急性髓细胞白血病细胞GM—CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前蜊缔和常数（ｋｄ１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后缔和常数（ｋｄ２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５     

家蚕表达的且人巨噬细胞集落刺激因子促进放射性损伤小鼠血细…

研究重组人巨噬细胞集落刺激因子对骨髓造血功能恢复的影响。方法：以亚致死剂量＾６０Ｃｏγ射线照射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，造成放射性损伤，继以家蚕表达的ｒｈＭ－ＣＳＦ连续７天给每只小鼠腹腔注射进行治疗。结论：ｒｈＭ－ＣＳＦ能促进放射性损伤小鼠血细胞的恢复。     

G－CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响

通过对１１例急性白血病患者单独化疗与化疗后加用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的对比，动态观察了Ｇ－ＣＳＦ对外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）的动员作用。发现化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ比单用化疗的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）增加５．１倍，红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）增加４．５倍。Ｇ－ＣＳＦ还可使ＣＦＵ－ＧＭ＞１００／ｍｌ和ＢＦＵ－Ｅ＞２００／ｍｌ的持续时间延长；化疗后ＣＦＵ－ＧＭ的最高值提早出现，而不影响ＢＦＵ－Ｅ／ＣＦＵ－ＧＭ比值。结果表明，化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ可明显提高ＰＢＳＣ的收集效率，Ｇ－ＣＳＦ是一种有效的ＰＢＳＣ动员剂。     

粒—巨噬细胞集落刺激因子对Vp16诱导白血病细胞凋亡的调控作用

目的：探讨粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｖｐ１６诱导白血病细胞凋亡的调控作用，指导白血病临床治疗中正确使用ＧＭ－ＣＳＦ。方法：在构建高效表达ＧＭ－ＣＳＦ的逆转录载体Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ＧＭ－ＣＳＦ表达系统的基础上，对转ＧＭ－ＣＳＦ基因和未转ＧＭ－ＣＳＦ基因的白血病ＨＬ－６０细胞进行研究。结果：未转ＧＭ－ＣＳＦ基因及转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞经Ｖｐ１６处理后均出现凋亡的特征性表现：ＤＮＡ电泳呈梯状；流式细胞仪ＤＮＡ直方图上呈现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰；透射电镜观察细胞形态可见凋亡的特征性改变。结论：Ｖｐ１６具有诱导白血病细胞发生凋亡的作用，而ＧＭ－ＣＳＦ能够抑制Ｖｐ１６诱导的细胞凋亡。以上结果表明，白血病临床治疗中为预防和改善化疗所致骨髓抑制而应用ＧＭ－ＣＳＦ时，应谨慎地选择时机，在化疗前和化疗期间不宜使用，以避免白血病细胞对抗癌药物诱导的凋亡产生抵抗而导致耐药。     

人粒-巨噬细胞集落刺激因子受体在NIH3T3细胞中的功能表达

目的　探讨人类粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ） 受体（ＧＭＲ） 在ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中表达的功能特性。方法　将编码人ＧＭＲα和β亚单位的ｃＤＮＡ 转染到无人ＧＭＲ表达的小鼠ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中,并检测其阳性转染子在配体刺激后的增殖信号传导与酪氨酸磷酸化。结果　重建的功能性ＧＭＲα／β可以介导细胞增殖与细胞集落形成,并诱导βｃ、Ｊａｋ２、Ｓｈｃ 及Ｓｈｃ 相关蛋白Ｐ１４５（ＳＨＩＰ） 酪氨酸磷酸化,然而,人ＧＭＣＳＦ并不能激活仅含ＧＭＲα的ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞出现有丝分裂信号表达。结论　人ＧＭＲα与β亚单位同时转染入ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞后,可通过βｃ 磷酸化,激活Ｊａｋ２ 、Ｓｈｃ 和ＳＨＩＰ信号传导途径,而导致配体依赖性细胞生长与集落形成     

白血病细胞膜相关因子（MAF－J6－1）单克隆抗体的制备及性质

用部分纯化的白血病细胞膜相关因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞进行体外免疫，然后与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合获杂交瘤，经３次再克隆得到能产生ＭＡＦ－Ｊ６－１单克隆抗体（单抗）的杂交瘤细胞系。用ＡＢＣ免疫酶标法检测，该单抗在Ｊ６－１细胞上产生强阳性反应，并与ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ单抗对ＭＡＦ－Ｊ６－１及ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ产生交叉中和反应。ＭＡＦ－Ｊ６－１单抗还对Ｊ６－２、ＬＣＬ、Ｋ５６２等细胞系呈膜阳性反应，对白血病患者骨髓中部分原始和幼稚的单核、粒细胞呈阳性反应。在２４例被检测的白血病患者中，有三例呈强阳性反应，ＭＡＦ－Ｊ６－１可用作研究ｍ－Ｍ－ＣＳＦ与白血病关系的工具。     

人粒细胞集落刺激因子cDNA的克隆及其在小鼠骨髓瘤细胞中…

庆用ＰＣＲ等方法从人膀胱纱５６３７总ＲＮＡ中扩增并克隆了人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ。经序分析鉴定含有人Ｇ－ＣＳＦ基因的全部编码序列。在成熟蛋白基因第４３位ｃｏｄｏｎ出现一个碱基突变导致一个氨基酸的改变。构建了其逆转灵病毒重组载体，并将其导入小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／Ｏ。体外软琼脂集落培养检测显示转化的ＳＰ２／Ｏ细胞培养上清具有Ｇ－ＣＳＦ活性，能有效地刺激小鼠骨髓造血祖细胞分化和增殖形成中性粒细胞集落。证明重     

粒单核细胞集落刺激因子在骨髓移植中的应用

报告异基因骨髓移植（ａｌｌｏ－ＢＭＴ）后接受重组人粒单核细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的患者２５例。ｒｈＧＭ－ＣＳＦ自骨髓移植后第６天开始静脉持续点滴，用量５μｇ／（ｋｇ·ｄ）连用２０天或用至连续３天粒细胞＞１．０×１０￣９／Ｌ或白细胞＞２．０×１０￣９／Ｌ为止。结果：粒细胞升至０．５×１０￣９／Ｌ及１．０×１０￣９／Ｌ的时间，试用组平均为１７．７天及２０．９天；对照组为２２．８天及２９．８天（Ｐ均＜０．００１）。白细胞升至＞１．０×１０￣９／Ｌ及２．０×１０￣９／Ｌ的时间，试用组平均为１８．３天及２３．０天；对照组平均为２３．８天及３３．３天（Ｐ＜０．００１及０．００５）。两组血小板的回升及输血小板次数均无显著差异。结论是ａｌｌｏ－ＢＭＴ后应用ＧＭＣＳＦ有明显促进白细胞（包括粒细胞）的恢复作用。     

粒细胞集落刺激因子在治疗成人急性髓系白血病中的应用

粒细胞集落刺激因子在治疗成人急性髓系白血病中的应用熊梅常瑛我们自１９９３年起应用基因重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）与化疗联合应用于成人急性髓系白血病（ＡＭＬ），取得了良好疗效。报道如下。对象和方法１观察对象１．１患者：１９９３年１月～１９...     

rhGM-CSF对放化疗后动物血象的影响

目的探讨重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对放疗化疗后动物血象等的影响。方法利用家犬和小白鼠分别服用环磷酰胺和６０Ｃｏ照射制造的动物模型，测定注射ｒｈＧＭ－ＣＳＦ后动物白细胞、血小板、红细胞、血红蛋白、网织细胞、脾集落数、骨髓有核细胞、巨噬细胞及病理组织变化等。结果注射１２和２４μｇ／ｋｇ剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ显著抑制家犬由环磷酰胺所致白细胞和血小板的减少；注射７５、１５０、３００μｇ／ｋｇ剂量ｒｈＧＭ－ＣＳＦ显著增加６０Ｃｏ照射后小鼠脾细胞集落、外周白细胞、骨髓有核细胞和巨噬细胞。结论ｒｈＧＭ－ＣＳＦ有明显抑制环磷酰胺及６０Ｃｏ照射所致白细胞减少的作用，且与进口升白能药效相似。