激光辅助孵化在辅助生殖技术中的应用进展

辅助生殖技术是治疗不孕症的重要方法,在一定程度上提高了妊娠率,但仍存在反复种植失败、高龄患者妊娠结局不理想等问题。研究发现胚胎着床失败是影响妊娠结局的重要因素,这与胚胎孵化困难有关。透明带结构异常、透明带厚度增加等均可导致胚胎孵化困难。辅助孵化技术通过对透明带进行操作,人为地帮助胚胎孵化,促进了胚胎植入。临床上以激光辅助孵化(LAH)为主,分为透明带薄化与透明带钻孔两种方式。本文综述了LAH在冻融胚胎移植、反复种植失败与高龄患者中的应用研究进展,发现在一定程度上提高了种植率和妊娠率的同时,也存在多胎率与流产率升高等方面的争议,应结合个体情况谨慎对待,仍需大量研究进一步证实,以期规范诊疗方案,改善妊娠结局。     

激光辅助孵化在冻融胚胎移植中的临床研究

目的:探讨激光辅助孵化对冻融胚胎移植周期中胚胎种植率的影响。方法:分析192个冻融胚胎移植周期,其中行激光辅助孵化后移植86个周期(激光组),常规冻融胚胎移植106个周期(常规组),比较二组患者临床妊娠率和胚胎种植率。结果:激光组的临床妊娠率为31.4%,与常规组的23.6%比较,无统计学差异(P>0.05);胚胎种植率为19.2%,显著高于常规组的12.0%(P<0.05);特别当透明带厚度≥17mm时,激光组胚胎种植率显著高于常规组(P<0.05)。结论:在冻融胚胎移植前对透明带厚度≥17mm的胚胎行激光辅助孵化有助于提高胚胎种植率。     

透明带激光削薄法在玻璃化冻融胚胎移植中的作用

目的:为探讨激光削薄法对冻融胚胎移植结局的影响。方法:选取分裂期胚胎移植组372个周期、囊胚期胚胎移植组81个周期以及反复种植失败(既往移植失败≥2次)移植组128个周期,分别按解冻单、双日将周期解冻胚胎分为激光削薄组和对照组,激光削薄组胚胎于移植前行卵透明带激光削薄处理,对照组胚胎不进行削薄处理,分析比较各组间的实验室和临床效果。结果:移植分裂期胚胎组患者的生化妊娠率、临床妊娠率及胚胎种植率激光削薄组与对照组相比无统计学差异(49.11%vs 48.28%,42.01%vs 42.36%,28.66%vs 28.35%,P0.05);囊胚期胚胎激光削薄组患者的上述移植结局与对照组比较亦无统计学差异(60.47%vs 63.16%,48.84%vs55.26%,37.88%vs 38.57%,P0.05);反复种植失败患者的冻融胚胎经激光削薄法处理后没有改善其妊娠结局(43.33%vs 45.59%,36.67%vs 39.71%,25.23%vs 26.15%,P0.05),但是在囊胚期胚胎和反复种植失败患者中,患者移植后的流产率激光削薄组较对照组有增高的趋势(19.05%vs4.76%,P=0.153;36.36%vs 11.11%,P=0.035),其中反复种植失败激光削薄组显著高于对照组(P0.05)。结论:透明带激光削薄辅助孵化技术并不能有效改善冻融胚胎移植患者的妊娠结局,其远期安全性有待于进一步研究。     

透明带薄化法激光辅助孵化对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响

目的:探讨透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响。方法:回顾性分析复苏后至少有1个胚胎是完整存活的564例卵裂期冻融胚胎移植周期,根据胚胎移植前是否行激光辅助孵化,分为辅助孵化组(研究组)与非辅助孵化组(对照组),分别观察透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻胚胎及玻璃化冷冻胚胎的临床妊娠率、种植率及流产率的影响。结果:胚胎经慢速冷冻后,研究组胚胎种植率(19.5%)显著高于对照组(13.5%),差异有统计学意义(P<0.05),而临床妊娠率及流产率(37.9%vs 28.5%、15.5%vs 10.8%)无显著差异;胚胎经玻璃化冷冻后,研究组和对照组胚胎的临床妊娠率(38.0%vs 35.6%)、种植率(17.3%vs 15.9%)及流产率(7.6%vs 19.2%)相比较均无统计学差异;研究组中来源于2种冷冻方法的卵裂期胚胎的临床妊娠率(37.9%vs 38.0%)和种植率(19.5%vs 17.3%)无统计学差异(P>0.05)。结论:透明带薄化法激光辅助孵化能够提高慢速冷冻的卵裂期胚胎的种植能力,且不会增加其流产风险,但并不能提高玻璃化冷冻的卵裂期胚胎的种植能力。     

激光辅助孵化对冻融胚胎种植潜力的影响

目的探讨激光辅助孵化冷冻胚胎移植的效果.方法2003-12-2005-04解放军173医院应用1.48μm波长二极体激光对d3冻融胚胎透明带薄化处理（1/4透明带周长,深度为透明带厚度的60%～80%）,比较激光孵化与未孵化组的临床妊娠率和着床率.结果激光孵化组60个周期共解冻307个胚胎,对照组60个周期共解冻316个胚胎,存活率分别为73.3%、72.5%,临床妊娠率分别为35.0%、18.3%,种植率19.3%、10.9%.激光孵化组临床妊娠率、种植率明显高于对照组,差异有显著性意义（P＜0.05）,两组均无单卵双胎发生.结论对冻融胚胎实施1/4透明带周长、深度为透明带厚度的60%～80%激光薄化是安全、有效的,激光辅助孵化可提高冻融胚胎移植周期妊娠率和种植率.     

两种不同激光辅助孵化方法在卵裂期冻融胚胎移植中的比较研究

目的:通过比较激光透明带打孔和激光透明带薄化辅助孵化方法对卵裂期冻融胚胎移植的临床妊娠率和种植率的影响,探讨激光薄化法取代传统的激光打孔法的可能性.方法:选择在云南省第一人民医院生殖医学中心行胚胎冷冻-解冻的554个周期,对269个冻融周期行激光打孔辅助孵化(激光打孔组),对285个周期行激光薄化辅助孵化(激光薄化组).对两组冻融胚胎不同辅助孵化方法的移植及妊娠情况、及不同年龄(≥35岁和＜ 35岁)和不同胚胎评分(＜5分、5～7分、＞7分)的临床妊娠率进行比较.结果:两组解冻后胚胎的复苏率、完整胚胎率、移植胚胎形态学评分、移植胚胎数、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);不同年龄和不同胚胎评分的临床妊娠率比较,差异也无统计学意义(P＞0.05).结论:激光薄化法与激光打孔法两种激光辅助孵化方法在卵裂期冻融胚胎移植中的临床效果相近,激光薄化法在减少激光热效应对胚胎的损伤上更具有优势.     

探讨辅助孵化在既往种植失败患者解冻周期中的合理化应用

目的:探讨在既往胚胎种植失败患者的解冻周期中如何合理化应用辅助孵化(AH)。方法:本研究共纳入了579名既往种植失败的患者,其中242例行激光AH(LAH组),337例未行AH(对照组)。比较组间临床妊娠率、种植率及活产率等;另根据患者的年龄、既往移植次数、胚胎评分及移植胚胎受精方式再进行分组,比较不同组别的妊娠结局。结果:妊娠率、种植率及活产率在LAH组与对照组组间无统计学差异(P0.05),但分组分析结果显示,既往移植次数2次的患者以及移植卵泡质内单精子显微注射(ICSI)胚胎的患者,LAH能显著提高活产率(25.5%vs 5.3%;37.0%vs 23.9%,P0.05)。结论:LAH并不适合作为解冻胚胎移植的常规移植策略,但对于既往移植次数2次的未孕者及移植ICSI胚胎的患者,LAH能明显改善妊娠结局。     

去除人类冷冻胚胎中坏死细胞对其移植结局的影响

目的:评价人类冷冻胚胎解冻后,在胚胎移植前,采用激光辅助孵化及吸出胚胎的坏死细胞碎片是否会提高胚胎的种植率。方法:回顾性的分析了91个冷冻胚胎移植周期的临床妊娠率和胚胎植入率,其中4 1个周期(A组)在胚胎移植前,采用激光辅助孵化结合显微操作去除冷冻胚胎中的坏死细胞碎片,5 0个周期(B组) ,采用激光辅助孵化,但没有去除坏死细胞碎片。采用慢速冷冻 快速解冻的方法。结果:在冷冻胚胎移植前去除胚胎的坏死细胞碎片,能显著性地提高移植周期的临床妊娠率(43.91%vs.2 4 .0 0 % ,P <0 .0 5 )和胚胎植入率(19.4 5 %vs.10 30 % ,P <0 .0 5 )。结论:在人类冷冻胚胎移植前,采用激光及显微操作辅助去除冷冻胚胎的坏死细胞碎片,能有效提高胚胎的种植率。     

胚胎透明带厚度与妊娠结局相关性的研究

目的:探讨新鲜胚胎移植前透明带厚度与妊娠结局的相关性。方法:以695个移植前新鲜胚胎为研究对象,按其透明带厚度分为A组(<15.00μm)、B组(≥15.00μm),比较胚胎种植率及妊娠率的差异。再按患者年龄分为a组(≥36岁)、b组(<36岁),分析年龄与透明带的关系及胚胎种植率、妊娠率的差异。结果:(1)A、B两组患者年龄、不孕年限、移植胚胎评分及移植胚胎数差异无统计学意义(P>0.05),两组患者的胚胎种植率、妊娠率差异有统计学意义(P<0.05),当胚胎透明带≥15.00μm时,其种植率及妊娠率明显下降(P<0.05);(2)a、b两组患者的透明带厚度(13.82±2.31 vs 13.66±2.62μm)差异无统计学意义(P>0.05),两组患者的胚胎种植率(11.3% vs 23.1%)、妊娠率(19.4% vs 56.7%)差异有统计学意义(P<0.05),当患者≥36岁时,胚胎种植率及妊娠率明显下降。结论:胚胎透明带厚度与妊娠结局直接相关。     

小于35岁助孕患者移植不同胚胎数的临床研究

目的:探讨35岁以下IVF-ET患者减少移植胚胎数对妊娠结局的影响。方法:选取2002.03-2004.10移植3枚胚胎与移植2枚胚胎患者151例,分析两组的单胚种植率、临床妊娠率和多胎率等。结果:35岁以下助孕患者移植3枚胚胎组与移植2枚胚胎组的单胚种植率和临床妊娠率分别是29.82%和30.00%,51.32%和48.00%,均无显著性差异(P>0.05),多胎率分别是53.85%和25.00%,差异显著(P<0.05)。结论:35岁以下IVF-ET患者减少移植胚胎数可在不影响临床妊娠率的情况下,有效降低多胎妊娠的发生。     

定点活检提高反复种植失败患者的临床妊娠率

胚胎反复种植失败（RIF）是阻碍辅助生殖技术进一步提高临床妊娠率的困难之一。子宫内膜容受性低下是造成反复种植失败的主要原因之一。宫腔镜下定点活检引起的子宫内膜损伤可通过炎症反应改善子宫内膜容受性,从而提高RIF患者的胚胎种植率和临床妊娠率。     

复融新鲜胚胎混合周期移植应用价值探讨

目的:通过分析复融新鲜胚胎混合周期移植的妊娠结局,探寻改善高龄、反复助孕失败患者妊娠结局的方法。方法:回顾分析2014年4月至2016年4月在河南省人民医院生殖医学研究所行常规体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSIET)患者的临床资料。根据移植胚胎类型、数量,设置A组(新鲜周期移植D3新鲜胚胎1枚及D3冷冻复苏胚胎1枚,36个周期)、B组(复苏周期移植D3冷冻复苏胚胎1枚,62个周期)和C组(复苏周期移植D3冷冻复苏胚胎2枚,62个周期)、D组(新鲜周期移植D3新鲜胚胎1枚,62个周期)和E组(新鲜周期移植D3新鲜胚胎2枚,62个周期)。比较各组的胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、多胎率和流产率等指标。结果:5组患者中,混合周期患者的既往助孕周期数显著高于其他各组(P<0.05)。5组的妊娠结局、早期流产率、流产率及新生儿出生性别比差异无统计学意义(P>0.05),生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、异位妊娠率、畸形率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。A组能获得相对较高的生化妊娠率、临床妊娠率和胚胎种植率。结论:对于可利用胚胎数目较少的高龄反复种植失败的患者,可依据情况建议其采用混合周期移植以改善妊娠结局。     

反复种植失败的相关对策新进展

辅助生殖技术的迅速发展使众多不孕症患者借助体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及其衍生技术获得了后代。然而很大一部分妇女经历多次优质胚胎移植亦不能获得妊娠,反复种植失败(RIF)已经成为阻碍妊娠率进一步提高的瓶颈问题,且日益受到生殖医学界的广泛关注。就目前的条件而言,对RIF患者给予药物或者机械操作以提高子宫内膜容受性,行宫腹腔镜检查排除宫腔及盆腔病变以改善胚胎种植环境,通过辅助孵化、选择性囊胚移植、植入前胚胎遗传学筛查、共培养等技术提高胚胎着床能力都有可能改善和提高其种植率及妊娠率。RIF成为了我们亟待解决的问题,现综述近年有关反复种植失败的相关对策新进展。     

卵母细胞透明带形态异常1例病例报道与文献复习

目的介绍1例卵母细胞透明带形态异常不孕患者成功活产的病例。方法对本院1例卵母细胞透明带形态异常不孕患者的临床资料进行分析,并对相关文献进行系统性回顾。结果患者孕40+1周成功分娩一男活婴。结论卵母细胞透明带形态异常可能影响受精、胚胎发育等,改变受精方式和采用非常规的胚胎激光辅助孵化可获得良好的妊娠结局。     

D3仅一枚优质胚胎患者新鲜周期不同移植方案的临床结局分析

目的:探讨D3仅一枚优质胚胎患者新鲜周期不同移植方案的临床结局。方法:回顾分析2014年1月至2016年12月在山东大学附属生殖医院接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗周期的第3天(D3)仅一枚优质胚胎的3286例患者,其中2677例新鲜周期移植。根据正常受精数分为3组:A组仅有一枚正常受精胚胎;B组仅有两枚正常受精胚胎;C组大于两枚正常受精胚胎。将3组患者按移植方案再分为3组:第三天移植一枚卵裂期胚胎(D3-1组);第三天移植两枚卵裂期胚胎(D3-2组);第五天移植一枚囊胚(D5-1组)。分别比较3组患者不同移植方案的临床结局。结果:A组中,D3-1组和D5-1组的临床妊娠率、胚胎着床率、早期流产率、多胎妊娠率方面均无显著差异(P0.05);B组中,D3-2组的临床妊娠率和多胎妊娠率均高于D3-1组(48.59%vs 33.73%,19.88%vs0,P0.01);C组中,D3-2组的临床妊娠率和多胎妊娠率均高于D3-1组(52.88%vs 40.24%,34.34%vs 0,P0.01),D3-2组的胚胎着床率低于D5-1组(34.95%vs 46.43%,P0.01),D3-2组的多胎妊娠率高于D5-1组(34.34%vs 1.56%,P0.01);D5有优质囊胚形成周期占比方面:C组高于A组和B组(68.93%vs 46.70%和56.67%,P0.01);放弃周期率方面:C组低于A组和B组(13.79%vs 32.42%和28.0%,P0.01)。结论:对于D3仅一枚优质胚胎的患者,移植一枚胚胎可显著降低多胎妊娠率;D5移植降低了胚胎的利用效率;D3移植两枚卵裂期胚胎比移植一枚卵裂期胚胎可获得更高的临床妊娠率;当正常受精胚胎数大于两枚时,D5移植可以获得更高的种植率。     

冻融胚胎移植中辅助孵化对妊娠结局及安全性的影响

目的探讨在玻璃化冻融胚胎移植(FET)中,激光辅助孵化(AH)操作后对妊娠结局及母儿安全性的影响。方法回顾性分析2014年1月—2015年10月接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败后行FET患者的临床资料,根据患者年龄进行分组后比较AH操作后妊娠结局及母儿并发症的发生情况。结果在正常年龄组(38岁)的患者中,未行AH操作的对照组中胚胎种植率、临床妊娠率、活产率、多胎率均高于AH组,流产率低于AH组,并且差异有统计学意义(P0.05);在高龄(≥38岁)患者中,AH组的胚胎种植率、临床妊娠率较对照组有增高的趋势(P0.05);分娩周期中,AH组与对照组早产率、死胎率、母体并发症、新生儿男女比例、胎龄、出生体质量、新生儿缺陷率等均无统计学差异(P0.05)。结论对于正常年龄患者,卵裂期FET时不建议行AH操作;对于高龄患者,AH操作可提高胚胎种植率及临床妊娠率,但不能明显改善其妊娠结局;AH对母儿安全暂无不良影响。     

拮抗剂方案添加GnRH-α黄体支持治疗后妊娠结局研究

目的:探讨拮抗剂方案添加促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)行黄体支持对临床结局的影响。方法:回顾分析兰州大学第一医院生殖医学专科医院2017年1月至2017年12月252个拮抗剂方案新鲜周期移植后获临床妊娠的患者的临床资料。根据黄体支持方法不同,将患者分为黄体酮+地屈孕酮组128例,添加GnRH-α组124例(常规黄体酮+地屈孕酮支持的基础上于取卵后第6天加用1次曲普瑞林0.1mg)。比较两组的妊娠率、临床妊娠率、持续妊娠率、早期流产率、异位妊娠率、多胎妊娠率、胚胎种植率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率及活产率。结果:两组患者的平均年龄、不孕年限、基础内分泌情况、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎数及移植胚胎级别均无统计学差异(P0.05)。添加GnRH-α组的妊娠率、临床妊娠率及胚胎种植率均高于黄体酮+地屈孕酮组(P0.05);两组的早期流产率、持续妊娠率、异位妊娠率、多胎妊娠率、OHSS发生率及活产率比较,差异均无统计学意义(P0.05)。两组妊娠患者的血HCG、E2、PGN比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:GnRH拮抗剂方案中,添加GnRH-α黄体支持方案可提高临床妊娠率及胚胎种植率,黄体期添加GnRH-α可作为黄体支持的新选择。     

囊胚期与卵裂期胚胎培养及移植60例疗效比较

目的比较囊胚期与卵裂期胚胎培养及移植的疗效。方法2002年9月至2003年2月,中国医科大学第二医院采用序贯培养的方法,对30例(囊胚组)IVFET的患者进行囊胚培养及移植,并与30例(卵裂组)在胚胎卵裂期移植的IVFET患者作配对研究。囊胚组移植胚胎1～2枚,对照组移植胚胎3枚。比较两组的胚胎种植率、临床妊娠率及多胎妊娠率。结果囊胚组的胚胎种植率高于卵裂组(56.76%、17.78%),差异有显著性意义(χ2=9.44,P<0.05)。囊胚组的临床妊娠率高于卵裂组(59.29%、26.70%),差异有显著性意义(χ2=4.37,P<0.05)。囊胚组与卵裂组多胎妊娠率分别为31.25%、62.50%。结论囊胚期胚胎培养及移植的疗效优于卵裂期。     

辅助生殖技术中发生单卵双胎的相关因素及妊娠结局分析

目的:探讨辅助生殖技术治疗后发生单卵双胎(MZT)的相关因素及妊娠结局。方法:回顾分析2007年1月～2017年12月在郑州大学第三附属医院生殖中心行体外受精/单精子卵胞浆内显微注射(IVF/ICSI)-胚胎移植(ET)治疗后获得临床妊娠患者的资料,统计MZT的发生情况,并分析患者年龄、透明带操作、囊胚培养、移植胚胎数与MZT发生的相关性及MZT的妊娠结局。结果:8510个临床妊娠周期中发生MZT 145例,发生率1.70%。囊胚移植组的MZT发生率高于D3胚胎移植组,辅助孵化组的MZT发生率高于未行辅助孵化组,差异均有统计学意义(P0.01)。年龄、鲜胎移植周期不同授精方式、移植胚胎数与MZT发生无相关性(P0.05)。与未行减胎术的非MZT双胎妊娠相比,MZT双胎妊娠的流产率高,足月产率、活产率低,差异有统计学意义(P0.01),早产率、新生儿畸形率差异无统计学意义(P0.05);与未行减胎术的非MZT双胎妊娠相比,以MZT之一为减胎对象保留双胎妊娠的伴MZT的多胎妊娠流产率、早产率、足月产率、活产率、新生儿畸形率差异无统计学意义(P0.05); MZT中自然减灭一胎的发生率为18.52%,以MZT之一为减胎对象行减胎术后另一胎发生停育的发生率为25%,差异无统计学意义(P0.05)。结论:MZT的发生与辅助孵化、囊胚培养相关;未行减胎术的MZT妊娠结局差,以MZT之一为减胎对象的减胎术不增加另一胎停育的发生率,并且可改善MZT的妊娠结局。     

体外受精移植胚胎数对临床妊娠率的影响

目的探讨将移植胚胎数由3枚减为2枚对体外受精临床妊娠率和多胎发生率的影响。方法选择2002年8月至2004年8月在南京大学医学院附属鼓楼医院生殖医学中心进行体外受精,年龄≤35岁的妇女共424个周期,其中2胚胎组235个周期,3胚胎组189个周期。比较两组胚胎种植率、临床妊娠率和多胎发生率。结果2胚胎组和3胚胎组胚胎种植率与临床妊娠率差异无显著性意义(40.85%和40.92%,59.57%和67.20%,P>0.05)。2胚胎组单胎妊娠率明显高于3胚胎组(64.29%和40.16%,P<0.01),而三胎妊娠率明显降低(1.43%和22.83%,P<0.01),但两组双胎妊娠率差异无显著性意义(34.29%和37.01%,P>0.05)。结论对年轻妇女,胚胎移植数由3枚减为2枚,并不降低体外受精妊娠率。但明显降低了多胎妊娠特别是高序多胎妊娠的发生率。