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相似文献
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1.
小鼠对大鼠异种皮肤移植耐受的诱导   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探索更为温和的适合临床应用的诱导异种移植耐受的方案。方法给小剂量照射( 300 rad)的 C57BL/6 (B6)小鼠静脉注射抗小鼠 CD4单抗 0.5 ml后输注 Lewis大鼠骨髓细胞 ,并联合应用腹腔注射环磷酰胺诱导耐受。于耐受诱导后 30 d对受体小鼠作耐受状态的检查,包括供体特异性皮肤移植、混合淋巴细胞反应( MLR)及迟发型超敏反应( DTH)。并通过过继转移实验、外源 IL- 2对耐受小鼠供体特异性 MLR的影响等进一步探讨耐受形成的机制。结果 Lewis大鼠的皮肤移植物在耐受 B6小鼠中存活期特异性延长, MLR及 DTH检查证明 B6小鼠对 Lewis大鼠的脾细胞产生特异性耐受,对无关第三者 DA大鼠及 BALB/c小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫应答。体内外过继转移实验表明 ,耐受不能被转移 ,未发现抑制细胞的存在。耐受小鼠供体特异的 MLR可以被外源 IL- 2逆转 ,说明耐受主要不是克隆排除,而与克隆不应答有关。结论应用低剂量照射、骨髓移植、环磷酰胺及抗 CD4单抗等方法法可以有效诱导出小鼠对大鼠的移植耐受。  相似文献   

2.
目的观察比较Tju103和CTLA4-Ig分别调节、诱导T淋巴细胞免疫耐受的作用.方法用经丝裂霉素处理的异基因正常BALB/c(H-2d)小鼠巨噬细胞做耐受诱导原,分别用Tju103和CTLA4-Ig体外训导、调节C57BL/6(H-2d)小鼠T淋巴细胞,通过增殖效应(单向混合淋巴细胞反应,MLR)和杀伤效应(MTT法),考察经训导的C57BL/6小鼠T淋巴细胞分别对BALB/c小鼠和CBA(H-2k)小鼠脾细胞以及EL9611(H-2d)红白血病细胞的增殖效应和杀伤效应的改变.结果经Yju103调节后,C57BL/6 小鼠T淋巴细胞对BALB/c和CBA小鼠脾细胞以及EL9611红白病细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显,未能诱导对已接触抗原(BALB/c小鼠)产生特异性免疫耐受.经CTLA4-Ig孵育后,C57BL/6 小鼠T淋巴细胞对这三种细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显;对已接触抗原呈现免疫耐受,而对第三种抗原(CBA小鼠)和EL9611白血病细胞保持反应性.结论在特异抗原存在下,Tju103和CTLA4-Ig均能明显抑制异基因小鼠T淋巴细胞增殖反应性和杀伤效应,但Tju103诱导非特异免疫抑制,而CTLA4-Ig诱导特异免疫耐受,更适合于诱导移植免耐受.  相似文献   

3.
目的:探索抗Ia单克隆抗体促进"细胞+环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)"系统诱导移植耐受的作用及其机制.方法:BALB/C(H-2d)小鼠经尾静脉注入C57BL/6(H-2b,B6)小鼠脾细胞,48 h后腹腔注射CP,接着两天分别经尾静脉注入抗小鼠Ia单克隆抗体500 μg,然后进行皮肤移植,并于耐受30 d对受体小鼠作混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)、迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)等耐受状态的检查.结果:B6小鼠的皮肤移植物在耐受BALB/C小鼠中存活期特异性延长,MLR和DTH检查证明BALB/C小鼠对B6小鼠的脾细胞产生特异性耐受,对无关第3者KM小鼠的脾细胞仍表现出强烈的免疫反应.机制研究发现,克隆不应答(anergy)和抑制细胞在耐受中起作用.结论:抗Ia单克隆抗体可明显促进"细胞+CP"诱导的异基因皮肤移植耐受.克隆不应答和抑制细胞是耐受的主要机制.  相似文献   

4.
目的:探讨抗T细胞受体(T cell receptor, TCR)αβ单抗和抗CD80单抗联合供体骨髓细胞输注方法在同种异基因小鼠皮肤移植耐受诱导中的作用.方法:第0天,向C57BL/6小鼠(受体)尾静脉输注2×108个BALB/c小鼠(供体)来源的骨髓细胞,同时腹腔注射抗TCRαβ单抗500 μg;第2天,向C57BL/6小鼠腹腔注射抗CD80单抗500 μg.第6天进行皮肤移植.在不同的时间对C57BL/6小鼠进行迟发型超敏反应测定和混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)分析,并进行MLR的白细胞介素-2(interleukin-2, IL-2)逆转实验、过继转移实验和嵌合体检查,探讨耐受形成的机制.结果:接受了抗TCRαβ单抗和抗CD80单抗联合供体骨髓移植的C57BL/6小鼠,供体皮肤移植物平均存活70 d;在迟发型超敏反应和混合淋巴细胞反应中均表现出显著的低反应性.IL-2逆转实验结果表明克隆不应答可能参与了移植耐受的形成.体内、体外过继转移实验均显示耐受C57BL/6小鼠脾细胞中存在抑制细胞的活性.嵌合体检查结果表明在耐受C57BL/6小鼠的胸腺和脾中均形成了混合嵌合体,嵌合体水平随时间下降.结论:抗TCRαβ单抗和抗CD80单抗联合大剂量供体骨髓细胞输注可以在组织相容性抗原完全不相同的成年小鼠间成功诱导出皮肤移植物的长期耐受.  相似文献   

5.
目的探讨供体NKT细胞静脉输注诱导移植耐受的作用及其机制。方法C57BL/6和BALB/c小鼠分别为供体和受体,建立皮肤移植模型。对照组:术后注射生理盐水;NKT组:术前静脉注射供体鼠NKT细胞(5×106个/只),术后腹腔注射生理盐水;CsA组:术后腹腔注射环孢素(CsA)(4mg/kg);NKT CsA组:手术前1日静脉注射供体鼠NKT细胞(5×106个/只),术后腹腔注射CsA(4mg/kg)。术后逐日观察移植皮肤存活情况及小鼠一般状况;术后14天对植皮BALB/c小鼠做混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)、迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)等确定耐受的状态;并通过过继转移实验及脾细胞中细胞因子mRNA表达情况,进一步探讨耐受形成的机制。结果采用此诱导方案,移植皮片存活时间明显延长,耐受可被过继转移,Th2型细胞因子IL-10、IL-4在耐受小鼠中明显升高。结论供体NKT细胞静脉输注能诱导异基因小鼠皮肤移植耐受,抑制细胞、Th1/Th2偏移在耐受中起了一定作用。  相似文献   

6.
本文用抗Thy-1.2单克隆抗体和补体在体外特异地去除C_(57)BL/6(H—2~b)小鼠骨髓中的T细胞,成功地对致死量照射的BALB/c(H—2~d)小鼠进行了异基因骨髓移植。移植后55天,异基因骨髓移植小鼠的免疫功能明显低于正常小鼠。在移植后45天,用每日100mg/kg剂量的刺五加多糖经腹腔连续给药10天,小鼠对胸腺不依赖抗原TNP-Ba的PFC反应以及对ConA和LPS增殖反应均较对照小鼠明显增加,但对胸腺依赖抗原SRBC的PFC反应以及BSA诱导的DTH反应无明显改善。  相似文献   

7.
皮肤移植耐受及其机制的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨静脉注射异基因脾细胞(SC)和抗T细胞受体(TCR)αβ单克隆抗体加腹腔注射环磷酰胺(CP)诱导的成年小鼠异基因皮肤移植耐受及其形成的机制.方法对C57BL/6(H-2b,B6)小鼠经尾静脉注射BALB/c小鼠(H-2d)脾细胞,2d后腹腔注射CP,之后第2、4天分别经尾静脉注射抗小鼠-TCRαβ的单克隆抗体,然后进行皮肤移植.分组(1)未处理B6小鼠,皮肤供者为BALB/c小鼠;(2)未处理B6小鼠,皮肤供者为KM小鼠;(3)SC+CP+抗TCRαβ单抗处理的B6小鼠,皮肤供者为BALB/c小鼠;(4)SC+CP+抗TCRαβ单抗处理的B6小鼠,皮肤供者为KM小鼠.每组各5只B6小鼠通过嵌合体检查、过继转移实验及外源白细胞介素2(IL-2)对耐受小鼠供体特异性混合淋巴细胞反应(MLR)的影响,探讨耐受形成的机制.采用成组t检验进行统计学分析.结果BALB/c小鼠的皮肤移植物在耐受B6小鼠中存活66.3d,与各对照组比较,差异有显著意义(P<0.001),流式细胞分析仪分析结果表明,耐受小鼠胸腺和脾脏内均形成了微量混合嵌合体,耐受诱导后第15天、35天和第70天胸腺内供体来源细胞嵌合水平依次为2.67%,1.61%,0.47%,脾脏中依次为7.66%,5.99%,3.87%;体、内外细胞转移实验均未显示耐受小鼠脾细胞中存在抑制细胞活性;耐受小鼠供体特异的MLR受到抑制,3H-TdR掺入值为4725cpm±406cpm,但外源IL-2的加入使掺入值增加到18175cpm±3642cpm(P<0.01),说明耐受小鼠MLR的抑制可被部分逆转.结论嵌合体的形成和克隆不应答(anergy)是耐受形成的主要机制.  相似文献   

8.
目的 观察异体小鼠骨髓细胞在不同基因型辐照小鼠体内的分布迁移规律和归巢特点.方法 分离萤火虫荧光素酶转基因C57BL/6J小鼠的骨髓细胞,分别输入γ射线辐照的C57BL/6J小鼠、CB6F1小鼠和BALB/c小鼠体内;在不同时间点,以活体成像仪观察供体骨髓细胞在受体内的动态分布和迁移规律.结果 供体骨髓细胞输注1h后,BALB/c小鼠肺脏中出现荧光且强度最强,与C57BL/6J小鼠和CB6F1小鼠肺脏的荧光强度差异有统计学意义(P=0.000);24 h后肺脏中荧光信号消失;48 h后在肺脏中又检测到荧光信号并逐渐增强.供体骨髓细胞输注4h后,各组小鼠均可在脾脏中检测到微弱荧光,C57BL/6J和CB6F1小鼠脾脏中荧光信号强度的差异无统计学意义(p=0.4051),而BALB/c小鼠和C57BL/6J、CB6F1小鼠脾脏的荧光强度差异有统计学意义(P=0.0012,P=0.001);48 h后各组小鼠脾脏中荧光均有增强,BALB/c小鼠脾脏中的荧光信号强度显著强于C57BL/6J和CB6F1小鼠(P=0.000).供体骨髓细胞输注24 h后各组小鼠肠系膜中均可检测到较弱的荧光信号,48 h后肠系膜中的荧光强度逐渐增强,BALB/c小鼠肠系膜表达的荧光强度强于CB6F1、C57BL/6J小鼠,差异有统计学意义(P=0.000),72 h后肠系膜的荧光强度继续增强,BALB/c小鼠肠系膜的荧光强度强于CB6F1小鼠,差异有统计学意义(P=0.000),CB6F1小鼠肠系膜的荧光强度强于C57BL/6J小鼠,但是两者之间的差异无统计学意义.结论 异体骨髓细胞通过尾静脉输入基因型相合、半相合和全不相合辐照小鼠体内,细胞均首先分布到肺脏,然后依次向肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结迁移,最后定居于骨髓微环境后进行造血重建.异基因骨髓细胞输入基因型全不相合小鼠体内后,在脾脏和肠系膜中的分布要多于基因型相合和半相合的小鼠.  相似文献   

9.
自1981年Siegel等提出红细胞免疫系统新概念后,许多学者在红细胞免疫功能及其调控系统、红细胞免疫与疾病的关系等方面进行了广泛地研究。我们对BALB/c及C_(57)BL/6J两 个品系小鼠的红细胞免疫功能进行了初步测定。用本中心一级近交系小鼠BALB/cola及C_(57)BL/6J各12只,体重15~20g,雌雄各半,用郭峰的“红细胞C_3b受体及免疫复合物花环试验”方法分别测定花环形成百分率。结果为:在BALB/cola,C_3b花环形成百分率雌雄平均为6±0.83,IC为2.83±0.78,合计为8.83;在C_(57)BL/6J,C_3b为5.46±0.89,IC为2.83±0.78,合计为8.29。  相似文献   

10.
目的 为了考察不同品系的小鼠囊胚对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响,进而提高通过在C57BL/6胚胎干细胞中同源重组制作基因打靶小鼠的效率。 方法 本研究除了选取近交系B6(Cg)-Tyrc-2J和BALB/c品系,还选了封闭群ICR作为囊胚供体鼠,通过在TLX3、Ai3K和SL三个不同基因修饰ES细胞的种系嵌合实验中,平行比较三者的囊胚利用率、嵌合鼠获得效率以及种系遗传效率等三个方面,并进一步针对囊胚来源这一因素对效率的影响进行统计学分析。 结果 本研究中三种ES细胞均未能通过B6(Cg)-Tyrc-2J品系囊胚的注射获得种系遗传。而BALB/c品系与ICR品系相比,囊胚利用率明显低于ICR品系(P< 0.05);嵌合鼠获得效率方面,BALB/c与ICR相当(P= 0.115);而种系遗传效率方面,BALB/c品系显著高于其他品系(P< 0.01)。 结论 BALB/c品系在C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率方面确实具有优势,然而,由于BALB/c囊胚较难获得,并且存在发育延迟和透明带脆性高等问题,而ICR品系在囊胚获得和利用方面的效率明显高于BABL/c,并且也可以支持C57BL/6胚胎干细胞的种系遗传,因此也是C57BL/6胚胎干细胞囊胚注射中较好的选择。  相似文献   

11.
重组人白细胞介素-1α(rhI1-1α,IL-1)对C3H和BALB/c小鼠的辐射防护作用有明显的种属差异。在C3H小鼠产生防护作用的IL-1剂量显著高于BALB/c小鼠的剂量.IL-1能增加BALB/c和C3H小鼠早期多能造血干细胞(CFU—S_(12))的数目,但C3H小鼠的CFU—S_(12)对IL-1的反应性低于BALB/c小鼠。BALB/c小鼠的骨髓基质细胞层在无TL-1存在时能很好地维持骨髓细胞的生长,而C3H小鼠的骨髓基质细胞层需有IL-1的存在才能维持骨髓有核细胞的生长。上述事实提示,IL-1对C3H和BALB/c小鼠的辐射防护作用存在种属差异。  相似文献   

12.
Comparativestudiesonradioprotectionofrecombinanthumaninterleukin-1inC_3HandBALB/cmiceWuShuguang(吴曙光);TadaakiMiyamoto(宫本忠昭)(1I?..  相似文献   

13.
目的 观察自制细胞扩散匣的免疫隔离作用及匣内异基因瘤细胞的在体生长情况。方法 通过PEG介导制备SP2/0-BALB/c小鼠脾细胞杂交细胞。注入BALB/c小鼠和C57BL/6(B6)小鼠腹腔,观察腹水产生和瘤体形成,了解杂交细胞MHC抗原携带情况。再将含杂交细胞的微孔膜扩散匣分别植入BALB/c和B6小鼠腹腔,观察匣内细胞生存情况。结果 腹腔注射杂交细胞后2个月内,BALB/c小鼠产生血性腹水,或形成瘤体,B6小鼠未见腹水产生和瘤体形成。腹腔植入杂交瘤细胞扩散匣后30d和101d,两组动物体内扩散匣均被大网膜或肠系膜包裹,外壁可见新生血管,匣内形成瘤体,但不能充满整个匣腔。结论 SP2/0细胞与BALB/c小鼠脾细胞融合后可转变为携带BALB/c品系MHC抗原的永生细胞,在异基因宿主(B6小鼠)体内不能存活。自制微孔膜扩散匣能有效起到免疫隔离作用。微孔膜外表面能够形成新的营养血管,支持匣内细胞长期生存与增殖。  相似文献   

14.
二种纯系小鼠动物模型应用于布鲁氏菌病传染免疫的研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
以细菌学、血清学、细胞免疫学及病理组织学等方法,较系统地应用牛、羊和猪布鲁氏菌毒种建立二个纯系小鼠(BALB/c及C57/BL)布鲁氏菌病动物模型。发现BALB/c感染布鲁氏菌的过程较明显,尤其用牛种544A皮下感染时更为明显,表明BALB/c小鼠可作为慢性感染动物模型。抗体形成细胞(PFC)的动态观察表明,三种布鲁氏菌对小鼠PFC的形成均有不同程度的抑制作用,其中以羊种布鲁氏菌的抑制作用最为明显。用布氏菌素进行皮内变态反应的观察发现,BALB/c小鼠对布氏菌素的皮内变态反应不敏感;而C57/BL小鼠则较为敏感,但在感染后第45天左右有一免疫抑制阶段。本研究为国内外广泛利用纯系小鼠作为布鲁氏菌传染免疫的研究提供了基础。  相似文献   

15.
目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标.方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测.结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异显著;普通级的CD4^+/CD8^+指标雌雄之间及普通级与清洁级的CD4^+/CD8^+差异显著.结论清洁级BALB/c近交系小鼠具有比较稳定的生物学特性.  相似文献   

16.
孙玉红  朱朝敏  谢尧 《医学争鸣》2004,25(24):2254-2257
目的:探讨人工合成硫代修饰的含CpG基序的寡脱氧核苷酸(ODN)作为佐剂对HBsAg诱导BALB/c和HBV转基因小鼠产生免疫应答的影响. 方法: 用人工合成CpG ODN与血源HBsAg联合免疫BALB/c和HBV转基因C57BL/6J小鼠,采用ELISA方法观察小鼠血清HBsAg及抗-HBs水平,用ELISPOT方法判断CpG ODN对HBsAg免疫小鼠脾T淋巴细胞分泌细胞因子的影响. 结果: CpG ODN联合HBsAg免疫BALB/c小鼠较HBsAg单独注射组同期抗-HBs滴度明显提高,尤其在首次免疫后6、8、12 wk,2组比较差异显著(P<0.05),联合免疫较CpG ODN单独免疫自首次免疫后4 ~16 wk差异显著(P<0.05).与HBsAg,CpG ODN 单独免疫比较,联合免疫能使HBsAg特异性分泌IFN- γ T细胞分别增加3或9倍;CpG ODN,HBsAg联合免疫可诱导转基因小鼠产生抗-HBs,随时间延长,抗体滴度逐渐升高,并能使更多小鼠产生抗体,而单用HBsAg组、CpG ODN组均不能诱导抗-HBs的产生,免疫后各组血清HBsAg浓度较免疫前明显下降(P <0.05),但组间无明显差别(P>0.05),与HBsAg,CpG ODN 单独免疫比较,联合免疫能使HBsAg特异性分泌IFN- γ T细胞分别增加3或11倍. 结论: CpG ODN作为佐剂可增强HBsAg诱导BALB/c小鼠产生体液及细胞免疫应答,CpG ODN ,HBsAg联合免疫可打破HBV转基因小鼠对HBsAg免疫耐受,可望成为慢性乙型肝炎的有效预防和治疗性疫苗.  相似文献   

17.
Objective To construct a eukaryotic expression system with pcDNA3-PfCSP/Hela for the Circ umsporozoite protein (CSP) gene of Plasmodium falciparum (P.falciparum), t o observe the immune responses in BALB/c mice induced by the expressed proteins .Methods The recombinant plasmid pcDNA3-PfCSP was transformed into the Hela cell line. The expressed protein was isolated and analyzed by using SDS-PAGE and used for immunization of BALB/c mice by subcutaneous, intravenous, and intraperitone al adminstration.Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA), Dot-ELISA, Wester n blot, T lymphocyte proliferation test, natural killer cell(NKC) activity assay , and CD4(+) and CD8(+) T cell detection were used for observation of humoral an d cellular immune responses.Results Immune sera strongly reacted with the expressed protein, antibody titer was up to 1∶6400 as detected by ELISA.Western blot analysis revealed a specific b and at 38.3 Kda.When the spleen cells of normal and immunized BALB/c mice we re specifically stimulated with expressed protein, the optical densities were 0 .12±0.03 and 0.34±0.04, respectively.The latter were significantly highe r than the former (P&lt;0.01).We used the MTT colorimetric assay to measure NKC activity of mice spleen.The results showed that the NKC activity of immuni zed BALB/c mice was remarkably higher than that of the controls (P&lt;0.05). CD4(+) and CD8(+) T cells were detected by using monoclonal antibody immunofluor escence methods.The results showed that the percentage of CD4(+) and CD8(+) T cells of immunized group were significantly higher than that of control group ( P&lt;0.05).Conclusions The humoral and cell-mediated immune responses and elevated NKC activity to pr oducts made with a eukaryotic expression system could be specifically detected i n BALB/c mice.These findings indicate that the expressed protein could enhance the immune function in mice.  相似文献   

18.
Immune responses to the expressed products of the CSP antigen gene of Plasmondium falciparum south in China isolate FCC1/HN in Hela cell@Yu XB @Liu YW @Luo SH  相似文献   

19.
目的 研究裸小鼠淋巴结的解剖学和组织学特点。方法 使用手术显微镜解剖20只BALB/c裸小鼠和20只BALB/c小鼠,通过免疫组织化学方法比较了两者淋巴结中T淋巴细胞和B淋巴细胞表达的不同。结果 平均每只裸小鼠中包含23个淋巴结和一组大型淋巴结群。裸小鼠颈部淋巴结分布密度较高,其中颌下淋巴结及颈浅淋巴结在裸小鼠中大多数为2个(构成比分别为95%和90%),而在小鼠中大多数为4个(构成比分别为95%和90%),两者差异有统计学意义。无论小鼠还是裸小鼠的颈深淋巴结均为2个(构成比分别为100%和95%),两者差异无统计学意义。裸小鼠淋巴结中CD3阳性的T淋巴细胞减少。细胞膜和细胞质着色的CD3阳性表达的T细胞在裸小鼠的表达阳性率为15%,在小鼠的表达阳性率为100%,两者表达的差异有统计学意义。细胞膜阳性表达CD20的B细胞在裸小鼠中的阳性率为95%,在小鼠中的阳性率为100%,两者表达的差异无统计学意义。结论 裸小鼠淋巴结分布的解剖图对于初学者有一定的帮助,裸小鼠颈部淋巴结密度较高的解剖学特点和缺乏CD3阳性的T淋巴细胞将有助于更好地理解裸小鼠的淋巴结转移机制。  相似文献   

20.
In the p~ess of allograft rejechon, the interactionbetween multiple adhesitin molecules Promotes the development Of the inflallnnatory ~on that leads to aliceddestruchon. Ih both aamal and hUInan models of aliced~splantation, the expression of adheSion molecules, including letlkocyte funchon-associated antigen-l (on-l ),intel'Cellular adhesion molecule-l (ICal-l ), vascularcell adhesion molecule~l (VCAM~l) and CD44 over thesurfaCe of the endothelial cells has been shown tO increasedwi al…  相似文献   

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