20批重楼药材皂苷类成分分析与其TLC鉴别方法探讨

目的：对不同品种、不同产地的重楼药材中的皂苷类成分进行测定,以探讨其标准中TLC鉴别指标成分设定的合理性。方法：按《中国药典》2015年版一部重楼标准项下的TLC法和HPLC法分别检测皂苷类成分的组成和含量。结果：20批重楼药材中只有10批同时检出重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ 4种皂苷成分,其余10批只检出其中的3种成分。结论：建议修订重楼标准项下相关内容：只要总皂苷含量符合规定,TLC鉴别检出其中两种以上皂苷即可。     

不同产地丫蕊花不同部位中3种皂苷成分含量测定及差异分析

目的:建立测定丫蕊花中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量的方法,比较不同产地丫蕊花不同部位中这3种皂苷成分的含量差异。方法:采用高效液相色谱法测定10个产地丫蕊花的全草部位和地下部位中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量,色谱柱为Kromasil C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm,进样量为10μL。以3种皂苷成分的含量为指标,对20批次丫蕊花进行聚类分析和偏最小二乘判别分析,对样品进行聚类区分,并确定其主要差异性成分。结果:重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ的检测质量线性范围分别为0.051～2.04、0.007～0.28、0.168～6.72μg(r≥0.999 5);检测限分别为1.92、1.75、1.87 ng,定量限分别为6.40、5.87、6.23 ng;精密度、重复性、稳定性(24 h)的RSD均小于2%(n=6);平均回收率分别为99.29%、101.38%、99.64%,RSD分别为1.17%、2.64%、0.75%(n=6)。20批次样品的重楼皂苷Ⅱ含量为0.615～1.875 mg/g,重楼皂苷Ⅵ含量为0～0.095 mg/g,重楼皂苷Ⅶ含量为3.158～12.354 mg/g。聚类分析结果显示,20批次样品被聚为两类,批次S9～S12为一类,其余16批次样品被聚为一类;偏最小二乘判别分析结果显示,20批次样品分为3个区,批次S1、S2、S8、S14、S16、S20被分为Ⅰ区,批次S9～S12被分为Ⅱ区,其余样品被分为Ⅲ区。不同产地的丫蕊花存在品质差异,且全草和地下部位中3种皂苷成分无差异性。权重排序结果显示,重楼皂苷Ⅶ为丫蕊花药材中主要差异性成分,其中彭州和大邑县产丫蕊花药材中重楼皂苷Ⅶ最高。结论:本方法简单方便、灵敏度高,可用于丫蕊花中3种皂苷成分的含量测定。以彭州和大邑县产丫蕊花活性成分含量较高、质量较好。     

武当山区市售重楼药材皂苷含量分析

目的通过分析市售中药重楼饮片中重楼皂苷类成分的含量,评价中药市场上重楼饮片质量,为中药重楼的生产、经销、使用和监管提供参考依据。方法收集武当山区(以湖北省十堰市为主)医院、药店中重楼饮片样品,采用高效液相色谱法测定样品中重楼皂苷的含量。色谱柱为Waters Atlantis T3(150 mm×4.6 mm,3μm);检测波长:203 nm;流动相:水-乙腈,梯度洗脱;进样量:10μL;流速:1 mL·min~(-1);柱温:30℃。结果市售重楼饮片中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ总含量差异明显;23个样本中有6个含量未达到2015年版中国药典规定标准,合格率为73.9%。结论重楼药材质量参差不齐,需要对中药重楼的生产、经销进行严格监管。     

毛重楼药材的质量标准研究

目的:建立毛重楼药材的质量标准。方法:从原植物形态、性状特征、显微特征(横切面、粉末)对毛重楼药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定药材中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量:色谱柱为Agilent C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.9mL/min,检测波长为203 nm,柱温为25℃,进样量为5μL;采用紫外分光光度法测定药材中重楼总皂苷的含量。结果:毛重楼根状茎呈结节状扁圆柱形,略弯曲。横切面木质部导管较大,韧皮部细胞小,粉末有大量淀粉粒,多为单粒。重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ和重楼总皂苷检测进样量线性范围分别为0.64~12.8、0.46~9.2、0.26~5.2、0.23~4.6、20.5~143.5μg(r分别为0.999 9、0.999 9、0.999 9、0.999 9、0.999 7);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为96.38%~105.24%(RSD=3.01%,n=6)、97.24%~102.57%(RSD=2.50%,n=6)、97.19%~101.74%(RSD=1.52%,n=6)、93.72%~104.00%(RSD=3.53%,n=6)、98.11%~104.50%(RSD=2.57%,n=6)。结论:该研究所建标准可用于毛重楼药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定云南红药胶囊中的三七皂苷R1、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ的含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定云南红药胶囊中三七皂苷R₁、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ的含量,为云南红药胶囊质量的全面评价提供了科学依据。 方法 采用Diamonsil C₁₈ 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,进行梯度洗脱(0～12 min,18.0%A;12～19 min,18.0%A→25.0%A;19～27 min,25.0%A→45.0%A;27～34 min,45.0%A→55.0%A;34～40 min,55.0%A→18.0%A),检测波长为203 nm。流速0.9 mL·min-1,柱温30 ℃,进样量为10 μL。结果 三七皂苷R1、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ5个成分分别在7.32～146.40、4.70～94.00、3.85～77.00、6.97～139.40、11.09～221.80 mg·L-1内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率均在97.12%～99.86%,RSD≤1.37%(n＝6)。结论 该研究建立的HPLC法同时测定云南红药胶囊中的5个成分,样品处理方法简便,方法专属性强,测定结果准确,重复性好,为云南红药胶囊质量的全面评价提供了科学依据。     

重楼药材中4种重楼皂苷含量测定的对照品替代方法研究

目的:建立用替代对照品法测定重楼药材中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ4种重楼皂苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以柴胡皂苷d为替代对照品,使用Waters SymmetryShield RP18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长203 nm,柱温27℃,同时测定重楼药材中4种重楼皂苷的含量。结果:以柴胡皂苷d与4种重楼皂苷的峰面积比值和柴胡皂苷d与4种重楼皂苷的浓度比值得到的标准曲线具有良好的线性关系,加样回收率在101.6%～104.2%之间。结论:柴胡皂苷d作为替代对照品可同时测定重楼药材中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ4种重楼皂苷的含量。     

HPLC梯度洗脱法同时测定云南红药胶囊中的三七皂苷R1、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ

目的 建立HPLC梯度洗脱法同时测定云南红药胶囊中三七皂苷R1、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ的含量,为云南红药胶囊质量的全面评价提供了科学依据。 方法 采用Diamonsil C18 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,进行梯度洗脱(0～12 min,18.0%A;12～19 min,18.0%A→25.0%A;19～27 min,25.0%A→45.0%A;27～34 min,45.0%A→55.0%A;34～40 min,55.0%A→18.0%A),检测波长为203 nm。流速0.9 mL.min-1,柱温30 ℃,进样量为10 μL。 结果 三七皂苷R1、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ5个成分分别在7.32～146.40、4.70～94.00、3.85～77.00、6.97～139.40、11.09～221.80 μg.mL-1内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率均在96.36%～100.23%,RSD ≤1.44%(n＝6)。结论 本文建立的HPLC梯度洗脱法同时测定云南红药胶囊中的5个成分,样品处理方法简便,方法专属性强,测定结果准确,重复性好,为云南红药胶囊质量的全面评价提供了科学依据。     

对照提取物定位结合一测多评法同时测定重楼中9个皂苷的含量

目的:建立一测多评法(QAMS法)同时测定重楼中9个皂苷的含量,为其质量标准的研究提供依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);以乙腈与水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为20℃,检测波长为203 nm。使用重楼对照提取物定位各色谱峰,以重楼皂苷Ⅶ为内参物,建立重楼中重楼皂苷D、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ与内参物的相对校正因子(RCFs),并验证所建立方法的可行性和准确性。结果:9个重楼皂苷在一定的浓度范围内呈良好的线性关系(R~2>0.999 9);精密度、稳定性、重现性等均符合方法学要求;重楼皂苷D、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ的相对校正因子分别为0.891 1、0.896 9、0.734 6、0.992 7、0.880 3、0.901 6、0.827 1、0.768 7,在不同实验条件下重现性良好。45批云南重楼中9个皂苷的平均总含量为...     

重楼皂苷提取分离及含量测定方法的研究

分离制备重楼药材中的专属性成分,建立相关成分的含量测定方法.应用常规柱色谱和反相中压制备色谱分离、制备重楼中主要皂苷成分,并建立高效液相色谱法测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ的含量测定方法.分离、制备了4种重楼皂苷单体,经光谱数据鉴定为重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,建立了其中Ⅰ、Ⅱ的含量测定方法.为控制和评价重楼药材质量提供了良好的研究基础.     

HPLC测定不同产地滇重楼中的4种重楼皂苷

目的 分析测定不同产地、不同部位滇重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量.方法 采用HPLC法,色谱柱为ZorbaxSB-C18(250 mm×4.6 him,5 μm),流动相为乙腈-水(40:60),体积流量1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长203 nm.结果 4种不同产地滇重楼皂苷的含量差异较大.栽培滇重楼中,4种重楼皂苷的总含鼍高于野生滇重楼,滇重楼不同部位的4种重楼皂苷的总含量为根茎>叶>果实>须根>茎.结论 应积极配合GAP的实施,尽快实现滇重楼人工栽培产业化,保证其质量具有可控性.     

HPLC测定宫血宁胶囊中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ及Ⅶ的含量

目的 建立高效液相测定宫血宁胶囊中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ及Ⅶ含量的方法。方法 色谱柱为Phenomenex Luna C18 （4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相为乙腈（A）-水（B）梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;柱温为25 ℃;检测波长为203 nm。结果 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ及Ⅶ分别在2.024-14.168,2.010-14.07,2.016-14.112及2.032-14.224 μg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 8,0.999 7,0.999 8和0.999 8;平均加样回收率分别为99.0%（RSD=0.29%）,99.4% （RSD=1.13%）,99.4%（RSD=0.58%）,100.3%（RSD=0.95%）。结论 本法简便快捷,具有良好的精密性和稳定性,测定结果可靠,可用于本产品的质量控制。     

“一测多评法”测定不同种重楼植物中的4种重楼皂苷含量

目的：建立可用于重楼药材中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的一测多评定量分析方法。方法：分别以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ作为内参物,计算4种重楼皂苷间的相对校正因子,进而对重楼植物中的重楼皂苷进行定量分析,并将此计算结果与外标实测值进行比较,以评价"一测多评法"的准确性和可行性。结果：以重楼皂苷Ⅰ作为内参物计算其余3种皂苷含量时,所得到一测多评法的计算结果与外标法无显著差异。结论：所建立的"一测多评法"测定重楼属植物中的4种重楼皂苷准确、快速且耐用性良好,为采用不同的评价方法对重楼植物品质评价提供了科学依据。     

马蓝的化学成分研究

Seven compounds have been isolated from the whole plant of Strobilanthes cusia (Nees) O. Ktze. Three of them are triterpenes (Ⅰ～Ⅲ), two are indole alkaloids (Ⅳ, Ⅴ), two are quinazolinone alkaloids (Ⅵ, Ⅶ). On the basis of spectral analysis and physicochemical properties, their structures were established as lupeol (Ⅰ), betulin (Ⅱ), lupenone (Ⅲ), indigo (Ⅳ), indirubin (Ⅴ), 4 (3H)-quinazolinone (Ⅵ), 2, 4 (1H, 3H)-quinazolinedione (Ⅶ). Ⅵ and Ⅶ were found from natural plant for the first time.The results of the pharmacological tests demonstrate that compound Ⅴ has anticancer activity and compound Ⅵ has hypotensive action. Compound Ⅶ can be quantitatively determined by HPLC, which may serve as a quality control standard for materia medica and its preparations. Compounds Ⅵ and Ⅶ have been confirmed by means of synthesis.     

铁轴草二萜成分的化学研究

从铁轴草(Teurcium quadrifarium Buch-Ham)的丙酮提取部分分离出六个新—克罗烷(neoclerodane)型二萜(Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ～Ⅶ)。其中五个为已知化合物,分别鉴定是teucvidin(Ⅰ),12-epi-teucvidin(Ⅱ),teufiin(Ⅳ),19-acetyl-tetmpinin(Ⅴ)和tcucvin(Ⅶ)。Ⅵ为新化合物,命名为teuquadrin B。     

延胡索中9种生物碱对醌还原酶诱导活性研究

目的 对延胡索的生物碱类成分及其醌还原酶(QR)诱导活性进行系统研究.方法 运用色谱学和波谱学方法分离鉴定了9个化合物的结构,并对分离得到的化合物单体进行QR诱导活性测定.结果 从该植物中分得9个化舍物,分别鉴定为d-紫堇碱(Ⅰ)、去氢海罂粟碱(Ⅱ)、四氢巴马汀(Ⅲ)、原阿片碱(Ⅳ)、α-别隐品碱(Ⅴ)、四氢非洲防己碱...     

HPLC法测定骨风宁胶囊中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ含量

目的建立骨风宁胶囊中重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ含量的分析方法。方法采用C18色谱柱,以0.4%磷酸：乙腈（55∶45）为流动相,检测波长210nm,流速1mL.min-1,柱温40℃。结果在0.09816～0.9816mg.mL-1范围内,重楼皂苷Ⅰ的峰面积与浓度有良好的线性,r=0.9999;在0.09889～0.9889mg.mL-1范围内,重楼皂苷Ⅱ的峰面积与浓度有良好的线性,r=0.9998。重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的平均回收率为98.00%和98.90%。结论该方法操作简便,重现性好,能有效监控骨风宁胶囊的质量。     

高效液相色谱法测定痛血康胶囊中重楼皂苷的含量

目的、测定痛血康胶囊中重楼皂苷I（C51H82O20）和重楼皂苷Ⅱ（C44H70O16）的含量。方法高效液相色谱法。使用HypersilODS2（4．6mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相为乙腈-水（42：58）;流速：1．0mL·min^-1;检测波长：210nm。结果在1．6～16．0pg浓度范围内,重楼皂苷含量与峰面积呈良好的线性关系。重楼皂苷I的回归方程Y=116．14X-9．167,r=0．9998,加样回收率为99．17％,RSD=0．65％（n=5）;重楼皂苷Ⅱ的回归方程Y=111．28X．5．267．r=0．9997．加样回收率为99．13％,RSD=0．54％（n=5）。结论本方法精密度和重现性均较好。测定结果准确,可用于痛血康胶囊中重楼皂苷I和重楼皂苷Ⅱ的含量测定。     

高效液相色谱法测定清炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ

目的测定清炒白术中白术内酯的含量。方法采用外标法,Dikma Kromasil 100AC18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,乙腈-水梯度洗脱（60％～100％乙腈）,流速为1．0mL·min,柱温25℃,检测波长为220nm（Ⅰ、Ⅲ）、276nm（Ⅱ）。结果测得4批清炒白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量合计分别是：1．3261、1．5910、1．5348和1．7380mg·g^-1结论白术清炒后对所含白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量有一定影响。     

穿山甲化学成分的研究

自中药穿山甲(Manis pentadactyla Linnaeus)中分离得到七个化合物(Ⅰ～Ⅶ),分别鉴定为硬脂酸(Ⅰ)、胆甾醇(Ⅱ)、二十三酰丁胺(Ⅲ)、碳原子数为26和29的二个脂肪族酰胺(Ⅳ～Ⅴ)、L-丝-L-酪环二肽[cyclo-(L-seryl-L-tyrosyl)](Ⅵ)和D-丝-L-酪环二肽[cyclo-(D-seryl-L-tyrosyl)](Ⅶ),其中Ⅵ和Ⅶ为非对映立体异构体(diastereoisomers),系首次从天然物中得到,化合物Ⅶ为一新的化合物。化合物Ⅵ和Ⅶ的分子结构均经X-衍射方法得到证明。穿山甲含18种微量元素,其水溶液含16种游离氨基酸。分析比较炮制前后的穿山甲化学成分,表明两者基本相同。     

6α-甲基强的松龙乙酸酯的合成

6α-甲基强的松龙乙酸酯(6α-methyl prednisolone acetate)(Ⅸ,R=OCOCH_3)是几种主要的甾体皮质激素药物之一,其丁二酸酯钠盐(Ⅸ,R=OCOCH_2CH_2COONa)又可作为器官移植的抗排斥药物。该化合物在6位碳原子上有一个α-甲基。引进C_6-甲基的