用PCR筛查献血者血液中HBV和HCV

<正> 目前,尽管已用HBsAg、抗-HCV及ALT等指标筛选献血者,但输血后肝炎(PTH)仍时有发生。其中,输血后丙型肝炎预后更差,更易转为慢性,发展为肝硬化和肝癌。自聚合酶链反应(polymoerase chainreaction,PCR)技术问世以来,由于其能从分子水平直接检测HBV-DNA和HCV-RNA,因此有望用于常规筛选献血者,以减少PTH的发生。笔者就此问题作一简单综述。1 PCR筛查HBV感染 HBsAg是乙型肝炎感染最常见的标志,检测HB-sAg用于献血者的筛选,大大减少了输血后乙型肝炎的发生率,但是HBsAg阴性并不能完全排除HBV感染。据报道,在输注HBsAg阴性血液成分后仍有0.3％～1.7％的乙型肝炎发生率。导致HBsAg假阴性的     

两种荧光定量PCR 仪检测HBV、HCV核酸结果的一致性

目的 探讨不同荧光定量PCR仪检测肝炎病毒 DNA 及RNA结果的一致性。 方法 参照美国NCCLS EP9-A2文件,以MJ Opticon 2为参比仪器,ABI 7300为实验仪器,检测HBV DNA 及 HCV RNA,分析结果的相关性及预期偏倚,评价两种仪器检测结果的一致性。 结果 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测HBV DNA 及 HCV RNA具有良好的相关性 （rHBV=0.995;rHCV=0.993）,预期偏差在可接受范围内。 结论 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测结果具有较好的一致性,可用于同时检测HBV DNA或HCV DNA。     

4394例新生儿HIV、HCV、HBV、TP检测结果分析

目的 了解艾滋病病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、及梅毒螺旋体（TP）抗体在新生儿中的感染状况.方法 采股静脉血3～5ml,分离血清分别用酶联免疫法（ELISA）作HIV抗体、HBV五项指标、HCV抗体和TP抗体检测,HIV初筛阳性送市疾控中心确认,TP-ELISA阳性用TPPA进行确认.结果 4394例新生儿中,HIV抗体初筛阳性2例（0.05％）,HBV五项标志物中HBsAg阳性36例（0.82％）,HCV抗体阳性20例（0.46％）,TP阳性116例（2.6％）.结论 抗-HIV、抗-HCV、HBsAg在新生儿中的检出率均低,而TP抗体的检出率则较高.     

HBV、HCV感染影响红细胞、血小板指数的差异

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染对人体红细胞(RBC)、血小板(PLT)的影响。方法采用Abbott Cell-DYN1700血细胞分析仪分别测定HBV、HCV感染者及对照组外周血RBC、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)、PLT、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)等,分析参数变化的差异。结果HBV、HCV感染者指标比较,RBC减小24%(P<0.01)、HCT减小26%(P<0.01)、HGB减小28%(P<0.01)、MCHC减小3%(P<0.01)、RDW增大7%(P<0.05)、PLT增大42%(P<0.01)、PCT增大39%(P<0.01)、MPV减小10%(P<0.01),差异均有显著性。HBV患者与对照组的比较,MCHC增加5%(P<0.01)、PLT减小35%(P<0.01)、PCT减小42%(P<0.01)、MPV减小10%(P<0.01),差异有显著性。HCV患者与对照组比较,RBC减小23%(P<0.01)、HCT减小24%(P<0.01)、HGB减小23%(P<0.01)、PCT减小19%(P<0.01)、MPV减小19%(P<0.01),差异有显著性。结论HBV、HCV病毒对RBC、PLT有不同的影响。     

HBV、HCV感染影响红细胞、血小板指数的差异

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染对人体红细胞（RBC）、血小板（PLT）的影响。方法采用Abbott Cell-DYN1700血细胞分析仪分别测定HBV、HCV感染者及对照组外周血RBC、血红蛋白（Hb）、红细胞比积（HCT）、红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度（RDW）、PLT、血小板压积（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）等,分析参数变化的差异。结果HBV、HCV感染者指标比较,RBC减小24％（P〈0．01）、HCT减小26％（P〈0．01）、HGB减小28％（P〈0．01）、MCHC减小3％（P〈0．01）、RDW增大7％（P〈0．05）、PLT增大42％（P〈0．01）、PCT增大39％（P〈0．01）、MPV减小10％（P〈0．01）,差异均有显著性。HBV患者与对照组的比较,MCHC增加5％（P〈0．01）、PLT减小35％（P〈0．01）、PCT减小42％（P〈0．01）、MPV减小10％（P〈0．01）,差异有显著性。HCV患者与对照组比较,RBC减小23％（P〈0．01）、HCT减小24％（P〈0．01）、HGB减小23％（P〈0．01）、PCT减小19％（P〈0．01）、MPV减小19％（P〈0．01）,差异有显著性。结论HBV、HCV病毒埘RBC、PLT有不同的影响。     

原发性肝细胞癌HBV、HCV感染状况的分析

为了探讨HCC与HBV、HCV感染的关系 ,了解HCC中HBV、HCV感染的构成 ,我们对 38例HCC及46例非肝癌癌症患者进行了HBV、HCV感染状况的研究。HCC及非肝癌癌症患者的HBV感染率分别为 78.95 %(30/38)、13.04 % (6/46 ) ,χ2 =36.90 ,P 2 =4.5 ,P <0.05。在原发性肝癌患者中A(“大三阳”)、B(“小三阳”)及C(HBsAg兼HBcAb双阳性 )这三种模式的检出率分别为 15.79% ,28.5 9% ,26.32 % ,但这三种模式在非肝癌癌症患者中均未出现 ,两组间有高度显著性差异。其中HBeAg均为阴性的检出率为 55.26%远高于HBeAg阳性者。HCC患者中 ,单纯乙肝感染者、单纯丙肝感染者、乙、丙肝混合感染者的构成分别为 41.18%、11.76%、47.06 %。以上结果提示 ,HCC的发生和HBV的感染有密切的关系 ;单纯HBV感染、HBV及HCV混合感染比单纯HCV感染者发生HCC的可能性大 ,但也并不说明单纯HCV感染者就没有发生HCC的危险性。     

如何发挥检验医师在HBV、HCV检测结果临床应用中的作用

摘要： HBV和HCV检测复杂,常会出现一些看似相互矛盾难以解释的结果,造成临床医生对检测结果的不理解及临床与实验室间的矛盾,产生医患纠纷。目前在HBV和HCV的检测过程中,检测前和检测后的质量保证是检验科较为薄弱的环节。本文从保证HBV和HCV检测前和检测后的过程质量的角度,探讨了检验医师应当如何成为实验室和临床之间沟通的桥梁,从而使得检验结果更加准确、可靠,并为病毒性肝炎的诊疗提供充分有效的信息。     

日本进行HCV、HBV和HIV病毒核酸筛查的现状

日本红十字会输血部对自愿献血者血液的细胞成份以及做血浆蛋白分离的血浆，在预筛后与发出前。第一次在全国范围用核酸扩增检测（NAT）方法检测血液中的乙型肝炎病毒（HBV），丙型肝炎病毒（HCV）和人类免疫缺陷病毒（HIV-1），使用多重NAT试剂对血液和血液制品，包括存活时间短的血小板检测，可节省检测时间，费用和人力，在2000年2月1日-2001年4月30日期间，采用50份血样品混合筛查。从血液和血液成分中查出112份HBV阳性，25份HCV阳性和4份HIV-1阳性。     

HBV合并HCV感染者相关指标的分析

目的探讨HBV合并HCV感染者病毒载量、血清ALT、AST和球蛋白(GLB)水平的相关性。方法收集120例经ELISA法检测并确诊为HBV合并HCV感染者,根据有无病毒复制,分为HBV和HCV均无复制、仅HBV复制、仅HCV复制、及HBV和HCV均复制4组,分别编为A、B、C、D 4组。分析4组ALT、AST、GLB水平及病毒载量、ALT、AST、GLB的相关性。结果 A、B、C 3组的ALT、AST与D组比较,差异均有统计学意义(P0.05),A、B组的GLB水平与C组比较,差异有统计学意义(P0.05),但A、B、C 3组间ALT、AST、GLB水平两两间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。B组AST的水平与HBV DNA载量、ALT水平有相关性(P0.05),C组的AST水平与ALT水平有相关性(P0.05)。结论 HBV合并HCV感染并HBV和HCV均复制者肝脏损伤较为严重,但复制载量与ALT、AST、GLB水平无相关性。     

一种竞争性RT-PCR测定HCV RNA方法的建立及其应用

目的　建立检测丙型肝炎病人血清HCVRNA水平的竞争性逆转录 聚合酶链式反应定量方法。方法　采用含HCV 5 非编码区 ( 5 NCR)缺失突变的重组质粒 5T1d ,将其目的基因亚克隆到体外转录载体pCDNAⅠ多克隆位点上 ,获得转录重组体 5T1d 。将其线性化后用SP6RNA聚合酶体外转录竞争性缺失突变模板RNA ,该模板定量后与血清HCVRNA一起作逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,建立检测血清HCVRNA水平的竞争性定量方法。结果　检测 15例丙肝病人 2 0份血清 ,滴度为 6.6× 10 2 ～ 6.6× 10 6copies/ml。 结论　各类丙型肝炎患者血清病毒滴度均较高 ,经干扰素治疗后病毒水平下降 1～ 5个Log ,年龄小于 2 0岁者干扰素治疗效果较好。     

慢性肝病患者HBV与HCV重叠感染的调查及其意义

为了解我国HBV与HCV重叠感染及其与三种慢性肝病的关系，本文以天津地区患者为对象，选择119例慢性肝病患者，用ELISA检测HBsAg和抗-HCV，巢式PCR检测HCVRNA，并对所得结果进行了分析。材料和方法一、研究对象天津市传染病医院和肿瘤医院1992年6月～1993年10月临床确诊的患者，     

快速反相杂交法检测HBV DNA

为建立一种简便快速的核酸探针杂交法检测 Ｐ Ｃ Ｒ扩增产物中的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ,将 Ｐ Ｃ Ｒ 上游引物用生物素标记后进行扩增;核酸探针固定于硝酸纤维素膜上,与带有生物素的 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增产物杂交,杂交信号用链霉亲和素 酶结合物显色检测。结果表明,该法检测的敏感性为 ５ ｆｇ,杂交时间为４０ 分钟。２００ 例临床标本检测的阳性率（２７５％ ）高于琼脂糖电泳法（２４５％ ）。同时具有操作简便的特点,可作为 Ｐ Ｃ Ｒ扩增产物中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的常规检测方法。     

HBV、HCV感染与原发性肝细胞癌关系的对照研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染者罹患原发性肝细胞癌(PHC)的流行病学特点及其相关性。方法对70例有乙型病毒性肝炎肝硬化史(B组,54例)及丙型病毒性肝炎肝硬化史(C组,16例)的PHC患者的好发年龄、肿瘤分化程度及大体病理类型进行回顾性对比研究。结果与HCV感染的PHC患者比较,HBV感染的PHC患者的年龄较低[(54.86±9.82)vs(62.88±6.90)岁,P<0.01];大肝癌发生率较高(90.9%vs53.8%,P<0.01)。70例患者中获得病理结果者B组为28例,C组为16例;经秩和检验,HBV感染的PHC患者肿瘤分化程度(高分化60.7%,中分化39.3%,低分化0)高于HCV感染的PHC者(高分化37.5%,中分化25.0%,低分化37.5%)(P<0.05)。结论患乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎后导致肝硬化背景下的PHC在流行病学及病理基础方面存在差异,反映出不同病毒感染后PHC的发生、发展的不同特征。     

襄阳市HIV感染者混合感染HBV、HCV及梅毒的调查研究

目的了解襄阳市HIV感染者合并感染HCV、HBV及梅毒状况。方法收集本市168例HIV感染者及356例普通体检人群血液标本,进行HCV、HBV及TP标志物检测,分别比较各项感染率;再对HIV感染者按感染方式分组比较各项感染率。结果 HIV感染者HCV及TP感染率明显高于体检人群,差异有统计学意义（P〈0.01）。而HBV感染率两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。输血途径感染HIV者,其HCV感染率与经静脉吸毒感染HIV者的差异无统计学意义,但二者的HCV感染率均显著高于经性感染HIV者;性传播途径感染HIV者,其TP的感染率显著高于其他非性传播感染组,差异有统计学意义（P〈0.01）;而HBV感染率在各组之间其差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论不同HIV感染方式导致HCV及TP感染率不同,但对HBV感染率影响较小。     

广东省惠州地区HBV、HCV、TP和HIV感染情况分析

目的检测并分析广东省惠州地区乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)和人类免疫缺陷病毒(HIV)的感染情况,为疾病防控提供临床依据。方法对2014-2017年共103229例、65770例、55667例和63201例体检人群或患者分别进行HBV、HCV、TP、HIV的检测,对性别、年龄、人群和年份分布进行分析。结果广东惠州地区的HBV、HCV、TP和HIV的阳性率分别为16.81%、1.02%、1.85%和0.11%。男性在HBV、HCV、HIV感染率均高于女性,差异有统计学意义(P0.05)。HBV、HCV、TP感染的成年组均高于未成年组(P0.05)。而HIV的18～60岁组阳性率较高(0.13%),但各年龄组差异无统计学意义(P0.05)。门诊病人的四种疾病阳性率明显高于体检人员和住院患者(P0.05)。不同年份间HBV、HCV、TP感染率差异有统计学意义,其中HBV阳性率逐年降低,而HCV则升高。结论该地区HBV、HCV、TP和HIV感染率仍较高,尤其要关注门诊病人,做好疾病防控,减少职业暴露。     

纳米金比色芯片同步目视化检测HBV和HCV

目的 建立一种简单、快速的比色芯片可同时目视化检测HBVDNA和HCVRNA。方法 利用多重PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中提取的HBVDNA和HCVcDNA。制备Au纳米颗粒基因探针，检测探针与固定在尼龙膜上的捕捉探针构成双探针，用斑点杂交法检测HBVDNA、HCVcDNA的多重PCR产物，加入银离子（Ag^＋）-对苯二酚液染色观察结果。结果 多重PCR可同时扩增HBVDNA和HCVcDNA，出现预期的431bp和323bp特异性条带。纳米金比色芯片可以同步目视化检出乙型、丙型肝炎合并感染患者血清中HBVDNA和HCVRNA的PCR产物。结论 目视化HBV、HCV纳米金比色芯片诊断方法操作简单、特异性好、成本低廉、结果 判定指标客观，此类基因芯片在病毒基因检测领域将会有广泛用途。     

玉林市无偿献血者ALT异常与HBV、HCV检测结果的相关性分析

目的分析无偿献血者血液检测结果中丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常与乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性结果的相关性,并探讨升高的ALT与肝炎病毒感染之间的相关性,并讨论ALT作为血液筛查计划的必要性。方法对2014年1月至2018年6月玉林市259 408名献血者血液中HBsAg、抗-HCV和ALT的检测结果进行分析,并进行相关分析。结果来自259 408名献血者的253 644份样本ALT结果正常,其中1 190份为HBsAg阳性,抗-HCV阳性者1 053份,核酸检测HBV DNA反应性558份,HCV RNA反应性2份;ALT试验的异常结果为5 764份,其中27份为HBsAg阳性,28份为抗-HCV阳性,核酸检测12份HBV DNA反应性,1份HCV RNA反应性;肝炎标志物阳性的献血者中ALT异常率为6.91%,肝炎标志物阴性的献血者ALT异常率为2.18%。结论 HBsAg与抗-HCV阳性结果和ALT异常结果之间存在相关性,ALT异常与乙型和丙型肝炎病毒感染之间不存在相关性。