应用薄层色谱-生物自显影技术评价乌药等三种中药的抗氧化活性

目的采用薄层色谱-生物自显影法研究与评价中药的抗氧化活性。方法用1,1-二苯基-2-苦肼基自由基乙醇溶液(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和传统显色剂显色,拍摄图像,采用模拟扫描,获得各抗氧化成分的峰面积。结果以总峰面积大小为指标判定不同来源中药的抗氧化能力,结果表明浙江天台产乌药(94 340)、四川凉山产厚朴(175 647)和收集于上海的紫苏子(153 206)清除DPPH自由基能力最强。以化学对照品峰面积与总峰面积的百分比来判定化合物抗氧化活性,表明去甲异波尔定(43.8%～66.0%)、厚朴酚与和厚朴酚(73.2%～93.2%)、木犀草素与芹菜素及成分“U”(47.6%～68.0%)分别是乌药、厚朴和紫苏子的主要抗氧化活性成分。结论 本方法在中药抗氧化活性成分筛选及质量评价方面具有操作简便、选择性高、重现性好等优点。     

薄层色谱-生物自显影技术在活性物质筛选中的应用

薄层色谱-生物自显影技术(TLC-bioautography)将薄层色谱分离和生物活性测定相结合,是一种活性指导下的快速靶向追踪分离、筛选活性成分的方法。此法操作简单、耗时短、灵敏度和专属性高,常应用于抗细菌、抗真菌、抗氧化,以及对乙酰胆碱酯酶抑制剂、葡萄糖苷酶抑制剂等活性天然产物的筛选。笔者对薄层色谱-生物自显影技术在活性物质筛选方面的应用进行综述。     

薄层生物自显影技术筛选两色金鸡菊中的活性成分

目的:建立薄层生物自显影技术的方法筛选具有抗氧化作用和α-葡萄糖苷酶抑制作用的活性物质。方法:将两色金鸡菊水提物、醇提物和乙酸乙酯提取物在硅胶板上以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶7∶3)为展开剂展开,以1,1-二苯基-2-苦肼基自由基甲醇溶液进行显色,获得具有抗氧化作用物质;将两色金鸡菊3种提取物以上述同样的方法展开后在硅胶板上先喷α-葡萄糖苷酶溶液孵育60 min,再以2-萘基-α-D-葡萄糖苷溶液和固蓝B盐溶液(1∶1)为显色剂,显色后在白光下对比获得具有α-葡糖糖苷酶抑制作用的物质。结果:薄层板上斑点周围可以观察到白色或类白色抑制区,说明两色金鸡菊水提物、醇提物和乙酸乙酯3种提取物中均有抗氧化活性成分和α-葡糖糖苷酶抑制成分。结论:建立的薄层生物自显影技术可以快速筛选具有抗氧化作用和α-葡糖糖苷酶抑制作用的化合物,经指认两色金鸡菊中花色苷-3-葡萄糖苷、马里苷、绿原酸、黄酮奥卡宁、奥卡宁有较强的抗氧化作用,马里苷和奥卡宁具有较强的α-葡糖糖苷酶抑制成分。     

薄层色谱直接生物自显影方法(TLC-Bioautography)在抗菌剂分析中的应用

生物自显影法(Bioautography)是在复杂的基质中检测物质对生物体的生长速率和检测生物活性。这种技术主要用于研究源于植物、微生物、组合化学的活性物质来寻找新的具有抗细菌、抗真菌、抗肿瘤及抗蚤状幼体寄生虫活性的复合物,调查废水、饮用水、体液、饲料和食品中的抗生素及抗生素药品的质量控制,寻找能有效对抗植物致病细菌及真菌的抗生素类化合物,检测毒物(如黄曲霉毒素)及光毒性化合物(如呋喃香豆素)。本文讨论了生物自显影法的三种形式,即接触法,浸润法和直接法,重点讲述了直接法及其应用,包括测试各种类型的化合物,也包括研究生化过程及影响细菌生长的因素。     

菝葜多酚类成分抗氧化活性的研究

目的 对菝葜中天然多酚类化合物的抗氧化活性进行研究,探讨多酚类化合物在菝葜药效发挥中的作用机制. 方法 分别采用TEAC法和DPPH法对菝葜醋酸乙酯部位中分离得到的9个天然多酚类化合物单体（SCE 1～9）的抗氧化活性进行测定,并初步分析它们发挥抗氧化作用的构效关系. 结果 化合物SCE 1～9具有很强的抗氧化活性,均能有效地清除ABTS•+和DPPH自由基,其中化合物SCE 1的活性最强,其清除ABTS•+自由基的TEAC值为（3.11±0.04）mmol•L^-1,在浓度50 μmol•L^-1时对DPPH自由基的清除能力为（95.95±0.76）%. 结论 菝葜中天然多酚类化合物可能是菝葜根茎醋酸乙酯提取物发挥治疗作用的物质基础.     

锁阳中抗氧化活性成分的筛选研究

目的：筛选锁阳中的抗氧化活性成分。方法：采用CUPRAC法确定锁阳抗氧化活性部位。以Cu²⁺-新亚铜灵试剂为显影试剂的TLC-生物自显影技术结合硅胶柱层析筛选分离活性部位中的抗氧化活性物质,并采用¹H-NMR和¹³C-NMR技术确定其的化学结构。结果：确定乙酸乙酯部位为锁阳的抗氧化活性部位,筛分得到的抗氧化活性成分主要有原儿茶酸、儿茶素、没食子酸、儿茶素没食子酸酯。结论：以Cu²⁺-新亚铜灵试剂为显影试剂的TLC-生物自显影技术能够快速、有效地从锁阳活性部位中筛选出抗氧化活性成分。     

海洋微藻抗肿瘤及抗氧化活性初筛

目的 对90株海洋微藻的提取物进行了体外抗肿瘤和抗氧化活性筛选,从中寻找活性微藻藻株.方法以细胞凋亡诱导、细胞坏死以及自由基清除为活性指标,采用SRB,TLC自显影技术和DPPH方法进行抗肿瘤以及抗氧化活性筛选,并对活性藻株代谢产物进行了HPLDUV分析.结果与结论发现5株微藻的提取物具有抗肿瘤活性、1株微藻的提取物具有抗氧化活性.HPLC-UV分析表明,其抗氧化活性可能与具有400nm最大紫外吸收的化合物有关.     

大蒜有机硫化合物药理活性的研究进展

大蒜的主要药理活性成分是有机硫化合物.大蒜有机硫化合物能通过多种途径抑制肿瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡,并具有抗菌消炎、提高机体免疫力、预防和治疗心血管疾病等药理作用.本文对大蒜有机硫化合物药理活性的研究进展做一综述.     

芡实多糖理化性质及抗氧化活性研究

采用水提醇沉、脱蛋白等工艺制备中药芡实多糖,并通过纤维素柱和葡聚糖凝胶柱分离纯化。精多糖分子量为15 367 Da,其单糖组成为葡萄糖：鼠李糖（0．0142：0．0026）,理化反应和红外光谱均符合多糖特征。体外抗氧化实验表明,芡实多糖能够显著清除DPPH、超氧阴离子和过氧化氢等自由基,并具有较强还原力。体内抗氧化实验显示,芡实多糖能够显著提高D-半乳糖所致衰老小鼠的SOD、CAT、GSH—Px水平,降低MDA水平。结果表明,芡实多糖具有广泛的研究前景。     

新型查尔酮类化合物TPY的抗氧化及抗菌活性研究

目的 研究查尔酮类化合物TPY的抗氧化、抗菌活性.方法 测定TPY对DPPH·清除能力和总还原能力,测定TPY对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌和变形杆菌等菌种的体外抑菌作用.结果 TPY的抗氧化能力呈现出明显的剂量依赖关系,具有良好的抗氧化活性.TPY对5种病菌具有不同程度的抑制作用.结论 TPY可作为一种理想的抗氧化和抑菌添加剂.     

Composition analysis and antioxidant properties of black garlic extract

Black garlic produced from fresh garlic under controlled high temperature and humidity has strong antioxidant properties. To determine these compounds, five fractions (from F1 to F5) were separated and purified by elution with chloroform:methanol at different ratios (8:1, 6:1, 4:1, 2:1, and 0:1; v/v). The antioxidant activity of each fraction was analyzed. The results showed that F3 and F4 had higher phenolic contents and stronger 2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity than the others. Seven purified individual components were further separated using semipreparation high-performance liquid chromatography from these two intensely antioxidant fractions (F3 and F4), their structures were elucidated by high-performance liquid chromatography coupled to diode array detection, electrospray ionization, mass spectrometry, ¹H nuclear magnetic resonance, and ¹³C nuclear magnetic resonance spectrometry. Three compounds including adenosine, uridine, and 2-acetylpyrrole were first identified in black garlic, except for 5-hydroxymethylfurfural, (1S, 3S)-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid, and (1R, 3S)-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid. The cellular antioxidant activities of uridine, adenosine, carboline alkaloids, 5-hydroxymethylfurfural, and ethyl acetate extracts were consistent with the results of in vitro experimental antioxidant properties. The results provide useful information for understanding the health benefits of black garlic products.     

红花中抗氧化活性成分及其作用机制的研究进展

红花为菊科植物红花的干燥管状花,为活血化瘀类中药,临床上多用于治疗心脑血管疾病。适宜的抗氧化物质可以有效地消除过多自由基,对于各种氧化应激相关疾病的治疗具有重要意义。归纳了红花中的抗氧化活性成分黄酮类、多糖类和生物碱类成分,并对其抗氧化酶、清除自由基、拮抗一氧化氮的作用机制进行总结,以期为红花更好的临床应用提供参考。     

大蒜及其有效成分的心血管活性研究进展

大蒜具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物学活性,近年来其心血管活性越来越受关注。目前国内外对大蒜有效成分的认识存在很大差异。大蒜的心血管活性主要集中在保护心肌、降低血压、调节血脂、预防动脉粥样硬化、抗心律失常等方面,但鲜见对大蒜及其有效成分抗心肌缺血作用的研究报道;对其心血管活性作用机制,主要集中在抗炎、抗氧化、抗凋亡、保护内皮等方面,也有报道认为其作用可能与诱导体内硫化氢(H₂S)生成有关,但与H₂S的相关性研究还不够透彻。本文将对大蒜及其有效成分的心血管活性作用进行综述,分析目前大蒜研究中存在的问题,为其开发应用于心血管疾病提供参考。     

大蒜多糖对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用

目的观察大蒜多糖(GP)对阿霉素(ADR)中毒心肌细胞的保护作用并探讨其机制。方法采用0~2 d SD乳鼠心肌细胞做原代培养,复制ADR损伤心肌细胞模型,测定上清液及细胞中多项生化指标,并运用MTT比色法、流式细胞仪检测凋亡细胞。结果ADR(终浓度为1 mg.L-1)可致上清液肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)释放量增加(P<0.01),同时细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力下降而丙二醛(MDA)含量升高(P<0.01),GP(25~100 mg.L-1)可呈浓度依赖性地降低CK、LDH、GOT活力,增加细胞SOD活力和降低MDA含量,尤其以GP大剂量组作用明显(P<0.05或P<0.01)。流式细胞仪检测GP能降低心肌细胞凋亡率,证实了GP的保护作用。结论GP能够拮抗ADR引起的自由基脂质过氧化,从而保护心肌细胞。     

紫菜中类菌孢素氨基酸抗氧化活性研究

目的 提取紫菜中类菌孢素氨基酸（Mycosporine-like amino acids, MAAs ),探究MAAs对外源性自由基的清除及对内源性抗氧化酶的活力影响。方法 采用乙醇提取、层析纯化的方法对紫菜MAAs进行提取纯化;利用液质联用法鉴定紫菜MAAs的种类及结构;采用邻苯三酚-鲁米诺、Fenton反应法和DPPH法研究紫菜MAAs对自由基的清除作用,并测定总抗氧化能力;选取正常ICR小鼠,随机分为空白对照组（NC）、阳性对照组（MP）以及MAAs给药组（MAAs）,通过对比各组小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力及丙二醛（MDA）的含量,对MAAs化合物体内抗氧化活性进行研究。结果 紫菜中两种主要的MAAs成分为：Porphyra-334和shinorine;MAAs化合物及Porphyra-334组分具有显著的自由基清除作用,其中功能性成分为Porphyra-334。MAAs的总抗氧化能力随浓度的增大呈现增强趋势;与对照组相比,给药组小鼠血清中SOD、GSH-Px的活力显著提升（P<0.05);结论 紫菜MAAs具有显著的抗氧化活性。     

Antimicrobial and antioxidant effects of phenolic constituents from Klainedoxa gabonensis

Bioassay-guided fractionation of the methanol extract of the stem bark of Klainedoxa gabonensis Pierre ex Engl. (Irvingiaceae) afforded 12 compounds, namely, ellagic acid (1), ellagic acid 3,3′-dimethylether (2), gallic acid (3), methyl gallate (4), lupeol (5), β-amyrin (7), erythrodiol (8), oleanolic acid (9), betulinic acid (6), hederagenin (10), bayogenin acid (11), and stigmasterol-3-O-β-d-glucopyranoside (12). Compounds 1-3 and 7-12 were isolated for the first time from this genus. The structures were established on the basis of 1D/2D NMR experiments and mass spectrometric data. Crude extract, fractions (A, B, C and D) and pure compounds were tested for their antimicrobial activity using paper disk agar diffusion assay. The test delivered a range of low to high activities for phenolic compounds 1-4, low or missing activities for terpenoid compounds 5-11, and impressive very high antibacterial/antifungal values for two fractions C and D probably due to synergistic effects of compounds. The broth microdilution assay revealed MICs of 15.4-115.1?μg/mL for phenolic compounds, MICs higher than 1?mg/mL for terpenoids and MICs of 4.5-30.3?μg/mL for fractions C and D. The determination of the radical scavenging activity using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) assay gave high antioxidant values for the methanol extract and fraction D (IC₅₀ 10.45 and 5.50?μg/mL) as well as for the phenolic compounds 1-4 (IC₅₀ 45.50-48.25?mM) compared to the standard 3-t-butyl-4-hydroxyanisole (BHA) (IC₅₀ 44.20?mM).     

Structural characterization and antioxidant activity of a heteropolysaccharide isolated from Hedysarum polybotrys

A water-soluble polysaccharide (HPS3aS) with a molecular mass of 1.22 × 10⁴ Da was isolated from Hedysarum polybotrys using anion-exchange and gel-permeation chromatography. HPS3aS exhibits a globular-shaped conformation in 0.1 M NaNO₃ by size exclusion chromatography with multi-angle laser light scattering (SEC-MALLS). The investigation of the structural features of this heteropolysaccharide through a combination of chemical and instrumental analyses revealed that the backbone of HPS3aS is composed of α-d-(1 → 4)-linked glucopyranose residues, which occasionally branched at O-6. The branches are composed of (1 → 4)-linked galactopyranose residues and terminated with glucopyranose residues. HPS3aS possesses good in vitro antioxidant activity, as evaluated by scavenging assays with 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, hydroxyl, and superoxide radicals, which suggests that HPS3aS could be a potential antioxidant.     

藻类中抗肿瘤活性成分的研究进展

藻类中含有多种生物活性成分,从中筛选抗肿瘤活性成分已成为当前研究热点。近年来,国内外研究者已从藻类中筛选出多种具有抗肿瘤作用的活性成分,如藻类多糖、萜类、溴苯酚及藻胆蛋白等。本文就其研究现状做一综述。     

大蒜油亚微乳的安全性及体外抗真菌作用

目的考察大蒜油亚微乳的安全性及体外抗真菌作用。方法急性毒性试验为小鼠尾静脉注射给药,测定LD50;采兔血配制成体积分数为2%的红细胞混悬液,进行溶血试验;新西兰大耳兔左、右耳缘静脉分别静滴大蒜油亚微乳或大蒜油注射液和5%的葡萄糖注射液,观察药物对血管的刺激性;用沙氏培养基以倍比稀释法测定大蒜油亚微乳、大蒜油注射液、氟康唑注射液对白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌、烟曲菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果大蒜油亚微乳的LD50为282.0 mg.kg-1,大蒜油注射液为167.2 mg.kg-1;大蒜油亚微乳无溶血作用,无血管刺激性;大蒜油亚微乳对白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌及烟曲菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为50、25、502、5 mg.L-1,大蒜油注射液对上述4种菌的MIC分别为50、50、100、25 mg.L-1。结论大蒜油亚微乳的LD50是大蒜油注射液的1.7倍,安全性好于大蒜油注射液;大蒜油制成亚微乳后仍具有较强的抗真菌作用。     

烟酰化孔石莼多糖的制备及抗氧化活性研究

摘要：目的 探究烟酰化孔石莼多糖NU的最佳制备工艺,并测定其体外抗氧化活性。方法 分别以甲酰胺（FA）、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)为溶剂,烟酰氯盐酸盐为酰化剂,以氮元素含量为指标采用单因素法确定最佳溶剂,再采用正交设计法,考察孔石莼多糖U与酰化剂的质量比、U的质量浓度、反应时间、反应温度对反应的影响。经氮元素分析、红外光谱(IR)、核磁共振碳谱(13C-NMR),推测烟酰化衍生物(NU)的化学结构。并研究NU对超氧阴离子自由基（O2??）、羟自由基（?OH）的清除作用以及还原能力、金属螯合能力。结果 烟酰化反应最佳条件：多糖与烟酰化试剂的质量比为1:2,多糖的质量浓度15 g?L?1,反应时间4 h、反应温度为125 ℃。NU的结构已初步确定。对羟自由基（?OH）的清除作用及其还原能力、金属螯合能力,NU与U相比表现出更优的活性;但对超氧阴离子自由基（O2?）的清除作用二者无明显差异。结论 通过确定的实验方案,烟酰化反应是成功的,烟酰化孔石莼多糖NU的抗氧化活性有显著增强。