因mRNA和蛋白的表达(P＜0.05);转染MRP2-siRNA后,HepG2/ADM细胞对ADM、5-Fu、长春新碱和奥沙利铂的IC50值明显减小,分别为0.1023、1.4417、0.0452和0.0268.结论 用siRNA沉默MRP2基因能够逆转HepG2/ADM细胞对化疗药物的耐药性,MRP2基因与HepG2/ADM肝癌细胞的多药耐药性相关,可通过沉默MRP2基因提高耐药细胞对化疗药物的敏感性.     

耐药相关蛋白P糖蛋白、多药耐药相关蛋白及谷胱甘肽S转移酶π在胰腺癌中的表达及其意义

胰腺癌化疗效果不佳 ,多药耐药 (multidrugresistance,MDR)是重要的原因。我们应用免疫组化技术分析P糖蛋白 (P gp) ,多药耐药相关蛋白 (MRP)及谷胱甘肽S转移酶π(GST π)在胰腺癌中的表达及其与预后的相关性。资料与方法1.临床资料 :所有标本来自手术切除 ,经病理确诊为胰腺癌。本组共 6 8例 ,其中男 4 4例 ,女 2 4例 ,年龄 30～ 74岁。TNM分期 :Ⅰ +Ⅱ期 4 6例 ,Ⅲ +Ⅳ期 2 2例 ;组织学分型 :管状腺癌 5 2例 ,乳头状腺癌 12例 ,囊腺癌 4例 ;病理分级 :高分化 18例 ,中分化 2 0例 ,低分化 30例 ;有淋巴结转移者30例 ,无转移者 38例。…     

多药耐药相关蛋白在肝癌多药耐药细胞系HePG2/ADM中的作用

目的研究4种耐药蛋白：多药耐药蛋白（multi—drug resistance protein 1，MDR1），多药耐药相关蛋白1（multi—drug resistance related protein 1，MRP1），肺耐药蛋白（lung resistance protein，LRP），乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）在肝癌多药耐药中的作用。方法通过培养液中阿霉素（adriamycin，ADM）浓度递增诱导法筛选培养，建立HePG2／ADM肝癌多药耐药细胞株；采用real time荧光定量PCR检测四种耐药蛋白mRNA在正常肝细胞系L02、肝癌细胞系HePG2及HePG2／ADM中的表达差异；Western blot检测3种细胞系中4种耐药蛋白的表达。结果（1）建立HePG2／ADM细胞系。MTT法检测阿霉素对HePG2／ADM细胞IC50为亲本细胞的282倍（P〈0．05）。（2）HePG2／ADM中MDR1和BCRP mRNA表达分别是HePG2的400倍（F=87．49，P〈0．05）和9倍（F=1006，P〈0．05）。MRP1和LRP mRNA表达差异无统计学意义（FMRPI=3．43，FLRP=2．44，Pall〉0．05）。（3）L02和HePG2中4种耐药蛋白mRNA的表达均无差异（FMDRI=1006，FBCRP=87．49，FMRPI=3．43，FLRP，=2．44，Pall〉0．05）。（4）Western blot检测发现HePG2／ADM细胞中MDR1，BCRP，LRP蛋白表达显著高于HePG2和L02细胞（FMDHI=28．68，FBCRP=18．60，FLRP=6．28，Pall〈0．05），MRP1蛋白表达不增高（FMRPI=0．70，P〉0．05）。（5）4种耐药蛋白表达在HePG2和L02细胞差异均无统计学意义（FMDRI=28．68，FBCRP=18．60，FMRPI=0．70，FLRP=6．28，Pall〉0．05）。结论MDR1和BCRP在HePG2／ADM多药耐药中起重要作用，HePG2／ADM多药耐药与MRP1和LRP可能无关。     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白表达与预后的关系

肺癌耐药性形成机制，已成为肺癌分子生物学研究热点。肿瘤细胞对抗肿瘤药物的耐药的原因较多，肺癌耐药机制复杂。肺耐药蛋白(lung resistance protein，LRP)、多药耐药蛋白(multidrug resistance-associated protein，MBP)是近年发现的肿瘤耐药相关基因，在肺癌耐药中起着一定的作用。本实验应用免疫组化方法检测LRP、MRP在非小细胞肺癌     

RNA干扰逆转肝癌多药耐药

目的 研究siRNA对肝癌耐药细胞系HepG2/mrp1中多药耐药相关蛋白基因(multidrug-resistant-associated 1,mrp1)及其蛋白产物MRP1表达的抑制作用和逆转其耐药性的效果.方法 设计合成针对mrp1启动子区域的RNA干扰小片段,转染肝癌耐药细胞HepG2/mrp1.通过RT-PCR和流式细胞仪,在mRNA和蛋白质水平评估RNA干扰对mrp1表达的影响;MTT法检测RNA干扰逆转HepG2/mrp1细胞多药耐药性的变化,按照实验组和亲本组细胞的半数抑制剂量(ICso)评估RNA干扰对细胞耐药倍数的改变.结果 在耐药细胞HepG2/mrp1中,RNA干扰明显抑制了 mrp1 mRNA和蛋白产物MRP1的表达水平,在相同浓度药物作用下实验组细胞耐药性显著下降.结论 我们设计的siRNA对肝癌耐药细胞HepG2/mrp1中的mrp1基因有显著的抑制作用,具有良好的逆转多药耐药性的效果.

Abstract：

Objective To investigate the suppression of mrp1 and MRP1 induced by small interfering RNA and the restoration of sensitivity to chemotherapeutic drugs in the multidrug-resistant hepatocellular carcinoma cell lines HepG2/mrp1. Methods mrp1-targeted small interfering RNA duplexes were designed and composed and introduced into multidrug-resistant hepatocellular carcinoma cell lines HepG2/mrp1. The suppression of mrp1 mRNA and its gene product MRP1 was examined by RT-PCR and flow cytometry (FCM), respectively. MTT assay was performed to measure the reverse effect of small interfering RNA based on the results of ICs0. Results The overexpression of mrp1 mRNA and MRP1 was effectively suppressed by small interfering RNAs. The level of mrp1 mRNA in the transfected HepG2/mrp1 cells was reduced to (86.36±2.76)% and MRP1 to (89.38±3.76)%compared with those of the controls. The resistance to ADR was reversed five-fold, which indicated the restoration of sensitivity to drugs. Conclusion Small interfering RNA can inhibit mrp1 expression effectively and reverse the multidrug resistance mediated by MRP1.     

多药耐药蛋白、P-糖蛋白及DNA拓扑异构酶Ⅱ与胰腺癌化疗耐药的相关影响因素分析

目的研究胰腺癌组织中多药耐药蛋白（MRP）、P-糖蛋白（P-gp）及DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）三种多药耐药相关蛋白的表达及其化疗耐药相关影响因素的分析。方法收集51例病理证实的胰腺癌组织标本,以7例正常胰腺组织标本作对照,采用免疫组化技术检测MRP、P-gp及TopoⅡ三种蛋白在胰腺癌组织中的表达情况,并结合患者临床病理资料、生存情况进行分析。结果 P-gp、MRP在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为70.6%、81.3%,与在正常胰腺组织中的阳性表达差异有统计学意义（P〈0.05）,TopoⅡ不同组织表达差异无统计学意义。在有淋巴结转移的患者中P-gp的表达具有更高的阳性率。TopoⅡ的阳性表达率与分化程度有关。胰腺癌组织中,P-gp与MRP表达相关;P-gp、MRP与TopoⅡ之间蛋白表达水平不具有相关性。MRP、P-gp及TopoⅡ共表达阳性者生存期明显短于阴性者。结论 MRP、P-gp及TopoⅡ在多药耐药现象中占有重要地位,同时也可作为判断胰腺癌患者预后的指标之一。     

多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的　研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法　采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果　MRP和LRP在 3种组织中均有表达,HCC组织中其基因表达显著高于其他组织 (P< 0. 0 5 )。HCC中两种基因表达呈正相关 (r= 0. 3 1 2, P <0. 0 5; r= 0. 3 2 8, P< 0. 0 5 );其表达与HCC的分化程度有关 (P< 0. 0 5 )。并且其表达阳性组患者化疗后AFP有效率和平均生存期分别高于和长于阴性组 (P< 0. 0 5 ),但LRP与平均生存期无关 (P> 0. 0 5 )。结论　HCC多药耐药 (MDR)与两种基因表达有关,起源于内源性耐药;检测其表达对预测化疗耐药具有指导意义;MRP可能与预后有关。     

乳腺癌组织多药耐药相关蛋白表达及其与化疗敏感性关系的研究

目的：探讨3种耐药相关蛋白P-gp、GST-π和TopoⅡ在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌新辅助化疗敏感性的相关性。方法：乳腺癌患者80例,随机分为应用新辅助化疗（CEF）组（A组）和未化疗组（B组）,A组应用新辅助化疗2周期,化疗前后分别行B超检查测量肿瘤大小。采用S-P免疫组织化学法检测80例乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达情况。结果：P-gp的表达在A组较B组有显著升高（P〈0.05）;GST-π和TopoⅡ的表达在A组及B组的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。A组P-gp的表达情况与乳腺癌肿瘤的缩小呈直线相关（P〈0.05）;GST-π、TopoⅡ的表达情况与乳腺癌瘤体的缩小无明显相关（P〉0.05）。P-gp的表达与腋窝淋巴结阳性有显著相关;GST-π的表达与肿瘤的分级有显著相关,与雌激素受体呈负相关;TopoⅡ的表达与肿瘤的分级呈正相关。结论：P-gp的表达可能与乳腺癌的获得性耐药有关,GST-π和TopoⅡ的表达可能与乳腺癌的天然耐药有关。     

三种逆转剂对人膀胱癌多药耐受相关蛋白介导的多药耐受逆转的研究

目的：观察环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）、维拉帕米（Ｖｅｒ）、黄体酮（Ｐｒｏｇ）对膀胱癌多药耐受相关蛋白（ＭＲＰ）介导的多药面受（ＭＤＲ）的塑转作用。方法：分别采用ＭＴＴ方法和流式细胞仪检测观察ＣｓＡ、Ｖｅｒ和Ｐｒｏｇ塑转化疗药物ＶＣＲ对ＭＲＰ高表达的膀胱癌细胞的细胞毒性作用的塑转效果。以及地细胞内柔红霉素（ＤＮＲ）聚集、外排的影响。结果：ＣｓＡ和Ｖｅｒ作为多药耐受糖蛋白（Ｐｇｐ）的良好剂同样可以显著逆转ＶＣＲ对Ｍ％ＲＰ高表达的ＥＪ／ＭＲＰ细胞毒性作用,具有增加ＥＪ／ＭＲＰ细胞内ＤＮＲ的聚集百的作用。剂量越大作用越强;而Ｐｒｏｇ则无类似作用。结论：ＣｓＡ和Ｖｅｒ对人膀胱癌ＭＲＰ介导的ＭＤＲ具有良好的逆转作用。可通过增加细胞内的药物聚集和减少外排已进入细胞内的药物起作用。这种作用存在剂量依从关系。     

多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达的检测在原发性肝细胞癌中的临床意义

化疗在原发性肝癌以手术为主的综合治疗中发挥着重要作用 ,而多药耐药的产生可能是其临床化疗失败的原因之一。近来研究提示MRP基因过表达参与了癌细胞多药耐药的发生〔1〕,检测其表达可能具有重要的临床意义。本研究运用RT PCR和免疫组织化学技术 ,检测原发性肝细胞癌组织中MRP的表达 ,结合临床病理资料 ,探讨MRP基因表达在原发性肝细胞癌中的临床意义。1.材料与方法 :(1)标本 :RT PCR检测新鲜标本 2 5例 ,随机选自我院 1999年 9月～ 2 0 0 0年 3月间行手术切除、经病理证实的原发性肝细胞癌 ,并同时取得癌周 2cm处肝组织。免疫组…     

肾盂输尿管癌多药耐药指标的表达意义

目的　探讨多药耐药指标在肾盂输尿管癌中的表达及临床意义。　方法　应用免疫组织化学技术检测 5 1例肾盂输尿管癌标本P 糖蛋白 (P gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白(LRP)和谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)的表达。　结果　 5 1例标本P gp、MRP、LRP、GST π表达阳性率分别为 35 .3% ,39.2 % ,5 8.8%和 4 3.1% ;P gp表达随病理分级升高而升高 (P <0 .0 5 ) ,MRP、LRP表达随病理分级升高而降低 (P <0 .0 5 ) ;MRP与GST π表达明显相关 (P =0 .0 0 1,r =0 .4 5 9)。　结论　LRP是肾盂输尿管癌先天性多药耐药的主要指标 ,MRP与LRP更多地在低分级肿瘤中发挥耐药作用 ,P gp在高分级肿瘤MDR机制中占有较高比例 ;MRP与GST π表达在基因调控上可能存在共同的诱导机制。     

膀胱癌中缺氧诱导因子和多药耐药相关蛋白表达的组织芯片研究

目的 :利用组织芯片研究缺氧诱导因子 (HIF 1α)和多药耐药相关蛋白 (MRP)在膀胱癌中的表达及其相互间的关系。方法 :构建膀胱癌组织芯片 ,应用免疫组织化学SABC法检测 12 6例膀胱癌及正常组织中HIF 1α和MRP的表达。结果 :在 119例膀胱癌组织中 ,HIF 1α阳性表达率为 5 7.9% ,并随膀胱癌的临床分期升高而增加 (P <0 .0 1) ,尤其在G3 膀胱移行细胞癌中呈高表达 ,为 6 4 .6 % ,而且HIF 1α的表达与MRP的表达也密切相关 (P <0 .0 1)。结论 :HIF 1α的表达与MRP相关 ,抑制缺氧环境可提高膀胱灌注化疗效果。组织芯片技术在检测膀胱癌的原癌基因、抑癌基因及其相关蛋白质产物方面具有样本量大、检测指标多、耗时少和通量高等特点。