铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶研究进展

铜绿假单胞菌是医院感染最常见的致病菌之一。金属β-内酰胺酶在铜绿假单胞菌中广。泛流行,给临床抗感染治疗带来了更多困难。现对铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的流行病学特征、性质、分类、分子生物学特征以及实验室检测方法进行综述。     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究进展

铜绿假单胞菌中金属β-内酰胺酶可分为4种:IMP、VIM、SPM以及GIM,而各型又有若干亚型。金属β-内酰胺酶基因位于细菌染色体或质粒上,并以基因盒的形式存在于整合子中。整合子属于可移动基因元件,借助整合子的移动,基因盒可在不同细菌间传递,导致耐药性在不同细菌间水平传播,给临床抗菌治疗带来严峻的挑战。     

斯氏假单胞菌34株的分离鉴定

斯氏假单胞菌３４株的分离鉴定濮本恒（南京化学工业公司医院检验科，南京２１００４８）关键词斯氏假单胞菌，鉴定斯氏假单胞菌（Ｐｓｔｕｔｚｅｒｉ）为条件致病菌，广泛分布于水及土壤中，可引起原发性和继发性感染。我们先后从临床各种标本中分离出３４株斯氏假单胞菌...     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的临床调查研究

目的调查临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶株分布情况及耐药现状，为临床合理应用抗生素提供依据。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌，采用κ—B法筛选对亚胺培南和头孢他啶同时耐药菌株，E—test法检测产金属伊内酰胺酶菌株，最后用最低抑菌浓度（MIC）法测定产金属β-内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度。结果300株铜绿假单胞菌中同时耐亚胺培南和头孢他啶者34株，占11．3％（34／300）；其中检出产金属伊内酰胺酶15株，占5．0％（15／300），产酶株分布较为集中，产酶株对亚胺培南和头孢他啶等抗生素高水平耐药，对阿米卡星和环丙沙星部分耐药。结论铜绿假单胞菌产金属伊内酰胺酶检出率升高，产酶株的多重耐药较严重，应高度重视产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的监测与控制。     

铜绿假单胞菌产IMP型金属β-内酰胺酶的研究进展

IMP型金属酶是我国临床检出率最高的金属酶，产金属酶（MBL）是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。MBL基因可位于细菌质粒或染色体上，并可以基因盒的形式由整合子携带，从而导致耐药性在细菌问水平或垂直传播，给临床抗菌治疗带来极大的困难。现对IMP型金属酶的演变、分类、分子生物学特点等方面的研究进展作一综述。     

产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的筛选及基因型研究

目的 研究本院临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶的基因型、耐药性及同源性.方法 用2-巯基丙酸或 EDTA 协同试验筛选临床分离的亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌.协同试验阳性菌株用PCR法检测金属酶基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产金属酶菌株同源性.结果 31株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌协同试验阳性5株,PCR扩增有4株阳性,为金属酶IMP-9型,均分离自神经科重症监护病房,PFGE结果显示为同一克隆株.产酶株对阿米卡星敏感或中介,对其他临床常用抗生素均高度耐药.结论 本院神经科重症监护病房有产IMP-9型金属酶铜绿假单胞菌流行,应注意进行临床检测和监控.     

铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的研究进展

产金属酶（MBL）是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。MBL基因可位于细菌质粒或染色体上,并以基因盒的形式由整合子携带,从而导致耐药性在细菌间水平或垂直传播,给临床抗菌治疗带来极大的困难。现对MBL的演变、分类、分子生物学特点等方面的研究进展作一综述。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌协同试验方法评价

[目的]在临床微生物实验室建立简便的纸片扩散试验方法,用于产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的检测。[方法]以头孢他啶、亚胺培南为底物,乙二胺四乙酸二钠（EDTA—Na2）和2-巯基乙醇（2-ME）为酶抑制剂,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验,并与聚合酶链反应（PCR）检测金属β-内酰胺酶基因结果进行比较。[结果]任一药敏纸片与含酶抑制剂纸片间出现抑菌环扩大现象则表示受试菌产金属β-内酰胺酶表型初筛试验阳性,在144株受试菌中,协同试验阳性29株,PCR检测金属β-内酰胺酶阳性26株。[结论]CAZ—EDTA纸片协同法在检测产IMP-1型金属酶的铜绿假单胞菌时的特异性和敏感性可与PCR技术相媲美,适用于临床微生物实验室对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的日常初步鉴定。     

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌协同试验方法评价

目的在临床微生物实验室建立简便的纸片扩散试验方法,用于产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的检测。方法以头孢他啶、亚胺培南为底物,乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）和2-巯基乙醇（2-ME）为酶抑制剂,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验,并与聚合酶链反应（PCR）检测金属β-内酰胺酶基因结果进行比较。结果任一药敏纸片与含酶抑制剂纸片间出现抑菌环扩大现象则表示受试菌产金属β-内酰胺酶表型初筛试验阳性,在144株受试菌中,协同试验阳性29株,PCR检测金属肛内酰胺酶阳性26株。结论CAZ-EDTA纸片协同法在检测产IMP-1型金属酶的铜绿假单胞菌时的特异性和敏感性可与PCR技术相媲美,适用于临床微生物实验室对产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的日常初步鉴定。     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶相关基因型的分布

目的 研究本地区患者对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌产金属酶检出情况及基因型分布特征.方法 本研究收集2012年2月～2013年2月共151株铜绿假单胞菌,分离出对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌47株.使用IMP/EDTA纸片法筛选产金属酶的耐药表型,PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM和GIM 4种基因型.PCR反应产物进行纯化后,进行核酸电泳.结果 47株对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌中,IMP/EDTA纸片法检测金属酶表型阳性21株,占44.6％.PCR检测金属酶基因型阳性14株,占29.8％,其中IMP型阳性11株,占78.6％,VIM型阳性3株,占21.4％.未检测出SPM和GIM型金属酶.结论 池州地区产生的金属酶同时存在IMP和VIM两种基因型,其中以IMP亚型为主,少部分为VIM亚型,分布科室主要为ICU,其次为神经外科.产金属酶是本地区对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌的重要耐药机制,对碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌产金属酶的监测十分重要.     

产超广谱β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性探讨

目的研究临床分离铜绿假单胞菌(PA)持续高产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其对耐药性的影响。方法用双纸片增效试验进行ESBLs检测,使用χ2检验比较PA产ES-BLs菌株与未产ESBLs菌株在耐药性之间的差别。结果对109株PA进行检测,其中22株产ES-BLs,检出率为20.2%。产ESBLsPA组与未产ESBLsPA组均对泰能、多粘菌素E敏感,对复方新诺明高度耐药(P>0.05);对替卡西林、替卡西林+棒酸、哌拉西林、哌拉西林+他唑巴坦、环丙沙星等在内的8种抗生素,产ESBLsPA组耐药率明显高于未产ESBLsPA组(P<0.05或P<0.01)。结论产ESBLsPA对常用抗生素呈现出更强的耐药性,并且部分产ESBLsPA菌株还常常联合其他酶造成混合耐药,使PA多重耐药状况更加严重。微生物工作者应加强PA产酶情况的监测。     

产超广谱β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性探讨

目的 研究临床分离铜绿假单胞菌（PA）持续高产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率及其对耐药性的影响。方法 用双纸片增效试验进行ESBLs检测，使用x^2检验比较PA产ESBLs菌株与未产ESBLs菌株在耐药性之间的差别。结果 对109株PA进行检测，其中22株产ESBLs．检出率为20．2％。产ESBLs PA组与未产ESBLs PA组均对泰能、多粘菌素E敏感，对复方新诺明高度耐药（P〉0．05）；对替卡西林、替卡西林＋棒酸、哌拉西林、哌拉西林＋他唑巴坦、环丙沙星等在内的8种抗生素，产ESBLs PA组耐药率明显高于未产ESBLs PA组（P〈0．05或P〈0．01）。结论 产ESBLs PA对常用抗生素呈现出更强的耐药性，并且部分产ESBLs PA菌株还常常联合其他酶造成混合耐药，使PA多重耐药状况更加严重。微生物工作者应加强PA产酶情况的监测。     

铜绿假单胞菌的耐药性与金属β-内酰胺酶检测

目的检测铜绿假单胞菌的耐药性以及β-内酰胺金属酶阳性率。方法采用K-B法检测356株铜绿假单胞菌对20种常用抗生素的耐药率,采用IPM EDTA与CAZ EDTA抑菌环直径之差判断金属酶阳必性率。结果356株铜绿假单胞菌有86株对IPM耐药。有155株对CAZ耐药,82株同时对CAZ与IPM耐药,从中共检测出16株铜绿假单胞菌产金属酶,对大多数抗生素形成耐药。结论金属酶对氨曲南和多粘菌素B稳定,可作为产金属酶铜绿假单胞菌临床感染治疗的首选药物。通过密切监视产金属酶菌株的发展趋势,合理使用抗生素,减少耐药菌株的传播。     

铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶与耐药相关性分析

目的调查本院铜绿假单胞菌(PA)耐药性与产β-内酰胺酶现状,并探讨产酶与耐药之间的相关性。方法收集院内感染PA菌株112株,进行药敏、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、金属β-内酰胺酶(MBL)和头孢菌素酶(Amp C)的检测。构建PA产β-内酰胺酶与耐药之间的Logistic回归方程,ROC曲线评价产酶预期概率(PRE)与多重耐药(MDR)在筛查PA产酶菌株中的价值。结果我院PA菌株对阿米卡星、美洛培南、亚胺培南、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦和头孢他啶的敏感率都70%,ESBLs、MBL和持续高产Amp C酶的阳性率分别为3.6%、8%和16.1%。PRE筛查产β-内酰胺酶菌株的灵敏度和特异度可达100%和93%,分别高于MDR的96.2%和74.4%。结论临床应加强对PA产β-内酰胺酶的监测,以Logistic回归PRE值为指标筛查产β-内酰胺酶菌株,要优于以MDR为指标。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究

目的检测该院2005年4~7月住院患者耐亚胺培南铜绿假单胞菌(PA)产金属β-内酰胺酶(MBL)的情况,为难治性感染治疗提供参考。方法VITEK-60鉴定细菌及测定PA对抗菌药物的耐药性;纸片法检测PA产MBL。结果共检出PA103株,耐亚胺培南PA47株,同时耐头孢他啶16株,其中产MBL的PA8株,占所分离PA的7.8%,占耐亚胺培南PA的17.0%。8株产酶菌株中除1株对左旋氧氟沙星敏感外,对羧苄青霉素、阿米卡星、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、奈替米星、复方增效磺胺、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星等抗生素均耐药;非产酶菌株仅有2株对羧苄青霉素敏感,1株对阿米卡星敏感,对其他抗生素均耐药。结论临床感染分离的PA、产酶菌株与非产酶菌株均呈多重耐药性。产MBL是PA对头孢类及碳青酶烯类抗生素耐药的机制之一,实验室对其正确检测可帮助临床合理选用抗菌药物,并减少耐药性的扩散。     

106株铜绿假单胞菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测

目的分析医院铜绿假单胞菌的分布、耐药性及产金属β-内酰胺酶的现状,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供合理用药的实验依据。方法将VITEK-2全自动鉴定仪鉴定出的106株铜绿假单胞菌,采用琼脂纸片扩散(K-B)法进行体外耐药性监测及统计耐药率,同时用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶的百分率。结果 106株铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的22株,占20.8%。金属β-内酰胺酶阳性与阴性的铜绿假单胞菌耐药率相比较,对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢哌酮的耐药率差异有统计学意义(P<0.05);而对氨曲南、阿米卡星、左氧氟沙星、庆大霉素呈现的耐药率二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论产金属β-内酰胺是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制之一,临床应根据药敏结果及产酶情况综合考虑合理用药,以减少耐药菌株的产生。     

三维试验检测耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶

目的了解耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶的现状。方法采用K-B法进行药敏试验,筛选耐头孢他啶的铜绿假单胞菌,采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶。结果 65株临床分离耐头孢他啶铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)30株(46.2%),AmpC酶4株(6.2%),同时产ESBLs和AmpC酶10株(15.4%),同时产金属酶和产ESBLs 15株(23.1%),同时产AmpC酶和金属酶2株(3.1%)。结论益阳市第三人民医院铜绿假单胞以产ESBLs为主,其次为AmpC酶和金属酶。     

烟台地区产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析及基因型检测

目的研究烟台地区产金属伊内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性,基因型及菌株的同源性,为监控产酶菌株的流行及指导临床合理选择抗生素提供依据。方法EDTA纸片复合法和E—test法分别筛选产金属β-内酰胺酶菌株,PCR扩增耐药基因imp、vim、spm和gim,用MIC法测定产金属G内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度,用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应（ERICPCR方法）确定菌株之间的同源性。结果42株耐亚胺培南和头胞他啶铜绿假单胞菌EDTA纸片复合法筛选出18株金属酶菌株、E—test法15株、PCR法12株;PCR法检测到imp阳性菌株4株,vim阳性菌株8株;产金属β-内酰胺酶菌株呈多重耐药,且PCR法阳性产金属酶菌株呈现为高水平耐药;ERIC—PCR结果显示,18株产金属伊内酰胺酶菌株呈现7种基因模型,其中10株为同一基因模型。结论经济简便快捷的EDTA纸片复合法可作为首选方法来对产金属酶铜绿假单胞菌进行筛选,烟台地区临床分离的铜绿假单胞菌所产金属β-内酰胺酶基因型以vim型为主,阿米卡星、环丙沙星具有较好的抗菌活性,某医院在一定时期曾出现爆发流行。