Effect of cuprizone-induced demyelination on callosal oligodendrocytes and motor function in mice

目的 研究Cuprizone (CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞变化情况,并探讨对小鼠运动能力的调控特点.方法 以正常饲料喂食的6周龄雄性小鼠作为对照,实验组用含0.2％ Cuprizone的混合饲料持续喂食6周龄雄性小鼠6周,诱导中枢神经系统脱髓鞘.用LFB组化和MBP免疫组化技术鉴定脑胼胝体区的脱髓鞘改变,确认模型的稳定可靠性.结合MBP和CC-1免疫荧光双标技术,观察脱髓鞘的胼胝体区少突胶质细胞变化情况.并通过体质量监测观察小鼠的整体功能状态变化,进一步采用行为学实验技术(旋转棒测试和旷场实验)观察对小鼠运动能力的调控效果和特点.结果 与正常组相比,Cuprizone诱导脱髓鞘6周后,脑胼胝体区的髓鞘缺失明显,髓鞘结构蛋白MBP含量明显减少[ (0.395±0.019)vs (0.242±0.016);P＜O.01];应用图像分析和统计学分析发现,成熟少突胶质细胞的胞体(CC-1+)和(MBP+)呈平行性减少[(42.62±2.48)vs (25.04±3.68)/100 μm2;P ＜0.05];在实验监测过程中,正常小鼠体质量呈上升增加,而CPZ组小鼠体质量先急剧下降,后趋于平稳并稍有恢复;同时行为学实验结果表明,小鼠的运动协调能力、自发活动能力都有明显减弱[( 156.17±22.17)vs(78.50±7.80);(240.91±29.52)vs(163.31±21.05);P＜0.05],但是对小鼠的探索习性并无明显影响(3.7％/5.4％ vs3.6％/5.3％;P＞O.05).结论 利用Cuprizone诱导小鼠脱髓鞘改变与少突胶质细胞减少有关,其主要影响小鼠的运动协调能力和自发活动而不影响探索习性等高级功能.     

Olig2在cuprizone介导的脱髓鞘动物模型中的表达变化

目的 探讨Olig2在cuprizone 诱导的急性脱髓鞘动物模型中的表达变化规律。方法 应用含0.2% cuprizone 饲料饲育小鼠, 通过调控饲育时间, 造成神经脱髓鞘及髓鞘再生, 使用免疫荧光染色和实时定量PCR(qRT-PCR)的方法观察模型髓鞘脱失后及髓鞘再生2周后Olig2、少突胶质细胞碱性髓鞘蛋白 (MBP)及星形胶质细胞神经胶质酸性蛋白（GFAP）的表达变化。 结果 Cuprizone 饲育6周后, 动物胼胝体白质内髓鞘脱失严重, 在恢复正常饲料后, 髓鞘逐渐恢复正常结构。正常小鼠大脑Olig2低水平表达。髓鞘脱失后Olig2、GFAP表达增高,并可见Olig2 / GFAP 细胞,MBP表达明显减低。髓鞘再生2周后 Olig2表达降低,MBP、GFAP表达增高。结论 Olig2基因在cuprizone诱导的脱髓鞘模型中的表达变化,提示 Olig2可能参与祖细胞向有活性的星形胶质细胞的分化过程,并与胶质瘢痕的形成有关。     

Activation of intracerebral astrocytes in a demyelination model of mice at different ages

目的 观察星形胶质细胞在不同年龄(青壮年及中老年)cuprizone(CPZ)脱髓鞘小鼠模型中的激活特点,探讨星形胶质细胞激活与髓鞘脱失可能存在的内在联系.方法 选取6周龄(青壮年)及9月龄(中老年)雄性C57 BL/6小鼠建立CPZ导致的急性脱髓鞘动物模型,经0.2％ CPZ处理6周后,通过体质量测量及卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察模型建立是否成功,利用免疫组织化学染色检测实验组(CPZ)和对照组(CTL)小鼠胼胝体(corpus callosum,CC)及皮层( cortex,CTX)区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达变化,并通过Western blot方法进一步检测GFAP及MBP蛋白表达差异.结果 0.2％ CPZ处理6周后,青壮年CPZ小鼠于胼胝体及皮层区GFAP阳性细胞数显著增多(P＜0.01),同时伴有显著的MBP表达下降(P＜0.01);中老年小鼠于胼胝体区GFAP阳性细胞数增多较明显(P＜0.05),并伴有MBP表达明显下降(P＜0.05);GFAP阳性细胞数的增多和MBP表达下降均表现为青壮年组更加明显(P＜0.01).结论 星形胶质细胞的激活于青壮年小鼠更加明显,并与髓鞘损伤呈现出一定的正相关性,星形胶质细胞激活可能是参与髓鞘损伤的重要原因.     

不同年龄小鼠脱髓鞘动物模型中脑内星形胶质细胞激活情况的观察

目的观察星形胶质细胞在不同年龄(青壮年及中老年)cuprizone(CPZ)脱髓鞘小鼠模型中的激活特点,探讨星形胶质细胞激活与髓鞘脱失可能存在的内在联系。方法选取6周龄(青壮年)及9月龄(中老年)雄性C57BL/6小鼠建立CPZ导致的急性脱髓鞘动物模型,经0.2%CPZ处理6周后,通过体质量测量及卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察模型建立是否成功,利用免疫组织化学染色检测实验组(CPZ)和对照组(CTL)小鼠胼胝体(corpus callosum,CC)及皮层(cortex,CTX)区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达变化,并通过Western blot方法进一步检测GFAP及MBP蛋白表达差异。结果 0.2%CPZ处理6周后,青壮年CPZ小鼠于胼胝体及皮层区GFAP阳性细胞数显著增多(P<0.01),同时伴有显著的MBP表达下降(P<0.01);中老年小鼠于胼胝体区GFAP阳性细胞数增多较明显(P<0.05),并伴有MBP表达明显下降(P<0.05);GFAP阳性细胞数的增多和MBP表达下降均表现为青壮年组更加明显(P<0.01)。结论星形胶质细胞的激活于青壮年小鼠更加明显,并与髓鞘损伤呈现出一定的正相关性,星形胶质细胞激活可能是参与髓鞘损伤的重要原因。     

少突胶质细胞前体细胞在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型中的变化特点

目的观察神经胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘模型中的变化特点,探讨其与髓鞘再生的内在联系。方法选8周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、急性脱髓鞘组及髓鞘再生组。正常组每天饲养正常鼠粮;模型组小鼠饲养含有0.2%CPZ的混合鼠粮,连续饲养6周;髓鞘再生组在连续喂养6周CPZ鼠粮后,换用正常鼠粮2周。实验过程中通过卢卡斯快蓝染色及透射电镜技术判断脑组织胼胝体区髓鞘脱失及恢复程度,通过免疫组化及免疫荧光技术检测脑内NG2,Olig2和GFAP的表达来评估少突胶质细胞前体细胞及星形胶质细胞的变化特点。结果与正常组相比,急性脱髓鞘组胼胝体髓鞘脱失明显,Olig2、GFAP表达明显升高(P<0.05),侧脑室旁外侧隔核(LSD)NG2升高水平较胼胝体区(CC)更为明显(P<0.05,P<0.01);髓鞘再生组髓鞘有所修复,Olig2、GFAP表达仍高于正常组,但较急性脱髓鞘组有一定程度降低(P<0.05)。结论髓鞘损伤期少突胶质细胞前体细胞不能有效迁移至受损部位,修复期Olig2表达降低,星形胶质细胞持续高水平表达可能是髓鞘修复障碍的影响因素。     

中药益肾平肝方对脱髓鞘模型小鼠社会交互行为的影响及作用靶点

目的 观察中药益肾平肝方对精神分裂症的治疗效果以及探究其作用的潜在靶标。方法 实验动物采用成年雄性C57BL/6小鼠,6周龄,实验分为3组,每组10只：对照组,cuprizone（CPZ）模型组和益肾平肝方（Yishenpingganfang,YSPGF）治疗组,实验共进行6周。社会交互实验以及组织采集在最后一次给予中药治疗24h后进行。采用社会交互实验以评价YSPGF对小鼠精神分裂症样行为的影响;采用髓鞘特异性免疫组化和Western blotting观察成熟少突胶质细胞及少突胶质细胞前体细胞的表达变化。结果 CPZ模型组小鼠于第3周出现明显体质量下降（P<0.05）,YSPGF治疗组与CPZ模型组相比,体质量差异无统计学意义（P>0.05）;社会交互实验：Trial 1实验中：对照组小鼠围绕陌生小鼠1（Stranger 1）的时间明显大于围绕空杯子（Empty）的时间（P<0.001）。YSPGF组与对照组类似,围绕Stranger 1与Empty的时间差异有统计学意义（P<0.01）。但模型组小鼠围绕Stranger 1与Empty的时间之间差异无统计学意义（P>0.05）。Trial 2实验中：对照组小鼠对新加入的Stranger 2较之已经熟悉的Stranger 1更加感兴趣（P<0.001）第;成熟少突胶质细胞特异性抗体髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）免疫组织化学染色和Western blotting显示：CPZ模型组小鼠成熟胶质细胞/髓鞘在胼胝体有一定程度缺失,YSPGF组与CPZ模型组相比,髓鞘脱失有所好转。进一步实验显示：少突胶质细胞前体细胞血小板源生长因子受体α（platelet-derived growth factor receptor-alpha,PDGFR-α）在CPZ诱导脱髓鞘后有反应性增生。结论 中药YSPGF可以改善CPZ诱导小鼠的社会退缩,改善少突胶质细胞/髓鞘结构的损害。     

大麻素WIN55,212-2对双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型髓鞘修复作用的研究

目的 探讨大麻素WIN55,212-2对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘模型的治疗作用.方法 取6周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、第2周WIN55,212-2给药组与DMSO对照组、第4周WIN55,212-2给药组及DMSO对照组,每组10只.正常组每天喂养普通饲料,CPZ模型持续喂养含有0.25％ CPZ的混合饲料,在第2周和第4周时进行WIN55,212-2注射,DMSO对照组则在相同条件下注射10％的DMSO,继续喂养CPZ混合饲料.于第3、5周末通过体质量变化观察整体状态;旋转棒实验观察小鼠运动功能,利用LFB和MBP免疫组化技术染色观察胼胝体区域髓鞘,GFAP染色观察星形胶质细胞.结果 与DMSO对照组相比,WIN55,212-2给药组模型体质量下降趋势明显减缓(P＜0.05);旋转棒实验中,WIN55,212-2给药组小鼠运动功能仍弱于正常小鼠,但是与DMSO对照组相比,WIN55,212-2给药组运动功能明显改善(P＜0.01);LFB染色结果显示DMSO对照组髓鞘脱失明显,WIN55,212-2给药组介于正常与DMSO对照组之间,MBP染色进一步证实了这一结果;GFAP免疫组化实验结果显示DMSO对照组CPZ模型小鼠胼胝体区域GFAP阳性细胞广泛表达,而经过WIN55,212-2治疗的小鼠GFAP表达量明显低于DMSO对照组(P＜0.05).结论 大麻素WIN55,212-2可通过降低髓鞘的脱失和星形胶质细胞的活化,对脱髓鞘病变具有一定缓解的作用.     

梓醇对大鼠慢性脑缺血白质损伤的保护作用

目的 初步探讨梓醇对慢性脑缺血所致白质损伤的保护作用及机制.方法 成年雄性Wistar大鼠24只,分为4组:假手术组,缺血组,生理盐水组和梓醇组.通过结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性脑缺血模型,同时腹腔注射5 mg/kg 梓醇或生理盐水予以治疗,每天1次,连续10 d.术后30 d处死,然后利用卢卡斯快蓝(luxol fast blue, LFB)染色法和免疫组织化学技术分别观察梓醇对脑白质髓鞘以及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、腺瘤性息肉蛋白(adenomatus polyposis coli,APC(CC-1)和星形胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidity protein,GFAP)表达的影响.结果 与假手术组比较,在缺血组和生理盐水组,LFB染色变浅[(37 259.6±6 626.6)、(36 554.4±7 865.7) vs (90 470.5±5 004.6)],MBP表达下降[(24 016.5±3 794.8)、(23 923.6±4 605.1) vs (65 055.4±6 839.9)],CC-1阳性的少突胶质细胞(oligodendrocytes,Ols)减少[(33.0±9.6)、(32.0±9.8) vs (100.0±11.2)],GFAP阳性的星形胶质细胞增多[(52.0±7.4)、(50.0±9.4) vs (14.0±6.6)],均有显著差异(P<0.01);梓醇治疗后能显著地减轻白质损伤,它能使LFB染色加深(86 687.6±6 619.1),MBP表达升高(61 604.5±6 319.9), CC-1阳性细胞数增加(91.0±8.4),GFAP阳性细胞数减少(17.0±7.8),与生理盐水组比较均有显著差异(P<0.01).结论 梓醇可通过抑制星形胶质细胞的增生进而抑制炎症反应来保护慢性脑缺血所致的白质损伤.     

两种髓鞘染色方法在Cuprizone诱导脱髓鞘小鼠模型中的比较

目的比较2种神经髓鞘染色方法在Cuprizone小鼠模型脑组织中脱髓鞘的形态学变化,为实验诊断提供病理依据。方法将Cuprizone掺入饲料中喂食小鼠4周,造成神经脱髓鞘模型。取脑后切片,分别用牢固蓝(Luxol Fast Blue)和油红O两种染色方法观察脑纹状体和海马两个切面胼胝体髓鞘脱失变化。结果牢固蓝和油红O两种染色方法均可显示Cuprizone模型小鼠脑内胼胝体部位有脱髓鞘发生,但在纹状体切面油红O染色法能清晰显示髓鞘脱失和炎性细胞浸润,而牢固蓝染色法显示髓鞘脱失与周围组织结构界限不明显。结论与牢固蓝染色法相比,油红O染色法能更清晰显示脱髓鞘,颜色对比明显,是一种简单易行的神经髓鞘染色方法。     

双环己酮草酰二腙诱导精神分裂症小鼠模型胼胝体有髓神经纤维脱髓鞘的定量观测

目的 进一步研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导精神分裂症动物模型胼胝体内有髓神经纤维的改变及与行为学改变之间的关系.方法 19只雄性C57BL/6小鼠被分为2组,空白对照组(n=10)和CPZ处理组(n=9),分别给予正常鼠饲料和混有0.2％(质量分数)CPZ的鼠饲料6周,运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、探孔实验和转棒实验检测小鼠的行为学改变,运用免疫组化、透射电镜、体视学方法研究小鼠的胼胝体和其内有髓神经纤维的改变.结果 CPZ处理组小鼠在行为学实验中表现为:旷场实验中央区活动增多,高架十字迷宫开臂内活动增加(P＜0.05),提示CPZ处理小鼠的焦虑行为减少;学习记忆能力、运动能力和基本探索行为并未受到影响(P＞0.05).透射电镜研究发现CPZ模型小鼠胼胝体存在有髓神经纤维脱髓鞘改变.透射电镜和体视学研究发现,CPZ模型小鼠胼胝体体积[(12.66±1.07)mm3]较空白对照组[(13.53 ±2.79)mm3]无显著性下降(P＞0.05),但CPZ模型小鼠胼胝体有髓神经纤维长度密度和总长度[(0.70±0.17) km/mm3和(9.06±2.56)km]均较空白对照组[(1.47±0.17) km/mm3和(19.75 ±3.70)km]显著下降(P＜0.05).结论 CPZ模型可以出现类似精神分裂症样症状且胼胝体内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变.     

Effect of Fasudil on Remyelination Following the Cuprizone-Induced Demyelination in Male C57BL/6 Mice

Background Multiple sclerosis (MS) is an autoimmune, inflammatory demyelinating disease of the central nervous system (CNS) characterized by de-/ remyelination, neuroinflammation and oligodendrocyte loss. Although a greater understanding of MS have increased acquaintance of the pathogenesis and pathophysiology, the exploration of treatment is still challenging. Fasudil, one of the most thoroughly studied Rho kinase (ROCK) inhibitors, has been shown to have effects in neurodegenerative diseases. However, the effect of Fasudil on preventing the progression of the demyelination in MS has not been evaluated. Cuprizone (CPZ)-induced demyelination is a model used to study de-/ remyelination in the CNS. Some aspects of the histological pattern induced by CPZ are similar to MS. The aim of the study is to investigate the effect of Fasudil on CPZ-induced demyelination, and to explore the mechanisms for the possible remyelination. Materials and Methods Male C57BL/6 mice (10–12 weeks old) were assigned into normal group, fed a normal diet; CPZ group, fed CPZ and intraperitoneally (i.p.) injected with normal saline after 4 weeks for consecutive 2 weeks; Fasudil-treated CPZ group, which were i.p. injected with Fasudil (40 mg/kg/day) after 4 weeks for consecutive 2 weeks. All groups were assessed by Elevated plus-maze (EPM) test and Pole test at the end of the experiment. For examing the extent of demyelination, Luxol Fast Blue (LFB) staining, Black Gold II and myelin basic protein (MBP) immunohistochemistry staining were used for slides of brains. Splenic MNCs were fixed and stained with the following antibodies: Alexa Fluor B220, FITC-CD4/PE-IFN-γ, FITC-CD4/PE-IL-17. At least 10, 000 events were collected using flow cytometer. Results Following CPZ-exposure, mice presented a lower density of LFB, Black Gold II and MBP expression, loss of mature oligodendrocytes. Spleen atrophy was observed in CPZ-group compared to normal mice, and we firstly found that CPZ feeding induced the formation of MOG antibody. Fasudil treatment improved behavioral abnormality, promoted remyelination, inhibited spleen atrophy and production of MOG antibodies, prevented the infiltration of peripheral T cells, B cells, macrophages, and declined the neuroinflammation by inhibiting Iba1+iNOS+, Iba1+NF-κB+ microglia. Fasudil treatment also reduced the levels of IL-1β, IL-6 and TNF-α. Discussion In this study, we demonstrated that demyelinating model was successfully established. Then we tested whether Fasudil plays a remyelinating role in this model. Spleen atrophy was observed after CPZ-feeding compared to normal mice. Previous studies have shown that splenic atrophy in experimental stroke may contribute to brain injury possibly through the release of inflammatory mediators and spleen-derived inflammatory cells to the circulation and migration into the brain, which aggravate the brain inflammatory response and led to secondary injure. At present, we lack direct evidence to elucidate the mechanisms for spleen atrophy in CPZ-induced demyelination. We firstly found that CPZ-feeding induced the formation of MOG antibody. Recent study indicated that BBB hyperpermeability precedes demyelination in CPZ-demyelinating model. Another study suggested that debris of damaged cells in the CNS may present as antigens after penetrating the BBB, giving rise to autoantibodies. Therefore, it is possible that the myelin debris produced the destruction of myelin sheath can enter the blood circulation and stimulate the immune response of T and B cells. We found that MOG antibody was elevated in the supernatant of cultured plenocytes, indicating that the MOG antibodies were derived from peripheral immune cells. Our results showed that the level of MOG antibody in the brain homogenate of CPZ-treated mice was higher than that of normal mice, suggesting that antibodies can enter brain tissue and anti a-synuclein antibody was negative, which indicate that anti MOG antibody is a specific antibody. In our study, MOG antibody was capable of being detected in the brain of CPZ-treated mice, providing a possibility for specific MOG antibody-mediated oligodendrocyte damage. CPZ induced a wide range of Iba-1+ microglia, which was inhibited by Fasudil. These results suggest that the suppression of inflammatory microenvironment may contribute to the remyelination. In conclusion, the administration of Fasudil promoted remyelination by multiple mechanisms.     

脑瘫患儿血清神经元特异性烯醇化酶及髓鞘碱性蛋白浓度的变化及其临床意义

目的: 探讨脑瘫患儿血清神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)和髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）水平的变化及其临床意义。方法: 选取进行康复治疗的符合脑瘫诊断标准的脑瘫患儿46例（脑瘫组）,同时选取性别、年龄与脑瘫组患儿匹配的健康儿童45名作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测健康组儿童体检时及脑瘫组患儿治疗前、常规康复治疗3个月后的血清NSE和MBP浓度。采用脑瘫粗大运动功能分级系统（GMFCS）和粗大运动功能88项量表（GMFM 88）对脑瘫组患儿治疗前、后的粗大运动功能进行分级和评估。结果： 健康组儿童血清NSE、MBP浓度分别为（6.77±2.08）μg/L、（0.38±0.10）μg/L;脑瘫组患儿治疗前血清NSE、MBP浓度分别为（16.26±2.94）μg/L、（1.21±0.41）μg/L,治疗3个月后浓度分别为（13.56±2.29）μg/L、（0.85±0.33）μg/L;脑瘫组患儿治疗前、后的GMFM 88评分分别为（132.33±81.60）分、（147.07±83.13）分。健康组儿童的NSE、MBP浓度与年龄之间均无显著相关性（P＞0.05）,而脑瘫组患儿治疗前的NSE、MBP浓度与年龄之间均呈负相关(P＜0.05)。脑瘫组儿童治疗前的NSE、MBP浓度均明显高于健康组(均P＜0.05)。脑瘫组治疗前的NSE、MBP浓度与脑瘫粗大运动功能分级（GMFCS）之间均呈正相关(P＜0.05),与GMFM 88评分之间均呈负相关(P＜0.05)。脑瘫组治疗前、后组内NSE、MBP浓度、GMFM 88评分间的差异均具有统计学意义(P＜0.05)。 结论： 脑瘫患儿血清NSE和MBP浓度较健康儿童显著升高,随年龄增加而降低,且与脑瘫的障碍程度及粗大运动功能相关。     

Research advancements of axonal remyelination in spinal cord injury

Spinal cord injuries （SCI） usually result in impairment of axonal conduction and sensorimotor function. There are no effective therapy to completely repair SCI. Axonal demyelination is very common as a pathologic change in SCI, and demyelination partly contributes to neural function impairment. So, it may be reasonable that remyelination of demyelinated axons become one of effective therapeutic targets for SCI treatment.
Demyelination involves myelin breakdown and loss of myelin-forming cells （oligodendrocytes）. The death of oligodendrocytes plays a key role in axonal demyelination in SCI. Recently a number of studies demonstrate that cell replacements could facilitate axonal remyelination and restore axonal conductive function. Thus, it is expected that myelinogenetic cell transplantation （oligodendroglial lineage） will have good prospect as an effective therapy to improve axonal remyelination and restore neural function for SCI treatment in the near future.     

淫羊藿苷对cuprizone诱导精神分裂症样小鼠模型行为学变化、髓鞘脱失及神经炎性反应的影响

目的 应用双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导的精神分裂症样小鼠模型,研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对模型小鼠行为学变化、髓鞘脱失及神经炎性反应的影响。方法 用含0.2%(质量分数) cuprizone的饲料饲喂C57BL/6小鼠5周,制备脱髓鞘模型。造模同时灌胃给予ICA(25、50 mg/kg),持续5周。用Y迷宫和旷场试验进行行为学检测,油红O染色检测髓鞘脱失,免疫组织化学法检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)表达、小胶质细胞和星形胶质细胞活化。结果 与对照组相比,cuprizone模型组小鼠在Y迷宫试验中的自发性交替反应率减低(空间工作记忆能力下降),在旷场试验中的自发活动总路程延长(高活动性阳性症状);胼胝体部位髓鞘脱失,MBP表达减少;小胶质细胞和星形胶质细胞数量增多。ICA灌胃给药5周明显改善模型小鼠的空间工作记忆能力和高活动性阳性症状,减轻胼胝体部位髓鞘脱失,增高MBP的表达,抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。结论 ICA能够改善cuprizone模型小鼠的认知功能障碍和高活动性阳性症状,其机制与减轻脑白质髓鞘脱失和拮抗神经炎症有关,提示ICA具有治疗精神分裂症的潜能。     

大麻素对双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的修复作用

目的：探讨大麻素（WIN55212-2）对双环己酮草酰二腙（cuprizone）诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的修复作用,阐明其可能机制。方法：选取C57BL/6小鼠95只,随机分为空白对照组、模型组（0.2%的cuprizone饲料喂养6周）、二甲基亚砜（DMSO）组（0.2% cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射等量的DMSO混合液）和治疗组（0.2% cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射1 mg·kg^-1 WIN55212-2）。采用黑金Ⅱ髓鞘染色技术对小鼠髓鞘组织染色,观察其组织形态表现;采用Western blotting法检测小鼠大脑组织中结侧蛋白（JN）、髓鞘碱性蛋白（MBP）和转录因子Nkx2.2蛋白表达水平。结果：黑金Ⅱ髓鞘染色,空白对照组小鼠大脑胼胝体区域有明显的着色,模型组小鼠大脑胼胝体区着色较浅。与空白对照组比较,模型组小鼠大脑组织中JN和MBP蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）;与模型组和DMSO组比较,治疗组小鼠大脑组织中JN和Nkx2.2蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：大麻素可能通过转录因子Nkx2.2蛋白促进cuprizone诱导的脱髓鞘模型小鼠大脑组织中JN蛋白表达,促进髓鞘再生和修复。     

大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的建立大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型.方法采用豚鼠脊髓和福氏完全佐剂混合乳剂一次性注入Wistar大鼠双足垫和尾部,同时腹腔注射左旋咪唑诱导大鼠发生EAE.观察发病情况;HE染色观察病理变化;Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变.结果空白对照组大鼠均未出现症状,HE染色大脑白质及脊髓无炎性细胞浸润;Loyez氏染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为87.5%,HE染色见大脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润;Loyez氏染色见部分脱髓鞘改变.结论用豚鼠脊髓髓鞘蛋白和福氏完全佐剂混合乳剂同时辅以左旋咪唑成功地诱导Wistar大鼠发生急性EAE.     

通络糖泰方对糖尿病周围神经病变大鼠炎性细胞因子的影响

【目的】探讨通络糖泰方对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠炎性细胞因子的影响。【方法】选用自发性2型糖尿病GK大鼠,建立由高脂饲料喂养的DPN大鼠模型,随机分为5组:模型组,通络糖泰方高、中、低剂量组(剂量分别为2.88、1.44、0.72 g·kg~(-1)·d~(-1)),西药组(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)二甲双胍+0.2 mg·kg~(-1)·d~(-1)弥可保)。并选用Wistar大鼠设为正常组。分别给予相应处理4周后采用神经电生理检测大鼠坐骨神经运动/感觉神经传导速度;采用酶联免疫吸附试验检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平。【结果】通络糖泰各剂量组可降低血清炎性细胞因子水平,降低血清MBP水平,提高坐骨神经传导速度,其中高剂量组作用最显著。【结论】通络糖泰方可减轻炎症反应,减少神经脱髓鞘病变,改善神经结构和传导功能,从而达到防治DPN发生发展的作用。